Жуленко-Ветеринарная токсикология. Ветеринарная токсикология

• Название: Ветеринарная токсикология
• Анкор: Жуленко-Ветеринарная токсикология.doc
• Дата: 28.03.2017
• Размер: 1.9 Mb.
• Имя файла: Жуленко-Ветеринарная токсикология.doc
• Тип: Документы; #4290
• Категория: Медицина
• страница: 2 из 30

Пестициды (pestis — вредное, caedere — убивать). Пестициды — средства борьбы с вредителями растений и животных. Для ветери­нарной токсикологии они имеют большее значение, чем токси­ческие вещества всех остальных групп. Именно среди пестицидов наибольшее количество химических соединений с высокой биоло­гической активностью. Однако ведение современного высокопро­дуктивного сельского хозяйства невозможно без их применения. Поэтому отмечается рост как ассортимента, так и объема приме­нения пестицидов. Пестициды имеют не только токсикологичес­кое, но и ветеринарно-санитарное значение, так как некоторые из них загрязняют объекты окружающей среды и накапливаются в тканях животных, выделяются с молоком и яйцами, что приводит к загрязнению их остатками продуктов питания животного проис­хождения.

Микотоксины. К микотоксинам относят токсичные вещества (метаболиты), образуемые микроскопическими грибами (плесе­нью). Среди них имеются соединения, обладающие исключи­тельно высокой биологической активностью, действующие экстрогенно, канцерогенно, эмбриотоксически, гонадотоксически и тератогенно. Так, ЛД₅о одного из метаболитов гриба из рода фузариум — Т-2-токсина для белых мышей составляет 3,8 мг/кг, примерно такой же токсичностью обладает афлатоксин B. В на­стоящее время неизвестно другого такого соединения, применяе­мого для защиты растений или животных, с такой высокой токсичностью. ЛДзо карбофурана (фурадана) — одного из наиболее кжсичпых пестицидов, применяемого для обработки семян свек-М1>1 и не допущенного к применению на животных, составляет I !> mi/кг, т. е. он в 4 раза менее токсичен, чем Т-2-токсины.

Но многих странах мира проводятся обширные исследования но выделению микотоксинов, изучению их химической структу­ры, определению биологической активности, разработке методов определения в кормах и тканях животных, факторов, влияющих м,| процесс токсинообразования.

Токсичные металлы и их соединения. Из соединений металлов наибольшее санитарно-токсикологическое значение имеют ртуть-, гиппец-, кадмийсодержащие вещества и в меньшей степени — чром-, молибден-, цинксодержащие соединения.

До недавнего времени часто отмечали отравления сельскохо-ыйственных и диких животных соединениями ртути, которые применяли для протравливания семян. В нашей стране для этих целей использовали в основном этилмеркурхлорид (^H^HgCl), который относится к группе сильнодействующих ядовитых ве­ществ (СДЯВ) и является действующим веществом протравителя гранозана. С 1997 г. гранозан исключен из списка пестицидов. От­равления другими соединениями тяжелых металлов встречаются реже, однако представляют опасность как загрязнители продуктов питания, в том числе животного происхождения — молока, мяса, яиц, рыбы. Основной источник загрязнения тяжелыми металлами и их соединениями — промышленные предприятия, использую­щие в технологическом процессе эти элементы. По мере развития промышленности, использующей тяжелые металлы и их соедине­ния, увеличивается их выброс в окружающую среду, повышается содержание соединений тяжелых металлов в почве, воде, растени­ях, животных и, следовательно, в продуктах питания. В связи с этим возрастает необходимость контроля за их накоплением в объектах окружающей среды, кормах и продуктах питания, с тем чтобы не допускать в пищу продукты питания, содержащие токси-коэлементы выше максимально допустимого уровня.

Токсичные металлоиды. К группе токсичных металлоидов отно­сят соединения мышьяка, фтора, селена, сурьмы, серы и др. Одна­ко причислить эти элементы и их соединения к ядам можно лишь условно. Токсичность металлоидов определяется дозой и видом соединения, поэтому она варьирует в очень широких пределах. Так, например, ЛД₅о натрия арсенита для крыс составляет 8— 15мг/кг их массы, тогда как гербицида монокальций метиларсената — 4000 мг/кг (Н.Н.Мельников, 1975). Совсем недавно со­единения мышьяка в небольших дозах применяли в качестве стимуляторов роста. Используют их в качестве лекарственных препаратов (новарсенол, осарсол и др.), для уничтожения вред­ных грызунов (кальция арсенит). Фтор- и селенсодержащие ве­щества в небольших дозах применяются для лечения ряда заболеваний, в то время как большие дозы их вызывают отравления животных.

Элементы этой группы позволяют наиболее наглядно проде­монстрировать двойственное воздействие ядов на организм в за­висимости от дозы. Например, селеном возможно отравление сельскохозяйственных животных, в то время как небольшие коли­чества этого элемента, поступающие с кормом, предотвращают развитие у них ряда заболеваний (беломышечной болезни, токси­ческой дистрофии печени). Известно также, что этот элемент не­обходим для организма животных (В. В. Ермаков, В. В. Ковальс­кий, 1974). Могут быть причиной отравления животных плохо обесфторенные фосфаты, используемые в качестве кормовых до­бавок. В то же время в небольших концентрациях фтор добавляют в питьевую воду для предотвращения кариеса зубов.

Полихлорированные и полибромированные бифенилы (ПХБ, ПББ). Токсические вещества этой группы близки по химическому строению к ДДТ и его метаболитам. ПХБ и ПББ — стойкие хлор-и броморганические соединения, широко применяемые в про­мышленности при производстве резины, пластмасс, в качестве пластификаторов. Токсичность этих веществ сравнительно неве­лика (ЛДзо азрола — наиболее распространенного соединения этой группы — составляет 1200 мг/кг массы животного). Однако некоторые из них действуют канцерогенно в опытах на лабора­торных животных. Исходя из этого, установлены очень низкие допустимые уровни их содержания в продуктах питания. ПХБ и ПББ очень медленно разрушаются в окружающей среде и накап­ливаются в органах и тканях животных. Отмечены случаи отрав­ления людей и животных ПХБ, а также высокий уровень загряз­нения их остатками кормов и продуктов питания животного про­исхождения. Особое внимание уделяется изучению биологичес­кой активности ПХБ и ПББ, отдаленных последствий их действия, а также миграции в объектах окружающей среды и организме животных.

Соединения азота. Из соединений этой группы санитарно-ток-сикологическое значение имеют нитраты (NO3), нитриты (NO₂), нитрозоамины и в определенной степени мочевина — карбамид [CO(NH₂)2] и др. Мочевина используется в качестве кормовой до­бавки животным. В связи с широкой химизацией сельского хозяй­ства и применением в больших масштабах азотистых удобрений существенно возрастает санитарно-токсикологическое значение нитратов и нитритов, которые могут в значительных количествах накапливаться в кормовых культурах, особенно в корнеклубне­плодах, за счет адсорбции из почвы.

Натрия хлорид (поваренная соль). Практически все виды сель­скохозяйственных животных одинаково чувствительны к натрия хлориду. Однако чаще других травятся свиньи и птицы. Это связа­но с тем, что зерновые корма, употребляемые для их кормления, содержат мало соли, поэтому они менее приучены к натрия хло­риду и более чувствительны к нему. Чаще всего случаи отравления ион 1 и кают при скармливании свиньям или курам комбикормов, предназначенных для крупного рогатого скота. Эти комбикорма содержат до 1 % натрия хлорида.

Яды растительного происхождения. В связи с окультуриванием пастбищ, развитием промышленного животноводства и перево­дом животных на круглогодичное стойловое содержание значение ядов растительного происхождения в отравлениях сельскохозяй­ственных животных снижается, хотя и не утрачивается полностью. Кроме того, некоторые яды, образуемые растениями в сравни­тельно небольших количествах, не вызывают острого отравления, чато действуют эмбритоксически и тератогенно. К ним относятся, например, алкалоиды люпина. В количествах, не вызывающих ос­трого отравления у коров, они оказывают тератогенное действие, и связи с чем у 50 % подопытных коров рождались телята с урод­ствами.

Растительные яды могут быть алкалоидами, тио- и цианогли-козидами, токсичными аминокислотами и растительными фе-польными соединениями.

Среди алкалоидов наибольшее ветеринарно-токсикологичес-кое значение имеют алкалоиды растений рода люпина (спортеин и люпинин), аконита (липоктонин, относящийся к классу поли­циклических дитерпенов), живокости, триходесмы седой и неко­торых других.

Тиогликозиды в основном содержатся в растениях семейства крестоцветных. Они могут быть причиной острых и хронических отравлений животных. Кроме того, поступление с кормом боль­шого количества растений этого семейства может привести к сни­жению их продуктивности. Тиогликозиды взаимодействуют в организме с йодом, в результате чего могут наступить йодная не­достаточность и развитие патологического процесса.

Из растительных фенольных соединений наибольшее ветери-нарно-санитарное значение имеют дикумарин и госсипол.

Лекарственные средства и премиксы. Многие лекарственные препараты в терапевтических дозировках обладают побочным действием — вызывают аллергические реакции, поражают отдель­ные органы. В завышенных дозах они вызывают интоксикацию и гибель животных. Некоторые лекарственные препараты могут длительное время сохраняться в тканях животных, выделяться с молоком или яйцами. Например, антигельминтик гексахлорпа-раксилол обнаруживают в жире обработанных животных через 60 дней после его однократного введения. В значительных количе­ствах он выделяется с молоком коров. В яйцах кур нередко обна­руживают антигельминтик фенотиазин, применяемый для обра­ботки птиц. Поэтому вопросы токсикологической и ветеринарно-санитарной оценки лекарственных препаратов приобретают особое значение. Решение этих вопросов — одна из задач ветеринар­ной токсикологии. Такое же значение имеют токсикологическая и ветеринарно-санитарная оценки премиксов.

Полимерные и пластические материалы. До последнего времени полимерные и пластические материалы являлись объектом иссле­дования медицинской токсикологии в связи с тем, что их исполь­зовали в основном в жилых и производственных помещениях, из­делиях бытового назначения и других предметах, с которыми кон­тактировал в основном человек. Однако в последнее время раз­личные отходы полимерных материалов и пластические массы широко применяют в животноводстве. Некоторые полимерные материалы для животноводческих помещений изготовляют непос­редственно на месте без необходимого технологического контро­ля. Были случаи отравления животных при использовании в жи­вотноводческих помещениях полимерных материалов, не прошед­ших токсикологической оценки. Поэтому все новые полимерные материалы, предназначенные для животноводческих помещений, должны проходить токсикологическую оценку. Они и являются предметом исследования и контроля ветеринарных токсикологи­ческих лабораторий.

Корма новых видов. В последнее время идут активные поиски новых биологических субстратов, которые могли бы быть исполь­зованы для кормления животных. Ведутся попытки использовать для этой цели куриный помет и навоз свиней, поскольку птицы и свиньи переваривают не более 50 % питательных веществ, содер­жащихся в кормах. Более 50 % дефицитного белка выбрасывается с фекалиями. Перспектива использования такого белка для корм­ления животных вполне реальна. Однако этому препятствуют два обстоятельства: психологический фактор и возможное присут­ствие в навозе токсических веществ, выделяемых организмом. Аналогичные затруднения возникают и при внедрении кормов других видов, например белково-витаминного концентрата, пред­ставляющего собой дрожжи или бактерии, выращенные на отхо­дах нефти или метанола и других продуктов. Все корма этих видов должны пройти токсикологическую и ветеринарно-санитарную оценку и являются объектом исследования ветеринарных токси­кологов.

1.4. РЕГЛАМЕНТЫ ПРИМЕНЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ

ВЕЩЕСТВ И ПРИНЦИПЫ ИХ НОРМИРОВАНИЯ В КОРМАХ

И ПРОДУКТАХ ЖИВОТНОВОДСТВА

Для предотвращения отравления сельскохозяйственных и ди­ких животных, в том числе рыб, птиц, пчел, токсическими веще­ствами, применяемыми для обработки растений, почвы, водоемов и животных, а также с целью профилактики загрязнения продук­тов питания животного происхождения их остатками устанавливани pel плмопты их безопасного использования и максимально до-iivi'iiiMi.if у|ювни (МДУ) содержания в кормах и продуктах пита­нии

МДУ и кормах — предельно допустимое количество химичес­ком» iичпостна в кормах для сельскохозяйственных животных, вы-рнжсимое и мг/кг массы корма, при котором вещество не оказыва­ем три нагельного влияния на организм и не может содержаться в продуктах питания, полученных от животного, в количествах шише признанных допустимыми.

МДУ, выраженный в мг/кг массы корма, соответствует поня-i то р.р.щ — parts per million (частей на миллион), принятому за

р\>(Н'ЖОМ.

МДУ в продуктах питания — максимально допустимый уровень i одержания биологически активного вещества в растительных и «минутных продуктах, выраженный в тех же единицах, что и вели­чина в кормах.

Допустимые уровни содержания токсических веществ в питье-iioii воде, воде рыбохозяйственных водоемов, а также в воздухе ра­бочей зоны определяются показателями ПДК, выраженными в mi/л для воды и в мг/м³ для воздуха. Расшифровывают эти показа-кмш как предельно допустимые концентрации токсических ве­ществ в объектах исследования.

МДУ химических веществ для продуктов питания устанавлива­ют органы здравоохранения на основании комплекса показателей:

исследований хронической токсичности химического соедине­ния в 10—12-месячных опытах не менее чем на двух видах лабора­торных животных, из которых один не является грызуном;

кумулятивных свойств химического соединения;

персистентности вещества во внешней среде;

способности выделяться с молоком и оказывать отрицательное действие на потомство, а также других показателей.

На основании исследования хронической токсичности для животных устанавливают минимальную действующую дозу (мин. ДД) или максимальную недействующую (безвредную) дозу (макс. НД) для животных. Затем с помощью коэффициента запа­са, который колеблется в пределах от 30 до 100 в зависимости от свойств химического соединения, выводят мин. ДД для человека. Для этого величину мин. ДД для животных делят на коэффициент запаса. Например, величина мин. ДД токсического вещества, ус­тановленная экспериментально, составила 5 мг/кг массы живот­ного. Коэффициент запаса для данного соединения равен 50. Тог­да величина мин.ДД этого вещества для человека составит 5 : 50 = 0,1 мг/кг массы. На основании полученного показателя рассчитывают суточную безопасную дозу. Для этого величину мин. ДД (в данном случае 0,1 мг/кг) умножают на среднюю массу человека, которую принято считать равной 50 кг (с учетом массы детей). Таким образом, суточная безопасная доза химического вещества в нашем примере составит 0,1 мг/кг • 50 кг = 5 мг. На осно­вании этого показателя вычисляют величину МДУ токсического вещества для продуктов питания различных видов.

Несколько иначе устанавливают величину толерантности (МДУ) токсических веществ в продуктах питания за рубежом. В основу расчетов также положены хронические опыты на лабора­торных животных. Исследуемое вещество не менее чем в 3 дозах дают с кормом в течение 3 мес или даже 2 лет. На основании ис­следований устанавливают максимально недействующую, или подпороговую, дозу, выраженную в мг/кг корма, а не в мг/кг жи­вой массы животного, как это принято в нашей стране. Этот пока­затель переводят с помощью коэффициента пересчета в мг/кг мас­сы животного. Для белых крыс коэффициент пересчета равен 12,5. Допустим, что в хронических опытах на белых крысах максималь­но недействующая доза установлена равной 10 мг/кг корма. В пе­ресчете на массу животного эта величина будет равна 0,8 мг/кг (10 : 12,5). По этой величине определяют безопасный уровень со­держания токсического вещества для определенного продукта пи­тания, входящего в состав рациона человека — Pd.

Этот показатель вычисляют по формуле

Pd =

Х50 Sa '

где X— максимально недействующая доза (подпороговая) для животных, выра­женная в мг/кг массы; 50 —средняя масса человека, кг; S— фактор безопаснос­ти, который обычно принимают равным 100. Эту цифру выводят из следующих соображений. Максимально возможные колебания чувствительности отдельных индивидуумов в пределах одного вида не превышают величины, равной 10. В этих же пределах колеблется чувствительность различных видов животных в пределах одного класса. Произведение этих двух величин составляет фактор безопасности. При определении величины Pdдля фосфорорганических инсектицидов фактор безопасности иногда берут равным 20, если основным токсикологическим тестом, по которому определяют физиологическое действие токсического вещества, явля­ются начальные признаки угнетения холинэстеразы крови; г— масса продукта, входящего в дневной рацион человека.

Сумма величин Pd— безопасного ежедневного уровня по­ступления токсических веществ с каждым отдельным пищевым продуктом, входящим в состав дневного рациона, составляет ве­личину ADI — acceptle daily intake — безопасный уровень поступ­ления токсического вещества в организм человека в день.

Величины МДУ, или толерантности, токсических веществ в продуктах питания являются официальными, установленными органами здравоохранения на основании величин мин. ДД токси­ческих веществ, фактического уровня содержания остатков в гото­вых продуктах питания и других показателей.

МДУ токсических веществ в кормах для сельскохозяйственных

ж 11 потных устанавливает ветеринарная служба на основании экс­периментов на животных тех видов, для которых выводят этот по-к;патель. Для экспериментального обоснования МДУ должны |)мть проведены исследования острой токсичности ядохимиката для лабораторных и сельскохозяйственных животных, разработан метод определения его остатков в органах и тканях животных, мо­локе, мясе, яйцах, кормах, изучены хроническая токсичность ве­щества, степень его материальной кумуляции при длительном по­ступлении с кормом, выделении с молоком и яйцами.

По результатам экспериментов определяют максимально не­токсическую (подпороговую) (макс. НД) и минимально токсичес­кую (пороговую) дозу (мин. ДД), а также коэффициент матери­альной кумуляции по отношению к животным того вида, для ко­торого нормируются остатки. На основании показателей макс. НД и коэффициента материальной кумуляции можно рассчитать ве­личину МДУ токсического вещества в кормах для сельскохозяй­ственных животных данного вида.

Если при введении с кормом исследуемого вещества в течение 3 мес в дозах, соответствующих макс. НД, официальным методом анализа не удается обнаружить его остатки в органах и тканях жи­вотных, молоке, яйцах в количествах выше тех, которые приняты органами здравоохранения в качестве допустимых, величину МДУ данного химического вещества в кормах для дойного и откормоч­ного скота можно принять равной 1/2 макс. НД. Например, в опытах с карбофосом установлена макс. НД 100 мг/кг корма. При введении пестицида коровам в этой дозе официальным методом не установлено его выделение с молоком и накопление в мышеч­ной ткани. Экспериментально обоснованную величину МДУ кар­бофоса в кормах для откормочного и молочного скота можно при­нять равной 50 мг/кг корма.

В случае, если при введении с кормом токсического вещества обнаруживают его остатки в органах и тканях животного, молоке, яйцах, МДУ в кормах целесообразно определять, исходя из степе­ни материальной кумуляции вещества в тканях, выделения с мо­локом и яйцами. Например, при длительном поступлении с кор­мом гамма-изомера ГХЦГ его обнаруживают в мышцах крупного рогатого скота и овец в количествах, в 25 раз меньших по сравне­нию с его содержанием в корме. Коэффициент материальной ку­муляции мышцы — корм в этом случае составляет 0,04. Органами здравоохранения МДУ гамма-иззомера в мясе установлен равным 0,005 мг/кг.

Для нашего примера ПДК гамма-изомера ГХЦГ для откормоч­ного скота равна

^^=0,125 мг/кг корма.

Выделение ГХЦГ с молоком составляет около 10% от уровня его содержания в корме в пересчете на жидкое молоко. Коэффи­циент выделения корм — молоко равен 0,1- ПДК гамма-изомера ГХЦГ в корме для молочного скота можно вычислить по той же формуле

„„., МДУмолока 0,005 _{А Л}. .

ПДКкорма=—— =— =0,05мг/кг.

Л выдел. 0,1

Аналогичные расчеты можно произвести и для яиц. Коэффи­циент выделения гамма-изомера ГХЦГ с желтком при поступле­нии с кормом достигает 1. Поэтому ПДК гамма-изомера ГХЦГ в кормах для яйценоской птицы следует рекомендовать равной 0,005 мг/кг — величине МДУ гамма-изомера для яиц.

Таким образом, исходным показателем, по которому устанав­ливают ПДК токсических веществ в кормах для сельскохозяй­ственных животных, является их МДУ в мясе, молоке и яйцах.

ПДК токсических веществ в воздухе рабочей зоны и в питьевой воде устанавливают органы здравоохранения на основании комп­лекса токсикологических исследований, в воде рыбохозяйствен-ных водоемов — соответствующие органы Минрыбпрома и Мин-сельхоза России. Однако до настоящего времени нет единых мето­дических подходов к нормированию токсических веществ в воде рыбохозяйственных водоемов.

Ряд авторов (Н. И. Лесликов, 1960, и др.) предлагают в качестве тест-организмов при экспериментальном обосновании ПДК ток­сических веществ в воде рыбохозяйственных водоемов использо­вать дафнии и другие низшие гидробионты, которые служат пи­щей для рыбы. Такой выбор едва ли будет удачным. ПДК токси­ческих веществ устанавливают для рыбы, поэтому правильным было бы и в качестве тест-объекта использовать рыбу.

Схемой проведения опытов должно быть предусмотрено, так же как и в опытах на теплокровных животных, определение в ост­рых и хронических опытах максимально недействующей (неток­сичной), минимально токсичной (пороговой) и смертельной кон­центраций, а также СК₅о при 96-часовом контакте токсического вещества с рыбой. Базисной концентрацией, по которой устанав­ливают ПДК, целесообразно принять максимально недействую­щую концентрацию. При этом обязательно должны быть предус­мотрены исследования по разработке методики определения ток­сического вещества в воде, планктоне, рыбе, изучена динамика i-1'о остатков в воде и рыбе и установлены пути попадания токси­канта в рыбохозяйственный водоем.

ПДК токсических веществ в воде рыбохозяиственных водоемов не может служить критерием оценки санитарного состояния водо­ема, как это имеет место с ПДК или МДУ токсикантов в кормах или продуктах питания. Следовательно, ПДК химических веществ и воде рыбохозяиственных водоемов является лишь исходным по­казателем, на основании которого могут быть установлены регла­менты применения пестицидов и других веществ в зоне водоемов или проведен контроль за работой очистных сооружений про­мышленных предприятий, сбрасывающих сточные воды в реки или моря. Поэтому ПДК в воде рыбохозяиственных водоемов не может быть меньше чувствительности аналитического метода оп­ределения остатков этого вещества в воде.

По показателю ПДК или МДУ химических веществ в кормах и продуктах питания и скорости снижения их остатков в почве, рас­тениях или организме животных устанавливают регламенты (огра­ничения) по применению веществ на растениях или животных. Ос­новным регламентом на растениях служит «время ожидания» — срок (в днях) от момента последней обработки участков (кормовых культур, лугов, пастбищ) до уборки урожая на корм животным или их выгона на обработанное пастбище. Это время соответствует про­должительности исчезновения остатков пестицида до уровня, рав­ного ПДК, установленной для кормов, в днях с момента последней обработки. Например, ПДК пестицида X в кормах для сельскохо­зяйственных животных установлена равной 2 мг/кг. Исчезновение остатков этого пестицида на люцерне до 2 мг/кг происходит в тече­ние 25 дней со дня обработки. Следовательно, «время ожидания» пестицида X на люцерне должно составлять 25 дней.

Для химических средств защиты животных устанавливают «сроки убоя», величина которых соответствует времени (в днях) снижения остатков в органотропном органе животного до МДУ химического вещества, установленного органами здравоохране­ния для мяса.

Особенно жесткие регламенты должны быть установлены в случаях применении пестицидов, антигельминтиков и других ве­теринарных препаратов для дойного крупного рогатого скота и яйценоских птиц. В молоке и яйцах, как правило, не допускается или допускается на очень низком уровне содержание остатков токсических веществ. Поэтому для обработки дойных животных и яйценоской птицы следует применять такие препараты, которые очень быстро разрушаются в организме и не выделяются с моло­ком и яйцами. Если такой возможности нет, преимущество следу­ет отдавать таким препаратам и методам применения, при исполь­зовании которых отмечается наиболее низкое выделение. Однако и для использования этих препаратов должны быть установлены жесткие регламенты.
1.5. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ

В ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ, ТКАНЯХ ЖИВОТНЫХ

И ПРОДУКТАХ ЖИВОТНОВОДСТВА

Химико-токсикологический анализ в ветеринарной токсиколо­гии имеет решающее значение. При установлении диагноза на от­равление, изучении миграции токсических веществ в объектах ок­ружающей среды и организме животных, проведении ветеринарно-санитарной оценки кормов и продуктов питания используют, как правило, только химико-аналитические методы исследования. Особенно их значение возросло за последние годы, когда стали уделять особое внимание охране окружающей среды, в системе которой большое место занимает мониторинг — накопление фак­тических данных по уровню загрязнения объектов окружающей среды токсическими веществами различного происхождения.

По данным Гунтера (1977), чувствительность аналитических методов определения пестицидов за 25 лет (1941 — 1965) выросла в десятки тысяч раз. Если в 1941 г. пределы обнаружения большин­ства токсических веществ составляли 10мг/кг, то в 1965 г.— 0,1 мкг/кг.

В настоящее время для анализа остатков химических веществ в объектах окружающей среды и биологическом материале исполь­зуют современные физико-химические методы, такие, как тонко­слойную и газожидкостную хроматографию, ультрафиолетовую, инфракрасную и атомно-абсорбционную спектрометрию, масс-спектрометрию и хромас-спектрометрию.

Современные методы исследования должны быть по возмож­ности специфичными, т. е. позволяли бы открывать искомое ве­щество в присутствии других аналогичных соединений, быть дос­таточно чувствительными и позволяли бы определять миллион­ные доли вещества в 1 кг субстрата. Особенно это важно для мето­дов, предназначенных для санитарной оценки кормов и продуктов животноводства, а также для изучения динамики остатков пести­цидов в воде, растениях и организме животных.

Степень определения химических токсикантов должна состав­лять не менее 60 % от количества стандартного вещества, внесен­ного в пробу. Методы должны быть удовлетворительно точными (не менее ± 20 %) и хорошо воспроизводимыми.

Методы определения токсических веществ в патологическом материале, объектах окружающей среды, кормах и продуктах пи­тания животного происхождения включают в себя выделение ток­сического вещества из пробы. Выделение яда из пробы может быть проведено путем мокрого или сухого озоления, отгонки с во­дяным паром или же экстракцией одним или несколькими орга­ническими растворителями.

Сухое озоление проводят под действием высокой температуры (до 500 °С) в муфельной печи. Этот метод в основном используют для выделения металлов.

Мокрое озоление применяют значительно чаще и проводят при помощи концентрированных неорганических кислот, чаще всего смеси азотной, серной кислот и окислителей.

Выделение токсических веществ методом отгонки с водяным паром или дистилляции используют для легколетучих химичес­ких соединений. Сущность метода заключается в том, что пробу тщательно измельчают до кашицеобразного состояния или же разрушают неорганической кислотой, разбавляют водой, а за­тем воду перегоняют, нагревая колбу или подавая в нее пар от парообразователя. Токсические вещества переводятся в дистил­лят.

Чаще других в ветеринарной практике выделяют токсические вещества путем их экстракции из пробы органическими раствори­телями. Для этого пробу тщательно измельчают, помещают в кол­бу, а затем заливают одним или несколькими органическими ра­створителями. Объем органического растворителя должен быть не менее чем в 2 раза больше массы или объема пробы. Экстракцию токсиканта проводят путем выдерживания пробы с органическим растворителем в течение 20—24 ч, перемешивания на шюттель-ап-парате в течение 1—2 ч или смешивания в течение нескольких ми-пут при большой скорости вращения перемешивающего устрой­ства (ультратораксы, омнимиксары и др.). Последний способ предпочтителен, так как при этом образуется гомогенная масса, в которой создается наиболее тесный контакт органического ра­створителя с субстратом, а следовательно, наиболее полно извле­каются токсические вещества, содержащиеся в пробе. Для этой цели также используют аппарат Соксклета, в котором токсическое вещество экстрагируется при многократном промывании субстра­та кипящим органическим растворителем. Аппарат Соксклета обеспечивает более полное извлечение токсиканта из пробы по сравнению с другими методами.

При любом способе выделения токсического вещества в экст­ракт переходит значительное количество примесей, мешающих определению: жиры, пигменты, воск, белки, соли и др. Для осво­бождения экстракта от этих веществ используют различные спо­собы очистки: путем омыления, вымораживания, осаждения, пе­рераспределения из одного органического растворителя в другой с помощью специальных колонок и др. Последние зависят от вида анализируемого соединения и субстрата, в котором он нахо­дится.

Для того чтобы повысить чувствительность метода анализа, эк­стракты концентрируют до небольшого объема, достаточного для проведения исследований данным методом. Обычно конечные объемы экстрактов составляют 0,5—5 мл. Для концентрирования используют специальные аппараты Кудерна—Данича, вакуум-ротационные испарители. Концентрирование также можно прово­дить в токе воздуха или азота. В практических условиях наиболее приемлемым способом является концентрирование в токе воздуха. Для этого экстракт заливают в фарфоровую выпарительную чаш­ку, ставят ее под шторку вытяжного шкафа и включают тягу. При определении высоколетучих веществ при концентрировании воз­можны значительные потери яда, поэтому при этой операции не­обходимо выполнять следующие требования: не концентрировать конечные экстракты при повышенной (выше 40 °С) температуре, не упаривать досуха очищенные экстракты.

Индикацию токсичных веществ проводят следующими основ­ными методами.