ответы на физиологию. 1. Современные представления о строении и функции мембран
 Скачать 0.69 Mb.
|
|
127.Лейкоциты (белые кровяные тельца) представляют собой образования различной формы и величины. По строению лейкоциты делятся на две группы: зернистые (гранулоциты) и незернистые (агранулоциты). К гранулоцитам относятся нейтрофилы, эозинофилы и базофилы, к агранулоцитам — лимфоциты и моноциты. В норме количество лейкоцитов у взрослых людей колеблется от 4,5 до 9 тыс. в 1 мм3, или 4,5—9•10в 9степени/л. Увеличение числа лейкоцитов за пределы нормы называется лейкоцитозом, уменьшение — лейкопениеи. Физиологические лейкоцитозы. Лейкопении Различают следующие виды физиологических лейкоцитозов. Пищевой лейкоцитоз возникает после приема пищи. При этом число лейкоцитов увеличивается незначительно (в среднем на 1—3 тыс. в I мкл) и редко выходит за границу верхней физиологической нормы. При пищевом лейкоцитозе большое количество лейкоцитов скапливается в подслизистой основе тонкой кишки. Здесь они осуществляют защитную функцию (препятствуют попаданию чужеродных агентов в кровь и лимфу). Пищевой лейкоцитоз носит перераспределительный характер и обеспечивается поступлением лейкоцитов в циркуляцию из депо крови. Миогенный лейкоцитоз наблюдается после выполнения тяжелой мышечной работы. Число лейкоцитов при этом может возрастать в 3—5 раз. Огромное количество лейкоцитов при физической нагрузке скапливается в мышцах. Миогенный лейкоцитоз носит как перераспределительный, так и истинный характер, так как при нем отмечается усиление костномозгового кроветворения. Эмоциональный лейкоцитоз, как и лейкоиитоз при болевом раздражении, носит перераспределительный характер и редко достигает высоких цифр. Овуляторныи лейкоцитоз характеризуется незначительным повышением числа лейкоцитов при одновременном снижении количества эозинофилов. При беременности большое количество лейкоцитов скапливается в подслизистой основе матки. Этот лейкоцитоз в основном носит местный характер. Его физиологический смысл состоит не только в предупреждении попадания инфекции в организм роженицы, но и в стимулировании сократительной функции матки. Во время родов число лейкоцитов увеличивается за счет повышения количества нейтрофилов. Содержание белых кровяных телец уже в начале родового акта может достигать более 30 000 в 1 мкл. Послеродовый лейкоцитоз сохраняется на протяжении 3—5 дней и связан с поступлением лейкоцитов из депо крови и костномозгового резерва. Лейкопении встречаются только при патологических состояниях. Особенно тяжелая лейкопения может наблюдаться при поражении костного мозга — острых лейкозах и лучевой болезни. Лейкоцитарная формула В норме и патологии учитывается не только количество леикоцитов, но и их процентное соотношение, получившее наименование леикоцитарнои формулы, или лейко граммы. В крови здорового человека могут встречаться зрелые и юные лейкоцитов, однако в норме обнаружить их удается лишь у самой многочисленной группы - нейтрофилов. К ним относятся юные и палочкоядерные нейтоойилы. Увеличение количества юных и палочкоядерных неитрофилов свительствует об омоложении крови и носит название сдвига лейкоцитарной формулы влево; снижение количества этих клеток говорит о старени крови и называется сдвигом лейкоцитарной формулы вправо. Лейкоцитарная формула здорового человека Нейтрофилы: метамиелоциты 0-1%,палочкоядерные 1-4,сегментоядерные 50-65, Агранулоциты: базофилы 0-1, эозинофилы 1-4 лимфоциты 25-40 Характеристика отдельных видов лейкоцитов Нейтрофилы Нейтрофилы содержат богатейший набор биологически активных субстанций, в том числе способных убивать бактерии, вирусы и раковые клетки. Нейтрофилы подвижны, легко проникают в экстравазальное пространство ткани, высокоактивны. При стимуляции нейтрофилы быстро реализуют свой цитолитический материал по отношению к вирусинфииированным и опухолевым клеткам и могут запускать у них генетические программы апоптоза. Нейтрофилы осуществляют цитотоксический эффект (киллинг) в отношении отдельных чужеродных клеток. Обладая фагоцитарной функцией, нейтрофилы поглощают не только бактерии, но и продукты повреждения тканей. Базофилы. Функция базофилов и тучных клеток обусловлена наличием в них ряда биологически активных веществ. К ним в первую очередь принадлежит гистамин, расширяющий кровеносные сосуды. В базофилах содержатся противосвертываюш.ие вещества — гепарин, хондроитинсульфаты А и С, дерматансульфат и гепарансульфат. Эозинофилы. Эозинофилы содержат большое число гранул, в которых находятся ферменты и многие биологически активные соединения. Основным компонентом гранул является главный щелочной белок, имеющий мол. массу около 1000 и играющий важную роль в защите от паразитбв. Эозинофилы обладают фагоцитарной активностью. Особенно интенсивно они фагоцитируют кокки. В тканях эозинофилы скапливаются преимущественно в тех органах, где содержится гистамин — в слизистой оболочке и подслизистой основе желудка и тонки кишки, в легких. Здесь их число превышает содержание в крови в 200—300 раз. Эозинофилы захватывают гистамин и разрушают его с помощью фермента гистаминазы. Велика роль эозинофилов, осуществляющих цитотоксический эффект, в борьбе с гельминтами, их яйцами и личинками. Содержание эозинофилов резко возрастает при аллергических заболеваниях, когда происходит дегрануляция базофилов и выделение анафилактнческого хемотаксического фактора, который привлекает эозинофилы. При этом эозинофилы выполняют роль «чистильщиков», фагоцитируя и инактивируя продукты, выделяемые базофилами. Моноциты и макрофаги выполняют многообразные функции: • являются активными фагоцитами, распознают Аг и переводят его в так называемую иммуногенную форму (выполняют функции антигенпрезентирующих клеток), • играют существенную роль в противоинфекционном и противораковом иимунитете; • участвуют в метаболизме липидов и железа; • синтезируют отдельные компоненты системы комплемента и факторы, принимающие участие в сосудисто-тромбоцитарном гемостазе, процессе свертывания крови и растворении кровяного сгустка. Лимфоциты, как и другие виды лейкоцитов, образуются в костном мозге, а затем поступают в циркуляцию. Здесь одна популяция лимфоцитов направляется в вилочковую железу, где в результате контакта со стромальными элементами и гуморальными факторами преимущественно полипептид ной природы превращаются в так называемые Т-лимфоциты. У челбвека окончательное формирование В-лимфоцитов происходит в костном мозге. Популяция Т-лимфоцитов гетерогенна и представлена следующими классами клеток: • Т-киллеры, осуществляющие лизис клеток-мишеней, к которым можно отнести возбудителей инфекционных болезней, грибы, микобактерии, опухолевые клетки; • Т-хелперы, или помощники иммунитета. Т-хелперы разделяются на 2 клона (Txl и Тх2). Txl являются регуляторами клеточного, а Тх2 — гуморального иммунитета. Предположение о том, что среди Т-лимфоцитов имеется популяция супрессоров, не нашло экспериментального подтверждения. Большинство В-лимфоцитов в ответ на действие чужеродных антигенов переходят в плазмоциты и продуцируют антитела или иммуноглобулины, т.е. являются антителопродуцентами. Однако среди В-лимфоцитов также различают В-киллеры и В-хелперы. Существует группа клеток, получивших наименование ни Т-, ни В-лимфоциты. К ним относятся так называемые 0-лимфоциты, являющиеся в основном предшественниками Т- и В-клеток и составляющие их резерв. К 0-лимфоцитам также относят клетки, носящие название натуральные (природные) киллеры, или НК-лимфоциты. Двойные клетки несут на своей поверхности маркеры и Т-, и В-лимфоцитов и способны заменять как те, так и другие. Методика подсчета в камере Принцип метода подсчета лейкоцитов аналогичен принципу подсчета эритроцитов, суть его состоит в точном отмеривании крови и разведении ее в определенном объеме жидкости с последующим подсчетом клеточных элементов в счетной камере и пересчете полученного результата на 1 мл крови. Оборудование и реактивы: 1. Смесители или пробирки для подсчета лейкоцитов. 2. 3 %-ный раствор уксусной кислоты, к которому прибавлено несколько капель метил-виолета или метиленовой синьки. 3. Счетная камера. 4. Микроскоп. Смеситель для лейкоцитов отличается от смесителя для эритроцитов тем, что имеет более широкий просвет капилляра и меньший по величине резервуар. На смесителе нанесены 3 метки: 0,5, 1,0 и 11. Это позволяет развести кровь в 10 либо в 20 раз (чаще разводят в 20 раз). Ход исследования.При взятии крови для подсчета лейкоцитов предварительно удаляют ватным тампоном остатки крови с кожи и, слегка сдавливая палец, выпускают свежую каплю крови. При работе со смесителями кровь набирают до метки 0,5, затем разводят 3 %-ным раствором уксусной кислоты до метки 11. Энергично встряхивают в течение 3 мин, после чего сливают 1-2 капли и заполняют счетную камеру. При работе с пробирками для подсчета лейкоцитов наливают 0,4 мл 3 %-ного раствора уксусной кислоты и в нее выпускают 0,02 мл крови, отмеренной пипеткой от гемометра Сали. Тщательно встряхивают пробирки, затем в жидкость опускают пипетку и, набрав содержимое, заполняют счетную камеру. Так как лейкоцитов гораздо меньше, чем эритроцитов, то для большей точности подсчет производят в 100 больших (неразграфленных) квадратах. Обычно в одном большом квадрате находится 1-2 лейкоцита. Число лейкоцитов в 1 мкл крови рассчитывается аналогично расчету числа эритроцитов по формуле: X = (А х 4000 х В)/Б, где X — количество лейкоцитов в 1 мкл крови; А — количество лейкоцитов, сосчитанных в 1600 малых квадратах; Б — количество сосчитанных малых квадратов (1600); 4000 — величина, умножая на которую мы получаем количество клеток в 1 мкл. 128.Сосудисто – тромбоцитарный гемостаз. Тромбоциты.особенности строения , количество, функции. Сосудисто-тромбоцитарный гемостаз сводится к образованию тромбоцитарной пробки, или тромбоцитарного тромба. Условно его разделяют на три стадии: 1) временный (первичный) спазм сосудов; 2) образование тромбоцитарной пробки за счет адгезии (прикрепления к поврежденной поверхности) и агрегации (склеивания между собой) тромбоцитов; 3) ретракция (сокращение и уплотнение) тромбоцитарной пробки. Сразу после травмы наблюдается первичный спазм кровеносных сосудов, благодаря чему кровотечение в первые секунды может не возникнуть или носит ограниченный характер. Первичный спазм сосудов обусловлен выбросом в кровь в ответ на болевое раздражение адреналина и норадреналина и длится не более 10—15 с. В дальнейшем наступает вторичный спазм, обусловленный активацией тромбоцитов и отдачей в кровь сосудосуживающих агентов — серотонина, ТхА2, адреналина и др. Повреждение сосудов сопровождается немедленной активацией тромбоцитов, что обусловлено появлением высоких концентраций АДФ (из разрушающихся эритроцитов и травмированных сосудов), а также с обнажением субэндотелия, коллагеновых и фибриллярных структур. В результате «раскрываются» вторичные рецепторы и создаются оптимальные условия для адгезии, агрегации и образования тромбоцитарной пробки. Адгезия обусловлена наличием в плазме и тромбоцитах особого белка — фактора Виллебранда (FW), имеющего три активных центра, два из которых связываются с экспрессированными рецепторами тромбоцитов, а один — с рецепторами субэндотелия и коллагеновых волокон. Таким образом, тромбоцит с помощью FW оказывается «подвешенным» к травмированной поверхности сосуда. Одновременно с адгезией наступает агрегация тромбоцитов, осуществляемая с помощью фибриногена — белка, содержащегося в плазме и тромбоцитах и образующего между ними связующие мостики, что и приводит к появлению тромбоцитарной пробки. Важную роль в адгезии и агрегации играет комплекс белков и полипептидов, получивших наименование «интегрины». Последние служат связующими агентами между отдельными тромбоцитами (при склеивании друг с другом) и структурами поврежденного сосуда. Агрегация тромбоцитов может носить обратимый характер (вслед за агрегацией наступает дезагрегация, т. е. распад агрегатов), что зависит от недостаточной дозы агрегирующего (активирующего) агента. Из тромбоцитов, подвергшихся адгезии и агрегации, усиленно секретируются гранулы и содержащиеся в них биологически активные соединения — АДФ, адреналин, норадреналин, фактор Р4, ТхА2 и др. (этот процесс получил название реакции высвобождения), что приводит к вторичной, необратимой агрегации. Одновременно с высвобождением тромбоцитарных факторов происходит образованием тромбина, резко усиливающего агрегацию и приводящего к появлению сети фибрина, в которой застревают отдельные эритроциты и лейкоциты. Благодаря контрактильному белку тромбостенину тромбоциты подтягиваются друг к другу, тромбоцитарная пробка сокращается и уплотняется, т. е. наступает ее ретракция. В норме остановка кровотечения из мелких сосудов занимает 2—4 мин. Важную роль для сосудисто-тромбоцитарного гемостаза играют производные арахидоновой кислоты — простагландин I2 (PgI2), или простациклин, и ТхА2. При сохранении целости эндотелиального покрова действие Pgl преобладает над ТхА2, благодаря чему в сосудистом русле не наблюдается адгезии и агрегации тромбоцитов. При повреждении эндотелия в месте травмы синтез Pgl не происходит, и тогда проявляется влияние ТхА2, приводящее к образованию тромбоцитарной пробки. Функции тромбоцитов: кровяные пластинки препятствуют внезапной потере крови ,мгновенно закупоривая место повреждения кровеносных сосудов вначале временной, а затем постоянной тромбоцитарной пробкой. Установлена также антипаразитарная активность тромбоцитов. При инфицировании организма человека шистосомами , трематодами они оказывают на них цитотоксический эффект и поражают их. Структура тромбоцитов:( 150-300х109/л.) красные кровяные пластинки, не имеющие ядра, не делятся.У них выделяют несколько зон-периферическую, зона золя- геля, внутриклеточных органелл. На наружной поверхности периферической зоны располагается покров толщиной до 50 нм, содержащий плазматические факторы свертывания крови, энзимы, рецепторы ,необходимые для активации тромбоцитов, их адгезии(приклеиванию к субэндотелию) и агрегации(приклеиванию др к др.). Периферическая зона . Мембрана содержит "мембранный фосфолипидный фактор 3"-"фосфолипидную матрицу", формирующую активные коагуляционные комплексы с плазменными факторами свертывания крови. Мембрана богата арахидоновой кислотой, из которой фосфолипаза А2 образует свободную арахидоновую кислоту для синтеза простагландинов. В липидный бислой мембраны тромбоцита "встроены" гликопротеины 1(субъединицы 1а,1b, 1c), 2( субъединицы 2a, 2b), 3(субъединицы 3a,3b), 4,5,6, которые обусловливают адгезивные и агрегационные функции тромбоцитов. Зона золя-геля гиалоплазмы прилегает к нижнему краю периферической зоны тромбоцита и отделяет зону внутриклеточных органелл.В этой зоне вдоль края клетки располагается сократительный аппарат тромбоцита-краевое кольцо микротрубочек, контактирующее с микрофиламентом. Зона плотных и альфа-гранул 1-го и 2-го типа .Плотные гранулы содержат АДФ, АТФ, кальций , серотонин , норадреналин и адреналин. Кальций участвует в регуляции адгезии, сокращения, секреции тромбоцитов, активации его фосфолипаз и продукции в мембране тромбоцитов простагландинов, необходимых для образования тромбоксана А2.Альфа -гранулы 1-го типа содержат и секретируют антигепариновый фактор тромбоцитов 4, тромбоцитарный ростовой фактор, тромбоспондин. Альфа -гранулы 2-го типа содержат лизосомальные энзимы(кислые гидролазы). После адгезии или агрегации большая часть гранул в тромбоците исчезает. Данный феномен получил название "реакции освобождения гранул". Он имеет место поле активации тромбоцитов тромбоксаном А2, АДФ, адреналином, тромбином, протеолитическими энзимами , бактериальными эндотоксинами, коллагеном. 129.Коагуляционный гемостаз, пути его активации и основные этапы. Тромбоцитарная реакция — реакция тромбоцитов на нарушение целостности сосудистой стенки, формируется параллельно реакции самих сосудов на повреждение — их сокращение в месте повреждения, вызывающая шунтирование крови выше поврежденного участка сосуда. Сосудисто-тромбоцитарная реакцияна повреждение сосудистой стенки первой останавливает кровотечение из микрососуда и поэтому называется Первичным Гемостазом. Формирование и закрепление тромбов с помощью плазменных факторов свертывания — Вторичный коагуляционный гемостаз. Первичный гемостаз начинается с приклеивания тромбоцитов рецепторами гликопротеинов I, II к фактору Виллебранда, фибронектину, коллагену субэндотелия поврежденных тканей. Далее агрегация тромбоцитов усиливается высвобождением АДФ из плотных гранул тромбоцитов, образованием Тромбоксана А2 в их мембране, взаимодействием мембранных гликопротеинов IIb, IIIa с фибриногеном, а V — с тромбином. Основную функцию агрегации тромбоцитов обеспечивают тромбоксан А2 и тромбин. Образование тромбоксана А2 стимулирует коллаген и фактор Виллебранда через фосфолипазу А2. Сильный агрегационный эффект оказывает тромбин, который образуется на мембране тромбоцитов при участии фактора V и гликопротеина V. Адгезированные тромбоциты являются основой для агрегации других тромбоцитов. Тромбоцитарный тромб уплотняется и сокращается. Его формирование усиливает фибрин вследствие активации плазменной системы свертывания крови. Останавливает окончательно кровотечение из поврежденных сосудов образование фибриновых тромбов, закрывающих их просвет. Повреждение тканей, эндотелия сосудов вызывает каскадную реакцию активации этих ферментов, которая приводит к образованию фибриновых нитей, формирующих сеть тромба. Начало каскадной реакции связано с контактом неактивных форм факторов свертывания с поврежденными тканями, окружающими сосуды. Существует 2 пути. Внешний путь. Мембраны поврежденных клеток тканей выделяют в плазму крови тканевый фактор — трансмембранный белок. Тканевый фактор с активированным им фактором свертывания крови VII активируют фактор Х. Фактор Ха соединяется с тканевыми фосфолипидами и фактором V. Образовавшийся комплекс превращает часть тромбина в протромбин. Тромбин начинает действовать как протеолитический фермент на фибриноген и активировать фактор V. Внутренний путь. Разрушение тромбоцитов и эритроцитов активирует фактор XII. Фактор XIIа превращает XI в Xiа, который формирует комплекс ф.IXa+VII+тромбоцитарный фосфолипид+ионы кальция. Протромбин синтезируется в печени. Для его образования необходим вит.К. Тромбин — протеолитический фермент, отщепляет от молекулы фибриногена 4 пептида мономера. Каждый из которых имеет 4 свободные связи. Соединяясь друг с другом, они формируют сеть волокон фибрина. Под влиянием фибринстабилизирующего фактора в фибрине образуются дополнительные дисульфидные связи, и сеть фибриовых волокон становится прочной. В этой сети задерживаются тромбоциты, лейкоциты, эритроциты, белки плазмы, формируя Фибриновый тромб. После образования сгустка через 30-60 минут начинается его сокращение, происходящее за счет сокращения нитей актина и миозина тромбоцитов, а также нитей фибрина. В результате фибриновый сгусток сжимается в плотную массу, тромб уплотняется и становится непроницаемым для клеток и плазмы крови. Продолжению свертывания крови в кровеносном русле препятствует противосвертывающая система крови. |