Мікроба екз. 1. Медична мікробіологія та предмет її вивчення
![]()
|
1. Медична мікробіологія та предмет її вивчення.Мікробіологія – комплекс біологічних наук про найдрібніші живі істоти або мікроорганізми.Мікроорганізми – збірна назва найменших (мікроскопічних) організмів клітинної або неклітинної організації, розміри яких не перевищують 0,1 мм.Основна мета мікробіології - вивчення морфології, фізіології, генетики і екології мікроорганізмів Характерні типові ознаки мікроорганізмів: Надзвичайно малі розміри, порівняно проста організація, висока швидкість розмноження, виисока розповсюдженість, всока пристосованість та пластичність, унікальна біохімічна активність. Напрямки мікробіології: Загальна, промислова (технічна), медична, ветеринарна, фармацевтична, санітарна, сільськогосподарська. Медична мікробіологія – вивчає хвороботворні (патогенні) і умовно-патогенні для людини мікроорганізми і розробляє методи мікробіологічної діагностики, специфічної профілактики і етіотропного лікування викликаних ними інфекційних захворювань Напрямки медичної мікробіології: Бактеріологія (наука про закономірності будов, фізіології і біологічні властивості патогенних і сингенних для людини бактерій), вірусологія, мікологія, протозоологія. Розділи медичної мікробіологіїІнфекційна мікробіологія – вивчає біологічні властивості збудників інфекційних захворювань людини, методи мікробіологічної діагностики, профілактики і лікування епідемічних захворювань Клінічна мікробіологія – досліджує мікробіологічні аспекти етіології, патогенезу, і імунології неепідемічних мікробних захворювань та розробляє методи їх мікробіологічної діагностики. Імунологія – розглядає закономірності специфічного і неспецифічного захисту організму людини у відповідь на дію мікроорганізмів, розробляє методи діагностики, терапії і профілактику інфекційних захворювань на підставі імунологічних реакцій 2. Задачі медичної мікробіології та вірусології у вивченні збудників інфекційних захворювань, вдосконаленніметодівлабораторноїдіагностики,специфічноїтерапіїтапрофілактики Завдання медичної мікробіології:Вивчення будови, фізіології, генетики, екології мікроорганізмів які потенційно небезпечні для здоров’я людини Виявлення нових хвороботворних мікроорганізмів і вивчення їх біологічних властивостей Розробка методів ранньої мікробіологічної діагностики і вдосконалення існуючих або класичних методів діагностики мікробних захворювань Вивчення патогенних властивостей хвороботворних мікроорганізмів і їх роль у патогенезі (розвитку) інфекційних захворювань Вивчення закономірностей спільного існування мікроорганізмів в навколишньому середовищі Вивчення механізму впливу патогенних мікроорганізмів на імунну систему організму, особливості імунної відповіді людини на певні хвороботворні мікроорганізми, можливості застосування імунних реакцій для діагностики захворювань Пошук нових високоефективних хімічних протимікробних речовин Вдосконалення існуючих методів специфічної профілактики і лікування мікробних захворювань Основу мікробіологічної діагностики інфекційних захворювань складають мікроскопічні, мікробіологічні,біологічні, серологічні та алергологічні методи. Мікроскопічні методи - включають приготування мазків і препаратів для микроскопирования. У більшості випадків результати мікроскопічних досліджень носять орієнтуючий характер (наприклад, визначають ставлення збудників до фарбування), так як багато мікроорганізмів позбавлені морфологічних і тинкторіальних особливостей. Тим не менш мікроскопією матеріалу можна визначити деякі морфологічні ознаки збудників (наявність ядер, джгутиків, внутрішньоклітинних включень і т.д.), а також встановити факт наявності або відсутності мікроорганізмів в надісланих зразках. Мікробіологічні методи - «золотий стандарт» мікробіологічної діагностики, так як результати мікробіологічних досліджень дозволяють точно встановити факт наявності збудника в досліджуваному матеріалі. Ідентифікацію чистих культур (до виду мікроорганізму) проводять з урахуванням морфологічних, тинкторіальних, культуральних, біохімічних, токсигенних і антигеннихвластивостей мікроорганізму . Більшість досліджень включає визначення чутливості до антимікробних препаратів у виділеного збудника. Для епідеміологічної оцінки ролі мікроорганізму проводять внутрішньовидову ідентифікацію визначенням фаговаров, біовару, резістентваров і т.д. Біологічні методи - спрямовані на визначення наявності токсинів збудника в досліджуваному матеріалі і на виявлення збудника (особливо при незначному вихідному вмісті в досліджуваному зразку). Методи включають зараження лабораторних тварин досліджуваним матеріалом з наступним виділенням чистої культури патогена, або встановленням факту присутності мікробного токсину та його природи.Моделювання експериментальних інфекцій у чутливих тварин - важливий інструмент вивченняпатогенезу захворювання і характеру взаємодій всередині системи мікроорганізм-макроорганізм. Для проведення біологічних проб використовують тільки здорових тварин певних маси тіла і віку. Інфекційний матеріал вводять всередину, в дихальні шляхи, внутрішньочеревно, внутрішньов енно, внутрішньом'язово, внутрішньошкірно і підшкірно, в передню камеру ока, через трепанаціонное отвір черепа, субокціпітально (у більшу цистерну головного мозку). У тварин прижиттєво забирають кров, ексудат з очеревини, після загибелі - кров, шматочки різних органон, СМЖ, ексудат з різних порожнин. Серологічні методи - виявлення специфічних АТ і АГ збудника - важливий інструмент у діагностиці інфекційних захворювань. Особливу цінність вони мають у тих випадках, коли виділити збудник не представляється можливості. При цьому необхідно виявити підвищення титрів АТ, у зв'язку з чим досліджують парні зразки сироватки, взяті в інтервалі 10-20 діб (іноді цей інтервал може бути більш тривалим). АТ зазвичай з'являються в крові на 1-2-й тиждень захворювання і циркулюють в організмі відносно довго, що дозволяє використовувати їх виявлення для ретроспективних епідеміологічних досліджень. Визначення класів lg чітко характеризує етапи інфекційного процесу, а також може бути непрямим прогностичним критерієм. Особливе значення мають методи виявлення мікробних АГ. У значущих кількостях вони з'являються вже на самих ранніх термінах, що робить їх ідентифікацію важливим інструментом експрес-діагностики інфекційних захворювань, а кількісне їх визначення в динаміці інфекційного процесу служить критерієм ефективності проведеної антимікробної терапії. Алергологічні методи - АГ багатьох збудників володіють сенсибілізірующим дією, що використовують для діагностики інфекційних захворювань, а також при проведенні епідеміологічних досліджень. Найбільшого поширення знайшли шкірно-алергічні проби, які включають внутрішньошкірне введення АГ (алергену) з розвитком реакції ГЗТ. Шкірні проби знайшли застосування в діаностіке таких захворювань як сап, меліодіоз, бруцельоз. Найбільш відома проба Манту для діагностики туберкульозу і для оцінки несприйнятливості організму до збудника. Прості та складні методи забарвлення. Мікроскопія нативних і забарвлених препаратівЗабарвлення мікроорганізмів - один з широко вживаних методів мікробіологічноїтехніки, що полягає в забарвленні фіксованих кліток мікроорганізмів спеціальними фарбниками. Спочатку в краплю води, що знаходиться на наочному або покривному склі, наносять петлею клітки мікроорганізмів. Після висушування суспензії кліток препарат фіксують такими, що спеціальними фіксують рідинами. Для з'ясування морфології кліток їх забарвлюють спиртними розчинами основних (метиленовий синій, генциановий фіолетовий, фуксин) або кислих (еритрозин, еозин) фарбників. Існують спеціальні методи забарвлення спор або джгутиків у бактерій, а також слизистих капсул у деяких мікроорганізмів. Дуже поширено забарвлення по Граму, що має діагностичне значення (див. Грамаметод). Кокові і спороносні форми бактерій, а також дріжджів — грамположітельни і забарвлюються в синій колір, багато неспороносних бактерій — грамотріцательни і забарвлюються в червоний колір. Деякі фарбники або хімічні реактиви застосовують для мікроскопічного хімічного аналізу, тобто виявлення в клітках певних органічних речовин. Так, що містяться в клітках ліпідизабарвлюються осмієвою кислотою в чорний, а суданом в червоний колір; метахроматін випадає у вакуолях у вигляді червоних зерен при забарвленні нейтральним червоним; розчин Люголя забарвлює крохмаль в коричневий, а гранулезу в синій колір. Кислототривкі бактерії (наприклад, мікобактерії, що зокрема викликають туберкульоз у людини і тварин, а також збудник прокази) після забарвлення їх фуксином в червоний колір не обезбарвлюються розчином сірчаної кислоти. Вельми поширене вітальне, тобто прижиттєвефарбуваннянефіксованих кліток мікроорганізмів. Вживання флюоресцентних фарбників (наприклад, акридінового помаранчевого) у поєднанні з люмінесцентною мікроскопією дозволяє розрізняти живі і мертві клітини мікроорганізмів: перші забарвлюються в зелений, другі — в червоний колір. Широке поширення набули флюоресцентні фарбники, сполучені з сироваткою, що містить антитіла проти мікроба певного вигляду. При люмінесцентній мікроскопії свіченням володіють лише клітки цього вигляду. Таким чином можна без посівів на живильному середовищі швидко встановити вигляд хвороботворного мікроба, що міститься в кишечнику, крові або мокроті хворого, а також види мікроорганізмів, присутніх в грунті.
Етапи виготовлення зафарбованого препарату: Виготовлення мазка, висушування, фіксування (тричі в полумї газового пальника), фарбування, промивання і висушування.
|