Общая хирургия. Коллоквиум I. Вопросы для устного опроса

• Название: Коллоквиум I. Вопросы для устного опроса
• Анкор: Общая хирургия
• Дата: 29.11.2020
• Размер: 0.68 Mb.
• Имя файла: Kollokvium_1_ustnyi_OBKh.docx
• Тип: Учебник; #155076
• страница: 22 из 45

ВАЖНО:

1. 
   Сыворотки для определения групп крови изготавливают в специальных серологических лабораториях из донорской крови.
   
2. 
   Хранят при температуре 4 -8 °С (в холодильнике).
   
3. 
   Срок годности сыворотки указан на этикетке. Титр сыворотки (также указывается на этикетке) должен быть не ниже 1:32 (для сыворотки В (III) — не ниже 1:16/32).
   
4. 
   Сыворотка должна быть прозрачной, без признаков гниения.
   
5. 
   Для удобства стандартные гемагглютинирующие сыворотки различных групп подкрашивают в определенный цвет: О (I) — бесцветная, А (II) — синяя, в (III) — красная, АВ
   

(IV) — ярко-желтая.

Методика проведения реакции:

1. 
   Перед началом реакции подписывают тарелку (наносят фамилию и инициалы исследуемого), после чего на нее под соответствующие обозначения наносят стандартные изогемагглютинирующие сыворотки I, II и III групп в объеме 0,1 мл Во избежание ошибок наносят две серии сывороток каждой из групп, так как одна из серий может иметь низкую активность и не дать четкой агглютинации. Всего получается 6 капель, которые образуют два ряда по три капли в следующем порядке слева направо: О (I), А (II), В (III).
   
2. 
   Кровь для исследования берут из пальца или из вены. Шесть капель исследуемой крови величиной приблизительно с булавочную головку (0,01 мл, маленькая капля) последовательно переносят сухой стеклянной палочкой на пластину в 6 точек, каждую рядом с каплей стандартной сыворотки (количество испытуемой крови должно быть приблизительно в 10 раз меньше количества стандартной сыворотки, с которой она смешивается, т.е. 1:10), потом их осторожно с помощью стеклянных палочек с закругленными краями перемешивают.
   
3. 
   После смешивания тарелку периодически покачивают. Агглютинация начинается в течение первых 10-30 секунд, однако наблюдение следует обязательно вести до 5 минут ввиду возможности более поздней агглютинации, например, с эритроцитами группы А2 (II).
   
4. 
   В те капли, где произошла агглютинация, добавляют по одной капле изотонического раствора натрияхлорида.
   
5. 
   Оценивают результат реакции.
   

2. Определение групп крови моноклональнымиантителами.Необходимое оснащение:

-Моноклональные антитела цоликлоны анти-А и анти-В;

-Исследуемая кровь.

-Белые фарфоровые либо эмалированные тарелки или любые другие; пластинки со смачиваемой поверхностью, маркированные О (I), А (II), в (III), АВ (IV).

-Изотонический раствор натрия хлорида.

-Иглы, пипетки, стеклянные палочки (предметные стекла).

Техника проведения реакции

Цоликлоны анти-А и анти-В наносят на белый планшет по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями: анти-А и анти-В. Рядом с ними наносят по одной маленькой капле (0,01 мл) исследуемой крови (т.е. опять же, 1:10, 1 – исследуемая кровь, 10 - цоликлоны). После перемешивания составных частей за реакцией агглютинации наблюдают в течение 3 минут.

2. Определение группы крови с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток и стандартных эритроцитов (перекрестный способ).

Суть метода состоит в определении наличия или отсутствия в исследуемой крови групповых антигенов А и В с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток, а также групповых антител α и β с помощью стандартных эритроцитов.

Необходимое оснащение

Оснащение для реакции со стандартными эритроцитами отличается тем, что для ее проведения необходимы стандартные эритроциты трех групп крови: О (I), А (II), В (III). Стандартные эритроциты приготавливают из крови доноров с заранее известной группой крови, хранят при 4—8 °С. Срок годности 2—3 дня.

Методика проведения реакции

1. 
   Кровь для исследования берут из вены в сухую пробирку, центрифугируют или оставляют в покое на 20—30 минут для получения сыворотки.
   
2. 
   На маркированную тарелку пипеткой наносят три большие капли (0,1 мл) сыворотки исследуемой крови из пробирки, а рядом с ними — по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп.
   
3. 
   Дальнейшие мероприятия проводятся аналогично методу с использованием стандартных изогемагглютинирующих сывороток: соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 минут, в капли с агглютинацией добавляют изотонический раствор натрия хлорида, после чего оценивают результат.