микробиология колок. Санитарная микробиология. Определение, задачи. Объекты санитарномикробиологического исследования. Связь санитарной микробиологии с инфекционной микробиологией, гигиеной, эпидемиологией
 Скачать 161.27 Kb.
|
|
Санитарно-микробиологическое исследование воздуха. Методы забора проб (седиментационный, аспирационный, фильтрационный). Определяемые показатели. Седиментационный метод применяется обычно для качественной характеристики микробного загрязнения. Метод основан на естественном осаждении микроорганизмов под действием силы тяжести. Метод чрезвычайно прост, но слабо чувствителен и мало достоверен. В большей степени является качественным, чем количественным и позволяет, в основном, определить лишь спектр присутствующих микроорганизмов. Аспирационный метод – более точный метод. Забор проб воздуха проводится пробоотборными устройствами различной конструкции, которые обеспечивают отбор биологического аэрозоля с величиной частиц диаметром до 1,4 мкм. Импакторы – приборы, в которых происходит принудительное осаждение микроорганизмов из прокачиваемого через прибор воздуха на поверхность плотной питательной среды (прибор Кротова, ПАБ-1, ПАБ-2 и др.). Импинджеры – группа приборов, в которых воздух проходит через жидкость (питательную среду, стерильную воду, физиологический раствор), в результате чего микроорганизмы задерживаются в ней и могут быть обнаружены. Фильтрационный метод. Используются мембранные фильтры из нитроцеллюлозы или ацетата целлюлозы. При отборе пробы, проходя через фильтр, воздух вызывает его электризацию, поэтому улавливание микроорганизмов происходит только в самом поверхностном слое фильтра толщиной около 0,3 мкм. Это не только обеспечивает высокую эффективность улавливания, но и позволяет элюировать (десорбировать) задержанные частицы, бактерии и вирусы для дальнейшего исследования.
Методы выделения микроорганизмов с предметов обихода и медицинских изделий Метод смывов. С помощью увлажненных стерильных ватных тампонов на металлических стержнях или салфеток (5*5 см), которые заготавливаются. В день взятия смывов в каждую пробирку с тампоном наливается по 10 см3 стерильной 0,1% пептонной воды или стерильного физиологического раствора, при этом тампон остается над жидкостью, не касаясь ее. Перед взятием смыва тампон погружают в жидкость. Смывы с крупного оборудования и инвентаря, поверхностей, стен берут 100 см2 с помощью шаблона, сделанного из проволоки. Смоченным ватным тампоном или марлевой салфеткой отбирают поверхность, ограниченную шаблоном, во взаимно перпендикулярных направлениях. При взятии смывов с мелких объектов отбирают всю поверхность предмета. При обследовании объектов, где невозможно применить шаблон, исследуют последнюю порцию промывных вод (около 100 см3), взятой после мойки объекта. При взятии смывов с рук увлажненным стерильной жидкостью тампоном протирают ладонные поверхности обеих рук сначала вдоль, потом поперек, затем межпальцевые пространства, ногти и подногтевые пространства. После взятия смыва тампон вновь погружают в пробирку со стерильной жидкостью для проведения десорбции микроорганизмов. Для определения БГКП тампоны или марлевые салфетки опускают в пробирки с 5 см3 среды Кесслера. При исследовании на стафилококки проводят посев тампоном на ЖСА и параллельно засевают 0,5 мл смывной жидкости в 6,5 % солевой бульон. При исследовании на наличие энтеробактерий и псевдомонад тампон инкубируют в 0,1 % пептонной воде с последующим высевом на среду Эндо. Ориентировочный перечень объектов, подлежащих бактериологическому контролю в ЛПУ:
Пищевые продукты относятся к числу важнейших объектов, загрязнение которых патогенными микроорганизмами или обильное обсеменение условно-патогенными может нанести существенный ущерб здоровью человека. С санитарной точки зрения продукты обладают двумя важными особенностями: 1. Значительная часть продуктов является благоприятной средой для сохранения и размножения патогенных и условно-патогенных микроорганизмов (сальмонеллы, шигеллы, стафилококки….) и могут быть факторами передачи большой группы инфекций. 2. Пищевые продукты, как и все объекты внешней среды, часто содержат обильную сапрофитную микрофлору, которая может существенно ухудшать качество продуктов. В пищевых продуктах различают специфическую и неспецифическую микрофлору: 1. Специфическая или производственная флора – стандартные микроорагнизмы, которые вносят в процессе приготовления того или иного продукта, это обязательное звено технологического процесса при изготовления хлеба, пива, вина, кисломолочных продуктов. Для получения простокваши, кумыса, йогурта, творога используется Streptococcus lactis (Грам+ диплококк), Streptococcus cremoris (цепочки кокков), кефира – специальная закваска – кефирные зерна (молочнокислые стрептококки, лактобактерии, дрожжеподобные грибы), в бифидокефире – бифидобактерии. В ацидофилине – Lactobacterium bulgaricus и L. acidophilus. В твердых сырах молочнокислые палочки, кокки, грибы (плесневые – пенициллум, рокфорум). 2. Неспецифическая - случайные МО из окружающей среды – сапрофиты, ОПМ, УПМ. Многие пищевые продукты характеризуются обильной аэробной и анаэробной сапрофитной микрофлорой. Степень загрязнения посторонней микрофлорой зависит от многих факторов:
Загрязнение продуктов патогенной и условно-патогенной микрофлорой происходит из различных источников. Так, контаминация продуктов животного происхождения может быть эндогенной (ОПМ – если животное больно или носитель – сальмонеллез, туберкулез, стафилококковые инфекции…), УПМ – транслокация МО из кишечника при транспортировке на мясокомбинат голодных животных ( в холоде, при длительном ожидании). Но чаще экзогенное – при убое, при разделке туш, из оборудования мясокомбината, одежды и рук рабочих, при транспортировке. Вторичное загрязнение мясных, рыбных и молочных продуктов, полуфабрикатов патогенными микроорганизмами может происходить на различных этапах транспортировки, переработки через выделения больных, бактерионосителей, при использовании загрязненных воды, посуды, оборудования. Многие патогенные микроорганизмы способны длительное время (дни-месяцы) сохраняться в пищевых продуктах и при благоприятных условиях могут размножаться (сальмонеллы, шигеллы, клостридии, стафилококки в консервированных продуктах). В связи с этим с пищевыми продуктами алиментарным путем могут передаваться многие возбудители кишечных инфекций (брюшной тиф, паратифы, сальмонеллезу, дизентерия, эшерихиозы, холера), бруцеллеза, сальмонеллеза, сибирской язвы, ботулизма. После употребления пищевых продуктов, массивного обсеменения
Сертификация - форма осуществляемого органом по сертификации подтверждения соответствия объектов требованиям технических регламентов, положениям стандартов; действие третьей стороны, доказывающее, что обеспечивается необходимая уверенность в том, что идентифицированная продукция, процесс или услуга соответствует конкретному нормативному документу. Сертификация продукции - деятельность по подтверждению соответствия продукции установленным требованиям. Сертификация - заключается в прохождении процедуры получения сертификата соответствия исходя из идентификации продукции, т.е. установление тождественности характеристик продукции её существенным признакам. Сертификаи соответсвия : обязательный сертификат, сертификаты Таможенного союза, сертификат соответствия техрегламента, свидетельство о гигиенической регистрации Сертификат качества – нерегулируемое государством свидетельство о соответствии продукции характеристикам, которые удовлетворяют потребителей. Сертификат качества к обязательной сертификации отношения не имеет, государственное регулирование или техническое регулирование касается только требований безопасности.
Гигиенические нормативы по микробиологическим показателям включают следующие группы микроорганизмов:
Нормирование микробиологических показателей качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов осуществляется для большинства групп микроорганизмов по альтернативному принципу т.е. нормируется масса (объем), в которой не допускаются -бактерии группы кишечных палочек, -большинство условно-патогенных микроорганизмов, -патогенные микроорганизмы, в том числе Salmonella и Listeria monocytoges. В других случаях (КМАФАнМ, количество плесеней и дрожжей, пробиотических микроорганизмов) норматив отражает количество колониеобразующих единиц в 1г (см3) пробы (КОЕ/г, см3). Распределение продуктов по степеням микробиологическим рисков в зависимости от рН продукта: Высокая степень риска
Умеренная степень риска:
По предложению экспертных групп Кодекс Алиментариус (структурная единица при FAO/ВОЗ), различают 6 категорий пищевых продуктов (приведены в порядке снижения степени риска): 1. Охлажденное и замороженное мясо, птица, рыба, мясные продукты, молоко и молочные продукты, яичные сухие продукты, моллюски, и крабы, кокосовые орехи 2. Пищевой лед, злаковые продукты, готовые к употреблению шоколад и какао-продукты 3. Сухие супы, сухофрукты, мороженая и копченая рыба, быстрозамороженные овощи, сыр 4. Быстрозамороженные фрукты и соки. 5. Продукты, подвергнутые термической стерилизации 6. Пищевые и технологические добавки: красители, ароматизаторы, желатин, специи, сахар, крахмал и др.
Загрязнение продуктов патогенной и условно-патогенной микрофлорой происходит из различных источников. Так, контаминация продуктов животного происхождения может быть эндогенной (ОПМ – если животное больно или носитель – сальмонеллез, туберкулез, стафилококковые инфекции…), УПМ – транслокация МО из кишечника при транспортировке на мясокомбинат голодных животных (в холоде, при длительном ожидании). Но чаще экзогенное – при убое, при разделке туш, из оборудования мясокомбината, одежды и рук рабочих, при транспортировке. Вторичное загрязнение мясных, рыбных и молочных продуктов, полуфабрикатов патогенными микроорганизмами может происходить на различных этапах транспортировки, переработки через выделения больных, бактерионосителей, при использовании загрязненных воды, посуды, оборудования. Многие патогенные микроорганизмы способны длительное время (дни-месяцы) сохраняться в пищевых продуктах и при благоприятных условиях могут размножаться (сальмонеллы, шигеллы, клостридии, стафилококки в консервированных продуктах). В связи с этим с пищевыми продуктами алиментарным путем могут передаваться многие возбудители кишечных инфекций (брюшной тиф, паратифы, сальмонеллезу, дизентерия, эшерихиозы, холера), бруцеллеза, сальмонеллеза, сибирской язвы, ботулизма. После употребления пищевых продуктов, массивного обсеменения
Лабораторный контроль за пищевыми продуктами проводится:
Исследование пищевых продуктов имеет ряд особенностей, зависящих от консистенции и степени питательности продукта и, следовательно, возможностей для размножения микроорганизмов; характера его обработки и применения тех или иных методов консервации; длительности допустимого хранения и др. В жидких продуктах условия для размножения, распространения во всей массе продукта, длительности сохранения жизнеспособности значительно более благоприятны, чем в продуктах плотной консистенции и особенно в продуктах высушенных и порошкообразных. В последних часто наблюдается гнездное расположение патогенов или санитарно-показательных микроорганизмов (мясные продукты, масло, мороженое, яичный порошок). Санитарно-микробиологический контроль за эпидемиологической безопасностью пищевых продуктов и продовольственного сырья основывается на требованиях нормативно-методических документов и предусматривает общие принципы и приемы отбора проб и проведения анализа (для некоторых видов продукции отдельными документами выделяются особые приемы процедуры определения микроорганизмов). Ниже приведены общие методические приемы для пищевых продуктов согласно действующим ГОСТам. Методы отбора проб Перед отбором проб визуально определяют внешний вид продуктов, попавших в выборку, и подразделяют их на: — нормальные по внешнему виду, при осмотре которых не обнаружены отклонения, вызванные развитием микроорганизмов;
Отбор проб продукции проводят по каждому виду отдельно. Пробы продуктов для микробиологических анализов отбирают до взятия проб для физико-химических и органолептических анализов, асептическим способом, исключающим микробное загрязнение продукта из окружающей среды. Пробы помещают в стерильную посуду, края которой предварительно обжигают в пламени горелки. Масса (объем) пробы продукта устанавливается в соответствии с нормативно-технической документацией на конкретный вид продукции и должна быть достаточной для проведения микробиологических анализов. Если масса пробы продукта:
При отборе проб от: — кусковой продукции массой нетто до 1000 г пользуются ложкой, половником, пинцетом или другим инструментом, в зависимости от вида и размера кусков продукта. При массе более 1000 г отрезают или вырезают часть продукта ножом, пилой или другим инструментом. Пробу помещают в посуду или упаковывают в фольгу. При отборе пробы из глубины продукта его просверливают в разных местах не менее чем до половины высоты; от твердого или хрупкого продукта пробы отбирают при помощи долота или другого инструмента;
Транспортирование и хранение. Каждую отобранную пробу маркируют этикетками с указанием наименования продукта, предприятия-изготовителя, номера партии, даты отбора проб, цели микробиологического анализа, подписи лиц, отбиравших пробу. Отобранные пробы пломбируют и опечатывают печатью организации, отвечающей за контролируемую продукцию, и транспортируют в лабораторию. Пробы замороженных продуктов укладывают в изотермическую тару (термос, изотермическая коробка) или обкладывают сухим льдом (СО2), обеспечивая сохранение проб в замороженном состоянии при температуре, не превышающей —15°С. Пробы консервов и продуктов транспортируют в соответствии с условиями транспортирования продукции, установленными нормативно-технической документацией на каждый вид продукта. Пробы скоропортящихся продуктов транспортируют при температуре 5°С не более 6 ч, за исключением продуктов, на которые предусмотрены специальные условия для транспортирования проб в нормативно-технической документации. Особое внимание обращают на соблюдение следующих температур при хранении перечисленных ниже продуктов:
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ: нестойкие пищевые продукты (например, субпродукты, свежую рыбу) следует хранить при температуре от 0 до 2°С. Образцы испорченных устойчивых продуктов должны транспортироваться в закрытых упаковках для защиты от возможного протекания. |