ответы микра. Экзаменационные вопросы по дисциплине микробиология, вирусология
 Скачать 0.55 Mb.
|
|
Микробиологическая диагностика клебсиеллезных инфекций. Бактериологический метод (основной): посев на среду Эндо с последующей идентификацией выделенной культуры до вида и подвида. Микроскопический метод: окраска по Бурри-Гинсу с целью выявления капсулы. Молекулярно-биологический метод: ПЦР. Цитологический метод (для диагностики склеромы): обнаружение гигантских клеток Микулича в срезах и отпечатках пораженных тканей. Клетки Микулича – это макрофаги, в вакуолизированной цитоплазме которых находятся фагоцитированные палочки склеромы. 97. Кишечный дисбиоз. Причины формирования. Кишечный эубиоз – это эволюционно сложившееся качественное (видовое) и количественное соотношение симбионтной микрофлоры кишечника, поддерживающее гомеостаз здорового человека. Кишечный дисбиоз – клинико-лабораторный синдром, характеризующийся изменением качественного и/или количественного состава нормофлоры толстого кишечника. Этот синдром обычно вторичен, т.к. формируется на фоне какого-либо основного заболевания. Следовательно, тактика врача должна быть направлена на диагностику и лечение основного заболевания в сочетании с коррекцией дисбиоза. В официальной международной классификации болезней (МКБ-10) заболевания с названием «дисбактериоз» нет. За рубежом существует диагноз «синдром избыточного бактериального роста». Он ставится при обнаружении в 1 мл содержимого тонкой кишки >105 микроорганизмов и/или появлении в ней флоры, характерной для толстой кишки. Основные причины формирования кишечных дисбиозов: Недоношенность, внутриутробное инфицирование, бактериальные вагинозы у беременных женщин. Позднее прикладывание ребенка к груди, раннее искусственное вскармливание, длительное пребывание в родильном роме, частые ОРВИ, аллергические заболевания; у взрослых – неправильный режим питания. Патология желудочно-кишечного тракта микробной природы (кишечные инфекции, вирусный гепатит и др.) и немикробной природы (хронический гастрит, язвенная болезнь желудка, дисферментоз, заболевания печени, поджелудочной железы). Микробные заболевания других органов и тканей (сепсис, пневмония, гнойная хирургическая инфекция и др.). Длительная антибиотико-, химио- и гормонотерапия. Облучение, лучевая терапия, прием цитостатиков и иммунодепрессантов. Длительное пребывание в стационарах различного профиля, интернатах и, как следствие, колонизация (заселение) кишечника госпитальными штаммами микроорганизмов (золотистый стафилококк, клебсиеллы, синегнойная палочка и др.). 98. Микробиологическая диагностика кишечного дисбиоза, принципы коррекции. Материал на исследование: фекалии. Основной метод диагностики: бактериологический. «Чтобы отличить так называемые временные вариации состава микробиоты от дисбиоза необходимо проведение 2-3-кратных исследований с интервалом 1-2 дня» (цит. по Меньшикову В.В. «Методики клинических лабораторных исследований», 2009). Фекалии забирают в стерильный контейнер при помощи стерильной ложки, впаянной в крышку контейнера из средней или последней порции фекалий после естественной дефекации, у новорожденных – с пеленки или памперса. Материал необходимо доставить в лабораторию не позднее 2 часов от момента забора. Фекалии (1 г) помещают в стерильную пробирку с тиогликолевым буфером, обеспечивающим оптимальные условия для сохранения анаэробов. Затем производят десятикратные разведения фекалий в этом буфере от 10-1 до 10-9. Из разведений производят высевы пипеткой по 0,1 мл на соответствующие питательные среды. После термостатирования производят макро- и микроскопическое изучение выросших колоний, а также определяют количество микроорганизмов в 1 г фекалий. Принципы коррекции кишечных дисбиозов. Дието-, ферменто- и витаминотерапия – для регулирования процессов пищеварения и стимулирования реактивности организма. Препараты для восстановления нормальной микробиоты (эубиотики). Фаготерапия. Противогрибковые препараты. Иммунотропные препараты. Бактериотерапия. 1. Пробиотики –препараты на основе живых микроорганизмов. Их назначают при значительном снижении количества резидентных микроорганизмов. К пробиотикам относят: а) монокомпонентные препараты из представителей резидентной ки- шечной микрофлоры: - бифидумбактерин – из одного или нескольких штаммов бифидобактерий (для лечения детей и взрослых). Особенно показано применение бифидумбактерина детям первого года жизни. Бифидобактерии: ▪ расщепляют молочный сахар до кислоты, и тем самым создают в кишечнике кислую реакцию среды, что подавляет размножение гнилостных бактерий; ▪ улучшают всасывание кальция и витамина Д в кишечнике, что способствует профилактике рахита у младенцев; ▪ участвует в энтеральном синтезе витаминов группы В, К и др.; ▪ стимулируют иммунную систему организма. - лактобактерин – из одного или нескольких штаммов лактобактерий; - колибактерин – из штамма бактерий E.coli М-17. Назначают детям старше 6 месяцев и взрослым. Особенно эффективен при наличии значительного количества лактозонегативных и гемолитических эшерихий, а также для лечения постдизентерийных дисбактериозов, длительной диареи. Обладает выраженным антагонистическим действием. б) комбинированные препараты пробиотиков: например, линекс из лактобактерий и энтерококков; бификол из бифидобактерий и E.coli М-17. в) препараты из напатогенных бацилл применяют для уменьшения из- быточного роста микроорганизмов: бактисубтил содержит бактерии штамма Bacillus cereus IP 5832 (109 спор). Препарат назначают при острой и хронической диареи различного генеза (включая инфекционную), кишечном дисбактериозе (особенно после лечения антибиотиками широкого спектра действия), энтерите, энтероколите; для профилактики и лечения нарушений функций кишечника, вызванных химио- или радиотерапией. Пребиотики –вещества, являющиеся питательным субстратом для нормальной флоры кишечника и стимулирующие ее рост и размножение: хилак-форте, лактулоза и др. Эффективность действия пробиотиков значительно усиливается при совместном применении с пребиотиками. Синбиотики –комбинация про- и пребиотиков. Фаготерапия. Используют при значительном увеличении в кишечнике условнопатогенных микроорганизмов. Назначение бактериофагов для лечения дисбиозов возможно только после предварительного определения чувствительности выделенной культуры к соответствующему бактериофагу. Все бактериофаги назначают по инструкции, прилагаемой к препарату. Стафилококковый бактериофагприменяют при дисбактериозах со значительным выделением из фекалий стафилококка (более 104 в 1 г). Назначают детям и взрослым. Бактериофаг псевдомонас аэругиноза применяют при дисбактериозах, обусловленных синегнойной палочкой. Назначают детям и взрослым. Клебсиеллезный поливалентный бактериофаг и бактериофаг клебсиелл пневмонии применяют при увеличении количества клебсиелл. Коли-протейный бактериофаг–смесь бактериофагов, активных в отношении наиболее распространенных диареегенных эшерихий, а также протеев. Пиобактериофаг содержит бактериофаги, активные в отношении стафилококков, стрептококков, энтерококков, клебсиелл, эшерихий, протеев, синегнойной палочки. Интестибактериофаг содержит бактериофаги, лизирующие шигеллы, сальмонеллы, патогенные эшерихии, энтерококки, стафилококки, протей, синегнойную палочку. Противогрибковые препараты: нистатин, флуконазол и др. применяют при грибковых (чаще кандидозных) дисбактериозах. Иммунотропные препараты: комплексный иммуноглобулиновый препарат (КИП) содержит иммуноглобулины человека, в основном IgА, IgМ, IgG против патогенной и условно-патогенной микробиоты, эффективен при коррекции дисбиоза кишечника, обусловленного условно-патогенной микрофлорой. 99. Характеристика возбудителей брюшного тифа и паратифов. Возбудителей брюшного тифа относят к роду Salmonella, который включает более 2500 серотипов. Современная классификация сальмонелл основана на строении их ДНК и включает только 2 вида, из которых патогенным для человека является вид Salmonella enterica с 6 подвидами и множеством серотипов в каждом. Это связано с изменчивостью генов, кодирующих синтез белков (флагеллинов) жгутиков. По современной номенклатуре возбудителя брюшного тифа, как и возбудителей паратифов, относят к подвиду еntericа и обозначают как S.еntericа еntericа, серотип typhi. Однако, во избежание путаницы, используют следующие названия возбудителей, соответственно их серотипу: возбудитель брюшного тифа – S.typhi; возбудитель паратифа А – S.paratyphi A; возбудитель паратифа В – S.paratyphi B; - возбудитель паратифа С – S.paratyphi C. Морфология: грамотрицательные палочки средних размеров, перитрихи, спор и капсул не образуют. Культуральные свойства: растут на простых питательных средах: МПА (S-колонии), МПБ, 20% желчном бульоне (диффузно-мутящий рост). На дифференциально-диагностических средах Плоскирева и Эндо все виды сальмонелл образуют бесцветные или цвета среды колонии, т.к. не ферментируют лактозу, на висмут-сульфитном агаре возбудители брюшного тифа растут в виде черных колоний с металлическим блеском и почернением подлежащей среды. Биохимические свойства: сальмонеллы биохимически менее активны, чем эшерихии. S.typhi ферментирует углеводы до кислоты, S.рaratyphi А и В до кислоты и газа. Изучение биохимических свойств сальмонелл проводят с помощью энтеротест-систем. Антигенная структура сальмонелл: О – соматический антиген; Н – жгутиковый антиген; К – оболочечные антигены. В системе оболочечных антигенов у S.typhi присутствует Vi-антиген (у вирулентных штаммов), являющийся рецептором для Vi-бактериофагов. На основании определения основных антигенов сальмонелл Ф. Кауфман и рак. Уайт построили их классификацию (табл.1). Согласно этой классификации сальмонеллы делят на серогруппы (по наличию общих О-антигенов), которые обозначают буквами латинского алфавита: A, B, C и т.д. Согласно схеме Кауфмана-Уайта, S.typhi относят к группе Д, S.рaratyphi A, S.paratyphi B, S.paratyphi C к группам А, В, С соответственно. Дифференциация серотипов сальмонелл внутри группы проводится по Н-антигену. Факторы патогенности сальмонелл: Адгезины для прикрепления сальмонелл к энтероцитам с помощью pili. Инвазины обеспечивают проникновение бактерий в макрофаги лимфоидной ткани тонкого кишечника (пейеровы бляшки) и размножение в них. Vi и K-антигены обеспечивают защиту от фагоцитоза. Эндотоксин (ЛПС). R-плазмиды (кодируют формирование устойчивости к нескольким антибиотикам). Острова патогенности (хромосомные гены, которые кодируют способность к адгезии, инвазии, защите от фагоцитоза). Механизмы патогенного действия эндотоксина сальмонелл на макроорганизм: Вызывает выработку в организме веществ, обусловливающих лихорадочное состояние. Приводит к расстройствам гемодинамики, резкому снижению артериального давления. Оказывает токсическое действие на нервную систему. Вызывает выраженную лейкопению. Активирует синтез простагландинов, что приводит к повышению цАМФ, гиперсекреции солей и воды из клеток в просвет кишечника. Возникает диарея. Брюшной тиф – острое антропонозное кишечное инфекционное заболевание, характеризующееся поражением лимфатического аппарата тонкого кишечника, паренхиматозных органов, бактериемией, лихорадкой с явлениями общей интоксикации (головная боль, помрачение сознания, бред, галлюцинации) и розеолезными высыпаниями на коже. Особенности современного течения брюшного тифа: менее выраженная симптоматика; короткий период лихорадки; редко возникает status typhosis (помрачение сознания, бред, галлюцинации); частые рецидивы; преобладают стертые и абортивные формы (короткое течение, отсутствие розеолезных высыпаний и поражений внутренних органов). Источники инфекции: больной человек или бактерионоситель. Путь заражения: алиментарный при употреблении инфицированной воды и молочных продуктов. Основную роль в заражении брюшным тифом играют бактерионосители, которые могут выделять сальмонеллы в течение многих лет. Патогенез: из ротовой полости сальмонеллы попадают в тонкий кишечник, где внедряются в энтероциты, лимфатический аппарат тонкого кишечника, а затем попадают в кровь (бактериемия и интоксикация). С током крови сальмонеллы попадают в паренхиматозные органы: печень, почки, селезенка, костный мозг, где они размножаются в макрофагах. Далее происходит выделение сальмонелл с фекалиями, мочой и другими биологическими жидкостями. Выделение бактерий с желчью приводит к повторному попаданию их в тонкий кишечник и внедрению в лимфатический аппарат. Развивается аллергическая воспалительная реакция замедленного типа с образованием язвенных поражений стенки тонкой кишки. Клиника: подъем температуры, лихорадка, интоксикация, увеличение печени и селезенки. Вследствие образования язвенных дефектов в стенке тонкой кишки – развитие кишечных кровотечений и перфорации стенки. Клиника паратифов отличается более острым началом и менее тяжелым течением. Материал на исследование: кровь (в стадии бактериемии на первой неделе заболевания), фекалии, моча, желчь, сыворотка крови (со второй недели заболевания). 100. Микробиологическая диагностика брюшного тифа и брюшнотифозного носительства. Бактериологический метод: посев крови производят на желчный бульон, фекалии, мочу и желчь засевают на плотные питательные среды. Идентификацию чистой культуры проводят: а) по биохимическим признакам (до рода) с помощью энтеротест-систем; б) по антигенным признакам (до серогруппы, а затем до серотипа) в РА на стекле с диагностическими сыворотками; в) фаготипированием (в эпидемиологических целях для установления ис- точника инфекции). Серологический метод: со 2-й недели заболевания сыворотку крови больного исследуют с помощью ИФА и в РНГА с O- и Vi-эритроцитарными диагностикумами. Брюшной тиф – это заболевание, при котором нередко после выздоровления формируется носительство в связи с длительным сохранением сальмонелл в различных органах, чаще в желчном пузыре. Современной особенностью эпидемиологии брюшного тифа является: ▪ увеличение частоты завоза инфекции с эндемичных территорий; ▪ высокий эпидемиологический риск за счет лиц без определенного места жительства, среди которых регистрируется высокая заболеваемость брюшным тифом. С целью выявления брюшнотифозных бактерионосителей обследуют: а) лиц, переболевших брюшным тифом и паратифом; б) лиц, бывших в контакте с больными брюшным тифом и паратифом; в) здоровых лиц (работников пищевых, детских и лечебных учреждений, а также учреждений системы водоснабжения); г) лиц с лихорадкой неясной этиологии более 5 дней. Микробиологическая диагностика брюшнотифозного носительства. Серологический метод: а) ИФА – для определения IgG, как маркеров ранее перенесенного заболевания; б) РНГА с эритроцитарным Vi-диагностикумом. Vi-антитела быстро исчезают после полного выздоровления, но при наличии брюшнотифозного носительства присутствуют постоянно. Все лица, сыворотки которых дали положительный результат в ИФА и РНГА, подлежат тщательному многократному бактериологическому обследованию. Бактериологический метод проводится по обычной схеме (см. выше бактериологическую диагностику брюшного тифа). На исследование забирают фекалии и мочу 5-кратно с интервалом 1-2 дня и однократно желчь. Окончательный диагноз брюшнотифозного носительства может быть установлен только после выделения возбудителя из исследуемого материала. Специфическая профилактика брюшного тифапроводится по эпидемическим показаниям химической сорбированной брюшнотифозной вакциной, обогащенной Vi-антигеном (малоэффективна). Существует фагопрофилактика с использованием брюшнотифозного бактериофага. 101. Внутрибольничные (госпитальные) сальмонеллезы. Основным возбудителем внутрибольничных сальмонеллезов является S.typhimurium, который отличается множественной устойчивостью к антибиотикам, дезинфектантам, антисептикам и не лизируется типовыми сальмонеллезными бактериофагами. |