Общая хирургия. Коллоквиум I. Вопросы для устного опроса

• Название: Коллоквиум I. Вопросы для устного опроса
• Анкор: Общая хирургия
• Дата: 29.11.2020
• Размер: 0.68 Mb.
• Имя файла: Kollokvium_1_ustnyi_OBKh.docx
• Тип: Учебник; #155076
• страница: 23 из 45

19. Групповая система резус. Методы определения группы крови по системе резус.

Система антигенов резус-фактора представлена большим количеством антигенов, из которых клиническое значение имеют 5 основных антигенов. Образование резус-антигенов контролируется тремя парами аллельных генов: Dd, Сс, Ее, которые расположены на двух хромосомах. Указанные пять резус-антигенов (исключая антиген d) встречаются в эритроцитах в виде одного из 18 возможных сочетаний

Наиболее активным из всех антигенов является Rh0 (D). В зависимости от его наличия или отсутствия кровь людей делят на резусположительную (Rh+) и резус-отрицательную (Rh—)

Способы определения резус-фактора

Все методы определения резус-фактора делятся на способы, применяемые в клинической практике, и лабораторные способы.

Способы определения Rh0 (D) в клинической практике

В клинических условиях (в приемном покое, хирургическом отделении, операционной), где нет специального лабораторного оборудования, используются экспресс-методы определения Rh0(D) (D-фактора).

Экспресс-метод со стандартным универсальным реагентом в пробирке без подогрева

Для исследования может быть использована свежая несвернувшаяся кровь, взятая из пальца (из вены) непосредственно перед исследованием, или консервированная кровь без предварительной обработки, а также эритроциты из пробирки после формирования сгустка и отстаиваниясыворотки.

Методика проведения реакции

1. 
   Исследование проводят в центрифужных пробирках объемом не менее 10 мл. На дно пробирки вносят одну каплю стандартного универсального реагента, представляющего собой антирезусную сыворотку группы АВ (IV), содержащую 33 % раствор полиглюкина.
   
2. 
   Затем в нее добавляют одну каплю исследуемой крови (или эритроцитов).
   
3. 
   Круговым вращением пробирки содержимое размазывают по ее внутренней поверхности таким образом, чтобы содержимое растеклось по стенкам. Это значительно ускоряет агглютинацию и делает ее крупнолепестковой. Агглютинация на стенках пробирки наступает, как правило, в течение первой минуты, но для образования устойчивого комплекса антиген— антитело и четкой агглютинации наблюдать следует не менее 3 минут.
   
4. 
   Затем для исключения неспецифической агрегации эритроцитов в пробирку добавляют 2-3 мл физиологического раствора и перемешивают путем одно-двукратного перевертывания пробирки (без взбалтывания!).
   

Трактовка результатов

Наличие агглютинации (крупные хлопья на фоне просветленной жидкости) указывает на резус- положительную принадлежность исследуемой крови.

Отсутствие агглютинации (в пробирке гомогенно окрашенная розовая жидкость) свидетельствует о резусотрицательной принадлежности исследуемой крови.

Лабораторные способы определения резус-фактора

Для определения резус-принадлежности крови больного в условиях лаборатории применяют

четыре основных метода.

Метод агглютинации в солевой среде

Используют специальные сыворотки, содержащие полные антитела анти-резус.

Эритроциты в виде 2% взвеси в изотоническом растворе хлорида натрия соединяют в пробирках с антирезусной сывороткой. Пробирки помещают на 1 час в термостат при температуре 37 °С, после чего осадок эритроцитов на дне пробирки рассматривают с помощью лупы и по его форме учитывают результат.

При положительном результате (Rh+) осадок имеет характерный рисунок в виде нитей или зернистости.

При отрицательном (Rh-) — осадок размещается равномерным слоем и имеет вид правильно очерченного круга.

Метод агглютинации в присутствии желатина

В пробирку помещают равные объемы исследуемых эритроцитов, антирезусной сыворотки и 10% раствора желатина. Пробирки инкубируют при температуре 45—48 °С, после чего добавляют десятикратный объем физиологического раствора. Пробирки 2-3 раза переворачивают и учитывают результат по наличию агглютинации, видимой невооруженным глазом.

Непрямой антиглобулиновый тест (реакция Кумбса)

Эта реакция является наиболее чувствительной для выявления неполных антител к ауто- и изоантигенам эритроцитов. К ней, как правило, прибегают при возникновении трудностей в определении резус-принадлежности крови, связанных с нечеткими результатами, полученными при других методах исследования. Реакция основана на использовании антиглобулиновой сыворотки (АГС). При обработке резус-положительных эритроцитов неполными антителами анти-Rh наступает их обволакивание, сенсибилизация по отношению к АГС, которая агглютинирует сенсибилизированные эритроциты, поскольку имеет антитела к глобулинам. В пробирку вносят антирезусную сыворотку и отмытые физиологическим раствором эритроциты, помещают на 1 час в термостат при температуре 37 °С, после чего эритроциты тщательно отмывают.

Последующий этап реакции проводят на плоскости. Каплю взвеси эритроцитов смешивают с равным количеством АГС и учитывают результат.

Наличие агглютинации является показателем того, что исследуемый образец крови резус- положительный.

Если агглютинация отсутствует, то испытуемая кровь — резус-отрицательная.