клинбиохметод. Лекции по клинической биохимии караганда 2003 удк 616 577 (075. 8) Рецензенты

• Название: Лекции по клинической биохимии караганда 2003 удк 616 577 (075. 8) Рецензенты
• Дата: 13.10.2021
• Размер: 0.78 Mb.
• Имя файла: клинбиохметод.doc
• Тип: Лекции; #246814
• страница: 6 из 32

2.4. Исследование белкового спектра плазмы (сыворотки) крови

В электростатическом поле белки сыворотки крови движутся по смоченной буферным раствором хроматографической бумаге (ацетатцеллюлозной пленке, крахмаловому, агаровому гелям) со скоростью, зависящей в основном от величины электрического заряда и молекулярной массы частиц. Вследствие этого белки сыворотки крови разделяются обычно на 5 основных фракций: альбумин и -1-, -2-, -, -глобулины, содержание которых определяется с помощью фотометрии или денситометрии (таблица 1. по В.С. Камышникову). .

Зона электрофореграммы	Главные белки	Минорные белки
Альбуминовая	Альбумин	Преальбумин
 -1-глобулиновая	 -1 липопротеин (ЛПВП),  - 1-антитрипсин	-1- антихимотрипсин, орозомукоид (-1-кислый гликопротеин)
 -2-глобулиновая	 -2- микроглобулин, гаптоглобин,  - липопротеин	Гемопексин, антитромбин III, С-1-эстеразы ингибитор, А-2-HS – гликопротеин
 -1,  -2		Тироидсвязывающий глобулин, церулоплазмин
-глобулиновая	Трансферрин, С-3 (комплимент),  - липопротеин (ЛПНП)	Комплемент (С-1-S), комплимент (С-4), комплемент (С-5),  -2 –микроглобулин и др.
 - глобулиновая	Фибриноген, IgA, IgM, IgG	IgD, IgE иммуноглобулины (легкие цепи), иммуноглобулины (тяжелые цепи), С-реактивный белок, лизоцим.

У практически здоровых взрослых людей на долю  -1- и  -2-глобулинов приходится 3,5–6,0% и 6,9–10,5% от общего содержания белка соответственно. |

В норме концентрация  -1-глобулинов в плазме крови составляет 2-5 г/л,  - 2 – глобулинов – 4-7 г/л. У детей (в возрасте от 1 месяца до 16 лет) содержание  -1-глобулинов в плазме крови составляет 2-4 г/л. У детей содержание  -2-глобулинов в плазме крови составляет 6-17 г/л (до 1 месяца), 5-10 г/л (1-12 месяцев), 6-12 г/л (1-16 лет).

В норме содержание  - глобулинов плазмы крови составляет 7,3–12,5% или 5– 9 г/л от общего уровня белка плазмы. У детей содержание -глобулинов в плазме крови составляет 6-11 г/л (до 1 месяца), 5-9 г/л (1-12 месяцев), 6-11 г/л (1-16 лет).

В норме на долю  -глобулинов приходится 12,8–19% или 8–17 г/л от общего содержания белков плазмы крови. У детей содержание -глобулинов в плазме крови составляет 5-18 г/л (до 1 месяца), 7-19 г/л (1-12 месяцев), 8-20 г/л (1-16 лет).

Для интегральной оценки используются коэффициенты отношений: альбумин/глобулины (А/Г), А/суммарная фракция -1- и -2-глобулинов: А/(-1 + -2);

Альбумино-глобулиновое соотношение (А/Г – коэффициент, составляющий в норме 1,2–1,8) снижается при хронических диффузных поражениях печени (гепатите и циррозе), инфекционных заболеваниях, пневмонии, плеврите, эндокардите, туберкулезе, воспалительных процессах различной локализации, а также при злокачественных новообразованиях, плазмоцитоме, амилоидозе.

Коэффициент А/-1 + -2), составляющий в норме 6,1–3,9, является весьма информативным и адекватным тестом оценки активности воспалительного процесса.

Среди белков биологических жидкостей самостоятельное диагностическое значение имеют следующие представители.

 -2-макроглобулин. Специфический белок плазмы – гликопротеин; один из компонентов фракции альфа-2-глобулинов. Альфа-2-макроглобулин является ингибитором протеиназ (плазмина, пепсина, эндопептидаз, трипсина, химотрипсина, катепсина D и т. д.), участвует в связывании некоторых гормонов. Совместно с альфа-1-антитрипсином влияет на развитие инфекций, подавляя развитие воспалительных процессов в организме.

Биологическим материалом для исследования служит чаще всего сыворотка крови.

Показатели нормы содержания альфа-2-макро-глобулина в сыворотке крови составляют: у мужчин 1500– 3500 мг/л (1,5-3,5 г/л), в среднем 2400 мг/л (2,40 г/л); у женщин 1750–4200 мг/л (1,75–4,20 г/л).

Содержание его в плазме крови плода на 10-й неделе внутриутробного развития достигает примерно 15% от уровня взрослого, в дальнейшем его уровень повышается. Максимальная концентрация отмечается к 1–3 годам, затем постепенно снижается и стабилизируется на уровне, характерном для взрослых (к 25 годам). В амниотической жидкости содержание альфа-2-макроглобулинов в период 15–39-й недели беременности составляет 1–1,5 мг/л.

Увеличение содержания -2-макроглобулина как одного из важного компонента фракции -2-глобулинов плазмы (сыворотки) крови отмечается при некоторых заболеваниях печени (циррозе, хроническом и остром гепатите); сахарном диабете; врожденных заболеваниях (дефектах нервной трубки); нефротическом синдроме (что связано с гипоальбуминемией); злокачественных опухолях; подострых и хронических воспалительных заболеваниях; стадии воспаления после термических ожогов; использовании эстрогенов с лечебной целью.

Уменьшение концентрации -2-глобулинов (в том числе и -2-макроглобулина) отмечается при: недостаточности белкового питания; заболеваниях кишечника (гастроэнтеропатиях, сопровождающихся потерей белка); ДВС-синдроме; проведении фибринолитической терапии; сепсисе; фибринолизе.

-2-микроглобулин. Определение содержания -2-микроглобулина используется прежде всего как тест диагностики и мониторинга лимфом и поражений почек, сопровождающихся их недостаточностью.

-2-микроглобулин – низкомолекулярный белок с м.м. 11 800, является компонентом поверхностных антигенов клеточных ядер. Образуется в лимфатической системе. Содержание этого белка в плазме крови обусловлено постоянно протекающим процессом биосинтеза и разрушения отдельных элементов клеток. Скорость обновления этого белка в плазме относительно постоянна.

-2-микроглобулин свободно фильтруется в клубочках почек, но в нормальных (физиологических) условиях реабсорбируется в проксимальных отделах почечного канальца, где подвергается в дальнейшем распаду. При нарушении функции почечных канальцев концентрация -2-микроглобулина в плазме крови снижается, а выведение его с мочой возрастает. К увеличению содержания -2-микроглобулина в моче приводит повреждение почечных канальцев. Поэтому тест на определение -2-микроглобулина в моче используется в качестве показателя степени повреждения почечных канальцев.

Исследования в крови. Показатели содержания бета-2-микроглобулина сыворотки (плазмы) крови в норме составляют 1,1–2,4 мг/л (в сыворотке крови людей моложе 60 лет – менее 2,4 мг/л, у людей старше 60 лет –не более 3,0 мг/л).

Увеличение содержания бета-2-микроглобулина в плазме крови отмечается при патологии лимфатической системы (множественной миеломе (плазмоцитоме), лимфоме Ходжкина (Hodkin), неходжкинской (Non-Hodkin) лимфоме, лимфомах, происходящих из В-линии лимфоцитов (определение специфического белка используется для слежения за ходом лечения)); заболеваниях почек (повреждениях почек с ограничением гломерулярной фильтрации, отторжении трансплантата почек, почечной недостаточности (клубочковая фильтрация менее 80 мл/мин)); острых вирусных инфекциях; хронических воспалениях (в некоторых случаях); миеломе; иммунодефиците (СПИД).

Показатели содержания бета-2-микроглобулина в моче в норме составляют менее 0,4 мг/л. Для получения пригодной для исследования мочи следует освободить мочевой пузырь (утренняя порция ее для анализа непригодна), выпить 200 мл воды, собрать часовую порцию мочи, поместить в воду со льдом и немедленно доставить в лабораторию; в случае выполнения отсроченных исследований пробу мочи заморозить и доставить в лабораторию. В мочу добавляют натриевую щелочь, чтобы рН мочи составила около 6,0. Проба мочи должна быть использована в течение 2–3 ч (на анализ обычно требуется 10 мл мочи), i

Увеличение содержания бета-2-микроглобулина в моче обнаруживается при заболеваниях почек, сопровождающихся повреждением их канальцев; острой и хронической интоксикации кадмием и ртутью; отравлении аминогликозидами.