ЕМТИХАН СҰРАҚ ПЕН ЖАУАПТАР. Бактерия капсуласына анытама берііз жне атаратын ызметін сипаттаыз
 Скачать 245.71 Kb.
|
|
І деңгей Бактерия капсуласына анықтама беріңіз және атқаратын қызметін сипаттаңыз Капсулалар қосымша беткі қабық болып табылады. Олар макроорганизмге микроорганизмдер түскенде пайда болады. Капсуланың функциясы - фагоцитоз бен антиденеден қорғау. Макро- және микрокапсула деп екіге бөлінеді. Макрокапсуланы бояудың оң және теріс әдістерін біріктіре отырып, арнайы бояу әдістерін пайдалана отырып анықтауға болады. Микрокапсула-жасуша қабырғасының жоғарғы қабаттарының қалыңдаған бөлігі. Оны тек электрондық микроскоп арқылы анықтауға болады. Микрокапсулалар вирулентті бактерияларға тән. Бактериялар арасында ажыратылады: 1) шынайы капсульді бактериялар (Klebsiella туысы) – макроорганизмде ғана емес, қоректік ортада өсу кезінде де капсула түзілісін сақтайды; 2) жалған капсулалы – макроорганизмге түскен кезде ғана капсула түзеді. Капсулалар полисахаридті және ақуызды болуы мүмкін. Олар антиген рөлін атқарады, вирулентілік факторы болуы да мүмкін. 2.Бактерия талшықтарына анықтама беріңіз және химиялық құрамын сипаттаңыз. Талшықтар - қозғалыс мүшесі. Жылжымалы бактерияларларда болады. Олардың құрамына флагеллин ақуызы кіреді, ол құрылымы бойынша миозин түріндегі қысқарған ақуыздарға жатады. Талшықтар цитоплазмалық мембранаға бекінеді, КС орнатылған бірнеше диск жүйесінен тұратын базальды денеден тұрады. Талшықтардың саны мен орналасуы әртүрлі болуы мүмкін. Монотрихтер - жасушалардың бір полюстерінде тек бір ғана талшық, лофотрихтар - талшықтар шоғыры бар, амфитрихтар - талшықтар жасушалардың екі полюстерінде, ал перитрихтар — оның барлық бетінде орналасқан. Бактериялардың қозғалғыштығы туралы тірі микроорганизмдерді қарастыра отырып немесе жанама түрде - Пешков қоректік ортасындағы өсу сипаты бойынша қарастырады. Қозғалмайтын бактериялар қатаң ине түрінде өседі, ал қозғалмалы бактериялар - диффузды өседі. Бактериялардың белсенді қозғалысы талшықтардың айналмалы қимылдарымен байланысты. Бактериялар ретсіз қозғалыспен қатар, оттегі мен фототаксистің әртүрлі концентрациясына негізделген хемотаксис, аэротаксис арқылы бағытталуы мүмкін. Бактериялардың қозғалыс жылдамдығы талшықтардың орналасуымен, қоректік ортаның құрамы мен қасиеттерімен байланысты. Талшықтар антигендік қасиеттерге ие. 3.Бактерия метаболизмінің түрлерін сипаттаңыз. Зат алмасу немесе метаболизм деп тірі ағзада өтетін барлық химиялық реакциялардың жиынын айтамыз. Зат алмасу нәтижесінде ағзаға қажет заттар түзіледі және энергия бөлінеді. Ағза мен сыртқы орта арасында әрқашан зат және энергия алмасуы үздіксіз жүріп отырады. Күрделі қоректік заттар ас қорыту мүшелерінде қорытылып құрылысы жай заттарға айналған соң ащы ішектен қанға және лимфаға өтеді. Қан және лимфа ағыны арқылы ұлпаларға жеткізіледі. Әр мүшенің жасушалары өзіне тән және өсіп-өнуіне қажетті қарапайым заттарды түзеді. Қоректік заттардың ыдырауынан пайда болған энергияны жасушалар әр-түрлі физиологиялық үрдістер үшін жұмсайды. Артық түскен заттарды өзіне қор етіп жинайды (мысалы, гликоген, май). Ал жасушалардың тіршілік етуі нәтижесінде түзілген керексіз заттар өкпе, тері ішек арқылы сыртқа шығарылып отырады. Зат алмасу (метаболизм) – жасушаның тіршілігін қамтамасыз ететін, организмде жүріп жататын барлық химиялық процестердің жиынтығы. Бұл организмнің тіршілік қабілетін сақтау және сыртқы ортамен қарым-қатынасын, организмге қоректік заттардың еніп, олармен ферменттер әсерінен ыдырауын, пайда болған жай заттардың жасушалар мен мүшелерге тасымалданып, олардың тотығуын, энергия бөлініп шығуын, жасуша құрамындағы түзілістердің биосинтезделуін және қорытылған өнімдердің организмнен бөлініп шығуын қамтамасыз етеді. Жасушадағы қандай да болса, бір заттың белгілі бір тәртіппен ферменттік айналуға түсуін –метаболизмдік жол, ал осы кезде пайда болатын аралық өнім – метаболиттер деп аталады. Бактериялардың метаболизмі әр түрлі. Бұл бір клеткалы организмдерде әртүрлі метаболикалық «өмір салты» бар, бұл оларға оттегі бар немесе онсыз өмір сүруге мүмкіндік береді, сонымен қатар олар пайдаланатын көміртегі мен энергия көзі арасында әр түрлі болады. Бұл биохимиялық икемділік оларға әр түрлі тіршілік ету ортасын отарлауға және олар мекендейтін экожүйелерде әртүрлі рөлдерді ойнауға мүмкіндік берді. Біз метаболизмнің екі классификациясын сипаттайтын боламыз, біріншісі оттегін кәдеге жаратуымен, екіншісі төрт қоректік категориямен байланысты. Метаболикалық реакциялар кезінде бактериялар қоршаған ортаға қоректік заттар алып, олардың дамуы мен күтімі үшін қажетті энергияны бөліп алады. Қоректік зат - бұл энергиямен қамтамасыз ету арқылы өмір сүруіне кепілдік беру үшін енгізілуі керек зат Жасушада. өтетін барлық реакциялар ферменттермен катализденетін болғандықтан, метаболизмнің реттелуі ферментативті реакциялардың қарқындылығын реттеуге түседі. Соңғылардың жылдамдығы екі негізгі тәсілмен реттелуі мүмкін: ферменттер санын өзгерту және олардың белсенділігін өзгерту жолымен. Конститутивті ферментке негізделген биосинтетикалық жолдар бірінші ферменттің белсенділігінің аллостериялық ингибирленуімен реттеледі. Индуцибельді ферменттерге негізделген биосинтетикалық жолдар оларды соңғы өніммен синтездеуді репрессия жолымен реттеледі. Индуцибельді ферменттермен жанама катаболикалық жолдар ферменттер синтезінің индукциясымен және катаболитикалық репрессиямен реттеледі, ал, жанама конститутивті ферменттер - олардың белсенділігіне аллостериялық әсер ету арқылы реттеледі. Бұл жағдайда АТФ - теріс нәтиже, ал АДФ-оң нәтиже береді. 4.Бактериялар қоректенуінің негізгі механизмдерін сипаттаңыз. Қоректік заттар жасушаға бірнеше жолмен өтеді: Пассивті диффузия, яғни заттардың мембрананың қалыңдығы арқылы орын ауыстыруы, нәтижесінде заттардың концентрациясы және қабықтың екі жағы бойынша осмотикалық қысым түзіледі. Бұл жолмен қоректік заттар кіруі мүмкін, егер қоректік ортада концентрация жасушадағы заттардың концентрациясынан едәуір асып кетсе. Жеңілдетілген диффузия-қоректік заттардың жасушаға пермеаза деп аталатын ерекше молекулалармен белсенді тасымалдау арқылы енуі. Бұл цитоплазмалық мембранада орналасқан және спецификацияға ие ферментті табиғат заттары. Әрбір пермеаза цитоплазмалық мембрананың сыртқы жағында тиісті қоректік затты адсорбциялайды, онымен уақытша байланысқа түседі және оның ішкі жағында тасымалданатын затты цитоплазмаға бере отырып, мембрана арқылы кешенді түрде диффундиялайды. Бұл процесс энергияны пайдаланбай жасалады, себебі заттардың қозғалысы жоғары концентрациядан төменге дейін жүреді. Қоректік заттардың белсенді тасымалдануы пермеаза көмегімен жүзеге асырылады, бірақ бұл процесс энергия шығындарын талап етеді. Бұл жағдайда қоректік зат, егер оның жасушадағы концентрациясы қоректік ортадағы концентрациядан едәуір асып кетсе, жасушаға енуі мүмкін. 5.Бактерия спорасына анықтама беріңіз және жасушада орналасуын сипаттап жазыңыз. Спора тек таяқша тәрізді бактерияларда кездеседі. Олар сыртқы ортаның қолайсыз жағдайларына микроорганизмдер түскен кезде қалыптасады. Споралар бактериялық жасушаның ішінде болады және нуклеоидты цитоплазманың тығыздалған бөлігін білдіреді. Химиялық құрамы бойынша олар вегетативтік жасушалардан судың аз мөлшерімен, липидтер мен кальций тұздарының ұлғаюымен ерекшеленеді, бұл спораның жоғары тұрақтылығына ықпал етеді. Спора түзу 18-20 сағат ішінде жүреді; микроағзалар спорасы қолайлы ортаға түскенде 4-5 сағат ішінде вегетативтік қалыпқа түседі. Бактериялық жасушада тек бір спора ғана пайда болады, демек, споралар көбею органдары болып табылмайды, қолайсыз жағдайларды бастан кешіру үшін қызмет етеді. Спора түзетін аэробты бактериялар - бацилла деп аталады, ал, анаэробтылар – клостридия деп аталады. Споралар формасы, өлшемі және жасушада орналасуы бойынша ерекшеленеді. Олар орталық, субтерминалды және терминалды болуы мүмкін. Сібір жарасы қоздырғышында спора ортада орналасады, оның мөлшері жасушаның көлденең бөлігінен аспайды. Ботулизм қоздырғышының спорасы жасушаның соңына жақын орналасқан - субтерминальды және жасушаның енінен асады. Сіреспе қоздырғышында дөңгелек спорасы жасушаның соңында-терминалды және жасушаның енінен едәуір асады. 6. Жағындыны дайындау кезеңдерін анықтап жазыңыз. Тығыз қоректік ортасынан жағынды дайындау кезінде майсыздандырылған заттық шыны әйнекке физиологиялық ерітіндінің кішкене тамшысын бактериологиялық ілмекпен тамызамыз. Ілмекті отта вертикальды ұстап стерилизациялаймыз. Ілмектер қыздырылған соң, ұстағыштың ұшын жалын арқылы өткізіңіз. Тығындыны пробиркадан алып, оны оң қолыңызға алыңыз. Спиртке тығынның жиектерін жағыңыз. Жағындыны енгізгенде ілмекті пробирканың дуалына суытып алу керек. Содан кейін қоректік орта бетінен ілмектермен жағындының өте аз мөлшерін алыңыз. Пробирканың қабырғасына тимей, ілмекті алып, пробирканың жиектерін спиртовканың үстінен тағы да күйдіріп, оны тығынмен жабыңыз. Қыздырылған ілмекті бұрын дайындалған физиологиялық ерітіндіге салыңыз, жақсылап араластырыңыз және шағын шеңбер немесе оваль түрінде шыныға біркелкі жайыңыз. Жағынды дайындау аяқталғаннан кейін, тағы да ілмекті стерилизациялаңыз. Етті-пептонды сорпалы қоректік ортадағы дақылдарынан жағынды дайындау үшін заттық шыныға зерттелетін материалдың 1-2 тамшы ілмектен жағып, шыныға біркелкі таратыңыз. Сұйық қоректік ортасы бар дақылдардан немесе микробтардың эмульсиясынан жағынды дайындау кезінде физиологиялық ерітіндіні пайдалану талап етілмейді. Шынының артқы жағында шыны бойынша қарындашпен препараттың шифрын жазып, жағындыны салыңыз. Дайын болған жағындыны иммерсиялық жүйеде самырсын майының көмегімен 90х немесе 100х объектив пен жарықтық микросопынд көреміз. 7. Қарапайым бояу әдісіне сипаттама беріп, мысал келтіріңіз. Бұл әдісте тек бір бояуды қолданады: метилен көгі немесе фуксиннің сулы-спирттік ерітіндісі. Боялған препараттарды сумен жуады, кептіреді және иммерсиялық жүйемен микроскопта көреді. Бұл тәсілмен микробтарды табу, санын, нысанын және орналасуын анықтау үшін бояу қолданылады. Қарапайым әдістерге бояу үшін бояудың бір ғана түрі қолданылады : 1.. Пфейффердің фуксинмен бояу. Ішек таяқшасының дақылынан тіркелген жағындыға фуксин Пфейффер жағылады және 1-2 мин ұстайды . Сумен жуып, сүзгіш қағазбен кептіреді. Бактериялар қызғылт түске боялады . 2. Метиленді көкпен бояу . Антракоид дақылынан тіркелген жағындыға метилен көк жағылады және 3-5 мин ұстайды . Сумен жуып, сүзгіш қағазбен кептіреді. Бактериялар көк түске боялады. 8.Күрделі бояу әдістерінің түрлерін сипаттаңыз. Жағындыға екі бояғыш заттар әсер етеді, біреуі негізгі, екіншісі қосымша. Бояғыш заттардан басқа, бояудың күрделі тәсілдерінде түрлі түссіздендіретін заттар: спирт, қышқылдар қолданылады. Бактерияларды бояу үшін қолданылатын стандартты бояғыштар - карболды фуксин. Циль, фуксин Пфейффер және Леффлер бойынша метилен көгі, Грам әдісі бойынша бояу әдістері, қышқылға төзімді бактериялар үшін Циль-Нильсен, Романовский – Гимзе, Ожешко, Бурри-Гинс әдістері кеңінен таралған. Грам әдісі бойынша бояу Грам-оң, Грам-теріс бактерияларын анықтау үшін қолданылады. Бурри-Гинс әдісі бойынша бояу капсула түзетін бактерияларды анықтау үшін қолданылады. Нейссер әдісі бойынша бояу коринебактерияда волютин дәндерін анықтау үшін қолданылады. Қышқылға төзімді микобактерияларды (туберкулез қоздырғыштарын, микобактериоздарды, алапесті қоздырғыш бактерияларын), актиномицеттерді және басқа қышқылға төзімді микроорганизмдерді анықтау үшін Циль-Нильсен бойынша бояу әдісі қолданылады. 9. Грам әдісінің мақсаттары мен кезеңдерін сипаттап жазыңыз. Ең көп дифференциалды бояудың жалпы әдісі - бұл Грам бойынша бояу әдісі болып табылады. Бояу нәтижелеріне байланысты барлық микроорганизмдерді екі топқа бөледі – Грам-оң және Грам-теріс. Грам-оң бактериялар - жасушалық қабырғада РНҚ магний тұзы бар, ол йодпен және негізгі бояғышпен кешенді қосылыс түзеді. Бұл кешен спирттің әсерінен бұзылмайды және бактериялар күлгін түс сақтайды. Грам-теріс бактериялар негізгі бояуды ұстап тұра алмайды, өйткені РНҚ магний тұзы жоқ. Спирттің әсерінен бояғыштар жуылады, жасушалар түссізденеді және қосымша бояғышпен қызыл түске боялады. 1. Препаратқа фильтр қағаз салады және бірнеше тамшы су немесе генциандық күлгін ерітіндісін жағады. Қағазды алады немесе бояғыш құйылады. 2. Сумен жумай, Люголь ерітіндісін қарайғанға дейін жағады, содан кейін бояғыш құйылады. 3. Сумен шаймастан, 96% спиртті бояғыш кеткенге дейін жағады. Препаратты 1-2 секунд спиртті стаканға салуға болады. 4. Препаратты сумен жуады. 5. Пфейффер фуксинімен 3 миутн бояйды, сумен жуып, кептіреді. 10.Бактерия спораларына анықтама беріңіз, мысал келтіріңіз. Спора - бактерия жасушасын сыртқы қолайсыз жағдайдан қорғап тұрады, ол тек таяқша тәрізді бактерияларда кездеседі. Олар сыртқы ортаның қолайсыз жағдайларына микроорганизмдер түскен кезде қалыптасады. Споралар бактериялық жасушаның ішінде болады және нуклеоидты цитоплазманың тығыздалған бөлігін білдіреді. Химиялық құрамы бойынша олар вегетативтік жасушалардан судың аз мөлшерімен, липидтер мен кальций тұздарының ұлғаюымен ерекшеленеді, бұл спораның жоғары тұрақтылығына ықпал етеді. Спора түзу 18-20 сағат ішінде жүреді; микроағзалар спораға қолайлы ортаға түскенде 4-5 сағат ішінде вегетативтік қалыпқа түседі. Бактериялық жасушада тек бір спора ғана пайда болады, демек, споралар көбею органдары болып табылмайды, қолайсыз жағдайларды бастан кешіру үшін қызмет етеді. Споротүзетін аэробты бактериялар бацилла деп аталады, ал анаэробты - клостридия. Споралар формасы, өлшемі және жасушада орналасуы бойынша ерекшеленеді. Олар орталық, субтерминалды және терминалды болуы мүмкін. Сібір жарасы қоздырғышындаспора ортада орналасады, оның мөлшері жасушаның көлденең бөлігінен аспайды. Ботулизм қоздырғышының спорасы жасушаның соңына жақын орналасқан-субтерминальды және жасушаның енінен асады. Сіреспе қоздырғышында дөңгелек спорасы жасушаның соңында-терминалды және жасушаның енінен едәуір асады. 11.Кох әдісін қолданудың мақсаты мен кезеңдерін көрсетіңіз. Тығыз қоректік ортада санау. (Кох әдісі.) Бұл әдістің ерекшелігі өсіп тұрған колонияларды санайды. Бұл жерде әр колония бір клетканың бөлінуінің нәтижесі. Егу әдісі 3 кезеңнен тұрады: 1. Ерітіндіні дайындау. 2.Петри табақшасына тығыз қоректік ортаға егу. 3.Өскен колонияларды санау. Жалпы микробтық санды (Кох әдісі) және санитарлық индикативті микробтарды анықтау Ауадағы микроорганизмдердің сандық құрамы және олардың құрамы ауаның шаң бөлшектерімен немесе сұйық тамшылармен ластану дәрежесіне байланысты ауытқуы мүмкін. Құрамында микроорганизмдер бар және газ тәрізді ортада суспензияланған бұл ұсақ бөлшектер микробтық аэрозольдің әртүрлі фазаларын құрайды. Төзімділігі төмен патогенді микроорганизмдер әдетте науқасқа жақын жерде ғана беріледі (қызылша, тұмау, көкжөтел қоздырғышы), кокктар, споралар және төзімді микроорганизмдер (сібір жарасы, туберкулез және т.б.). шаң бөлшектері. Ауаның санитарлық-бактериологиялық жағдайын бағалау үшін келесі көрсеткіштер анықталады: Кох бойынша тұндыру және Кротов бойынша аспирация әдістері бойынша ауаның микробтық саны, қанды агарға ауаны қосу арқылы себу арқылы жасыл стрептококктың болуы. гентиан шегіргүлі (Гарроның ортасы), S. aureus анықтау үшін - сарысы - тұзды агарда, басқа патогенді бактерияларды анықтау үшін - сәйкес селективті қоректік орталар Кох әдісімен ауаның микробтық санын анықтау кезеңдері: 1 кезең. Ауа сынамасын алу. ЕПА бар стерильді Петри табақшасы ауа сынамасын алу орнында ашылады және 10 минут бойы инкубацияланады, содан кейін олар 370С температурада 48 сағат бойы жабылады және инкубацияланады. 2-кезең. Нәтижелерді есепке алу. Өскен колониялардың санына сәйкес, ауаның микробтық саны Омелянский формуласы бойынша есептеледі, оған сәйкес, көптеген микроорганизмдер ауданы 100 см 2 болатын қоректік ортаның бетіне 5 минут ішінде қонады деп есептеледі. 10 литр ауаның құрамында: Х = а х 100 х 5 х 1000/ в х 10 Х – 1 м3 ауадағы микробтар саны А – ыдыстағы өскен колониялар саны В – Петри табағының ауданы ПR2-ге тең 12.Дригальский әдісін қолдану мақсаты мен кезеңдерін сипаттап жазыңыз. Дригальский әдісі - сапалы әдіс болып саналады. Зерттелетін материалдан жекелеген колонияларды алу үшін зерттелетін материалды бірінші табақшаға шпательмен жағады, оттыққа шпательді күйдірмей, сол күйде 2, 3, 4 т.б. табақшаларға жағады. Осылай егу арқылы бірыңғай колония алуға болады. Бұл күнделікті микробиологиялық тәжірибеде кеңінен қолданылатын жетілдірілген әдіс. Оның мақсаты – аэробты және факультативті анаэробты бактериялардың таза дақылдарын бөліп алу және оларды анықтау. 13.Вейнберг әдісін қолдану мақсаты мен кезеңдерін сипаттап жазыңыз. Вейнберг әдісі - қатаң анаэробтардың таза дақылын алу үшін қолданылады. Вейнберг әдісінде зерттеу материалын Китта-Тароцци ортасына себеді, кейін Вейон-Виньян түтікшесіне сеуіп, Китта-Тароцци қоректік ортасына қайта себеді. Алдымен балқытылып, 42-45оС-қа дейін салқындатылған қантты етті- пептонды агары бар бірнеше пробиркалар дайындаймыз. Стерилденген Пастер пипеткасымен Китта-Троцци ортасынан материал алып, біріншы пробиркаға салып, мұқият араластырамыз, содан соң екінші пробиркаға, үшінші пробиркаға дәл осылай саламыз. Агарды қатайту үшін ағынды суық сумен тез салқындатамыз. Осының көмегімен агардың белгілі аймақтарында тірі микроб жасушалары бекітіледі. Агар-агары қатқанннан кейін, пробиркаларды микробтардың оқшауланған колониялары түзілуі үшін оптимальды температурада 1-2 күн дақылдайды. Әр пробирканың құрамын алу үшін Пастер пипеткасымен немесе Виньяль-Вейон трубкасымен алуға болады, бірақ ауа көпіршіктері жоқ екеніне көз жеткізу керек. Виньяль-Вейон трубкасының ұзындығы шамамен 30см және диаметрі 0,5-0,6 см. Олардың үстіңгі ұшы мақтамен жабылған тарылмалы, ал, төменгі ұшы капилляр түрінде ұзартылған. Пипетка толтырылғаннан кейін оның ұзартылған ұшы мөрленеді және өсіру үшін термостатқа орналастырады. 1-2 күннен кейін агарда анаэробты бактериялардың колонияларының өсуін байқаймыз. Оларды оқшаулау үшін трубканы белгілі бір дәрежеде қажетті құралдармен кеседі, сындырады. Ондағы колонияны бактериялық ілмекпен немесе инемен алып тиісты қоректік ортаға ауыстырады. |