Материалы международной научнопрактической конференции современная фармация
 Скачать 4.31 Mb.
|
|
Никитина Т.Г., Сандрюхина МВ, Алексеева ГМ. Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет, Санкт-Петербург, РФ Цель разработать электрофоретическую методику определения катионов металлов в лекарственных препаратах Материалы и методы исследования Объектами исследования являются следующие лекарственные препараты (ЛП) класса кардиопротекторов: «Кардиомагнил», «Аспаркам» и «Панангин». Капиллярно-электрофоретическое анализ ЛП проводили на приборе капиллярного электрофореза «Капель-104Т», производства НПП АФ “Люмэкс”, с кварцевым капилляром с внешним полиамидным защитным покрытием (внутренний диаметр 75 мкм, внешний 365 мкм, общая длина капилляра – 60 см, длина капилляра до детектора – 50 см. Все эксперименты проводили в буферном растворе 5.0 мМ бензимидазол - 10.0 мМ винная кислота [1], при напряжении 20 кВ, длина волны спектрофотометрического детектирования – 254 нм, ввод пробы осуществляли давлением 30 мбар в течение 7 с. Для регистрации электрофореграмм использовали компьютерную программу «Мультихром для Windows.1.45». Результаты и обсуждение При проведении градуировки прибора КЭ было установлено, градуировочные графики линейны в диапазоне концентраций катионов 0.5- 20 мг/л. Электрофореграмма стандартного раствора катионов представлена на рисунок 1. Конференция материалдары, 2021 182 Рис. 1 - Электрофореграмма стандартного раствора катионов 1 – калий, 2 – натрий, 3 – магний, 4 – кальций (С мг/л). Поскольку в исследуемых ЛП действующие вещества, содержащие катионы магния, обладают разной растворимостью вводных растворах, были оптимизированы способы пробоподготовки при анализе таблеток данных ЛП. Оптимальные способы извлечения, позволяющие добиться количественного извлечения магния, представлены в таблице 1. Таблица 1 - Способы извлечения катионов магния и калия из ЛП для последующего капиллярно- электрофоретического определения. ЛП Средняя масса таблетки, m, г Действующие вещества Способ извлечения Кардиомагнил 0,115±0,009 Гидроксид магния – Измельчение таблетки и взятие точной навески (50 -100 мг) добавление 5 мл 0,1 М соляной кислоты нагревание 3 минуты при Т =50 °C Аспаркам 0,498±0,006 Калия аспарагинат гемигидрат Тетрагидрат аспарагината магния Измельчение таблетки и взятие точной навески (50 -100 мг) добавление 5 мл воды очищенной нагревание 3 минуты при Т =50 °C Панангин 0,913±0,005 Для проведения анализа методом КЭ полученную водную пробу, содержащую катионы, количественно переносили в мерную колбу на 100 мл и разбавляли водой очищенной до метки. Часть раствора фильтровали через мембранный фильтр с диаметром пор 0.45 мкм. 200 мкл фильтрата помещали в пробирку Эппендорфа, добавляли 200 мкл буферного раствора, перемешивали и анализировали. Было установлено, что на электрофореграммах, полученных после растворения некоторых ЛП, присутствуют пики других катионов (натрия и кальция, которые не оказывают мешающего влияния на определение калия и магния. В таблице 2 представлены результаты определения калия и магния в ЛП. Правильность полученных результатов определения катионов в ЛП методом КЭ была подтверждена сравнением полученных результатов сданными гравиметрического определения калия в и комплексонометрического определения магния по ГФ РФ [2]. 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270 сек mAU Capel 1 2 3 4 Конференция материалдары, 2021 183 Рис. 2 - Электрофореграмма раствора, полученного после извлечения катионов из ЛП «Аспаркам» 1 – калий, 2 – натрий, 3 – магний, 4 – кальций. Таблица 2 - Определение содержания калия и магния в ЛП методом капиллярного электрофреза и химическими методами анализа. Препарат Содержание, m, мг Найдено КЭ m, мг Найдено ХМА*, m, мг Кардиомагнил Магния гидроксид 15,2 мг 14,8 ± 0,4 15,1 ± 0,2 Аспаркам Калия аспарагинат гемигидрат – 175 мг 165 ± 12 169 ± 9 Магния аспарагинат тетрагидрат – 175 мг 170 ± 8 173 ± 7 Панангин Калия аспарагинат гемигидрат – 316 мг 311 ± 10 312±4 Тетрагидрат аспарагината магния – 280 мг 276±9 281±5 Определение магния проводилось методом комплексонометрического титрования, калия – гравиметрически в форме тетрафенилбората. Заключение. Таким образом, разработана методика одновременного определения катионов калия и магния в ЛП методом капиллярного электрофореза позволяет проводить, общее время анализа не превышает 20 мин. Список литературы 1. Комарова Н.В., Каменцев Я.С. Практическое руководство по использованию систем капиллярного электрофореза Капель. - СПб.: ООО Веда, 2008. — 212 с. Государственная Фармакопея Российской Федерации XIV издания, 1 том Электронный ресурс. Режим доступа Дата обращения – 15.12.2020]. МРНТИ 76.31.35 УДК 543.545.2 ОПРЕДЕЛЕНИЕ РОДСТВЕННЫХ ПРИМЕСЕЙ В НОВОЙ СУБСТАНЦИИ 4,4’-(ПРОПАНДИАМИДО) ДИБЕНЗОАТА НАТРИЯ МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОГО ЭЛЕКТРОФОРЕЗА Генералова Ю.Э., Никитина Т.Г., Алексеева ГМ. Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет, Санкт-Петербург, РФ Цель провести определение родственных примесей в новой активной фармацевтической субстанции 4,4’-(пропандиамидо)дибензоат натрия методом капиллярного электрофореза. Материалы и методы исследования Объектом исследования является новое синтезированное соединение, производное малонового эфира и п-аминобензойной сек mAU Capel 1 2 3 4 Конференция материалдары, 2021 184 кислоты (ПАБК) – 4,4’-(пропандиамидо)дибензоат натрия (условное название – малабен), которое проявляет антиатеросклеротическое, антиалкогольное и антиоксидантное действие [1]. Образец малабена синтезирован на кафедре органической химии СПХФУ. Для контроля чистоты этого соединения и определения в нём родственных примесей использовали метод капиллярного электрофореза [2]. Исследования проводили на системе капиллярного электрофореза «Капель-105М», в кварцевом капилляре общей длиной 60 см, эффективной длиной 50 см, внутренним диаметром 75 мкм, при использовании в качестве ведущего электролита раствора натрия тетраборнокислого водного концентрацией 50 ммоль/л, напряжении +20 кВ, температуре С. Детектирование зон разделения осуществляли при длине волны 270 нм, а ввод пробы – гидродинамически приложением давления 30 мбар. в течение 7 с. Результаты и обсуждение Родственные примеси, которые могут содержаться в малабене – исходное соединение (ПАБК) и полупродукт синтеза – этмабен [3]. Первые экспериментальные данные получали при концентрации раствора малабена 1,0 мг/мл., в качестве растворителя использовали воду с добавкой ацетона (как маркер электроосмотического потока - ЭОП). Так как образцы содержат могут содержать примеси неизвестной структуры, то для определения их времён миграции были проанализированы растворы ПАБК, этмабена и нескольких серий малабена, содержащие такие комбинации примесей, что при совокупности данных можно, зная общие закономерности электрофоретического поведения веществ, предположить структуры неидентифицированных примесей. Электрофореграмма (ЭФГ) раствора малабена, содержащие наибольшее число пиков, приведена на рисунке. Рисунок - Электрофореграмма раствора малабена. На ЭФГ раствора малабена наблюдаем пики 1 с временем миграции 3,973 мин. (ЭОП), 2 – 5,350 мин. (примесь D), 3 – 5,565 мин. (примесь С, этмабен), 4 – 6,677 мин. примесь А, ПАБК), 8 – 9,373 мин. (примесь В. Пики под номерами 6 и 7 присутствуют только в указанной серии, поэтому дальнейшее их изучение не проводили. Структурные формулы указанных соединений, их времена миграции, рассчитанные истинные электрофоретические подвижности (ЭФП) и характеристики их поведения входе электрофоретического разделения представлены в таблице. Конференция материалдары, 2021 185 Таблица - Основные характеристики малабена и его родственных примесей в условиях электрофоретического разделения. Название примеси Структурная формула Время миграции, мин ЭФП, см 2 ×кВ -1 ×с -1 Характеристика поведения Примесь D Неизвестна 5,350 -0,162 Наименее полярна, так как имеет наименьшую ЭФП Примесь С (этмабен) HO O HN O O O 5,565 -0,180 Малополярна, имеет одно бензольное кольцо и одну карбокси-группу Примесь А (ПАБК) HO O NH 2 6,677 -0,255 За счёт маленького размера и карбокси- группы имеет значительную подвижность Малабен HN NH O O Na + Na + O O O - - O 7,540 -0,285 Наличие двух карбокси-групп компенсируют большой размер молекулы и придают ей высокую подвижность Примесь В Неизвестна 9,373 -0,363 Очень полярное соединение Исходя их основных характеристик примесь D вероятнее всего содержит небольшой отрицательный заряд, имеет значительный размер (несколько бензольных колец, большие незаряженные заместители, а примесь В имеет большой отрицательный заряд (наличие нескольких карбокси-групп), и сравнительно небольшие размеры (одно бензольное кольцо, отсутствие больших заместителей. Заключение. Таким образом, нами проведено определение примесей в новой активной фармацевтической субстанции малабена, в которой подтверждено наличие двух идентифицированных примесей. Для двух примесей неизвестной структуры предположены структура, которые требуют дальнейшего изучения. Список литературы 1. Юсковец В.Н., Чернов НМ, Яковлев И.П., Наркевич И.А. Патент РФ №2624729, 06.07.2017. 2. Генералова Ю.Э., Алексеева ГМ. Патент РФ №2721908 от 25.05.2020. 3. Печенюк В.А., Денисенко П.П., Кирсанов АТ, Ивин Б.А., Беловодский В.П. Патент РФ №2167852 от 27.05.2001. Конференция материалдары, 2021 186 МРНТИ 76.31.35 УДК 615.074 РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДОДЕЦИЛ (3,5-ДИМЕТИЛ-4-ГИДРОКСИБЕНЗИЛ) СУЛЬФИДА МЕТОДОМ МЕРКУРИМЕТРИИ Шинко Т.Г. Новосибирский государственный медицинский университет, Новосибирск, РФ Додецил (3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфид - перспективная фармацевтическая субстанция, разработанная НИИ Химии антиоксидантов на базе кафедры органической химии Новосибирского государственного педагогического университета. Субстанция представляет собой фенольный серосодержащий антиоксидант, проявляющий активность в отношении подавления развития свободнорадикального механизма в организме человека. Проведенные исследования показали эффективность применения данной субстанции в комплексной терапии гепатитов, циррозов, доброкачественных и злокачественных новообразований, атеросклероза и ишемической болезни сердца [1]. Для целей стандартизации додецил(3,5- диметил-4-гидроксибензил)сульфида необходима разработка методик анализа, которые позволят в дальнейшем проводить контроль качества производимой субстанции и лекарственных препаратов на её основе. Для параметра Количественное определение был выбран метод меркуриметрии, поскольку титриметрические методы легко воспроизводимы и позволяют добиться необходимой точности определения в условиях отсутствия стандартного образца. Цель разработать методику количественного определения додецил (3,5-диметил-4- гидроксибензил) сульфида методом меркуриметрии. Материалы и методы В качестве объекта исследования использовали образец субстанции додецил (3,5-диметил-4-гидроксибензил) сульфида, предоставленный НИИ химии антиоксидантов. Титрант – ртути (II) нитрат 0,1 моль/л; индикатор – дифенилкарбазон. Статистическую обработку результатов применения разработанной методики проводили в соответствии с ОФС.1.1.0013.15 Статистическая обработка результатов химического эксперимента [2]. Результаты и их обсуждение. Применение метода меркуриметрии для титриметрического количественного определения додецил(3,5-диметил-4- гидроксибензил)сульфида основано на способности сульфидной группы исследуемой субстанции образовывать комплексные соединения с солями ртути (II) [3]. Методика 0,1 г. (точная навеска) исследуемой субстанции растворяют в 10 мл спирта этилового, перемешивают до полного растворения. Затем прибавляют 10 капель кислоты азотной разведенной, 2-3 капли индикатора дифенилкарбазона и титруют 0,1 моль/л раствором ртути (II) нитрата до появления устойчивого в течение 30 секунд фиолетового окрашивания. Воспроизводимость оценивали путём проведения 5 титрований согласно условиям, описанным в методике. Относительное стандартное отклонение RSD%=0,77% не превышает допустимых 2%. Оценку линейности методики проводили на 5 образцах исследуемой субстанции в диапазоне массы навески г. Коэффициент корреляции составил 0,9999, что подтверждает наличие линейной зависимости в исследуемом диапазоне концентрации (20-150% от количества, указанного в методике. Заключение Разработанная методика меркуриметрического титрования додецил (3,5- диметил-4-гидроксибензил) сульфида обладает необходимыми воспроизводимостью и линейностью для проведения количественного определения. Список литературы 1. Просенко А.Е., Кандалинцева Н.В., Ягунов СЕ. Серосодержащие фенольные антиоксиданты прошлое, настоящее и будущее//Окисление, окислительный стресс, антиоксиданты Лекции и тезисы Международной конференции молодых ученых и VIII школы им. академика Н. Э. Эмануэля, 2015. - С. 33-59. 2. Государственная фармакопея Российской Федерации. е изд. 2018. URL: http://resource.rucml.ru/feml/pharmacopia/14_1/HTML/index.html . Дата обращения 03.02.2021. Конференция материалдары, 2021 187 3. Черножуков НИ. Теория очистки нефтепродуктов. – М Книга по Требованию, 2015 – 116 с. МРНТИ 76.31.35+76.01.37 УДК 615.072 ПРОБЛЕМАТИКА ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СТАНДАРТНЫХ ОБРАЗЦОВ В КОНТРОЛЕ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ Жигалина А.А., Стрелова О.Ю. ФГБОУ ВО СПХФУ, Санкт-Петербург, РФ Необходимость в использовании стандартных образцов (СО) для проведения фармацевтического анализа лекарственных препаратов (ЛП), активных фармацевтических субстанций (АФС), лекарственного растительного сырья (ЛРС), биологически активных добавок (БАД), витаминов с каждым годом увеличивается. Это обусловлено ужесточением требований к качеству продукции, что в свою очередь приводит к закономерному повышению требований к контролю ее качества. На всех этапах жизненного цикла ЛП контроль качества по показателям подлинность, количественное содержание и чистота должен осуществляться в сравнении с одними тем же СО, что на сегодняшний момент является самым простыми точным методом контроля. Этот способ позволяет лимитировать действие различных внешних факторов, а также является одним из методов контроля, позволяющих признавать результаты проведенного анализа легитимными. Применение СО, описанного в конкретной фармакопее, накладывает обязательства по анализу ЛП в соответствии с этой же фармакопеей. Таким образом законодательно исключена возможность использования приобретенных СО вне предназначенной для них области, а также применения других методов анализа ЛП, не включенных в соответствующую стандарту фармакопейную статью (ФС). Кроме стандартных образцов, произведенных по требованиям ФС, существуют СО, считающиеся нефармакопейными стандартными образцами их производят в лабораториях фармацевтических предприятий или в специализированных организациях. Необходимость использования СО для проведения фармакопейного анализа сопряжена с проблемой их высокой стоимости и длительностью ожидания поставки из-за рубежа. В странах постсоветского пространства таких как Казахстан и Украина ведутся работы по созданию своих фармакопейных СО, что позволит существенно сократить расходы на закупку импортных СОВ России же собственных фармакопейных СО не производится, поэтому проблема организации фармацевтического анализа становится все более актуальной. Производство стандартных образцов внутри лаборатории накладывает на нее необходимость быть аккредитованной по ISO 17025 в целях обеспечения надлежащего качества и гарантировать достоверность результатов анализа. Если рассмотреть ситуацию, когда предприятиями производятся собственные СО (стандартные образцы предприятия, тона этом предприятии должна быть организована отдельная лаборатория, соответствующая международным стандартам [2]. При поиске литературы и обработке имеющейся информации по обсуждаемой теме можно сказать, что основной проблемой является отсутствие единого подхода в документации на СО, даже на уровне использования единого термина стандартный образец. Кроме того, при разработке, регистрации и внедрении в практическую деятельность стандартных образцов появляются новые трудности, а именно несогласованность перевода существующих международных терминов, принятых в Европейской Фармакопее (EP), Фармакопее Соединенных Штатов Америки (USP) Международной Фармакопее и ISO Guide 30:2015 на русский язык одному, по этой Конференция материалдары, 2021 188 причине одному и тому же специальному понятию может соответствовать несколько параллельных переводных терминов [3]. Вопрос о единой и полной классификации СО тоже пока не получает однозначного ответа. Существующая ныне классификация сводится к перечислению основных определений, связанных со стандартными образцами. Так выделяют различные СО I. По методам аттестации первичные вторичные. II. По наличию сертификата СО сертифицированные СО (ССО); стандартный материал сертифицированный стандартный материал. III. По природе вещества химические биологические растительные радиофармацевтические. IV. По назначению для количественного определения, для качественного определения, СО примесей, СО спектров. V. По сфере/уровню/области признания Международные, Межгосударственные, ГСО, СО предприятия. Большой интерес в плане поиска новых высокоэффективных лекарственных препаратов представляют вещества природного происхождения, в частности генистеин. Показано, что генистеин обладает радиозащитными свойствами, оказывает положительный эффект при профилактике и терапии сердечно-сосудистых заболеваний и остеопороза у женщин в период менопаузы, проявляет гипохолестеринемическое и антидиабетическое действие [4]. В настоящий момент в Российской Федерации стандартные образцы генистеина отсутствуют, поэтому было предложено разработать стандартный образец для его аттестации и дальнейшего применения в контроле качества БАДов и лекарственных препаратов на основе данного вещества. Наличие стандартного образца позволит проводить полноценный анализ качества биологически активных добавок, содержащих генистеин. Разработанная методика установления доброкачественности и подходы к анализу БАДов на основе генистеина позволит в перспективе создать лекарственные препараты на основе данного вещества. Список литературы 1. Леонтьев ДА. Система вторичных стандартных образцов в лабораториях контроля качества лекарственных средств // Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. – 2016. - № 1. - С. 50-54. 2. Trends in developments of certified reference materials for chemical analysis - Focus on food, water, soil, and sediment matrices / I.R.B. Olivares, G.B. Souza, A.R.A. Nogueira et al. // Trends in Analytical Chemistry. – 2018. - № 100. – P. 53-64. 3. Громова, А. В. Проблемы перевода фармацевтической терминологии Понимание и рефлексия в коммуникации, культуре и образовании Сб. статей Всероссийской (с международным участием) научно- практической конференции, посвящённой памяти заслуженного деятеля науки, профессора, доктора филологических наук Георгия Исаевича Богина (Тверь, 12 – октября 2018 г. – Тверь Издательство Тверской государственный университет, 2019. – С. 100-105. 4. Оценка качества и радиозащитной эффективности фармацевтической субстанции на основе синтетического генистеина как перспективного лекарственного препарата для сопровождения лучевой терапии /О.Ю. Стрелова, Л.С. Теслов, КВ. Волкова и др Радиологические основы лучевой терапии Материалы й Российской конференции с международным участием (Дубна, 17-18 октября. – Дубна, 2019. - С. 128-130. |