Медицинская микробиология и вирусология ч1 (1). Т. П. Гажеева, Т. Х. Гордеева, Е. И. Хорошавина Медицинская микробиология и вирусология Часть 1
 Скачать 5.4 Mb.
|
Цель занятия: ознакомиться и изучить систематику и биологические особенности грибов, освоить методы приготовления препаратов микроскопических грибов.Материалы и оборудование: Микроскоп. Набор готовых растворов красок во флаконах, спирт, метиленовая синька. Бактериологические петли и иглы. Предметные стекла, покровные стекла, стеклянный мостик в ванночке для окраски препаратов, промывалка с водой. Дезинфицирующая жидкость, вата, фланелевая салфетка, карандаш по стеклу, иммерсионное масло, фильтровальная бумага, спички. Чистые культуры грибов и актиномицетов, выращенные на агаровой среде. Таблицы. План занятияСистематика грибов. Биологические особенности грибов: морфология, ультраструктура, химический состав. Методы исследования грибов. Задание: Изучить морфологию плесневых грибов: мукора, аспергилла, пеницилла и дрожжеподобного гриба Candida albicans . Приготовить препарат «раздавленная капля» из культуры плесневых грибов, изучить под микроскопом, определить на основании строения мицелия и спор видовую принадлежность, зарисовать. Приготовить препарат из культуры дрожжеподобных грибов, окрасить метиленовой синью. Изучить под микроскопом, зарисовать. Вопросы для обсуждения 1. Систематика царства грибов. 2. Общие биологические свойства грибов. 3. Общая характеристика зигомицетов. 4. Морфология и структура мукоральных грибов. 5. Морфологические и структурные особенности сумчатых грибов. 6. Морфология и структура дрожжевых и дрожжеподобных грибов. 7. Морфологические особенности и структурные особенности базидиомицетов. 8. Морфологические и структурные особенности несовершенных грибов. 9. Морфология и структура аспергиллов и пенициллов. 10. Методы изучения морфологии грибов. Грибы (Fungi, Mycota) – царство эукариотических свободноживущих или паразитических организмов, микроскопических и макроскопических. Среди грибов, имеющих медицинское значение, выделяют три типа (Phylum) или отдела, имеющие половой способ размножения (совершенные грибы): зигомицеты (Zygomycota), аскомицеты (Asсomycota) и базидиомицеты (Basidiomycota). Кроме того, выделяют условный тип/группу грибов – дейтеромицеты (Deuteromycota), у которых имеется только бесполый способ размножения (несовершенные грибы). По названиям грибов-возбудителей определяются и наименования болезней: аспергиллёз, пенициллёз и т.д. Зигомицеты (Zygomycota) относятся к низшим грибам. Имеют хорошо развитый несептированный мицелий (рис. 12).
Рис. 12. Зигомицеты: а – Mucor; б – Rhisopus. Включают представителей родов Mucor, Rhizopus, Rhizovucor, Absidia, Basidiobolus, Conidiobolus. Вызывает зигомикоз (мукоромикоз) легких, поражение желудочно-кишечного тракта, кожи, головного мозга и других органов человека. Широко распространены в почве и воздухе. Бесполое размножение осуществляется спорангиоспорами, половое с помощью зигоспор. Споры грибов проникают в организм воздушно-капельным путем, элементарным и контактным путями. Микробиологическая диагностика зигомицетов. Клиническим материалом являются кожа, полипы, отделяемое пазух носа, содержимое абсцесса мозга, соскобы со слизистых оболочек, кал, биоптаты тканей. Микроскопический метод: препараты окрашивают метиленовым синим или по Романовскому-Гимза. При микроскопии выявляют широкие неравномерной толщины несептированный гифы. Культуральный метод: посевы делают на питательные среды: Сабуро, Мартина, глюкозо-пептон- дрожжевой агар, сусло-агар, подкисленная молочной кислотой. На питательных средах зигомицеты образуют серые, черные, серо-черные, коричневые ватные колонии. Серологический метод: выявляют антитела в ИФА, РП. Аскомицеты (Ascomycota) относятся к высшим грибам. Имеет хорошо развитый септированный мицелий, кроме одноклеточных дрожжей. Характерной особенностью является формирование органов полового спороношения сумок или асков, содержащих 4 или 8 гаплоидных половых спор - аскоспор. К аскомицетам относятся отдельные представители (телеоморфы) родов Aspergillus и Penicillium, а также дрожжи (роды Saccharomyces, телеоморфы видов Candida) и возбудитель эрготизма (спорынья Clavicepspurpurea), паразитирующий на злаках. Некоторые виды аспергилл могут вызывать аспергиллезы и афлатоксикозы, пенициллы – пенициллезы. Дрожжи - одноклеточные грибы, утратившие способность к образованию истинного мицелия, чаще имеют овальную форму клеток (рис. 13). Размножаются почкованием, бинарным делением клетки или половым путем с образованием аскоспор. Вызывают дрожжевые микозы.
С. albicans Рис.13. Грибы рода Candida(http://schmsts3.appspot.com) Микробиологическая диагностика аскомицетов. Клиническим материалом являются гной, кровь, кал, биоптаты тканей. Микроскопический метод: препараты окрашивают метиленовым синим, гематоксилином, эозином, по Романовскому-Гимза, Цилю-Нельсену. При микроскопии выявляют псевдомицелий, септированный мицелий, почкующие бластоспоры, аскоспоры, хламидоспоры. Культуральный метод: посев на питательные среды: Сабуро, глюкозо-пептон- дрожжевой агар, сусло-агар. Аллергологический метод: кожно-аллегологическая проба с кандидо-аллергеном. Серологический метод: РА, РСК, ИФА, РП, ПЦР и др.. Базидиомицеты (Basidiomycota) относятся к высшим грибам, имеет хорошо развитый септированный мицелий. Характерная особенность - формирование базидии, аналогов сумок. Базидия образуется после полового процесса. На базидии формируются четыре базидиоспоры на коротких шипиках стеригмах. К базидиомицетам относятся некоторые дрожжи (телеоморфы Cryptococcus neoformas). Дейтеромицеты (Deuteromycota) - несовершенные грибы, анаморфные грибы, конидиальные грибы - являются условным типом грибов, объединяющий виды, не имеющие полового размножения. Образуют септированный мицелий, размножаются только бесполым путем с помощью конидий. К дейтеромицетам относится большинство грибов родов Aspergillusи Penicillium, а также некоторые грибы рода Candida, поражающие кожу, слизистые оболочки и внутренние органы (кандидоз). Они имеют овальную форму, делятся почкованием, образуют псевдогифы (псевдомицели) в виде цепочек из удлиненных клеток; иногда образуют гифы и хламидоспоры (рис. 14). Микробиологическая диагностика дейтеромицетов. Клиническим материалом являются гной, мокрота, кровь, кал, биоптаты тканей, кожа, ногти, роговица, отделяемое пазух носа, наружного слухового прохода. Микроскопический метод: препараты окрашивают гематоксилином, эозином, по Романовскому-Гимза, по Граму. При микроскопии выявляют септированный мицелий, цепочки конидий (аспергиллы, пенициллы), микро- и макроконидии, хламидоспоры (фузарии). Культуральный метод: посев на питательные среды: Сабуро, Мартина, Чапека, глюкозо-пептон- дрожжевой агар, сусло-агар, подкисленный молочной кислотой. На питательных средах аспергиллы формируют чаще белые пушистые колонии с последующей дополнительной окраской (желтой, розовой, кремовой); пенициллы образуют зеленые, бело-зеленые, желто-зеленые, голубоватые, бело-голубые, желто-коричневые, реже коричневые и черные компактные бархатистые колонии; фузарии образуют пушистые или ватообразные колонии белого цвета, с возрастом приобретающие оттенки розового, сиреневого, красного, желтого или оранжевого. Аллергологический метод: кожно-аллегологическая проба. Серологический метод: ИФА, РП, ПЦР и др..  Рис. 14. Дейтеромицеты: 1– Aspergillus, 2 – Penicillium, 3 – Fusarium Из дрожжеподобных грибов чаще других вызывают заболевания у человека грибы рода Candida. Они настолько широко распространены в природе, что сам человек в норме очень часто бывает их носителем. Но в условиях иммунодефицита они проявляют агрессивные свойства и могут вызывать поражения (кандидоз) практически всех органов и тканей. Возможность возникновения микоза увеличивается с углублением иммунодефицита. Поэтому при не нарушенном иммунитете носительство грибковых клеток в организме может продолжаться неопределенно долгое время, а на фоне иммунодефицита возможен не только микоз, обусловленный одним возбудителем, но и смешанные грибковые поражения, в частности микозы, вызываемые одновременно и плесневыми, и дрожжеподобными грибами, а в некоторых случаях одновременно грибами и бактериями. Оформление лабораторной тетради: Заполнить таблицы 5, 6, зарисовать микропрепараты дрожжеподобных грибов и плесневых грибов. Таблица 5. Систематическое положение грибов, имеющих медицинское значение
Таблица 6. Морфологические признаки плесневых и дрожжеподобных грибов
Контрольные вопросы по теме занятия: 1. Перечислите микроорганизмы, имеющие эукариотический тип клеточной организации. 2. Опишите морфологические особенности и способы размножения грибов рода Aspergillus. 3. Опишите морфологические особенности и способы размножения грибов рода Mucor. 4. Опишите морфологические особенности и способы размножения грибов рода Penicillium Ситуационная задача № 1 На слизистой оболочке полости рта новорожденного отмечается гиперемия и наличие белого творожистого налета. Взят мазок и окрашен по методу Грама. В мазке обнаружены крупные грамположительные овально-округлые клетки, располагающиеся неправильными группами. Дайте заключение: В исследуемом материале обнаружены микроорганизмы рода Streptococcus В исследуемом материале обнаружены микроорганизмы рода Candida В исследуемом материале обнаружены микроорганизмы рода Staphylococcus В исследуемом материале обнаружены микроорганизмы рода Clostridium Ситуационная задача № 2 У больного с подозрением на возвратный тиф в начале приступа лихорадки взята кровь, приготовлен мазок и окрашен по методу Романовскому-Гимзы. Опишите характерные морфологические и тинкториальные свойства предполагаемого возбудителя: Одиночная извитая бактерия, синего цвета, имеющая 3-8 крупных неравномерных завитков Одиночная извитая бактерия, бледно-розового цвета, имеющая 8-12 равномерных мелких завитков Одиночная извитая бактерия, красно-розового цвета, имеющая неглубокие частые завитки 1-го и завитки 2-го порядка, придающие бактерии форму букв "S" или "С" Грамположительные кокки, располагающиеся цепочкой Ситуационная задача № 3 У больного с подозрением на сифилис приготовлен мазок из отделяемого твердого шанкра и окрашен по методу Романовскому-Гимзы. Опишите характерные морфологические и тинкториальные свойства предполагаемого возбудителя: Одиночная извитая бактерия, синего цвета, имеющая 3-8 крупных неравномерных завитков Одиночная извитая бактерия, бледно-розового цвета, имеющая 8-12 равномерных мелких завитков Одиночная извитая бактерия, красно-розового цвета, имеющая неглубокие частые завитки 1-го и завитки 2-го порядка, придающие бактерии форму букв "S" или "С" Грамположительные кокки, располагающиеся цепочкой Ситуационная задача № 4 Какие методы окраски используются при подозрении на инфекции, вызванные простейшими: Метод Грама Метод Здродовского Метод Циля-Нильсена Метод Романовского-Гимзы | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
