|
|
Лаб.по физиологии. Рабочую тетрадь распечатать и заполнить от руки
Аденогипофиз
(тропины) Периферические эндокринные железы гормоны периферических эндокринных желез)
4. Опишите основные элементы ренин-ангиотензин-альдостероновой системы, заполнив таблицу Вещество Откуда появляется в крови Какие функции выполняет Ренин
____________
____________
____________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________ Ангиотензин
____________
____________
____________
____________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________ Ангиотензин
____________
____________
____________
____________
____________
____________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
Минералкортикоиды
(альдостерон)
____________
____________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
____________________________________________
2 6 Перечислите факторы, способствующие повышению выделения ренина
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________ При повышении секреции ренина артериальное давление увеличивается, не изменяется, уменьшается неправильные варианты- зачеркнуть)
5. Что такое пермиссивный эффект Приведите пример гормона, оказывающего пермиссивный эффект
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
2 7 К разделу Физиология крови» Ознакомьтесь с методами исследования крови Работа №1 Подсчет эритроцитов»Объект исследования кровь человека Принцип метода Подсчет эритроцитов производится с помощью счетной камеры Горяева, представляющей собой стеклянную пластину, на верхней поверхности которой поперечными бороздками выделены три площадки. Средняя из них дополнительной бороздкой разделена на две части и заглублена на 1/10 мм по отношению к поверхности боковых площадок. На каждой из двух частей средней площадки нанесена счетная сетка в виде 25 квадратов. Такой квадрат, называемый условно большим квадратом, дополнительной штриховкой разделен на 16 маленьких квадратиков. Сторона каждого маленького квадрата равна 1/20 мм. Когда камеру накрывают покровным стеклом (с притиркой последнего к поверхности камеры, над каждым маленьким квадратом создается объем, равный 1/20ммх1/20ммх мм = 1/4000 мм
3
Вместо камеры Горяева для подсчета форменных элементов крови можно использовать камеру Бюркера. Сетка Бюркера (см. рис. А) содержит 144 больших квадрата (в отличие от сетки
Горяева они не разграфлены внутри. Большие квадраты отделены один от другого с боков, сверху и снизу пространствами, по ширине равными малому квадрату. Таким образом, на местах перекрещивания образуются малые квадраты, такие же, как малые квадраты сетки Горява (см. рис. Б. А. Сетка Бюркера Б. Сетка Горяева
1 - большой квадрат, 2 – малый квадрат Размер малого квадрата сторона мм, площадь 1/400 мм (0,0025 мм. Большой квадрат по размерам соответствует 16 маленьким. Глубина камеры Бюркера (как и камеры Горяева) = 0,1 мм. Таким образом, эритроциты считаем в 80 маленьких квадратах (на пересечениях, или в 5 больших.
1 2
2 8 Для подсчета эритроцитов кровь предварительно разводят в физиологическом растворе (0,9% NаС1) в специальных смесителях. Смеситель для эритроцитов представляет собой капиллярную пипетку с ампулообразным расширением. Объем ампульной части смесителя враз больше объема его капиллярной части. На капилляр смесителя нанесены две метки - 0,5 и 1,0, а над ампулообразным расширением - метка 101. Внутри ампулы помещена красная бусинка для перемешивания крови с раствором. Надев на смеситель резиновую трубку, набрать донорскую кровь в капилляр до отметки 0,5 (столбик крови не должен содержать пузырьков воздуха. Кончик капилляра протереть фильтровальной бумагой и, опустив в физиологический раствор, заполнить смеситель до отметки 101 (это соответствует разведению крови враз. Перевести смеситель в горизонтальное положение и снять с него резиновую трубку. Закрыть оба отверстия смесителя большими средним пальцами правой руки и путем легких покачиваний перемешивать раствор в течение 3 мин. После этого выпустить из капилляра смесителя 3 капли раствора на ватный шарик. Следующую каплю поместить между предварительно притертым к камере Горяева покровным стеклом и средней частью камеры. Поместить камеру под микроскоп и при малом увеличении найти сетку. Затем перевести микроскоп на большое увеличение так, чтобы в центре поля зрения оказался большой квадрат, разделенный на 16 маленьких. Подсчитать число эритроцитов в каждом из 16 квадратов раздельно. Эритроциты могут располагаться на линиях, отделяющих квадраты друг от друга. Чтобы не подсчитывать одни и те же эритроциты дважды, следует воспользоваться простым приемом считать принадлежащими данному квадрату те эритроциты, которые находятся либо непосредственно в нем, либо на левой и верхней его сторонах. После этого установить в поле зрения другой большой квадрат и продолжать подсчет. Для получения более точных результатов подсчитать число эритроцитов в 5 больших квадратах (80 маленьких. Содержание эритроцитов в I литре крови рассчитать по формуле X = N x 4000 x 200 x 10 6 = 5 x 16 где X- искомое число эритроцитов в 1 литре, N- количество эритроцитов в 5 больших квадратах, 200 – степень разведения крови, 4000 – число, на которое надо умножить объем маленького квадрата, чтобы получить объем одного кубического миллиметра, 5 количество больших квадратов, 16 – количество маленьких квадратов водном большом квадрате 10 6 - количество кубических миллиметров водном литре. Сравнить результаты с нормой ж. 3,9 – 4,7 х 10 л м. 4,5 – 5,5 х л, если содержание эритроцитов выше нормы, используется термин «эритроцитоз», если ниже – «эритропения». Работа №2 Подсчет лейкоцитов» Объект исследования _________________________________________________________ Принцип метода Подсчет белых кровяных телец производится с помощью счетной камеры Горяева, описанной в работе № 4. Емкость ампульной части смесителя длялейкоцитов враз меньше таковой для эритроцитов. На капиллярной части смесителя имеются метки 0,5 и
1,0, а над ампулообразным расширением - метка 11. При наборе крови до метки 0,5 и раствора до метки 11 кровь разбавляется враз, а при наборе крови до метки 1,0 -
N x 10 12 100
2 9 соответственно враз. Внутри ампулы смесителя для лейкоцитов находится белая бусинка для перемешивания крови с раствором. Чтобы осуществить подсчет лейкоцитов, необходимо предварительно разрушить (гемолизировать) эритроциты. Это достигается разбавлением крови 0,3% уксусной кислотой. Добавленная к уксусной кислоте краска (генцианвиолет) окрашивает ядра лейкоцитов. Лейкоциты подсчитывают по количеству окрашенных ядер, видимых на счетной сетке под микроскопом. Набор донорской крови в смеситель, смешивание с раствором, нанесение капли крови из смесителя на счетную сетку проводится также, как для подсчета эритроцитов в работе № 1. Отличия состоят в том, что, во-первых, кровь разводят не в 200, а враз и, во-вторых, подсчет лейкоцитов ведется под малым увеличением микроскопа только в больших квадратах сетки Бюркера или Горяева. Подсчитать количество лейкоцитов в 25 больших квадратах. Содержание лейкоцитов в 1 литре цельной крови определить по формуле X = N x 4000 x 20 x 10 6 = N x 10 9 25 x 16 5 где X - искомое количество лейкоцитов в I литре крови, N - число лейкоцитов в 25 больших квадратах, 20 – степень разведения крови, 4000 – число, на которое надо умножить объем маленького квадрата (1/4000 мкл, чтобы получить объем одного кубического миллиметра, 25 – количество больших квадратов, 16 – количество маленьких квадратов водном большом. Полученные данные сравнить с нормой 4,0 – 8,8 х л. Повышение количества лейкоцитов называется лейкоцитоз, снижение – лейкопения. Вывод Чем отличается методика подсчета лейкоцитов от методики подсчета эритроцитов Работа №3 Определение количества гемоглобина в крови»Объект исследования _________________________________________________________ Принцип метода Количество гемоглобина в крови определяется колориметрическим методом с помощью гемометра Сали. Гемометр состоит из 3 пробирок и штатива. Две запаянные пробирки содержат стандартный раствор солянокислого гематина. Третья пробирка служит для разведения исследуемой крови. На ней нанесены деления либо в относительных единицах Сали (100 ед. Сали соответствует концентрации гемоглобина
166.7 гл, либо в грамм-процентах (г г раствора, либо в гл. К гемометру прилагается капилляр емкостью 20 мкл, пипетка и стеклянная палочка.
Налить в градуированную пробирку децинормальный раствор соляной кислоты до нижней метки (мл. Набрать донорскую кровь в капилляр до отметки 20 мкл. Обтерев кончик капилляра фильтровальной бумагой, погрузить его в раствор соляной кислоты и осторожно выдуть кровь на дно пробирки так, чтобы верхний слой раствора остался прозрачным. Промыть капилляр раствором соляной кислоты два раза, не вынимая его из
3 0 пробирки. После чего убрать капилляр, осторожно встряхнуть содержимое пробирки и оставить в штативе на 10 минут. Образовавшийся в пробирке солянокислый гематин развести дистиллированной водой, перемешивая его стеклянной палочкой, до тех пор, пока его цвет не станет одинаковым с цветом стандартного раствора солянокислого гематина в боковых пробирках. Определив уровень раствора в средней пробирке по шкале грамм-процентов и умножив на 10, получаем содержание гемоглобина в граммах на I л крови. Если пользоваться шкалой гемометра в относительных единицах Сали, то количество гемоглобина в граммах на литр рассчитывают по формуле:
Х = 166.7 х С 10 х С
100 6 где X - содержание гемоглобина в граммах на литр,
С - содержание гемоглобина в относительных единицах Сали. В выводах сравнить результаты с нормой ж. 120-145 гл м 130-160 гл. Пониженная концентрация гемоглобина называется анемия. Работа №4 Вычисление цветового показателя крови»
Объект исследования кровь человека, ____ пол, Er = ___________, Hb = ___________ Принцип метода Цветной показатель крови (ЦП) характеризует степень насыщения эритроцитов гемоглобином. При его вычислении надо знать содержание гемоглобина (вотносительных единицах Сали) и относительное содержание эритроцитов (в %% по отношению к стандарту 5,0 x 10 12
у мужчин и 4,5 x 10 12
- у женщин. Вычисления ЦП (безразмерная величина) осуществляется по формуле
ЦП = Г
(гемоглобин в относительных единицах)
=
Э относительное содержание эритроцитов)
= гемоглобин пациента (гл) : 166.7 гл , где эритроциты пациента : стандарт эритроцитов стандарт эритроцитов для мужчин = 5 х 10 12
л, стандарт эритроцитов для женщин = 4.5 х 10 12
л. Выполните расчет ЦП, если содержание гемоглобина в крови пациентки – 130 гл, а количество эритроцитов водном литре крови – 4х10
12
/л, сравните полученное значение с нормой (N ЦП): N ЦП = 0.86-1.05, дайте заключение, используя следующие термины
ЦП = N => нормохромия;
ЦП > N => гиперхромия;
ЦП < N => гипохромия. Результаты
ЦП = ________________________________________________________________________
3 1 Вывод Работа №5 Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ) по Панченкову»Объект исследования _________________________________________________________ Принцип метода Прибор Панченкова, с помощью которого определяется СОЭ, представляет собой штатив с набором капиллярных пипеток. Каждая пипетка градуирована с шагом I мм от 0 верхняя метка) до 100 (нижняя. На уровне метки 0 стоит дополнительно буква К (кровь, а на уровне 50 мм - буква Р (реактив. дну из капиллярных пипеток промыть раствором антикоагулянта (5% раствор цитрата натрия. Затем набрать в нее раствор цитрата натрия до метки Р и выпустить его в стеклянный стаканчик. В туже пипетку набрать донорскую кровь до метки К дваждыи оба раза вылить в стаканчик с раствором цитрата натрия, тщательно перемешивая обе жидкости. Цитратную кровь после перемешивания набрать снова в пипетку точно до метки К и укрепить пипетку в штативе в вертикальном положении (не снимать палец с пипетки, прежде чем нижний конец ее не будет прочно поставлен на резиновую прокладку штатива. Ровно через I час определить высоту столбика отстоявшейся плазмы (отметки К вниз. Эта величина и есть СОЭ.
Полученные результаты сравнить с нормой ж. 2-15 мм/ч; м. 1-10 мм/ч. Результаты Нарисуйте вертикально стоящий капилляр с отстоявшейся кровью и покажите, как Выбудете измерять СОЭ: 3 2 Работа №6 Определение группы крови с использованием стандартных сывороток» Ознакомьтесь с методикой. Объект исследования _________________________________________________________ Принцип метода Способность сыворотки крови одного человека склеивать эритроциты крови другого человека называется гемагглютинацией. Эта способность обусловлена наличием в сыворотке агглютининов – веществ, способных склеивать эритроциты другого человека, а на поверхности эритроцитов – агглютиногенов – веществ, взаимодействующих с соответствующими агглютининами сыворотки. В системе АВО выделяют агглютиногены Аи В - на эритроцитах и соответствующие им агглютинины антиА (альфа) и антиВ (бета) – в плазме крови. В плазме крови данного человека не могут образовываться агглютинины, соответствующие агглютиногенам его эритроцитов. По наличию или отсутствию на эритроцитах человека агглютиногенов Аи В различают 4 группы крови I (O), II (A), III (B) и IV (AB) При определении групп крови в капли сывороток известных групп добавляют небольшую (1/8 от объема сыворотки) каплю донорской крови. Агглютинация происходит при взаимодействии одноименных агглютиногенов и агглютининов: Ас альфа, В – с бета. Методика На керамическую пластинку нанести по одной капле стандартных сывороток I, II,
III и групп. Сыворотку каждой группы брать отдельной палочкой. Уголком предметного стекла набрать небольшое количество донорской крови, внести ее в каплю сыворотки I группы и перемешать. Эту операцию повторить последовательно для каждой капли сыворотки, всякий раз забирая донорскую кровь чистым уголком предметного стекла. В течение 5 минут наблюдать за каплями, слегка покачивая пластинку. При наличии агглютинации капля становится прозрачной, а эритроциты склеиваются в виде комочков. Группа крови устанавливается в зависимости от наличия или отсутствия агглютинации. Результаты При невозможности практически выполнить лабораторную работу определите группу крови, если агглютинация произошла с сыворотками й, й и III й групп. В таблице поставьте знак «+», если агглютинация произошла и знак «-«, если агглютинации не наблюдается. По каждому результату сделайте заключение относительно наличия или отсутствия на исследуемых эритроцитах антигенов Аи В если агглютинация произошла с сывороткой, содержащей как анти-А, таки анти-В агглютинины (я группа, тона исследуемых эритроцитах есть какой-либо из антигенов А или В (а может быть оба если агглютинация произошла с сывороткой, содержащей анти-В (я группа, тона исследуемых эритроцитах присутствует антиген В если - с сывороткой, содержащей анти-А (я группа, тона эритроците присутствует антиген А. В сыворотке й группы агглютинации быть не должно (т.к. она не содержит анти-А и анти-В агглютининов)!
3 3 Сыворотки групп Антитела в сыворотках Агглютинация Заключение о наличии антигенов на эритроцитах
I (0)
Анти-А и анти-В
II(A)
Анти-В
III(B)
Анти-А
IV (AB) Отсутствуют Вывод
1. Группа исследованной крови
__________ ( ____ ).
римскими цифрами (буквами)
2. Какая группа крови у Вас _____________ В сыворотках каких групп произошла агглютинация при определении Вашей группы крови
___________________________________________________________________________ Работа №7 Определение группы крови с использованием
цоликлонов»
Объект исследования _________________________________________________________ Ознакомьтесь с методикой. Методика
Цоликлоны анти-А и анти-В предназначены для определения групп крови системы
АВО у человека, взамен стандартных изогемагглютинирующих сывороток. Они являются продуктами гибридомных клеточных линий, полученных в результате слияния мышиных антителобразующих В-лимфоцитов с клетками мышиной миеломы. Цоликлоны не являются продуктами клеток человека и поэтому исключена контаминация препаратов вирусами гепатита и СПИД. Определение групп крови системы АВО включает выявление антигенов Аи В в эритроцитах стандартными антигенами цоликлон анти-А и цоликлон анти-В. Анализ производится в помещении с хорошим освещением при температуре от 15 до 25 С. На керамическую пластину наносят по одной большой капле цоликлонов анти-А и анти-В (0,1 мл) под соответствующими надписями «анти-А» и «анти-В». В каплю с антителами добавляют по одной маленькой капле исследуемой крови (0,03 мл. Наблюдение заходом реакции с цоликлонами проводят при легком покачивании пластины в течение 2,5 – 3 минут. Если агглютинация произошла, то результат реакции считается положительным («+»), если нет – отрицательным («-«). Обычно реакция агглютинации с цоликлонами наступает в течение первых 3-4 сек, но наблюдение следует продолжать ввиду возможности более позднего наступления агглютинации с эритроцитами, содержащими более слабые разновидности антигенов А или В.
3 4 Правило оценки результата реакции агглютинации представлено в таблице № Реакция исследуемых эритроцитов с цоликлонами Исследуемая кровь принадлежит к группе Анти-А Анти-В 1 - - I (O) 2 + - II (A) 3 - + III (B) 4 + + IV (AB) Результат При невозможности практически выполнить лабораторную работу определите группу крови, если агглютинация произошла с цоликлонами анти-А. Реакция исследуемых эритроцитов с цоликлонами Анти-А Анти-В Вывод Исследуемая кровь принадлежит к группе _____________ ( ____ ). римскими цифрами (буквами) Работа №8 Определение резус |
|
|
Скачать 0.84 Mb.