|
|
Медицинская микробиология и вирусология ч1 (1). Т. П. Гажеева, Т. Х. Гордеева, Е. И. Хорошавина Медицинская микробиология и вирусология Часть 1
Рис. 27. Полоска Е-теста.
3. Метод серийных разведений. Данный метод позволяет определить минимальную концентрацию антибиотика, ингибирующую рост исследуемой культуры бактерий. Вначале готовят базовый раствор, состоящий из специального растворителя или буферного раствора, а также содержащий антибиотик в определенной концентрации (мкг/мл или ЕД/мл). Из этого раствора в пробирках готовят все последующие разведения в бульоне объемом 1 мл. В каждую пробирку добавляют 0,1 мл исследуемой бактериальной суспензии, содержащей 106–107 бактериальных клеток в 1 мл. В последнюю пробирку вносят 1 мл бульона и 0,1 мл суспензии бактерий, так называемой контроль культуры. Все посевы инкубируют при температуре 37 °С в течение дня. На следующий день отмечают результаты эксперимента по помутнению питательной среды в пробирке, сравнивая с контролем культуры, который указывает на замедление роста исследуемой культуры бактерий под влиянием содержащейся в ней минимальной ингибирующей концентрации (МИК) антибиотика.
Итоговую оценку чувствительности микроорганизмов к антибиотикам проводят по специальной таблице, содержащей пограничные значения диаметров зон задержки роста для устойчивых, умеренно устойчивых и чувствительных штаммов. Также эта таблица содержит значения МИК антибиотиков для устойчивых и чувствительных штаммов. Штаммы микроорганизмов относят к категории чувствительных, если в сыворотке крови их рост подавляется при концентрациях обычных доз антибиотиков. Штаммы микроорганизмов относят к категории умеренно устойчивых, если в сыворотке крови их рост подавляется при концентрациях максимальных доз антибиотиков. Штаммы микроорганизмов относят к категории устойчивых, если в сыворотке крови их рост не подавляется даже при концентрациях максимально допустимых доз препарата.
Минимальной подавляющей концентрацией является первая, после серии последовательных разведений, наименьшая концентрация антибиотика, в которой визуально не определяется бактериальный рост. Минимальная подавляющая концентрация (МПК) измеряется в мг/л или мкг/мл (рис. 28).
Рис. 28. Метод разведений при определении чувствительности микроорганизмов. https://fr.slideserve.com/camila/3705057
Минимальная бактерицидная концентрация, далее МБК – это наименьшая концентрация антибиотика, при которой invitro погибает 99,9% от исходного количества микроорганизмов за определенный интервал времени. Измеряется в мг/л или мкг/мл.
Показатель МБК используется в терапии с низким антибактериальным эффектом, а также в терапии антибиотиками, обладающими бактериостатическим действием. Также в определенных ситуациях МБК определяют, например, при бактериальном эндокардите, остеомиелите или генерализованной инфекции у пациентов с иммунодефицитом.
Стоит отметить, что на сегодняшний день не существует методов, позволяющих с абсолютной достоверностью спрогнозировать клинический эффект от терапии с применением антибиотиков при лечении инфекционных болезней. Тем не менее, результаты определения чувствительности помогают врачам в задаче выбора и коррекции антибактериальной терапии (табл. 10).
Таблица 10. Критерии чувствительности бактерий
Тип чувствительности
|
Микробиологическая интерпретация
|
Клиническая интерпретация
|
Чувствительный
|
Отстуствуют механизмы резистентности
|
Обычных доз достаточно для успешного проведения терапии
|
С промежуточной резистентностью
|
Популяция находится между чувствительной и резистентной
|
Терапия имеет положительный исход при локализации инфекции в местах, где антибиотик накапливается в высоких концентрациях, или при использовании максимальных доз
|
Резистентный
|
Присутствуют механизмы резистентности
|
Терапия не имеет эффекта
|
|
|
|
|
Скачать 5.4 Mb.