ШПОРА Микробиология. Шпаргалка на экзамен. 24 Классификация антител. Принцип деления антител на классы
 Скачать 1.48 Mb.
|
|
22 Характеристика химического состава, происхождения и роли ингибиторов. Ин-гибиторы относят к неспецифическим гумо-ральным факторам противовирусной резис-тенстности. Это термостабильные сыворо-точные ингибиторы, которые являются гли-копротеинами. Выделяют: -ингибиторы – 75, -ингибиторы – 65, -ингибиторы – 100. Существует гипотеза, что термостбиль-ные ингибиторы это оторвавшиеся клеточные рецепторы, которые соединяются с каким-то кофактором (кофактор + ингибитор). | 23 Роль антител различных классов в резистентности против вирусов. Антитела являются специфическими гуморальными факторами противовирусной резистентности. Они действуют на вирус при нахождении его вне клетки (у места входных ворот и в крови – вирусемия). Главную роль в противовирусной резистентности среди антител играет секреторный Ig класса А (sIgA). sIgA находятся на всех слизистых оболочках и препятствуют адгезии вируса. Кроме sIgA в противовирусной резистентности принимают учатие IgG и IgM. | ||
| 4 Не обязательные компоненты стр-ры бактер кл:жгутики,пили,капсула, включ, плазмиды.Жгутики обеспечивают подвижность бактерий.Подвижность определяют в живом состоянии в тёмном поле зрения,но самих жгутиков не видно. Сост.из Б флагеллина .Жгутики можно увидеть в эл микроскопе,при спец окрашивании (серебрение, свечение) ..Пили-тончайшие нити,видны в эл.микроскопе. Функции пилей:адгезия. Конъюгативные пили(их 1-4)передают плазмиды. Капсула это ослизнённый поверхностный слой из полисахаридов и гликополисахаридов кл стенки.Виды капсул: микрокапсула и обычная капсула.К капсульным бактериям относят:.клебсиела-озена имеет капсулу при любых обстоятельствах ,пневмококк и возбудитель чумы образуют капсулу только при попадании в живой орг-м Капсулу можно обнаружить при окраске по Бури-Гинсу .Напр при иследовании мазка из чистой культуры клебсиелы-озена, окрашенного поБури-Гинсу в поле зрения на коричневом фоне будут видны мелкие б/ц образования внутри которых находятся не> коккобактерии.Капсула по этому методу не окрашивается.Также капсулу можно обнаружить при использовании феномена набухания и иммунолюминесцентного метода (будет свечение).Ф-ции капсулы:защита от фагоцитоза и адгезия.Включения(волютин) встречается у дифтерийной палочки. Зёрнышки волютина это поли и метафосфаты.Они выполняют трофическую функцию. Плазмиды-дополнительные кольцевые ДНК, которые несут дополнительную нежизненноважную инф.Напр.R-плазмида отвечает за лек.зависимость.Плазмида может существовать автономно или интегрировано.Может передаваться от одной кл к др через конъюгативные пили- это трансмиссивные плазмиды,они имеют трансген.Нетрансмиссивные плазмиды могут передаваться с помощью фагов,реже при трансформации.К плазмидам можно “пришить” любые гены.Их используют как вектор для передачи свойств.По свойствам выделяют: 1.плазмиды,дающие вирулентность Ent+ плазмиды отвечают за синтез ентеротоксина,Hly за синтез гемолизина,К 88 отвечает за адгезию,умеренный фаг за лизогенную конверсию.Напр синтез экзотоксина у дифтерийной палочки, палочки ботулизма происходит при наличии в кл умеренного фага,т.е.при её лизогенизации.2.Плазмиды,дающие селективные преимущества:плазмиды колициогенности (синтез бактериями а/б подобных в-в.У киш палочки колицин,у стафилококка стафилоцин).Р-плазмиды отвечают за множественную лек.резистентность.R-плазмида трансмиссивная (самостоятельная), r-плазмида нетрансмиссивная. 3. Плазмиды, изменяющие фенотипические cв-ва: изменение ферментации различных У, изменение поверхностных аг. Все плазмиды имеют F+ гены, отвечающие за синтез ферментов,инактивирующх а/б | 6 Особенности структуры L-форм, коплазм, ламидий,спирохет. L-формы это бактерии временно,потерявшие клеточную стенку под действием внешних факторов.,часто под действием антибиотиков.Это приводит к хронизации инфеционного процесса.Микоплазмы-мелкие бактерии,окружённые ЦПМ и не имеющие клеточной стенки.Из-отсутствия клеточной стенки они осмотически чувствительны, поэтому их сложно культивировать.Имеют разнообразную форму: кокковидную, нитевидную,колбовидную. Эти формы можно рассмотреть при фазово-контрастной микроскопии чистых культур микоплазм..Патогенные микоплазмы вызывают хронические инфекции.Mycoplasma pneuoniae является возбудителем заболевания по типу острой респираторной инфекции.Хламидии относятся к облигатным внутирклеточным кокковидным Гр- бактериям..Хламидии размножаются только в живых клетках:их рассматривают как энергетических паразитов..Вне клеток хламидии имеют сферическую форму, являясь элементарными тельцами.Внутри клеток они превращаются в делящиеся ретикулярные тельца,образуя их скопление-включения.. Хламидии вызывают трахому, орнитоз, урогенит. хламидиоз, пневмонию. Спирохеты - тонкие, извитые, спиралевидные бактерии, отличающиеся подвижностью. Спирохеты состоят из клеточной стенки,окружающей протоплазматический цилиндр с ЦПМ и аксиальной нитью.Аксиальная нить находится под наружной мембраной и как бы закручивается вокруг протоплазматческого цилиндра спирохеты,придавая ей винтообразную форму.Аксиальная нить состоит из фибрилл и представляет собой сократительный белок флагеллин.Они прикреплены к концам клетки и направлены навстречу друг лругу.Другой конец фибрилл свободен.Число фибрилл варьирует у разных видов. Фибриллы участвуют в передвижении спирохет. У спирохет параллельное деление(из 1 может получиться 4,6).Спирохеты плохо воспринимают красители.Спирохеты окрашиваются по методу Романовского –Гимзе в розоавый цвет,но так как у неё мало нуклеопротеидов получается слабое окрашивание.Поэтому лучше пользоваться методом серебрения или исследовать в живом виде в тёмном поле зрения. 3родами,патогенные для человека:трепонема, боррелия,лептоспира. Спирохеты под действием лек.препаратов и ат может легко превращаться в L-формы, образовывать гранулярные формы и цисты. Поэтому часто встречаются поздние рецидивы.T. pallidum является возбудителем сифилиса, имеет 8-12 витков. Спирохета рода Borrelia –возбудитель возвратного тифа,боррелиозов, имеет3-5 неровных завитков.Т.Leptospira попадая в организм с водой или с пищей приводит к развитию кровоизлияний и желтухи, имеет 18-20 мелких завитков и 2-3 крупных.На конце пуговки. | 8 Особенности энергетического метаболизма у разных групп бактерий.У бактерий высокий уровень метаболизма.Все процессы метаболизма(биосинтез и катаболизм) идут в ЦПМ.Биосинтез требует затрат энергии, а катаболизм происходит с образованием энергии.Энергия образуется за счёт субстратного и окислительного фосфорилирования .А также бактерии могут использовать энергию фотосинтеза.Катаболизм-дыхание клетки,а биосинтез-её питание.Для регуляции этих процессов клетка имеет огромное количнство ферментов.Констутивные ферменты есть всегда и у всех бактерий,это определяется генетически. Индуцибильные ферменты появляются у бактерий под действием субстрата. За синтез ферментов отвечает геном. Ген-регулятор влияет на белок репрессор > подавление аллостерических белков > нарушение регуляторной функции (появление или отсутствие фермента в клетке и его количество).Если белок прикрепляется к АДФ, то резко увеличивается синтез АТФ. Уровень метаболизма в любой клетке зависит от площади ЦПМ,которая увеличивается за счёт мезосом Кл стенка и ЦПМ не могут пропускать большие молекулы.Для их расщипления бактерия выделяет наружу экзоферменты,которые расщипляют макромолекулу на микромолекулы.У бакт.клетки на поверхности есть рецепторы,которые улавливают нужное вещество и ферменты пермиазы протаскивают это вещество в ЦПМ. Внутри клетки работают транслоказы.У гр+ бактерий роль рецепторов выполняют тейхоевые кислоты, у гр- порины,у микоплазмы белковые ферменты ЦПМ.Питательные вещества могут поступать в клетку без затрат энергии(простая и облегчённая диффузия) и с затратой энергии(активный перенос против градиента концентрации, фосфорилирование).В метаболизме бактерий участвуют 3 вида ферментов:ферменты брожения, ферменты анаэробы, ферменты аэробные.Если работает больше ферментов,значит больше АТФ.По типу питания бактерии делятся на:1)строгие или облигатные анаэробы( возбудители столбняка,газовой гангрены, ботулизма). 2) факультаттвные анаэробы 3) микроаэрофилы (возбудители бруцилёза, стрептококки) 4)строгие или облигатные аэробы.Им иногда нужна дополнительная аэрация (туберкул. пал).В энергетическом плане анаэробное дыхание менее выгодно. Когда кислород вмешивается в цикл окислительно-восстановительных процессов образуются токсичные продукты. 1е + О2 = супероксид, 2е + О2 = перекись, 3е + О2 = Н2О + ОН. Вреден не О2, а продукты,которые получаются в результате его взаимодействия с электронами. Уанаэробов нет ферментов каталазы,пероксидазы и супероксиддисмутазы. Конечным акцептором электронов при аэробном дыхании является кислород.При анаэробном дыхании-неорганические вещ-ва.При брожении конечным акцептором являются органические вещ-ва. | 27 Коньюгация у бактерий , F+ и F- клетки. Конъюгация ( соединение) бактерий состоит в переходе генетического материала (ДНК) из клетки-донора (“мужской”) в клетку-реципиент (“женскую”) при контакте клеток между собой. Мужская клетка содержит F-фактор, который контролирует синтез половых пилей, или F-пилей. Клетки, не содержащие F-фактора, являются женскими; при получении F-фактора они превращаются в “мужские” и сами становятся донорами. При конъюгации F-пили соединяют “мужскую” и “женскую” клетки, обеспечивая переход ДНК через конъюгационный мостик или F-пили. Клетки, содержащие F-фактор в цитоплазме, обозначаются F+; они передают F-фактор клеткам, обозначаемым F- (“женским”), не утрачивая донорской способности, так как оставляют копии F-фактора. F-фактор располагается в цитоплазме в виде кольцевой двунитчатой молекулы ДНК, т. е. является плазмидой. Контактировать клетки будут если одна F+ а др. F- . Донор должен иметь плазмиду F+ а реципиент определенные рецепторы . Плазмида F+ в ней есть гены: 1) отвечающие за синтез секс-пилей от F+ есть пили , кот. определяют рецептор F- ; 2) гены отвечающие за саморепликацию,т.е. должен быть разрез ; 3) ДНК полимераза ; 4) трансфергены (гены переноса). Саморепликация –образуется мостик- одна нить F переходит в рецепиента (трансфер ген). ДНК полимераза подстраивают одну нить донора и у рецеп. – и кл. из F- (минус) стала F+. Это редко 10 в минус 7 степени. F+ обработали ипритом ( отравляющий газ) и клетка стала секс-бомбой ее называют Hfr штамм с высокой частотой рекомбинаций 20-30 рек. на 100 кл. Секс –бомба из автономного состояния F перешла в интегривное F- (минус) + гены донора.. Разрез в точке О на границе фактора F и точки рибосом первой пройдет ДНК донора, а фактор F последний. Значит разрез на границе (т.О) и бактериальная хромосомапередалась в кл. реципиента через цитоплазматический мостик через 90 минут. F- (минус) была и остаётся, но приобретает гены донора, т.е.проявляет новые свойства. При конъюгации клеток Hfr и клеток F- хромосома разрывается и передается с определенного участка (начальной точки) в клетку F- , продолжая реплицироваться. Перенос всей хромосомы может длиться до 100 мин. Прерывая процесс конъюгации (мостик) бактерий, можно определять последовательность расположения генов в хромосоме- генетическую карту. Иногда F-фактор может при выходе из хромосомы захватывать небольшую ее часть, образуя так называемый замещенный фактор — F'. При коньюгации передается: 1) лекарственная резистентность при помощи R-плазмид; 2) разные факторы вирулентности ; 3) ферменты ращепляющие углеводы; 4) АГ свойства. |
| 12 Механизм образования и строения спор у бактерий.Споры-форма, бактерий с гр+ типом строения клеточной стенки.Споры образуются при неблагоприятных условиях существования бактерий.Внутри одной бактерии образуется одна спора.Образование спор является способом сохранения вида и не является способом размножения. Спорообразующие аэробные бактерии,у которых размер споры не превышает диаметр клетки называются бациллами,а спорообразующие анаэробные бактерии.у которых размер споры превышает диаметр клетки наз. Клостридиями. ..Стадии спорообразования:нуклеотид смещается к одному концу,идёт уплотнение всей структуры,далее происходит инвагинация и образование проспоры,затем формируется многослойная непроницаемая оболочка(кортекс).Спора сохраняется без питания, выдерживает температуру абсолютного нуля, может сохраняться на протяжении веков. Устойчивость обусловлена плотной многослойной кл оболочкой с высоким содержанием липидов и жировосков,переходом воды из свободного в связанное состояние, повышением содержания ионов Са (термоустойчивость), появлением димиколиновой кислоты, которая подавляет метаболизм клетки.Форма спор может быть овальной и шаровидной;расположение в клетке терминальное-на конце палочки(возбудитель столбняка), субтерминальное-ближе к концу палочки(возбудитель ботулизма,газовой гангрены) и центральное(сибиреязвенная бацилла). П методу Ожешки споры окрашиваются в красный цвет. | 16 Характеристика процессов роста и размножения у бактерий. Размножение это кодированное воспроизводство клеточных компонентов и структур,ведущее к увеличению массы клеток.Схема репликации ДНК:Днк-полинуклеотид.имеет 2 цепи:информативную и комплементарную. Цепи антипараллельны и разнонаправлены. По команде одна нить уходит и прикрепляется к рядом находящейся мезосоме.Другая нить раскручивается со скоростью 10000 оборотов в минпод действием белка-репликоида РНКполимеразы. Другая РНК-полимераза подстраивает другую нить,клетка растёт,ЦПМ растягивается и получается 2 или 4 нуклеотида.Затем происходит инвагинация с обоих сторон.ЦПМ растут и соединяются.У гр+ бактерий Кл стенка врастает внутрь.У гр-получается 2 клетки.Деление идёт за счёт 2-х нитей А иВ.А-информационная нить, В-комплементарная. Стадии размножения бактерий в жидкой пит среде.1)Lag-фаза-фаза адаптации.В этой фазе увеличения массы происходит.2)Log-фаза логорифмического роста(при благоприятных условиях).Происходит резкое увеличение микробной массы.3)стационарная фазф.Кол-во вновь появляющихся микробов = количеству погибающих.4)Фаза отмирания.Кол-во погибающих клеток значительно больше.На 2-ой фазе микробы более чувствительны к лек препаратам.Назначают ударную дозу.Если доза недостаточна происходит хронизация процесса.Бактерицидные дозы-убивают бактерии.Бактериостатические дозы преостанавливают размножение.На 4 стадии появляются инволюционные формы: из гр+ могут перейти в гр-,изкокка в диплококк.Это затрудняет диагностику. | 19 Характеристика бактериальных плазмид. Плазмиды - дополнительные кольцевые ДНК, которые несут дополнительную нежизненноважную информацию.Например R-плазмида отвечает за лекарственную зависимость.Плазмида может существовать автономно или интегрировано.Может передаваться от одной клетки к другой через конъюгативные пили- это трансмиссивные плазмиды,они имеют трансген.Нетрансмиссивные плазмиды могут передаваться с помощью фагов,реже при трансформации.К плазмидам можно “пришить” любые гены.Их используют как вектор для передачи свойств.По свойствам выделяют:1.плазмиды,дающие вирулентность Ent+ плазмиды отвечают за синтез ентеротоксина,Hly за синтез гемолизина,К 88 отвечает за адгезию,умеренный фаг за лизогенную конверсию.Например синтез экзотоксина у дифтерийной палочки, палочки ботулизма происходит при наличии в клетке умеренного фага,т.е.при её лизогенизации.2.Плазмиды,дающие селективные преимущества:плазмиды колициогенности (синтез бактериями антибиотико подобных веществ.У киш палочки колицин,у стафилококка стафилоцин).Р-плазмиды отвечают за множественную лекарственную резистентность.R-плазмида трансмиссивная (самостоятельная), r-плазмида нетрансмиссивная. 3. Плазмиды,изменяющие фенотипические cвойства: изменение ферментации различных углеводов, изменение поверхностных аг. Все плазмиды имеют F+ гены, отвечающие за синтез ферментов,инактивирующх антибиотики. | 26 Механизм трансформации у бактерий, эксперимент Гриффитса. Трансформация (превращение) заключается в том, что ДНК, выделенная из бактерий в свободной растворимой форме, передается бактерии-реципиенту.. При трансформации рекомбинация происходит, если ДНК бактерий родственны друг другу. В этом случае возможен обмен гомологичных участков собственной и проникшей извне ДНК. Клетка реципиента должна находится в компетентном состоянии –это сразу же после деления, молодая и родная. Донор погиб и получились фрагменты. Клетка вырабатывает ферменты , кот. Большие ращепляет на мелкие фрагменты (каталитические ферменты) и ферменты кот. Протаскивают в клетку. Двунитчатая структура попала внутрь и 3-я группа ферментов ращепляет ДНК на 1-у нить –это близкородственная клетка. Затем ферменты разрезают одну нить ее разрушают, вшивают одну нить донора в одну нить реципиента . Это происходит редко . Таким путем передаются вирулентность , появл. ферменты ращепляющих углеводы , появляется лекарственная устойчивость. Впервые явление трансформации описал Ф. Гриффите (1928). Он вводил мышам живой невирулентный бескапсульный R-штамм пневмококка и одновременно убитый вирулентный капсульный S-штамм пневмококка. Из крови погибших мышей был выделен вирулентный пневмококк, имеющий капсулу убитого S-штамма пневмококка. Таким образом, убитый S-штамм пневмококка передал наследственную способность капсулообразования R-штамму пневмококка. Путем трансформации могут быть перенесены различные признаки: капсулообразование, устойчивость к а/б синтез ферментов. |
| 1 Характеристика основных методов исследовании.Микроскоп метод изучение морфол и структуы бактерий под > увеличением.Достоинства метода: возможность изучения морфи структуры микробов,быстрый и недорогой метод.Применяют при острой гонореи, малярии,возвратном тифе, заболеваниях, вызываемых простейшими. Недостатки: нельзя идентифицировать род и вид микроба, невозможно обнаружить возбудителя в иссл-м материале.Напр tbc палочка может превратиться в фильтр форму. Ведущий метод исследования-бактерио-логический. Бактериологический метод – выделение из исследуемого материала чистой культуры бактерий и её идентификация.Достоинства::возможность идентификации выделенной культуры,возможность определения чувствит-ти к а/б. Недостатки: длительность, невозможность культивирования отдельн.бактерий., неэкономичный метод,почвление ауксотрофов в процессе лечения.Серологический метод-выявление а/т или а/г с помощью серологических р-ий(р-я агглютинации,р-я преципитации,р-я связывания комплемента и др).В серологических р-ях всегда участвует сыворотка крови исследуемого ч-ка или иммунная сыворотка( в ней всегда находятся ат).Серологические р-и строго специфичны, т.к. эпитоп аг специфичен к паратопу Ig за исключением р-и Вассермана.Достоинсива метода: относительная быстрота и специфичность р-и-100%гарантия диагноза.Недостатки метода:1.при вирусных инфекциях титр ат (т.е. их количество)будет низким, что требует высокочувствительных р-й. Р-ю ставят 2-х кратно с интервалом 7-10дней.2.при острых инфекциях данный метод пости не используются, т.к.титр ат нарастает к 5-7дню болезни.3.при некоторых инфекциях (ВИЧ) ат можно обнаружить через 3-6 мес. После зарожения и то в низком титре.Серологический метод включает серодиагностику и сероидентификацию.Серодиагностика-выявление титра ат в сыворотке крови п-та с помо щью известного аг.Сероидентификация-определение вида микроба по его аг, с помощью типоспецифических иммунных сывороток(т.е.известная сыворотка). Экспресс методы диагностики: 1. Иммунофлюоресцентный метод - сочетает быстроту микроскоп метода и специфичность серологического. 2. иммуно-ферментный анализ (ИФА). Вместо светящегося ат прикрепляется фермент.3.полимеразно-цепная реакция(ПЦР)-обнаружение специфических частков ДНК. |