ответы микра. Экзаменационные вопросы по дисциплине микробиология, вирусология

• Название: Экзаменационные вопросы по дисциплине микробиология, вирусология
• Анкор: ответы микра
• Дата: 08.05.2023
• Размер: 0.55 Mb.
• Имя файла: MIKROB2021gotovye.docx
• Тип: Экзаменационные вопросы; #1115625
• страница: 2 из 17

КЛЕТОЧНАЯ СТЕНКА представляет собой биополимер – пептидогликан (муреин), являющийся плотной структурой. По строению клеточной стенки грамположительные и грамотрицательные бактерии существенно отличаются друг от друга (см. занятие №2).

Функции клеточной стенки:

• 
  придает клетке постоянную форму;
  
• 
  защищает клетку от механических повреждений извне и выдерживает значительное внутреннее давление;
  
• 
  участвует в транспорте метаболитов;
  
• 
  несет на своей поверхности рецепторы для бактериофагов (вирусов бактерий) и различных химических веществ.
  

L-формы бактерий, их медицинское значение.

L-формы (от названия Института им. Д. Листера, где они впервые были изучены) – это бактерии, полностью или частично лишенные клеточной стенки, но способные к размножению. Имеют своеобразную морфологию в виде крупных и мелких сферических клеток.

L-трансформации могут подвергаться все бактерии, имеющие клеточную стенку.

L-трансформация происходит под действием различных индуцирующих факторов (антибиотики, угнетающие биосинтез клеточной стенки, лизоцим и др.). В результате бактерии становятся устойчивыми к некоторым антибиотикам.

L-трансформация может быть обратимой и необратимой. Обратимая – наблюдается при сохранении генетического контроля синтеза клеточной стенки и тогда бактерии реверсируют в исходную форму.

L-формы могут образовывать многие возбудители инфекционных заболеваний. Это одна из причин хронизации заболеваний и форм приспособления бактерий к неблагоприятным условиям существования.

ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКАЯ МЕМБРАНА (ЦПМ) располагается под клеточной стенкой. Представляет собой трехслойную мембрану. Состоит из двойного слоя липидов и белков, пронизывающих липидные слои.

Функции ЦПМ:

• 
  является основным осмотическим и онкотическим барьером;
  
• 
  участвует в энергетическом метаболизме и активном транспорте питательных веществ в клетку, т.к. является местом локализации пермеаз и ферментов окислительного фосфорилирования;
  
• 
  участвует в процессах дыхания и деления;
  
• 
  участвует в синтезе компонентов клеточной стенки (пептидогликана); - участвует в выделении из клетки токсинов и ферментов.
  

ЦПМ выявляется при электронной микроскопии.

9. 
   Особенности строения клеточной стенки кислотоустойчивых бактерий. Окраска по Цилю-Нильсену, механизм окраски.
   

КИСЛОТОУСТОЙЧИВЫЕ БАКТЕРИИ имеют особый химический состав клеточной стенки с повышенным количеством липидов и жирных кислот (миколовой и миколеновой).

К ним относят:

Mycobacterium tuberculosis – возбудитель туберкулеза;

Mycobacterium leprae – возбудитель лепры;

Mycobacterium africanum – возбудитель эндемического туберкулеза в Африке;

Mycobacterium scrofulaceum – возбудитель лимфаденитов у детей;

Mycobacterium smegmatis – нормальный симбионт мочеполовой системы мужчин.

Кислотоустойчивые бактерии плохо воспринимают красители. Для их окраски и дифференцировки от других бактерий используют метод Циля-Нильсена.

Окраска по Цилю-Нильсену. Механизм окраски.

• 
  на фиксированный мазок накладывают полоску фильтровальной бумаги и наносят карболовый фуксин Циля. Над пламенем спиртовки подогревают мазок 2-3 раза до появления пара;
  
• 
  бумагу снимают, препарат обесцвечивают 5% раствором серной кислоты, погружая в стаканчик с кислотой 2-3 раза;
  
• 
  промывают водой, окрашивают метиленовым синим 3-5 минут; - промывают водой, высушивают и микроскопируют.
  

Кислотоустойчивые бактерии окрашиваются в красный цвет, кислотоподатливые – в синий.

Механизм окраски:

При обработке препарата карболовым фуксином Циля все клетки окрашиваются в красный цвет. При последующем обесцвечивании серной кислотой кислотоустойчивые бактерии из-за особенностей своего химического состава удерживают краситель. Кислотоподатливые – обесцвечиваются, поэтому при дальнейшем окрашивании метиленовым синим воспринимают краситель и приобретают синий цвет.

10. Цитоплазма бактерий, ее составные, их функции.

Цитоплазма занимает основной объем бактериальной клетки. Представляет собой аморфный матрикс, содержащий различные органические соединения, органеллы и включения.

• 
  нуклеоид – внутренняя зона цитоплазмы. Представлен одной кольцевой молекулой ДНК, содержащей около 2000 генов. Нуклеоид не имеет ядерной оболочки, ядрышек и основных белков (гистонов). Содержит одну хромосому, имеет гаплоидный (одиночный) набор генов, поэтому клетка не способна к митотическому делению. Нуклеоид выявляется специальными методами окраски
  

(по Романовскому-Гимзе и др.) и электронной микроскопией;

• 
  плазмиды – факторы внехромосомной наследственности, автономно присутствующие в цитоплазме в виде небольших молекул ДНК. Гены плазмид могут придавать бактериям новые свойства, способствующие их выживанию. Особое значение в медицине имеют плазмиды, обеспечивающие устойчивость бактерий к антибиотикам. У патогенных бактерий плазмиды кодируют факторы, способствующие развитию инфекционного процесса;
  
• 
  рибосомы – состоят из двух субъединиц, но отличаются от рибосом эукариот молекулярной массой. Функция рибосом – синтез белка. Индикация 16S рРНК бактерий является основой метода пиросеквенирования (см. занятие №1);
  
• 
  мезосомы – являются производными ЦПМ при впячивании ее участков в цитоплазму. Функции: участвуют в энергетическом метаболизме, в процессах деления и спорообразования;
  
• 
  включения образуются в процессе жизнедеятельности клетки и выполняют резервную (трофическую и энергетическую) функцию. Они представлены гранулами гликогена, крахмала, каплями жира, минеральными веществами – серой, кальцием, железом и др., а также зернами волютина. Зерна волютина по химической природе полифосфаты – являются запасным источником энергии. Для обнаружения зерен волютина используют метод окраски по Нейссеру. В результате окраски бактерии приобретают нежно-желтый цвет, а зерна волютина – темно-синий.
  

Зерна волютина имеют: Spirillum volutans– сапрофит; Corynebacterium diphtheriaе; Corynebacterium xerosis; Corynebacterium ulcerans – возбудитель дифтериеподобных поражений кожи.

11. Поверхностные структуры бактериальной клетки, их функции.

Бактерии подразделяют на подвижные и неподвижные. Органами движения у бактерий являются ЖГУТИКИ. Они состоят из белка флагеллина, который по своей структуре относят к сократительным белкам типа миозина. Основанием жгутика является базальное тельце, состоящее из системы дисков, «вмонтированных» в ЦПМ и клеточную стенку. Длина жгутика больше длины самого микроба.

По числу жгутиков и их расположению бактерии подразделяют:

• 
  монотрихи, имеющие на конце клетки один жгутик (Vibrio choleraе);
  
• 
  лофотрихи, имеющие пучок жгутиков на одном из концов клетки (Helicobacte rpylori);
  
• 
  амфитрихи, имеющие жгутики на обоих концах клетки (Spirillum volutans);
  
• 
  перитрихи, имеющие жгутики по всему периметру клетки (Escherichia coli, Salmonella typhi).
  

Жгутики очень тонкие, поэтому их можно обнаружить только специальной обработкой, при которой достигается увеличение их размера. Жгутики выявляют окраской по Морозову, электронной микроскопией. Движение микробов наблюдают с помощью темно-полевой или фазово-контрастной микроскопии. Подвижность можно определить по характеру роста бактерий в полужидком агаре.

ПИЛИ (ворсинки, фимбрии) – тонкие нити белковой природы, покрывающие поверхность бактериальных клеток. Не выполняют двигательную функцию. Различают пили первого и второго типа.

Пили первого (общего) типа имеются у большинства бактерий. Осуществляют прикрепление (адгезию) бактерий к определенным клеткам организма.

Адгезия является начальной стадией любого инфекционного процесса.

Пили второго типа, F-пили (конъюгативные или половые) есть у бактерий, имеющих специальную плазмиду. Их количество невелико – 1-3 на клетку.

Половые пили представляют собой длинные пустые трубочки и выполняют следующие функции:

• 
  участвуют в передаче генетического материала от одной клетки к другой при конъюгации бактерий;
  
• 
  являются рецепторами для адсорбции специфических вирусов бактерий – бактериофагов.
  

12. Спорообразование у бактерий и его значение. Стадии спорообразования.

СПОРООБРАЗОВАНИЕ – это способ сохранения вида в неблагоприятных условиях внешней среды, но не способ размножения. Споры устойчивы к высокой температуре, УФ-облучению, радиации, действию химических веществ, поэтому могут сохраняться в почве десятки лет (споры возбудителей сибирской язвы и столбняка). Споры круглой или овальной формы могут располагаться в клетке центрально, субтерминально (ближе к концу палочки) и терминально (на конце палочки). Спора образуется в цитоплазме в течение 18-20 часов. Прорастание спор в вегетативные клетки начинается при их попадании в благоприятные условия и длится 4-5 часов.

Стадии спорообразования:

1. 
   Подготовительная. В цитоплазме бактерий образуется уплотненный участок, не имеющий свободной воды, называемый «спорогенной зоной». В ней содержится нуклеоид.
   
2. 
   Стадия предспоры. Вокруг спорогенной зоны образуется оболочка из двойной ЦПМ.
   
3. 
   Между двумя ЦПМ формируется кортекс, состоящий из пептидогликана. 4. Стадия созревания. С внешней стороны наружной ЦПМ образуется оболочка споры с повышенным содержанием солей кальция и липидов. Затем вегетативная часть клетки лизируется, освобождая спору.
   

Споры устойчивы во внешней среде за счет:

• 
  низкого содержания воды, которая находится в связанном состоянии;
  
• 
  наличия многослойной оболочки с повышенным содержанием солей кальция и липидов.
  

Споры обнаруживают в бактериальной клетке специальной окраской по методу Ожешко (спора окрашивается в ярко-красный цвет, вегетативная часть бактерии – в синий), или с помощью фазово-контрастной микроскопии.

Спорообразующие бактерии: Bacillus anthracis, Clostridium perfringens, Clostridium tetani, Clostridium botulinum

13. Химический состав бактериальной клетки, его особенности.

Вода составляет более 80% массы микробной клетки и находится в свободном и связанном состоянии (коллоидно-связанная и ионно-связанная).

Функции свободной воды:

является универсальным растворителем; обеспечивает оптимальные условия для переноса метаболитов; обеспечивает процессы осмоса и диффузии.

Связанная вода входит в состав молекул органических и неорганических соединений и является структурным элементом цитоплазмы бактерий.

Сухой остаток бактериальной клетки включает в себя неорганические и органические вещества.

К неорганическим веществам относят: углерод, азот, фосфор, калий, магний, натрий, серу, железо, медь, цинк и др. Они участвуют в процессах метаболизма клетки. Некоторые неорганические вещества (железо, магний) стимулируют рост большинства болезнетворных бактерий.

К органическим веществам относят: белки, углеводы, липиды и нуклеиновые кислоты.

Белки составляют 50-80% сухого веса бактерий, выполняют строительную и ферментативную функции, участвуют в транспорте питательных веществ, являются экзотоксинами.

Углеводы составляют 12-18% сухого веса клетки, качественно многообразны и представлены моносахаридами, дисахаридами, полисахаридами и др. Основная масса углеводов представлена полисахаридами. Углеводы обеспечивают энергетику клетки, входят в состав эндотоксинов и некоторых структурных компонентов бактериальной клетки.

Липиды – их количество варьирует в широких пределах (9-41%) в зависимости от видовой и родовой принадлежности бактерий. Липиды, так же, как и углеводы, качественно многообразны и представлены фосфолипидами, нейтральными жирами, свободными жирными кислотами. В бактериальной клетке преобладают фосфолипиды. Липиды придают устойчивость бактериальной клетке во внешней среде, обеспечивают энергетику клетки при недостатке углеводов, выполняют строительную функцию, входят в состав эндотоксинов, обладают пирогенными свойствами (повышение температуры тела при инфекционном заболевании).

Нуклеиновые кислоты представлены ДНК (3%) и РНК (16%), структура и функции которых сходны с нуклеиновыми кислотами эукариот. Процентное содержание Г+Ц в ДНК, характерное для отдельных видов, родов и семейств, используется в построении систематики микроорганизмов.

14. Питание бактерий. Механизмы поступления питательных веществ в клетку.

Общий тип питания у бактерий голофитный, т.е. через всю поверхность клетки. Основным барьером, регулирующим поступление питательных веществ в клетку, является ЦПМ, т.к. в ней очень мелкие поры, непроницаемые для крупных молекул.

Механизмы поступления питательных веществ в клетку:

• 
  простая диффузия происходит по градиенту концентрации, без затрат энергии. Таким путем в клетку проникают вода и газы (0₂, Н₂, N₂);
  
• 
  облегченная диффузия – по градиенту концентрации, без затрат энергии, с помощью специальных белков-переносчиков – пермеаз; активный механизм осуществляется против градиента концентрации с затратой энергии при помощи белков-переносчиков – пермеаз. Имеется два типа активного транспорта: 1 – «накачивание» небольших молекул в клетку с созданием концентрации, в 100-1000 раз превышающей концентрацию этого вещества снаружи клетки. 2 – транслокация (перенос) радикалов, сопровождающаяся химической модификацией переносимого вещества (фосфорилирование глюкозы, фруктозы).
  

15. Классификация микроорганизмов по типам питания и способам получения энергии. Сапрофиты. Паразиты.

Классификация бактерий по типам питания и способам получения энергии:

аутотрофы (лат. autos – сам, trophe – питание) – используют для построения своих клеток неорганический углерод в виде СО₂;

гетеротрофы (лат. heteros – другой, «питающийся за счет других») – усваивают углерод из сложных органических соединений.

Для накопления своей биомассы бактериям, помимо источника углерода, требуется источник энергии. Энергия запасается бактериальной клеткой в форме молекул АТФ. Бактерии, для которых источником энергии является солнечный свет, называются фототрофами. Бактерии, которые для биосинтеза используют энергию химических реакций, называются хемотрофами. Хемотрофы получают энергию за счет окислительно-восстановительных реакций. В патологии человека ведущую роль играют хемогетеротрофы.

К хемогетеротрофам относят:

• 
  сапрофиты (от греч. sapros – гнилой и phyton – растение) – источником питания для них служит мертвый органический материал. Например: клостридии.
  
• 
  паразиты (от греч. parasitоs – нахлебник) – получают питательные вещества от макроорганизма и могут наносить ему вред. Различают облигатные и факультативные паразиты. Облигатные паразиты не могут жить вне клеток организма. Например: риккетсии, хламидии. Факультативные паразиты могут существовать внеклеточно и размножаться на питательных средах in vitro.
  

16. Классификация питательных сред по назначению.

1) транспортные – для первичного посева и транспортировки исследуемого материала в лабораторию;

2) элективные (селективные) – среды для избирательного культивирования бактерий определенного вида (1% пептонная вода и щелочной агар для холерных вибрионов, среда Плоскирева – для возбудителей брюшного тифа и дизентерии);

3) дифференциально-диагностические – для дифференциации отдельных видов бактерий по ферментативным свойствам. Например: среда Эндо – для кишечных бактерий.

4) специальные – для выделения и культивирования бактерий, не растущих на простых средах (сывороточный агар, кровяной агар);

5) накопительные – для накопления возбудителя при его низкой концентрации в материале от больного (селенитовая среда – для культивирования возбудителей дизентерии).

Состав и механизм работы среды Эндо.

Состав: МПА + 1% лактозы + индикатор (фуксин, обесцвеченный гипосульфитом натрия). Дифференциация кишечных бактерий основана на различиях в способности расщеплять лактозу. Кишечные палочки расщепляют лактозу до кислоты, которая нейтрализует гипосульфит натрия. В результате фуксин из связанного состояния переходит в свободное. Колонии кишечных палочек окрашиваются в красный цвет (лактозопозитивные). Возбудители брюшного тифа и дизентерии не расщепляют лактозу, поэтому дают на среде Эндо бесцветные (лактозонегативные) колонии.

17. Классификация бактерий по типу дыхания. Способы создания условий для культивирования анаэробных бактерий.

Сущность дыхания у микроорганизмов – получение энергии, образующейся в процессе прямого биологического окисления веществ кислородом или путем ферментативного метаболизма. Накопление энергии происходит в мезосомах.

В соответствии с потребностями в кислороде бактерии классифицируют на основные группы:

- Облигатные (строгие) аэробы – микроорганизмы, которые растут и размножаются только в присутствии кислорода. Например: Vibrio cholerae, Pseudomonas aeruginosa.

- Облигатные анаэробы – микроорганизмы, которые растут и размножаются только без доступа кислорода. Например: Clostridium botulinum, Clostridium tetani, Bacteroides fragilis.

- Факультативные анаэробы – микроорганизмы, которые могут расти и размножаться как в присутствии кислорода, так и в бескислородных условиях. Например: Escherichia coli, Salmonella typhi, Mycobacterium tuberculosis.

Микроаэрофильные бактерии – микроорганизмы, которые растут и размножаются при повышенном содержании СО2 и низком содержании О2. Например: Helicobacter pylori, Campylobacter coli.

Способы создания анаэробных условий:

1) механическое удаление воздуха из анаэростата с последующим заполнением газовой смесью (80% азота, 10% водорода, 10% углекислого газа);

2) использование газогенераторных пакетов с набором специальных реагентов (боргидрит натрия, винная кислота, бикарбонат натрия) для создания бескислородной газовой среды в анаэростате.

18. Рост и размножение бактерий.

Рост бактерий – это увеличение линейных размеров и массы микробной клетки.

Размножение бактерий – это увеличение количества особей в популяции за счет поперечного деления, реже путем почкования.

Интервал времени, за который число клеток удваивается, называется временем генерации (Т-генерации). Для большинства бактерий время генерации составляет 20-30 мин., у возбудителя туберкулеза – 24 часа.

Популяция бактерий – совокупность особей одного вида, сформировавшаяся в определенных условиях внешней среды.

Характеристика роста бактериальной популяции на плотных и жидких питательных средах.

Популяция бактерий, развившаяся из одной микробной клетки на плотной питательной среде, называется колонией.

Культура бактерий – популяция одного вида микроорганизмов.

Для учета количества жизнеспособных клеток в культуре определяют число колониеобразующих единиц в 1 мл материала (КОЕ/мл).

Колонии характеризуют по следующим признакам:

1. 
   по размеру: мелкие - 1-2 мм; средние - 2-4 мм; крупные - более 4 мм;
   
2. 
   по форме: круглые или неправильной формы;
   
3. 
   по рельефу: выпуклые, уплощенные;
   
4. 
   по характеру поверхности: гладкие или шероховатые;
   
5. 
   по характеру краев: ровные, изрезанные, волнистые;
   
6. 
   по оптическим свойствам: прозрачные, полупрозрачные, непрозрачные;
   
7. 
   по цвету: бесцветные или пигментированные (золотистые, красные, синезеленого цвета и др.);
   
8. 
   по запаху, например, колонии синегнойной палочки имеют запах жасми-
   

на, фиалки, карамели;

9. 
   по консистенции: сухие, влажные, слизистые.
   

Гладкие колонии с ровными краями обозначаются как «S»-колонии (англ. smooth – гладкие), шероховатые с изрезанными краями - «R»-колонии (англ. rough – шероховатые). Внешний вид колоний у некоторых бактерий настолько характерен, что может служить одним из дифференциальных признаков при их идентификации. Например, R-колонии возбудителя чумы (Yersinia pestis) сравнивают с «кружевными платочками», т.к. они имеют плотный центр и прозрачные волнистые края, R-колонии возбудителя сибирской язвы (Bacillus anthracis) напоминают «гриву льва».

Характер роста микроорганизмов в жидкой питательной среде зависит от скорости деления и типа дыхания бактерий и может быть:

1. 
   диффузно-мутящий (Staphylococcus aureus, Escherichia coli);
   
2. 
   придонный или придонно-пристеночный (Streptococcus pyogenes);
   
3. 
   поверхностно-пленчатый (Vibrio choleraе, Mycobacterium tuberculosis).
   

Рост микроорганизмов в жидкой питательной среде.

Некоторые виды возбудителей дают характерный тип роста в жидкой питательной среде. Например, Y.pestis образует на поверхности пленку со спускающимися вниз тяжами (нитями) - «чумные сталактиты»; B.anthracis образует придонный осадок в виде «комочка ваты».

19. Влияние физических факторов на микроорганизмы.

1. 
   Ультразвук. Под его действием в цитоплазме бактерий образуются кавитационные полости, заполненные парами жидкости под высоким давлением до 10 000 атм. Это приводит к разрушению цитоплазматических и оболочечных структур клетки.
   

Практическое применение: для стерилизации вакцин, жидких пищевых продуктов и др.

2. 
   Ультрафиолетовый свет – повреждает ДНК микробной клетки. Действие УФ-света на бактерии было доказано опытом Бухнера: в чашку Петри с МПА делают посев культуры микроорганизмов, например, S.typhi «сплошным газоном». На посев накладывают черную бумагу с вырезанными буквами, составляющими какое-либо слово, например, «typhus» и подвергают его действию прямых солнечных лучей в течение 1 часа. После этого черную бумагу снимают и ставят чашку на сутки в термостат при температуре 37⁰С. Рост культуры микробов наблюдается только на тех участках среды, которые были защищены от действия УФ-лучей. Практическое применение УФ-лучей: стерилизация воздуха в операционных, родильных залах, палатах для новорожденных, в бактериологических лабораториях и др.
   
3. 
   Гамма-излучение вызывает повреждение белков и нуклеиновых кислот микробной клетки (микробицидное действие). Практическое применение: для стерилизации одноразовых шприцев, одноразовой пластиковой микробиологической посуды, перевязочного материала, систем для переливания крови.
   
4. 
   Высокая температура – вызывает денатурацию белков и инактивацию ферментов микроорганизмов. Практическое применение: для стерилизации различных объектов.
   

Стерилизация или обеспложивание (лат. sterilis - бесплодный) – полное уничтожение всех микроорганизмов и их спор в различных объектах (хирургические инструменты, перевязочный материал, питательные среды и др.).

20. Методы стерилизации, аппаратура.

Физический:

1. 
   Прокаливание в пламени спиртовки. Этот способ имеет ограниченное применение, в частности, для стерилизации бактериологических петель.
   
2. 
   Сухим жаром в печи Пастера (воздушный стерилизатор). Режим стерилизации: 180°С, 1 час. Стерилизуют стеклянную посуду (чашки Петри, пипетки, пробирки), хирургические инструменты.
   
3. 
   Паром под давлением в автоклаве.
   

Параметры автоклавирования выбирают в зависимости от свойств материала. Чаще используют следующие режимы: 1 атм (121⁰С), 1,5 атм (125⁰С), 2 атм (134⁰С). При таких режимах вегетативные формы микробов погибают в течение нескольких минут, а споры за 20-30 минут.

4. 
   Стерилизация УФ-облучением. Применяется для стерилизации воздуха в микробиологических лабораториях, родильных залах, палатах для новорожденных, операционных, процедурных кабинетах и др. Ее проводят ультрафиолетовыми бактерицидными лампами различной мощности.
   

2. 
   Химический метод стерилизации основан на использовании токсичных газов: оксида этилена, формальдегида и др. Эти вещества инактивируют ферменты и нуклеиновые кислоты микроорганизмов. Химическая стерилизация проводится в специальных камерах при температуре газа от 20 до 60⁰С. Практическое применение: стерилизация оптических приборов, предметов медицинского назначения из полимерных материалов.
   
3. 
   Механический метод стерилизации (фильтрование) основан на механической задержке микроорганизмов и их спор мелкопористыми фильтрами с определенным диаметром пор. В микробиологической промышленности и в лабораторной практике широко применяется фильтрация материала через асбестовые и нитроцеллюлозные фильтры. Фильтрование используют для стерилизации биологических препаратов, не выдерживающих нагревания (сывороточные препараты, антибиотики, бактериальные экзотоксины и др.).
   

21. Дезинфекция. Химические вещества, используемые для дезинфекции.

Дезинфекция (от франц. приставки des и лат. infectio – заражение) – это комплекс мероприятий, направленных на уничтожение и удаление возбудителей инфекции из объектов окружающей среды. Дезинфекция отличается от стерилизации по конечному результату. Путем стерилизации уничтожаются все виды микроорганизмов и их споровые формы. При дезинфекции погибают только вегетативные формы болезнетворных микроорганизмов.

Для проведения дезинфекции обычно используют химические дезинфицирующие средства. Выбор дезинфицирующего средства, а также способ его применения определяются особенностями обеззараживаемого объекта и биологическими свойствами материала.
Различают профилактическую, текущую и заключительную дезинфекцию.

Химические вещества, используемые для дезинфекции:

1. 
   Хлорсодержащие соединения.
   
2. 
   Перекисные соединения (перекись водорода в различных концентрациях).
   
3. 
   Производные фенола.
   

Помимо химической, существуют физическая, тепловая и комбинированные виды дезинфекции.

Примером тепловой дезинфекции является пастеризация – уничтожение только вегетативных форм патогенных бактерий (возбудителей кишечных инфекций, бруцеллеза, туберкулеза). В зависимости от вида и свойств пищевого сырья используют различные режимы пастеризации. Например, пастеризацию молока в промышленных условиях проводят при температуре 74⁰С, 15-20 секунд.

22. Асептика. Антисептика. Химические вещества, используемые для антисептики.

Асептика – система мероприятий, предупреждающих попадание микроорганизмов из внешней среды в рану, органы больного при операциях, лечебных и диагностических процедурах. Асептика предусматривает меры защиты от микроорганизмов путем сохранения стерильности перевязочного материала, перчаток, инструментов, материала для обработки ран, а также дезинфекцию рук врача, операционного поля, аппаратуры и др.

Антисептика – комплекс лечебно-профилактических мероприятий, направленных на уничтожение или подавление размножения микроорганизмов на коже, слизистых оболочках, в ране.

Антисептика включает различные методы: механический (удаление некротизированных тканей и др.); физический (дренирование ран и др.); биологический (интраоперационное введение антибиотиков и др.); химический (применение антисептиков).

Химические вещества, используемые для антисептики:

1. 
   Галогены (препараты йода и хлора).
   
2. 
   Окислители (перекись водорода и др.).
   
3. 
   Производные фенолов (резорцин и др.).
   
4. 
   Красители (бриллиантовый зеленый, метиленовый синий и др.).
   
5. 
   Соединения тяжелых металлов (серебра, ртути, цинка и др.).
   

23. Методы и критерии оценки чистоты воздуха в медицинских учреждениях.

Санитарно-бактериологическое состояние воздуха оценивают по двум показателям:

1. 
   Микробное число – это общее количество микробов в 1м³ воздуха.
   
2. 
   Санитарно-показательный микроорганизм – S.aureus.
   

Исследование воздуха проводят аспирационным методом в аппарате Кротова, который устроен таким образом, что воздух с заданной скоростью (25 л/мин) всасывается через клиновидную щель крышки аппарата, под которой находится чашка Петри с питательной средой. При этом частицы аэрозоля, содержащие микроорганизмы, равномерно распределяются по всей поверхности среды благодаря постоянному вращению чашки. Для определения микробного числа используют МПА, а для определения S.aureus – желточно-солевой агар (ЖСА). После посева чашки с МПА и ЖСА термостатируют при температуре 37⁰С в течение 24-48 часов, затем подсчитывают количество колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 м³ воздуха.

24. Микробиологические показатели оценки качества питьевой воды.

Микрофлора воды отражает микробный пейзаж почвы.

1. Микробиологические показатели оценки качества питьевой воды.

Санитарно-показательными микроорганизмами питьевой воды являются колиформные бактерии: эшерихии, клебсиеллы, цитробактеры, энтеробактеры и др. Обнаружение их в воде указывает на наличие свежего фекального загрязнения.

Оценку микробиологической доброкачественности питьевой воды в России проводят по нескольким показателям (Таблица 2), предусмотренным соответствующими санитарными правилами и нормами (СанПиН, 2010 г.).

25. Микробиота (нормальная микрофлора) организма человека. Микробиом человека. Резидентная и факультативная микробиота организма (определение).

Организм человека заселен (колонизирован) многочисленными видами микробов. Они представляют собой сообщества (микробиоценозы), образующие устойчивую к различным воздействиям биологическую пленку на коже, слизистых оболочках открытых полостей организма. Плотность популяции микробов и их взаимоотношения определяются понятием Quorum Sensing (чувство «кворума»). Чувство «кворума» – способность некоторых бактерий общаться и координировать свое поведение за счет секреции молекулярных сигналов.

Национальным институтом здоровья США (2008-2012г.г.) был инициирован крупномасштабный проект («Human microbiome projеct») по изучению микробиома человеческого организма. Микробиом человека – общий генетический материал микробных сообществ, населяющих человеческий организм.

В составе микробиоты человека выделяют: резидентную (облигатную) микрофлору, которая в норме присутствует постоянно, в значительных количествах и выполняет ряд полезных функций для организма; факультативную (необязательную) микрофлору, которая в норме либо отсутствует, либо присутствует в незначительных количествах. Это группа условно-патогенных микробов, которая при снижении сопротивляемости организма может вызывать различные патологические процессы.

транзиторную микрофлору, которая не способна к длительному существованию в организме.

26. Микробиота толстого кишечника здорового человека.

Общая масса микрофлоры этого биотопа составляет от 1 до 5 кг и представлена более чем 500 видами микроорганизмов. 1 г фекалий содержит около 10¹¹ бактерий. Более 90% фекальной микрофлоры составляют анаэробы. Наиболее значимые микроорганизмы представлены в Таблице 4.

27. Микробиота влагалища и ее значение для становления микробиоты новорожденных.

Микробиота влагалища представляет собой динамическую экосистему. Влагалище при рождении стерильно. Затем, в течение нескольких дней заселяется преимущественно грамположительной флорой (анаэробные бактерии, стафилококки, коринебактерии). В это период рН влагалища нейтральна – 7,0. В период полового созревания под влиянием половых гормонов (эстрогенов) вагинальный эпителий утолщается и накапливает гликоген. Это, в свою очередь, стимулирует размножение лактобактерий, которые активно расщепляют гликоген с образованием молочной кислоты. рН влагалища снижается до 4,0. Подкисление лактобактериями влагалищного секрета и продукция ими перекиси водорода ведут к подавлению роста посторонней микрофлоры.

У женщин репродуктивного возраста молекулярно-генетическими методами выявлены более 265 видов бактерий. Микробный спектр влагалища отличается у женщин различных возрастных категорий и этнических групп. Основными (резидентными) представителями микробиоты данного биотопа являются различные виды лактобактерий. Во влагалище в норме преобладают анаэробные микроорганизмы. Соотношение анаэробы/аэробы составляет 10/1. Анаэробы представлены бифидобактериями, бактероидами, пропионибактериями, пептострептококками и др., аэробы – коринебактериями, стафилококками, стрептококками и др. Реже в составе микробиоты обнаруживают гарднереллы (грамотрицательные анаэробные коккобактерии), микоплазмы, мобилюнкусы (грамотрицательные палочки в виде полумесяца).

В период беременности бактериальное разнообразие уменьшается с преобладанием лактобактерий. Ребенок, проходя через родовые пути, контаминируется нормальными представителями микробиоты матери, что в дальнейшем положительно влияет на формирование его микрофлоры.

28. Положительная роль нормальной микрофлоры для организма. Эубиоз и дисбиоз.

Положительная роль нормальной микрофлоры для организма

1. 
   Представители резидентной микрофлоры формируют своеобразную биопленку на поверхности кожи и слизистых оболочек. Это препятствует заселению их болезнетворными бактериями, попадающими извне. Способность нормальной микрофлоры ограничивать рост патогенов называется колонизационной резистентностью. В частности, для толстого кишечника колонизационную резистентность создают бифидо- и лактобактерии.
   
2. 
   Обеспечивает иммуномодулирующую и иммуностимулирующую функции: оказывает постоянное антигенное стимулирующее действие, что способствует развитию лимфоидной ткани кишечника, синтезу секреторных IgА, активации фагоцитоза. Это приводит к формированию и нормальному функционированию иммунной системы.
   
3. 
   Обладает анатагонистическим действием по отношению к болезнетворным бактериям. В частности, кишечная палочка является антагонистом возбудителей брюшного тифа и дизентерии.
   
4. 
   Инактивирует токсические вещества и способствует их выведению из организма.
   
5. 
   Участвует в энтеральном синтезе витаминов группы В, К, никотиновой кислоты.
   
6. 
   Участвует в липидном, водно-солевом обмене, обмене желчных кислот.
   
7. 
   Улучшает перистальтику кишечника и процессы всасывания питательных веществ в кишечном тракте.
   

Эубиоз и дисбиоз.

Организм человека и колонизирующие его микробы представляют единую экологическую систему, находящуюся в состоянии динамического равновесия.

Эубиоз – относительно стабильные видовые и количественные соотношения микробов, населяющих организм.

Дисбактериоз или дисбиоз – (от греч. dis – приставка отрицания и «bacteria») состояние микробного дисбаланса организма. Дисбактериоз не является болезнью, но может быть следствием какого-либо заболевания. В России под дисбактериозом обычно понимают дисбактериоз кишечника – это «клинико-лабораторный синдром, связанный с изменением качественного и/или количественного состава микрофлоры толстого кишечника» (Отраслевой стандарт «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника». ОСТ 915000.11.0004-2003, Приказ МЗ РФ № 231 от 09.06.2003).

В официальных международных классификациях болезней (МКБ-10), заболевания с названием «дисбактериоз» не существует.

За рубежом существует диагноз «синдром избыточного бактериального роста». Он ставится при обнаружении в 1мл содержимого тонкой кишки >10⁵ микроорганизмов и/или появлении в ней флоры, характерной для толстой кишки.

29. Открытие вирусов. Критерии царства вирусов. Молекулярно-генетическая организация вирусов.

Приоритет открытия вирусов (от лат. virus – яд) принадлежит русскому ученому Д.И. Ивановскому (1892 г.), который доказал вирусную природу мозаичной болезни табака. Вирусы широко распространены в природе и поражают человека, животных, насекомых, растения и бактерии.

Основные свойства (критерии) вирусов:

• 
  ультрамикроскопические размеры, не имеют клеточного строения; не способны к росту и бинарному делению;
  
• 
  содержат только один тип нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК); для воспроизведения в клетке хозяина вирусного потомства достаточно попадания в нее только нуклеиновой кислоты вируса (ДНК или РНК);
  
• 
  абсолютный внутриклеточный паразитизм, так как у вирусов отсутствуют:
  
  • 
    ферменты для энергетического метаболизма;
    
  • 
    собственные рибосомы, поэтому синтез вирусных белков происходит на рибосомах клетки-хозяина.