ШПОРА Микробиология. Шпаргалка на экзамен. 24 Классификация антител. Принцип деления антител на классы
 Скачать 1.48 Mb.
|
|
13 Строение и функционирование органов движения у бактерий.К органам движения у бактерий относятся жгутики и пили. Жгутики-тонкие нити, берущие начало от ЦПМ;длина их больше,чем длина клетки. Жгутики состоят из белка флагелина. Подвижность определяют в живом состоянии в тёмном поле зрения,но самих жгутиков не видно.. Они обладают антигенными сва-вами.Жгутики можно увидеть в эл микроскопе,при специальном окрашивании(серебрение,свечение).Число жгутиков варьирует от одного(монотрих) до сотен(перитрих).Лофотрихи имеют пучок жгутиков на одном конце клеетки, амфитрихи по одному жгутику или пучку на противоположных концах клетки.Пили-тончайшие нити,видны в эл.микроскопе.Функции пилей:адгезия, участие в питании и участие в конъюгации. Конъюгативные пили (их 1-4)передают плазмиды | 2 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Дифтерии. Основной метод диагностики – бактериологический. Материал засевают на элективные кровяно-теллуритовые среды (среда Клауберга), где подавляется рост сопутствующей флоры. На теллуритовой среде C..diphtheriaeобразует черные колонии за счет восстановления теллурита. Колонии пересевают на кровяной агар для получения чистой культуры. Для подтверждения диагноза дифтерии в первую очередь необходимо установить токсигенность выделенной культуры (способность к продукции дифтерийного токсина) с помощью различных серологических реакций. Определение токсигенности – реакция преципитации в агаре с антитоксической противодифтерийной сывороткой: в чашку Петри с агаром, содержащим лошадиную сыворотку, мальтозу и цистин, кладут полоску фильтровальной бумаги, пропитанную антитоксической противодифтерийной сывороткой. Затем засевают исследуемые культуры в виде перпендикулярных к бумаге штрихов. В качестве контроля используют заведомо токсигенную культуру. Посевы инкубируют при 37 "С до следующего дня. При размножении токсигенной культуры в месте соединения токсина с антитоксическими антителами образуется преципитат в виде белых линий "усов". Выделенную культуру идентифицируют и дифференцируют по морфологическим особенностям, культуральным и биохимическим признакам: пробы на цистиназу, уреазу, ферментация углеводов и др. Для определения цистиназы (проба Пизу) в столбик питательного агара с цистином уколом засевают исследуемую культуру. C.diphtheriae вызывают почернение среды по ходу посева (в результате образования сульфида свинца). Для определения уреазы (проба Закса) готовят спиртовой раствор мочевины и раствор индикатора фенолового красного, затем исследуемые бактерии петлей вносят и растирают по стенке пробирки. После 20—30-минутной инкубации при 37 °С наблюдают расщепление мочевины уреазой, в результате чего среда приобретает красный цвет. Профилактика: Получение дифтерийного анатоксина: к экзотоксину добовляют формалин, и ставят в термостат при t – 40 на 3-4 недели. За это время фермент А разрушается, токсические св-ва исчезают, а антигенные св-ва сохраняются. Антитела вырабатываются к фракции В, и попавшая молекула экзотоксина прикрепиться не может, и выводится через почки. Активная профилактика: вакцины: дифтерийный анатоксин, АКДС, АДС, АКДС+полимиелит. пассивная профилактика – не вакцинированным детям вводят противодифтерийную анатоксическую сыворотку, примерно 5000МЕ. При тяжел формах дифтерии используют анатоксическую противодифтерийную сыворотку по Безредко, примерно 100000МЕ. Получение антитоксической сыворотки – иммунизируют лошадь дифтерийным анатоксином. | ||
| 1 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Дифтерии. Факторы вирулентности. Возбудителем явл коринебактерия. Морфолог св-ва: палочка, на концах имеет утолщения – волютин (по хим составу явл полифосфатами). В чистой культуре располагается под углом. Гр+ , красят ее уксусно-кислой синькой, либо по Нейсеру. Имеет микрокапсулу, и в клеточной стенке факторы адгезии. Культивирование: требовательная, растет на средах с добавлением сыворотки: среда Ру (свернутая лошадиная сыворотка), среда Леффлера (три части свернутой сыворотки и одна часть сахарного бульона). Эти сыворотки используют для получения чистых культур. Первичный посев делают на кровяно-теллуритовые среды (среда Клауберга), где подавляется рост сопутствующей флоры. На этих средах различают три биовара: 1 – gravis (R-формы, серые с шероховатыми краями), 2 – mitis (S-форма, гладкие, блестящие, с ровными краями, черного цвета), 3 – intermedius. Резиденты – ложная дифтерийная палочка (палочка Гоффмана), обитает на слизистых полости рта. Палочка Xerosis – обитает на слизистой носа. Ложные палочки на этих средах будут коричневого цвета. Биохимическая активность: наряду с другими ферментами возбудитель дифтерии обладает цистиназой и уреазой. Gravis ферментирует крахмал и гликоген в отличие от mitis. Факторы вирулентности: фактор адгезии клеточной стенки, корд-фактор, фактор инвазивности – гиалуронидаза, экзотоксин – действием которого обьясняется патогенез заболевания. | 3 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Туберкулеза. Факторы вирулентности. Источник инфекции – больной человек. Морфологические свойства: тонкая, изящная, слегка изогнутая, гр+. Из–за высокого содержания липидов окрашивается по Цилю-Нильсену (красный цвет). Имеет кислотоустойчивые участки (зерна Муха). Под действием лек препаратов превращается в: L формы, фильтрующиеся формы (проходит через бактериальные фильтры), ветвящиеся формы. Культуральные св-ва: размножается медленно, требовательная (глицерин, желток, картофельная мука, аспарагиновые кислоты и др). Культивируют ее на среде Левенштейн-Йенсена (желток, картофельная мука, аспарагиновая кислота, малахитовая зелень для подавления сопутствующей микрофлоры). Растет 3-4 недели. Биохимические свойства: микобактрии туберкулеза дают положительный результат при ниациновом тесте, редуцируют нитраты, разлагают мочевину, никотинамид, пиразинамид. Факторы вирулентности: к пептидогликану через фосфарные остатки присоединяется вещ-во ЛАМ (липидоарабиноманозный комплекс). Маноза на верхушке ЛАМ дает сродство к макрофагам. Имеется корд-фактор в состав которого входят миколиевые кислоты.. Этот фактор имеется только у вирулентных форм. В кл стенке нах-ся белковые молекулы – туберкулопротеины. Также имеются гликолипиды, которые придают устойчивость во внешней среде. Сульфолипиды – нарушают переваривание туберкулезной палочки в фагосоме (незавершенный фагоцитоз). | 8 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика кишечных заболеваний. Для большинства кишечных инфекций ведущим методом диагностики является бактериологический. Исследуемый материал (фекалии) засевают на дифференциально диагностическую среду (Эндо) и ставят в термостат. Через сутки выросли 2 типа колоний: 1 – Lac+ гладкие, малинового цвета с металлическим отливом, круглой формы Е.Соli. 2 – Lac бесцветные колонии (патогенные микробы). Из колонии Lac: 1 – приготовлен мазок, окрашен по грамму. При микроскопии – Гр палочки. 2 – Определение подвижности методом “висячей капли”. 3 – Получение чистой культуры (среда Ресселя). Для определения родовой принадлежности Гр- палочек ставят реакцию аггютинации на стекле с поливалентными агглютинирующими сыво-ротками (сальмонеллезными, эшерихиоз-ными, дизентерийными). Допустим реакция положительна с сальмонеллезной сыворот-кой Гр- палочка относится к роду Salmonella. Исследуемую сальмонеллу пересевают на среду Ресселя для выделения чистой культуры. Идентификация сальмонелл: 1 – Посев на среды Api или Enterotest или Enterotube для определения б/х активности. 2 – Для более точного определения вида сальмонелл ставят реакцию агглютинации на стекле с сальмонелезными сыворотками. Профилактика: проведение санитарно-гигиенических мероприятий, заключающихся, в частности, в правильной обработке мяса и др пищевых продуктов. | 14 Микробиологическая диагностика и профилактика стрептококковых заболевании Методы диагностики: Основной метод диагностики – бактериологический. Для выделения чистой культуры исследуемый материал засевают на кровяной агар для получения изолированных колоний. Затем производят учет результатов посева: характрер колонии, характер гемолиза. По характреу гемолиза на кровяном агаре стрептококки делятся на 3 группы: а – -гемолитические – образуют вокруг колонии полностью прозразную зону гемолиза, б – -гемолитические – неполный гемолиз, образующийся метHb дает зеленоватый оттенок (зеленящий стрептококк), в – – негемолитические стрептококки. Затем выросшие изолированные колонии пересевают на скошенный агар для получения чистой культуры. Заключительный этап – идентификация чистой культуры по культуральным признакам, сероидентификация и серотипирование (определение серогруппы). Серогруппу стрептококков определяют в реакции преципитации с экстрактом из исследуемой культуры и группоспецифическими сыворотками (4 наиболее распространенные серогруппы – А, В, С, Д). Иммунитет: антитоксический, антимикробный, типоспецифический, нестойкий, с тенденцией к подавлению фагоцитоза, с образованием L-форм, к хронизации процесса. Специфической профилактики нет. Лечение – антибиотикотерапия. |
| 6 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Сифилиса. Методы диагностики: 1 – микроскопический (1-2 ст), 2 – серологический (реагиновые тесты, когда в качестве антигена используют кардиолипиновый антиген из сердечной мышцы быка), 3 – специфические реакции, когда используются трепонемальные тесты (трепонема Никольса – культуральные спирохеты, выращенные на искуственной питательной среде и не обладающие вирулентностью, антигенными св-ми отличаются от бледной спирохеты). Из трепонемальных тестов в настоящее время используют иммунофлюорисцентный адсорбционный тест (ИФАТ) и трепонемальную микрогемагглютинацию. Постановка реакции Вассермана: Для постановки реакции связывания комплемента по Вассерману при подозрении на сифилис необходимы следующие компоненты: 1. Исследуемая сыворотка больного в разведении 1:5. Исследуемую сыворотку необходимо прогреть в течение 30 минут при температуре 56°С для разрушения (инакти вации) комплемента. 2.Неспецифический антиген – кардиолипиновый антиген – холестеринизированный спиртовой экстракт из сердечной мышцы быка. 3.Комплемент – в качестве комплемента используют сыворотку морской свинки. Так как количество комплемента должно быть строго определенным, комплемент берут в рабочей дозе (титр, увеличенный на 25-30%). Титр комплемента – это минимальное его количество, при котором еще происходит гемолиз.. 4.Гемолитическая система – это смесь гемолитической сыворотки и эритроцитов барана, которую перед постановкой РСК выдерживают в термостате при 37°С в течении 30 минут для адсорбции гемолизинов на поверхности эритроцитов. Реакцию Вассермана ставят по методике РСК. Отсутствие гемолиза в опытной пробирке свидетельствует о положительной реакции Вассермана. Наличие гемолиза в опытной пробирке – отрицательная реакция Вассермана (человек здоров). Иммунитет изучен недостаточно 1 ст у 30% болезнь заканчивается самоизличением и повторного заражения не происходит. 2 ст у части людей не происходит заражения на второй стадии, т.к спирохета не изменяет свои антигенные св-ва. Профилактика: специфической профилактики нет, неспецифическая – соблюдени правил гигиены, учет и госпитализация больных сифилисом. | 12 Микробиологическая диагностика и профилактика стфилококковых заболеваний. Лечение и профилактика: а – вакцины, сыворотки, -глобулины – для всех инфекций, б – профилактика – стафилококковый анатоксин – вводится тем лицам, которым предстоят серьезные пластические операции. Смотрим на стойкость иммунитета и на типоспецифичность. С целью лечения стафилококковый анатоксин может использоваться при хронических инфекциях (пиодермия, пневмония, остеомиелит). Для профилактики – искусственный, активный, антитоксический стафилококковый анатоксин; в – аутовакцинотерапия – от больного выделяют его штамм стафилококка, убивает его и вводят собственный аутоштамм; г – стафилококковый -глобулин (содержит антитела) – применяют для лечения хронических инфекций, д – гиперимунная антитоксическая донорская плазма – получают путем иммунизации донора стафилококковым анатоксином; применяют для лечения стафилококкового сепсиса. Методы диагностики. Основной метод диагностики – бактериологический. Для выделения чистой культуры исследуемый материал засевают на кровяной, молочно-солевой и желточно-солевой агары. Выросшие изолированные колонии пересевают на скошенный агар для получения чистой культуры. Идентификацию чистой культуры проводят по морфологическим, культуральным и б/х св-вам, затем определяют факторы вирулентности. Для определения гемолитических св-в экзотоксина культура стафилококка засевается на кровяной агар и определяется зона гемолиза. Для определния фермента лецитиназы стафилококк засевают на желточно-солевой агар – вокруг колонии – зона помутнения среды за счет ресщепления лецитина. Для определения фермента плазмокоагулазы стафилококк засевают в цитратную плазму – происходит коагуляция плазмы с образованием сгустка фибрина. Для патогенного стафилококка хар-но сбраживание маннита в анаэробных условиях – при расщеплении маннита образуются кислые продукты, которые изменяют цвет индикатора в среде (индикатор Андреде – красная окраска, ВР – синюю). С целью идентификации можно провести фаготипирование. При стафилококковых инфекциях необходимо проверять чувствительность к антибиотикам (метод дисков). Лекарственная резистентонсть обуловлена: синтезом -лактамазы, R-плазмидами, лизогенной конверсией. | 11 Морфологические культуральные и биохимические свойства стафилококков. Факторы вирулентности. Вызывает пиодермию, остеомиелит, токсикоз. 1 – Морфологическая хар-ка: Гр + кокки, расп в чистой культуре гроздьевидно. У некоторых имеется микрокапсула. На поверхности имеется белок А – способствует адгезии. 2 – Культуральные св-ва: по типу дыхания – факультативный анаэроб, неприхотлив. Устойчив к концентрации соли до 10% NaCl. Элективные среды: солевой агар, молочно-солевой агар, желточно-солевой агар (на нем определяют фермент лецитиназу). Б/х активность – слабая, выражена ферментация маннита. 3 – Антигенная структура разнобразна, его типируют по чувствительности к бактериофагам – фаготип. Имеет эпидемиологическое значение. Стафилококк выделяет пигмент: золотистый (s. aurus) – патогенный, белый (s. еpidermidis) – на коже, лимонно-желтый (s. saprophiticus). 4 – Факторы вирулентности: а – факторы адгезии – белок А – неспецифически связывает Fc-фрагмент а/т и тем самым уменьшает кол-во а/т – препятствует фагоцитозу, б – факторы инвазивности (агрессии): гиалуронидаза, плазмокоагулаза, коллагеназа, фибринолизин, ДНКаза, в – факторы токсичности: выделяет экзотоксин, кот обладает различными биологич св-вами: гемолизин (растворяет эритроциты), лейкоцидин (растворяет лейкоциты), энтеротоксин (вызывает ПТИ, гастроколиэнтериты у детей грудного возраста), эксфолиативный токсин (вызывает пузырчатку новорожденных, у взрослых – стафилококковую эпидермию), этот экзотоксин является супера/г, вызывает синдром токсического шока – неспецифическая реакция с выделением цитокинов. Стафилококк явл антагонистом по отношению к некоторым микробам за счет выделения лизоцима. Иммунитет – антитоксический, антибактериальный, типоспецифический, кратковременный, имеет место тенденция к хронизации процесса за счет снижения уровня фагоцитоза, неспецифического связывания антител, за счет перехода в L-формы и за счет появления лекарственно-резистентых штаммов. Лекарственная резистентонсть обуловлена: синтезом -лактамазы, R-плазмидами (передаются путем коньюгации), r-плазмидами – нетрансмиссивная, передается путем трансдукции (с помощью умеренного фага). | 13 Морфологические культуральные и биохимические свойства стрептококков. Факторы вирулентности. (S. Mutans). Вызывает ревматизм, скарлатину, рожистое воспаление, эндокардит, гломерулонефрит. Является резидентом человека. Морфологическая хар-ка: Гр+ кокки, располагаются в виде цепочки, имеют микрокапсулу, иногда имеют вытянутую форму (стрептококки гр Д – энтерококки). Культуральные св-ва: мелкие, точечные, бесцветные колонии, требовательны к добавлению сахаров и хорошо растут на кровяном агаре. Они факультативные анаэробы, фермента каталазы у них нет, а в крови есть. Встречаются строгие анаэробы – пептострептококки (они наши резиденты, могут учавствовать в оппортунистических инфекциях). Классификация в зависимости от характра роста на кровяном агаре: а – -гемолитический стрептококк, б – -гемолиз – неполный гемолиз, образующийся метHb дает зеленоватый оттенок (зеленящий стрептококк), в – – негемолитические стрептококки. S. Mutans является основой образования зубного налета. Расщепляет сахарозу с декстраном, образует липкий полимер, к которому прилипают другие микробы. Факторы вирулентности: 1 – выделяет гемолизин: стрептолизин О и стрептолизин S. Титры антистрептолизина О свидетельствуют о наличии хронической стрептококковой инфекции (фронтит, гайморит, пародонтит, цистит), 2 – выделяет фибринолизин – стрептокиназу, 3 – выделяет стрептодорназу – разрушает ДНК, 4 – выделяет фактор М – связывает Ig, 5 – имеет микрокапсулу, 6 – имеет факторы инвазивности – гиалуронидаза, 7 – имеет протеиназу – разушает комплемент, тем самым нарушает фагоцитоз, 8 – имеет экзотоксин, который обладает гемолитическим и летальным св-вами, разрушает лейкоциты (лейкоцедин), а у скарлатинозного стрептококка имеется эритрогенный токсин (вызывает алую сыпь). |
| 16 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика менингита. Методы диагностики: Основной метод диагностики – бактериологический: 1 – при подозрении на менингококконосительство мазок из носоглотки засевают петлей на сывороточный агар с добавлением ристомицина, который подавляет рост Гр+ флоры, затем ставят в термостат (37С). При этом могут вырасти N. Meningitidis и нейсерии-резиденты (N. Catarrhalis). Выросшие изолированные колонии пересевают на скошенный сывороточный агар для получения чистой культуры. Затем проводят идентификацию: б/х – слабо активен, серодиагностика – по капсульным антигенам, ПЦР. Полученную культуру засевают на сывороточный агар при t +22 вырастет N. Catarrhalis, на МПА – вырастет N. Catarrhalis и на сывороточный агар при t +37 вырастет N. Meningitidis. 2 – при подозрении на менингококковую инфекцию центрифугируют спиномозговую жидкость, делают мазок если в мазке “чистые” лейкоциты (без менингококка), то возникает подозрение, что они подверглись аутолизу. Тогда делают реакцию кольцепреципитации – в каждой пробирке находится сыворотка к определенной серогруппе; в какой пробирке реакция кольцепреципитации положительна такой тип менингита у больного. Если в мазке менингококк находится в самом лейкоците и вне его, тогда засевают на сывороточнй агар при t 37,. Выросшие колонии пересевают на скошенный сывороточный агар для получения чистой культуры. Затем проводят идентификацию: б/х – слабо активен, серодиагностика – по капсульным антигенам. Иммунитет – стойкий, антимикробный, имеется “врожденная” устойчивость. Профилактика и лечение: профилактика – вакцинация – химическая вакцина, которая получена из капсульных полисахаридов типа А и С и обладают протективными св-вами. У детей до 2-3 лет антиген С не иммуногенен (не создает иммунологической памяти). Лечение – антибиотикотерапия. |