I. общая часть (бактериология, микология, вирусология, микробная экология, санитарная микробиология)
 Скачать 5.14 Mb.
|
13. Антигенная структура микробов. Сероидентификация бактерий.Основные АГ бактерий: О-антиген (эндотоксин) 2)Н-антиген (жгутики, белок флагелин) 3)К-антиген (капсула) 4)Экзотоксины (термолабильны) Сероидентификация бактерий - определение неизвестного АГ с помощью известных антител. Известное антитело представляется иммунной диагностической сывороткой. Серологические реакции – реакции связывания АГ+АТ in vitro Основные характеристики серологических реакций: 1. Специфичность – степень пространственного соответствия эпитопа АГ и паратопа АТ, определяет прочность связи 2. Взаимодействие АГ и АТ обеспечивают: водородные связи, электростатические связи, Ванн-дер-Ваальсовы силы, гидрофобные связи 3. Протекают при эквивалентных соотношениях количества АТ и АГ 4. Имеют двухфазный характер: а) специфическое взаимодействие («невидимая фаза») б) неспецифическая фаза – визуализация (напр., образование хлопьев при агглютинации) Варианты серологических реакций: -Прямые – взаимодействие АГ и АТ – агглютинация и преципитация -Опосредованные (непрямые) – взаимодействие АГ и АТ через посредника – непрямая гемагглютинация, связывание комплемента -Реакции с использованием меченных АТ – иммуноферментный анализ, радиоиммунный анализ, метод флуоресцирующих АТ Получение диагностической сыворотки: иммунизация лабораторных животных вакцинами или анатоксинами по схеме (многократно) и через 10-15 дней после вакцинации животное обескровливают, получают сыворотку и определяют ее активность (титр АТ). Применяют для индикации микробов в материале больного, идентификации в чистой культуре. 14. Гуморальные и клеточные факторы неспецифической защиты. Возрастные особенности.Клеточные факторы врожденного иммунитета: фагоцитоз (макрофаги, дендритные клетки, гранулоциты), натуральные киллеры (NK – cells), воспаление (комплекс факторов). Гуморальные факторы: система комплемента, интерфероны, лизоцим, пропердин, белки острой фазы, цитокины, адгезины, белки теплового шока. Неспецифический иммунитет: быстрый, существует до начала агрессии, активируются все клетки, блокирует инфекцию, не имеет памяти. Возрастные особенности: 1) Микрофагальная функция нейтрофилов формируется уже внутриутробно (по одним данным, на 20-23 неделе, а по другим – на 6-12 неделе). Позже формируется макрофагальная реакция. К рождению ребенка активность фагоцитоза достигает уровня взрослых. Однако, фагоцитоз отличается по качеству: отсутствует завершающая фаза, она формируется через 2-6 месяцев. Это обусловлено низким содержанием неферментных катионных белков. У детей раннего возраста пневмококки не подвергаются фагоцитозу, что объясняет более высокую их заболеваемость пневмонией и ее более тяжелое течение (осложнения – деструкция легких). Стафилококки и гонококки даже могут размножаться в протоплазме фагоцитов. Лишь после 5 лет жизни детей фагоцитоз качественно соответствует таковому взрослых. 2) Лизоцим. Его содержание в сыворотке крови у новорожденных превышает уровень у взрослых. 3) Пропердин. Его количество в момент рождения низкое, но в течение первой недели жизни быстро нарастает и держится на высоком уровне на протяжении всего детства. 4) Интерферон. Способность к его образованию у новорожденных высокая, но в течение года она снижается и только с возрастом постепенно увеличивается, достигая уровня взрослых к 12-18 годам. Особенность возрастной динамики интерферонообразования служит одной из причин повышенной восприимчивости детей раннего возраста к вирусной инфекции и ее более тяжелого течения, особенно ОРВИ. 5) Комплемент. Его активность у новорожденных составляет 50% от ее уровня у взрослых. Затем его содержание нарастает и с возраста 1 мес не отличается от количества у взрослых. 15. Система комплемента. Классический и альтернативный пути активации. Возрастные особенности.Комплемент― система самособирающихся белков крови при последовательной активации которых об-тся МАК –мембраноаттакующий комплекс и разрушаются кл-ки мишени -сывороточные белки, которые вырабатываются макрофагами и кл-ми печени; - обычно в неактивном состоянии; - каскадная активация его компонентов; - содержится в крови всех теплокровных животных и человека; - при нагревании 56С° в течение 30 мин инактивируется, чувствительна к свету, щелочам и к-там. -основное св-во комплемента-лизис клеток -широко применяется в РСК-реакциях связывания комплимента-серологических реакциях Каскадная активация −это поочередное появление активных компонентов в серии протеолитических реакций, в которых продукт одной реакции служит катализатором последующей. Каждый очередной продукт расщепления компонентов комплемента имеет 2 активных центра: - контактный для связывания с предобразованным комплексом; - каталитический для активации очередного компонента. Классический путь активации (АТ-зависимый) осуществляется комплексом Аг-АТ (активатор). Важно, чтобы в состав таких комплексов входили АТ, принадлежащие к IgM, IgG1, IgG3, в меньшей степени ― IgG2, в составе константных доменов которых имеется участок, обладающий сродством к С1q. Активаторами классического пути мб компоненты бактерий (ЛПС, холестеринсодержащие липиды, ретровирусы и др.). АГ+АТ+С1 → +С2,С3,С4 → активируют с помощью ферментов С5, при чем реакция протекает уже без участия АТ+АГ→С5 прикрепляется к м-не кл и на нем обр-ся литический комплекс из С5b, С6, С7, С8, С9. →этот комплекс называется мембраноатакующий(МАК) т к он осущ-т лизис (растворение) клетки. Альтернативная активация (АТ-независимый) - без участия АТ. Активаторы― полисахариды многих бактерий (в основном ― непатогенных, патогенные бактерии устойчивы к действию комплемента и даже могут его инактивировать) ― связывают и активируют С3. Ключевое событие - формирование С5-конвертазы. Чтобы это произошло, необходимо присутствие активированного фактора В и компонента С3b. Молекула С3 вз/д в присутствии Mg2+ с фактором В -> фактор В становится доступным для расщепления эстеразой ― фактором D ― на фрагменты Ва и Вb → С3Вb, который представляет собой С3/С5-конвертазу. Одним из факторов стабилизации С3bВb за счет ослабления его спонтанной диссоциации, является белок пропердин (фактор Р). Комплекс состава С3bВb(Р) выполняет функцию С5-конвертазы. Активация С5 «открывает» терминальный этап активации комплемента − формирование литического комплекса (мембраноатакующего комплекса − МАК): как на мембране, так и в растворе С5b + С6 -> С5b6, который связывает С7, а затем ― С8, происходит присоединении 12-20 молекул С9 (гомологичный перфорину белок, способный полимеризоваться). В результате формируется цилиндрический комплекс. Цилиндры образуют поры, создают возможность для поступления в клетку ионов Н+, Na+ и воды, что приводит к разрыву мембраны и гибели клетки. Функции компонентов комплемента: · стимулируют фагоцитоз; · вызывают лизис бактерий и клеток, инфицированных вирусом; · стимулируют воспалительные реакции; · способствуют межклеточным вз/д в процессинге Аг; · участвуют в развитии анафилактических реакций и в реакциях свертывания крови. Возрастные особенности: У новорожденных и маленьких детей ослаблены процессы активации системы комплемента, особенно альтернативного пути. Для них характерны концентрации в 2 раза ниже в крови компонентов системы комплемента С1, С2, С3, С4, что определяет низкую опсоническую активность крови новорожденных. |