|
|
Учебнометодическим объединением вузов Российской Федерации по педагогическому образованию в качестве учебного пособия для студентов педагогических вузов по специальности 032400 биология
71
Если информация не помещается на одну этикетку, ее можно разместить на двух географической и экологической. Примеры написания этикеток приведены на рисунке 62. Наиболее обще- употребимые размеры этикеток 18x8 мм для наколотых насекомых и 15x30 мм для влажных препаратов. Удобно предварительно расчертить заготовку, а вырезать этикетки только после их заполнения. Не рекомендуется пользоваться временными этикетками, написанными карандашом или содержащими закодированные обозначения. Если этого избежать не удается, то хотя бы часть этикеток должна быть написана полностью и содержать всю информацию, позволяющую расшифровать остальные этикетки даже неспециалисту. Рис. 62. Варианты заполнения этикеток 1 - обычная этикетка, 2 - отдельные экологическая и географическая этикетки 3 - полная определительная этикетка, 4- неполная определительная этикетка Место сбора животных следует указывать так, чтобы вдаль нейшем при необходимости его легко можно было бы установить Не следует пользоваться местными названиями или указывать населенные пункты, не отмеченные на обычных картах. Хранение Беспозвоночных сохраняют в фиксирующих жидкостях различного состава. Для большинства мелких видов используют
70%-ный раствор спирта или 4%-ный раствор формалина, иногда - более сложные растворы 100 мл 70%-ного раствора спирта в смеси с 2-3 мл 40 %-ного раствора формалина, иногда с добавлением
2-3 мл глицерина. Личинок насекомых, почвенных членистоногих, моллюсков, энхитреид, плоских червей и т . п . обычно фиксируют в ном спирте или смесях на его основе. Дождевых червей, нематод и других круглых червей фиксичуют в ном растворе формалина. Вообще следует помнить, что формалин оказывает сильное дубящее действие, вследствие чего материал со временем становится ломким. Поэтому следует избегать его использования для хранения членистоногих и любых видов с длинными придатками. Однако в некоторых случаях желательно применять специальный фиксатор. Например, для объектов с мягкими покровами и
72
яркой окраской применяют специальную фиксирующую жидкость, позволяющую сохранить прижизненную окраску. Для ее приготовления 2 г салициловой кислоты растворяют в 100 мл 96%-ного спирта и смешивают этот раствор с 100 мл 1%-ного раствора поваренной соли. Такие препараты желательно хранить в защищенном отсвета месте. Перед помещением в фиксатор объект расправляют и очищают от загрязнений. Особенно важно очистить влажной ваткой слизь с моллюсков и дождевых червей. Снабженных этикеткой животных раскладывают по пробиркам с фиксатором, затыкают их ватной пробкой и помещают в банку с плотно закрывающейся крышкой. Размеры пробирок и банки должны соответствовать размерам объектов, но всегда над горлышком пробирок должен оставаться слой фиксирующей жидкости толщиной 1,0-1,5 см (см. рис. 31). Животных с мягким телом (моллюски, плоские черви) не следует переносить непосредственно в спиртовой фиксатор. Желательно провести их через ряд растворов спирта восходящей крепости (30, 50, 70%), причем в каждом из растворов объект должен находиться 1,5-4,0 ч в зависимости от размера тела. Во всех случаях для успешного длительного хранения желательна замена жидкости спустя 1-2 дня после фиксации. Насекомых с относительно плотными покровами, предназначенных для энтомологических коллекций, можно хранить на ватных матрасиках (см. выше. Перед выкладыванием на матрасик насекомые должны пролежать в морилке несколько часов для размягчения мышечных тканей. Следует учитывать, что насекомые снежным телом могут довольно быстро мацерироваться, поэтому их надо обрабатывать в первую очередь. Объекты раскладывают на слое "ваты ровными рядами или группами, соблюдая два правила во-первых, особи, собранные водном биотопе, должны лежать совместно во-вторых, следует избегать непосредственного соседства очень крупных и очень мелких форм. Нередко при раскладке сборов проводят предварительную систематизацию бабочек помещают на один матрасик, крупных жуков - на другой и т. д. Если границы между выложенными на матрасик группами насекомых не очевидны, следует провести их пунктиром (карандашом или шариковой ручкой) или проложить темную нитку рис. 63). Схема этих границ и расположение объектов переносятся на вкладыши каждая группа подписывается полной этикеткой (см. выше) с указанием количества экземпляров в группе. Если все сборы проведены водном месте, то географическая этикетка пишется на клапане конверта, а на вкладыше указывают биотоп, дату 73 Рис. 63. Энтомологический матрасик с насекомыми и число особей. В случае предварительной систематизации на клапане указывают также название группы и порядковый номер матрасика, например Мелкие клопы - 2». Монтирование беспозвоночных Монтированием называется обработка целого объекта с целью определения и дальнейшего хранения. Из разнообразных способов монтирования при прохождении полевой практики используют простейшие методы изготовления тотальных препаратов и расправления членистоногих для коллекции. Изготовление тотальных препаратов В большинстве случаев для препаратов рекомендуется использовать стандартные предметные и покровные стекла, выбирая соответствующие заливочные среды, ножки и прокладки различной высоты и т.д. Временные препараты, необходимые лишь на короткий период обработки, готовят с использованием воды, глицерина или их смесей. Лишь в редких случаях (например, наблюдение за живыми паразитами) применяются специальные физиологические растворы 0,6%-ный растворили раствор Рингера. Как правило, временные препараты готовят с использованием различных ножек и прокладок кусочков пластилина или воска, полосок предметных и покровных стекол, стеклянных капилляров, обрезков полистироловых трубочек (рис. 64). Для замедления движения объекта в препарате добавляют немного раствора желатина или вишневой камеди. Техника приготовления препарата не отличается от применяемой на лабораторных занятиях. При изготовлении постоянных препаратов в качестве заливочных средств чаще всего употребляют канадский бальзам, жидкость Фора-Берлезе (30 г гуммиарабика, 50 г дистиллированной воды, 20 г глицерина и 200 г хлоралгидрата) и глицерин-желати новую смесь (7 г желатина, 42 г дистиллированной воды, 50 г гли- 74 Рис. 64. Различные способы изготовления ножек для покровных стекол 1 - из стеклянных капилляров 2 - из обрезков пластиковых трубочек 3 - из кусочков предметного стекла 4 - из пластилина
церина и 0,5 г кристаллического фенола - карболовой кислоты. При приготовлении последних составов сначала в указанном количестве воды растворяют гуммиарабик или желатин и лишь затем добавляют остальные компоненты. Для заливки объекта в глицерин-желатин необходимо провести следующие операции скальпелем, пинцетом или препаровальной иглой отделить кусочек глицерин-желатина подходящего размера (обычно около
0,3 см) и перенести на предметное стекло
- нагреть предметное стекло на водяной бане до расплавления смеси (варианты простейших водяных бань приведены на рис. 65,1,2);
- не снимая предметного стекла с водяной бани, препароваль
ной иглой размазать глицерин-желатин так, чтобы получилась четырехугольная капля на 3-4 мм меньше покровного стекла, и перенести в нее заливаемый объект
- под бинокуляром расположить объект так, как он должен находиться на препарате, и осторожно накрыть покровным стеклом рис. 65,3).
75
Последняя операция должна выполняться быстро, чтобы смесь не успела схватиться. Готовые препараты необходимо подсушить на водяной бане или в термостате (температура должна быть не более Св течение 1-10 суток. Для лучшей сохранности покровное стекло можно оконтурить асфальтовым битумным) лаком. Если монтируемые беспозвоночные обладают тонкими, мягкими покровами, то перед заливкой в глицерин-желатин их следует провести через ряд растворов глицерина восходящей крепости (40, 60, 80, 90%) или поместить в 40%-ный раствор глицерина и медленно упарить его до концентрации 90-100%. В последнем случае важно избегать резкого изменения температуры, так как объект может разрушиться вследствие неравномерного расширения. Канадский бальзам менее удобен в обращении в связи стем, что заливаемые объекты должны быть предварительно обезвожены и обработаны толуолом (токсичен. Техника заливки препаратов в общем соответствует традиционной, но требует большей тщательности, так как возникающие дефекты впоследствии трудноисправимы. Все постоянные препараты должны быть снабжены полными этикетками, обычно слева от покровного стекла пишут название животного, а справа помещают географическую этикетку (рис 65,4). Прокрашивание препаратов требует знания специальных методики на полевой практике обычно не применяется. В случае необходимости можно воспользоваться витальными красителями нейтральный красный, конго красный, метиленовый синий) или Рис, 65. Изготовление препарата в глицерин-желатине: 1 - водяная баня, 2 - простейший заменитель водяной бани 3 - техника опускания покровного стекла 4 - расположение этикеток на препарате 76 простейшими методами окраски тотальных препаратов (кармин по Блажину* и др. Монтирование членистоногих для коллекции Изготовление коллекции из 60-70 видов насекомых - обязательное задание на полевой практике. Как правило, для монтирования используют насекомых, собранных на дневной экскурсии. Лишь в редких случаях возникает необходимость использовать материалы, хранящиеся на ватных матрасиках. Тогда их предварительно размягчают, поместив в камеру со ной влажностью воздуха (рис. 66) на срок от 2 ч до 2 суток. Для предотвращения развития грибков полезно добавлять в камеру несколько капель раствора фенола. Извлекают насекомых из камеры тогда, когда у них восстановится гибкость всех сочленений. Рис. 66. Камеры для размачивания насекомых Накалывают насекомых, применяя энтомологические булавки различной толщинь1 в зависимости от размеров животного. Не рекомендуется использовать булавки тоньше чем № 1. Если же необходимы тонкие булавки, то их используют, комбинируя с толстыми (см. ниже. Во всех случаях энтомологическая булавка вводится отвесно (перпендикулярно к продольной и поперечной осям тела) в строго установленные участки тела (рис. 67). Над телом насекомого должен остаться участок булавки длиной 1,0- 1,5 см, за который можно легко взяться пальцами. Наколотых насекомых расправляют на толстом куске поролона, пенопласта или аналогичного материала, в который легко входит энтомологическая булавка (см. рис. 29, 1). Конечности насекомых прижимают к телу, при этом передние направляют вперед, средние и задние - назад. У ряда групп - бабочек, стрекоз, сетчатокрылых и некоторых других - необходимо расправлять крылья, для чего используют расправилки. Методику применения этих красителей см Иванов А.В. и др. Большой практикум по зоологии беспозвоночных. - М Высшая школа, 1981. - С. 33-34, 42.
77
Рис. 67. Накалывание насекомых на энтомологические булавки
1 - правильно 2 - неправильно 3 - способы накалывания насекомых разных отрядов На рисунке 68 на примере бабочки показан способ расправления насекомых с крупными крыльями. Части насекомого фиксируют в расправилке полосками бумаги и стальными булавками, при этом нив коем случае нельзя прокалывать крылья или брюшко. Крылья
78
должны плотно прилегать к дощечкам расправилки. Как правило, задний край переднего крыла располагают перпендикулярно телу насекомого. Крылья расправляют поочередно. Прежде чем расправлять первое крыло, второе фиксируют полоской бумаги. Мелких насекомых можно расправлять на самодельных расправилочках, сделанных из спичечного коробка, кусочков пробки или пенопласта и других подобных материалов (рис. 69). Именно в этом случае рекомендуется использовать предварительно обрезанные до 15-20 мм тонкие энтомологические булавки (№ 0-000). После высыхания насекомого булавку втыкают в небольшой пенопластовый брусок, наколотый на более толстую иголку (рис. Г Для монтирования очень мелких насекомых, которых можно повредить при накалывании, используют пластинки из тонкого прозрачного пластика или белого картона. При этом применяют водорастворимые клеи, не теряющие прозрачности при высыхании (например, поливинилацетат- ный - ПВА). Расправлять таких насекомых можно как до приклеивания например, на кусочке фильтровальной бумаги, таки после, но обязательно под бинокуляром. В последнем случае важно приклеить объект так, чтобы конечности не потеряли Рис. 68. Стадии расправления бабочки Рис. 69. Использование микрорасправилок
Рис. 70. Монтирование мелких насекомых 1 на пенопластовом брусочке, из пластинках, 5 - на капле клея подвижность. Помните, что мелкие формы очень быстро высыхают (особенно под светом мощного осветителя, поэтому расправлять их надо немедленно. Если вы располагаете несколькими экземплярами одного вида, их следует наклеить по-разному: спинной или брюшной стороной вверх, боком и т.д. - и разместить все пластинки на одной энтомологической булавке (рис.
70,2). Наконец, некоторых насекомых с тонкими покровами можно наклеивать непосредственно на булавку (рис. 70,3) на расстоянии 1 -1,5 см от вершины. Специальные способы монтировки применяются при сушке пауков и личинок (гусениц бабочек и т.п.). У пауков, предназначенных для коллекции, отрезают брюшков головогрудь втыкают энтомологическую булавку, расправляют конечности на куске пенопласта и сушат. Брюшко помещают на лист продырявленной
1 Рис. 71. Простые способы высушивания пауков и гусениц 1 - высушивание брюшка паука 2 - выдувание гусеницы в атмосфере теплого воздуха
80
булавками бумаги и несколько раз проводят им в потоке горячего воздуха от лампы, электроплитки и т.д. (рис. 71,7): вследствие расширения легочных мешков брюшко раздувается ив таком положении засыхает. Его приклеивают к высохшей головогруди узкой полоской картона или пленки. Аналогичный метод используется и для монтирования гусениц бабочек их надувают в атмосфере теплого воздуха (рис. 71,2), предварительно выдавив содержимое личинки через небольшой надрезу анального отверстия. Анатомирование объекта Это одна из наиболее сложных форм работы с беспозвоночными. Методы вскрытия и вычленения внутренних структур разнообразны, поэтому мы остановимся лишь на общих рекомендациях и рассмотрим несколько частных случаев, обычных на полевой практике. В большинстве случаев вскрытие проводят под бинокуляром, манипулируя обеими руками. При этом (рис. 72) в левой руке держат инструмент, фиксирующий объект (пинцет, затупленная игла, а в правой - рабочий инструмент (скальпель, заточенная игла, крючок и т.д.). Как правило, животное предварительно закрепляют булавками в препаровальной ванночке с водой. Для заливки дна используют смесь пчелиного воска и топленого сала (4:1) или воска и вара (1:1). Если объект настолько мал, что не может быть зафиксирован булавками, используют специальные мастики (смесь
1 части воска и 3 частей вазелина, к которым беспозвоночное прилипает, или вязкие среды (глицерин. При вскрытии соблюдают следующие правила
1. Орган или животное, подлежащее вскрытию, должны быть прочно зафиксированы. Булавки следует втыкать в самые плотные части препарата, наиболее удаленные от обрабатываемого места.
2. Никогда не следует производить вскрытие под грязной водой. Если вода становится мутной (это зависит от разных причин, то объект промывают под слабой струей и меняют воду в ванночке.
3. Не следует ничего отрезать и удалять без надобности. Удаляются после внимательного рассмотрения только те части и органы, которые мешают дальнейшему вскрытию.
4. После употребления инструменты следует тщательно вытереть и просушить. Наиболее простой анатомической операцией является изготовление пре-
Рис 72
. Правильное располо-
парата глаз пиявки. Для этого нож жение инструментов и объекта
ницами отделяют 10-15 головных сег-
при вскрытии
81
Рис. 73. Примеры анатомирования водных беспозвоночных / - отделение жаберного лепестка личинки поденки 2 - изготовление препарата маски личинки стрекозы-коромысла, 3 - вскрытие ректальных жабр личинки стрекозы ментов, помещают их между двумя предметными стеклами и сильно сдавливают. Главное условие - избежать перекоса стекол, тогда на расплющенных головных сегментах будут хорошо видны пигментные пятна глазков. Довольно часто возникает необходимость в вычленении придатков тела жабр личинок поденок, хвостового лепестка личинок равнокрылых стрекоз и т.д. Обычно в этих случаях достаточно прижать пинцетом к дну ванночки соответствующий сегмент брюшка и скользящим движением заточенной иглы отделить жабру у основания (рис. 73,7). Из удаленной жабры готовят препарат и рассматривают его под бинокуляром. Сложнее отпрепарировать маску личинки стрекозы. Для этого надо булавками зафиксировать личинку брюшной стороной вверх, оттянуть маску и, придерживая головную капсулу пинцетом, разрушить сочленение маски и головы (рис. 73,2). Одна из наиболее сложных анатомических процедур, входящих в программу практики, - изготовление препарата ректальных жабр личинки разнокрылой стрекозы. Брюшко личинки вскрывают по средней линии спинной стороны и фиксируют края разрезана дне ванночки (рис 73,5). Далее выделяют заднюю кишку и подходящие к ней крупные трахейные стволы. Затем заднюю кишку разрезают вдоль и рассматривают ректальные жабры. Иногда возникает необходимость в расчленении хитинового скелета насекомого на отдельные склериты. Предварительно внутренние органы объекта должны быть отмацерированы растворами щелочи (5 %-ный раствор КОН или N a O H ) вымачиванием в течение суток или минутным кипячением. Крупные объекты предварительно делят на части ив ходе обработки несколько разменяют раствор. Очищенный скелет промывают вводе и разделяют по швам. Полученные склериты высушивают и наклеивают на картон.
82
Рис. 74. Препарирование и хранение гениталий насекомых 1 - извлечение гениталий 2 - хранение глицериновых препаратов Сходным образом проводят обработку гениталий, часто необходимых для определения видовой принадлежности насекомых. Обычно гениталии извлекают загнутой препаровальной иглой через анальную щель или специальный разрез на границе тергитов и стернитов брюшка (рис. 74,7). Гениталии обрабатывают раствором щелочи, очищают от остатков мышц и хранят в постоянных препаратах или специальных капсулах с глицерином наколотыми на энтомологическую булавку (рис. 74,2). Наиболее доступный источник таких капсул - лента «Коррэкс», используемая в фотографии. Зарисовка объектов Особое внимание при прохождении практики следует уделять рисованию изучаемых объектов. Ведь только рисуя объект, можно основательно его изучить, зафиксировать внимание на тех деталях, которые ускользают при простом просмотре препарата, закрепить в памяти образы животных и важнейшие детали их строения. Часто студенты пытаются обходиться без рисования, оправдываясь отсутствием художественных способностей. Однако следует иметь ввиду, что морфологический рисунок - технический, ему может научиться всякий. Как показывает практика, способность правильно изобразить объект достигается постепенно в процессе работы. В рисунках, изображающих внешнюю морфологию животного или картину вскрытия, главное внимание следует обращать на точность и четкость контуров. Накладка теней имеет второстепенное значение, и почти всегда можно ограничиться теми тенями, которые необходимы для ясности рисунка. Любой рисунок, даже очень детальный, всегда имеет известную долю схематизации, чем отличается от фотографии. Степень схематизации может быть различной. Например, необязательно изображать все гомо-
|
|
|
Скачать 3.19 Mb.