Материалы международной научнопрактической конференции современная фармация
 Скачать 4.31 Mb.
|
|
Учитывая перспективности топинамбура Правительства Республики Таджикистан принял Постановления о интродукции и селекции топинамбура в различных географических зонах республики и на его основе развивать сырьевой источников пищевой и фармацевтической промышленности. Поэтому, изучение свойств, особенно новых селекционными сорта топинамбура в условия Таджикистана и на его основе разрабатывать лекарственные формы, является задачей актуальной. Цель фармако-технологическое исследование травы топинамбура и разработка новых фитопрепаратов лечебного и профилактического назначения. Материал исследования Объектом исследования служили селекционной работы топинамбура культивируемого в Яванском районе Республики Таджикистан под названием «Сарват» - (богатство) (рис. 1 2. Рис. 1 - Топинамбур вид “Сарват”: 1. Карта РТ, 2. топинамбур в период цветения, 3. клбней топинамбура. Преобладающая форма клубней – грушевидная, продолговато-овальная, веретеновидная. Окраска клубней светло-коричневая. Топинамбур (Helianthus tuberosus сорт “Сарват” является высокорослым сортом, высота стебля достигает 3-4 м, имеет Конференция материалдары, 2021 202 много листьев. Окраска листьев темно-зеленная, формирует много цветков. Окраска цветков желтая, продолжительность цветения долгая. Клубни белого цвета, имеют продолговатую форму, с хорошим вкусом. Сорт «Сарват» является засухоустойчивыми солеустойчивым. Этот сорт по таким важным признакам, как количество надзеный части и клубней, продуктивности растений и урожайности значительно превышает исходного сорта топинамбура Интерес (Россия) [2]. Методы исследования Присутствие углеводов было доказано с помощью хроматографии в тонком слое сорбента. Анализ проводили на пластинках «Сорбфил- ПТСХ-АФ-А-УФ» в системе растворителей изопропанол-вода (4:1). В качестве детектирующих реагентов использовали антроновый реактив, резорциновый реактив и дифениламиновый реактив. Для качественного и количественного определения свободных углеводов использовали метод прямофазной ВЭЖХ при следующих условиях колонках мм) или аналогичная с подвижной фазой ацетонитрил - вода (70:30) при скорости потока 1 мл/мин, при комнатной температуре с рефрактометрической детекцией. Для анализа связанных углеводов водное извлечение гидролизовали 1 М раствора хлористоводородной кислоты при 100 Св течение 2,5 часов. Содержание связанных углеводов определяли методом капиллярного электрофореза, используя прибор Applied Biosistem Т. Обработку электрофореграмм осуществляли с помощью той же программы, что и свободных сахаров. Отношение пиков и расчет концентраций проводили по внутреннему (глюкозамин) и внешнему (смеси 5 анализируемых углеводов) стандарту в концентрации 1 гл. Анализ аскорбиновой кислоты осуществляли методом ВЭЖХ. Использовали хроматограф высокого давления, укомплектованный системой градиатной подачи элюента [5,6]. УФ -диоднометричний детектор с компьютерной системой сбора и обработки результатов, функционирующий при следующих условиях - колонка 250×4,6 мм, сорбент Kromosil С с размером частиц 5 мкм. температура термостата 38 С длина волны детектирования 280 нм подвижная фаза ацетонитрил, 0,01% раствор фосфорной кислоты-градиентный режим элюирования, скорость элюирования 1мл/мин. В качестве стандарта использована аскорбиновая кислота фирмы (Sigma A-5960) Для идентификации инулина предложен метод тонкослойной хроматографии, описанный ДА. Шматковым [7]. Анализ проведен пластинках «Сорбфил- ПТСХ-АФ-А- УФ» в системе растворителе изопропанол-вода (4:1). Проявитель 20% спиртовый раствор тимола и кислота серная разведенная. Количественное определение фруктозанов и фуктозидов проводили спектрофотометрическим методом по реакции фруктозидов и фруктозанов со спиртовым раствором резорцина, стандартом служил инулин (Sigma 12255) [2, Содержание экстрактивных веществ в сырье определяли по ГФ Х. Статистическую обработку результатов фитохимических исследований проводили в соответствии с ГФ Х ОФС.1.1.0013.15 [8]. Результаты исследования. Для определения химического состава топинамбура использовали хроматограф Finnigan Trace DSQ GC/MS оборудованном автоинжектором AL 3000 (Thermo Fisher Scientific Inc., MA, USA) и капиллярной колонкой (Thermo TR- 5MS, crosslined 5% фенилполисилфенилен-силоксан, 30 м. x 0.25 мм. внутренний диаметр, толщина фазы 0.25 мм. Условия масс-спектрометрии: ионизация напряжения 70 эВ. Ионный источники температура 250 С. Скорость сканирования 50-450 мс. Время удержания растворителя 2 мин. Химический состав топинамбура сорт “Сарват” как пищевой и лечебной культуры представлена в таблице 1. Конференция материалдары, 2021 203 Таблица 1 - Химический состав топинамбура сорт “Сарват”. Вид объекта Масса сухого вещества, % Жир Клетчатка Протеин, % Экстрактивные вещества, % Зола, % Надземные части 23,3 2,2 20, 6 14,4 76,3 15,2 Клубни 21,5 1,8 3,9 12,7 58,5 6, 4 Полученные данные свидетельствуют о том, что по химическому составу надземные части топинамбура отличается от клубней и для дальнейшего исследования остановились на травы топинамбура. Для извлечения суммы веществ из травы топинамбура использовали таких экстрагентов, как вода очищенная, этиловый спирт различной концентрации. Оптимальную концентрацию находили путем сравнения содержания экстрактивных веществ в извлечениях, полученных с использованием воды очищенной и спирта этилового различной концентрации (20%,40%,70%). Полученные результаты представлены в таблице 2. Таблица 2 - Результаты количественного определения экстрактивных веществ в траве топинамбура. №№ Экстрагент Содержание экстрактивных веществ в траве, % 1. Вода очищенная 37,23 0,23 2. Спирт этиловый, 20% 31,64 0,33 3. Спирт этиловый, 40% 24,55 0,45 4. Спирт этиловый, 70% 20,15 0,56 5. Спирт этиловый 90% 16,43 0,34 Как видано из таблицы 2, оптимальную концентрацию экстрагента находили путем сравнения содержания экстрактивных веществ в извлечениях, полученных с использованием воды очищенной и спирта этилового различной концентрации. По мере увеличения концентрации спирта содержание экстрактивных веществ уменьшается и максимальной экстракционной способностью - обладает вода очищенная. Вода очищенная, как экстрагент, имеет ряд преимуществ она хорошо проникает через клеточные стенки, растворяет многие лекарственных веществ. Однако, вода очищенная подвергается микробной контаминации. Другим широко распространенным экстрагентом является спирт этиловый. Этиловый спирт доступен и относительно дешев, обладает бактериостатическим действием. Полученные данные свидетельствуют о том, что максимальной извлекающей способностью обладает вода очищенная, затем спирт этиловый 20%, и, наконец, спирт этиловый 40%, причем в последнем случае, это отличие является статистически достоверным, как по количеству экстрактивных веществ, таки полисахаридов. Для максимального экстрагирования необходимо найти оптимальное соотношение сырье экстрагент. Для исследования соотношения сырье экстрагент (вода очищенная и спирт этиловый 20%) проводили в диапазоне 1:5 - 1: 10 на водяной бане, в колбе с обратным холодильником. В колбу с обратным холодильником помещали 50 г. сырья, добавляли 250 или 500 мл. экстрагента, выдерживали 1 час. Затем нагревали на водяной бане в течение х часов. Затем извлечение отфильтровывали с использованием фильтра бумажного лабораторного марки "Фи анализировали. Измельченность сырья составляла 1-2 мм. Результаты эксперимента приведены в таблице 3. Конференция материалдары, 2021 204 Таблица 3 - Зависимость извлечения полисахаридов из травы топинамбура от соотношения сырье экстрагент (n=5). Соотношение сырье экстрагент Вид экстрагента Вода очищенная Р-р спирта этилового 20% Сухой Остаток, г Сумма полисахаридов, от сухого остатка, % Сухой Остаток, г Сумма полисахаридов, от сухого остатка 1:5 13,45±0,54 75,83±0,12 12,12±0,4 70,17±0,35 1:10 15,15±0,22 76,43±0,28 13,19±0,3 71,34±0,26 Как видно из таблицы 3, увеличение объема экстрагента в два раза, приводит к незначительному изменению в количествах извлеченных полисахаридов (0,4% и 0,2% соответственно, как в случае воды очищенной, таки спирта этилового 20%. В стеклянный реактор вместимостью 500 мл, загружали 50,0 г. измельченных до размера 0,5-1,0 мм. высушенных листья топинамбура, заливали спирта этилового 20% в количестве 255,0 мл, помещали на водяную баню температурой 80 С. Внутрь реактора помешали мешалку. Частота вращения составляла 50-100 об/мин -1 . По истечении 45 мин извлечение в количестве 100 мл. сливали, а сырье заливали спирта этилового 20% в количестве 100 мл. Повторно проводили обработку сырья спирта этилового 20% в течение 30 мин. Получали 100 мл извлечения. Оценивали выход сухого остатка и суммы полисахаридов при различных условиях экстрагирования, как при первой, таки при второй экстракции. Результаты эксперимента приведены в таблице 4. Таблица 4 - Показатели качества водного извлечения из травы топинамбура. Показатели качества Серия 1 2 3 Внешний вид Жидкость темно-зеленого цвета Реакции на дубильные вещества Положительные Сухой остаток, % 9,34 8,3 9,32 Содержание дубильных веществ, % 3,55 3,2 2,1 Общее число микроорганизмов 9 9 9 Общее число грибов <8 <8 <8 Наличие Епterobасtегiасеае, Staphylo- соссиs, Р нет нет нет Для получения водной извлечения из травы топинамбура использовали лабораторной установке, представляющей собой перколятор с паровой рубашкой. Сырьё заливали горячей водой в соотношении 1:5, настаивали в течение 1,5 часов при температуре С, затем сливали и немедленно фильтровали. Повторно заливали 3 объёмами горячей воды, настаивали еще 1 час, сливали и фильтровали. Показатели качества извлечения из травы топинамбура представлены в таблице 5. Для получения сухого экстракта извлечение упаривали на роторном испарителе ИР- 1М до консистенции сиропа, затем сушили в вакуум-сушильном шкафу при температуре не выше Си измельчали в ступке. Стандартизация экстракта травы топинамбура сухого проводили по числовым показателям, указанным в таблице 5. Конференция материалдары, 2021 205 Таблица 5 - Органолептические, физико-химические показатели экстракта травы топинамбура сухого. Наименование показателя Характеристики и нормы Методы испытания Внешний вид порошок буро-коричневого цвета со слабым травянистым запахом. ГОСТ 26186-91, с. 6 Вкус горьковато-соленый ГОСТ 261 86-91, с. 6 Подлинность Дубильные вещества С раствором железоам-монийных квасцов даёт черно-синее окрашивание ГОСТ 261 86-91, с. 6 Потеря массы при высушивание Не более 5 % ГОСТ 261 86-91, с. 6 Содержание дубильных веществ Не менее 13,4% ГОСТ 261 86-91, с. 6 Полученных результаты можно использовать при составления проект ФСП на траву топинамбура. Выводы 1. Разработана технология экстракта травы топинамбура сухого определены технологические показатели исходного сырья. Установлено, что для получения экстракта травы топинамбура сухого оптимальным экстрагентом является вода очищенная. 2. Теоретически обоснованы и экспериментально разработаны методики анализа и нормы качества экстракта травы топинамбура сухого по основным действующим веществам. Список литературы 1.Рамазони Ш.С. Фитохимическое исследование клубней топинамбура и создание лечебно- профилактических средств на его основе Диссерт. на соиск. уч. степ. канд. фармац. наук. – Москва, 2011. - 233 с. 2.Содержание углеводов в клубнях топинамбура, заготовленных в Таджикистане и России / Ш.С. Рамазони, Д.Р.,Халифаев, ДМ. Попов, Ф.С. Шаропов/Фармация (Москва. - 2015. - № 3. - С. 14-17. 3. Партоев К, Сайдалиев Н.Х. Продуктивность топинамбура (Helianthus tuberosus l.) в условиях Гиссарской и Раштской долин Таджикистана. - Душанбе, 2020. – 139 с. 4. Ахмедов ХМ, Партоев К, Ташбаев ГА. Топинамбур (Helianthus tuberosus L.) – перспективная культура для производства биоэтанола в Таджикистане Известия Академия наук Республики Таджикистан. – 2014. - № 4 (157). - С. 105-112. 5. Белоусова А.Л. Исследование травы топинамбура и создание лекарственных препаратов на его основе Автореф. дис. на соиск. ученой степени. канд. фарм. наук- Пятигорск, 2004. - 24 с. 6. Наумова О.А., Попов ДМ. Количественное определение аскорбиновой кислоты в плодах бархата амурского методом ВЭЖХ//Весник Пермской государственной фармацевтической академии. – 2010. - № 7. - С. 132 – 136. 7. Шматков ДА. Использование физико – химических методов анализа для изучения химического состава, оценки качества и стандартизации корней лопуха большого Диссерт. на соиск. учен. cтепени канд. фармац. наук. – Москв, 2000. 8. Государственная Фармакопея РФ Х, том 2. – Москва, 2015. Конференция материалдары, 2021 206 ҒТАМБ 76.31.35 Ж 615.9:615.222 ХИМИЯ-ТОКСИКОЛОГИЯЛЫҚ ЗЕРТТЕУЛЕР ҮШІН АНТИАРИТМИЯЛЫҚ ПРЕПАРАТТАРДЫҢ ИДЕНТИФИКАЦИЯЛАУ Ә ДІСТЕМЕСІН ЖАСАУ Жұманазар Н.Н., Серикбаева АД, Ордабаева С.К. НО тстік Қазақстан медицина академиясы, Шымкент қ., Қазақстан Биологиялық матрицадан бөлініп алынған антиаритмиялық препараттардың химия-токсикологиялық зерттеулеріне арналған жұқа қабатты хроматографиялық скрининг көмегімен идентификациялау әдістемесі жасалды. Тәжірибені жүргізу барысында диэтил эфирі-ацетон - 25% аммиак (2:2:1) еріткіштер жүйесінен тұратын жылжымалы фаза таңдалды. Зерттелген токсиканттарың Rf мәндері: пропранолол – 0,62±3 , бисопролол – 0,55±3, амиодарон - 0,43±3, пропафенон – 0,52±3 болды. Осы аталған аналиттерді идентификациялау үшін детектірлер таңдалып, ашу шегі анықталды. Кілт сөздер: пропафенон, пропранолол, бисопролол, амиодарон, идентификация. DEVELOPMENT OF ANTIARHYTHMIC DRUGS IDENTIFICATION METHOD FOR CHEMICAL-TOXICOLOGICAL RESEARCH N. Zhumanazar, A. Serikbayeva, S. Ordabayeva South Kazakhstan medical academy, Shymkent, Kazakhstan A method for the identification of antiarrhythmic drugs isolated from a biological matrix using thin layer chromatographic screening for chemical and toxicological studies has been developed. In the course of the experiment, a mobile phase was selected, consisting of a system of solvents diethyl ether-acetone - 25% ammonia (2: 2: 1). The Rf values of the studied toxicants were: propranolol - 0.62 ± 3, bisoprolol - 0.55 ± 3, amiodarone - 0.43 ± 3, propafenone - 0.52 ± 3. Key words:propafenone, propranolol, bisoprolol, amiodarone, identification. РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ ИДЕНТИФИКАЦИЙ АНТИАРИТМИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ Н.Н. Жуманазар, АД. Серикбаева, С.К. Ордабаева Южно-Казахстанская медицинская академия, Шымкент, Казахстан Разработан метод идентификации антиаритмических препаратов, выделенных из биологической матрицы, с помощью тонкослойного хроматографического скрининга для химических и токсикологических исследований. Входе эксперимента была выбрана подвижная фаза, состоящая из системы растворителей диэтиловый эфир-ацетон - 25% аммиак (2: 2: 1). Значения Rf исследуемых токсикантов составили пропранолол - 0,62 ± 3, бисопролол - 0,55 ± 3, амиодарон - 0,43 ± 3, пропафенон - 0,52 ± 3. Ключевые слова:пропафенон, пропранолол, бисопролол, амиодарон, идентификация. Кіріспе. Дүниежүзілік денсаулық сақтау ұйымының зерттеулеріне сәйкес тұрғындардың өліміне және өмір сүру сапасының төмендеуіне алып келетін аурлар саны соңғы он жыл ішінде күрт артуда. Осындай аурулардың бірі жүрек-қантамыр ырғағының бұзылыстары [1]. Жүрек ырғағының бұзылыстары оның таралуы, алдын-ала диагностикалаудың қиындығы тұрғысынан жүрек-қан тамырлары ауруының асқынуларының және халықтың ерте мүгедектікке алып келуінің себебі болып табылады. Жүректің соғу жылдамдығының бұзылысына алып келетін аурудың бірі – аритмия [2]. Қазіргі кезде антиаритмиялық қасиеті бар 100-ден астам дәрі бар екені белгілі және олардың көпшілігі медициналық тәжірибеге енгізілген. Осы мақсатта амиодарон, пропафенон сияқты тағы да баса антиаритмиялық қасиетке ие препараттар кең Конференция материалдары, 2021 207 қолданылады. Аритмияны емдеуге арналған дәрілік препараттар өмірлік маңызы барж нет рындара босатылуы қолжетімді дәрілер болып табылады [3]. Р Кардиология және ішкі аурулар ғылыми-зерттеу институтының мәліметтері бойынша, біздің елімізде қанайналым жүйесі ауруларынан болатын өлім-жітім әлдеқашан жоғарғы көрсеткішке жетті - 100 мы адамға шаққанда 500-600 жағдай. Республикада екі миллиона жуық адам жүрек-қан тамырлары ауруларымен тіркелген. Бұл елдің экономикалық белсенді халқының 12% құрайды [4]. Қазіргі таңда фармацевтикалық нарыта дәрілік заттар ассортиментінің тек п жнет рындара қол жетімді болуының салдарынан, дәрілермен уланудың суицидтік және криминогенді жағдайлары жиі кездесуде. Дәрілік заттардың интоксикацияның комбинирленуі, олардың организмдегі жнем йіттегі зат алмасу процестерінің әсеріне ұшырауы, зерттеуге кіретін объектілердің шектеулі саны, жоғары сезімтал және спецификалық заманауи талдау әдістерін енгізу қажеттілігін көрсетеді. Химия-токсикологиялық талдау жүргізу барысында ЖҚХ әдісі маңызды әрі тиімді ә дістердің бірі болып табылады [5]. Хроматографиялық әдістің бұл түрі көп жағдайда сынамаға скринингтік зерттеулер жүргізу кезінде күрделі және көпкомпонентті органикалық қосылыстардың қоспаларын қарапайым топтарға бөлу мақсатында қолданылады. Қоспаларды бөлу кезеңінен со сезімталдығы жоғары әдістермен (ГХ, ГСХ, ЖЭСХ, И, УК-спектрофотометрия) зерттеулер жүргізіледі. Талдау әдістерінің шеңберін кішірейту мақсатында скринингтік әдістер қолданылады. Соның ішінде жұқа қабатты хроматографиялық (ЖҚХ) скрининг жиі пайдаланылады. Скринигтің бірінші кезеңінде дәрілік улардың ай топа жататындығы, ал екінші кезеңінде нақты қандай дәрілік зат екендігі анықталады. Әдеби шолу нәтижесінде антиаритмиялық препраттарға арналған хроматографиялық скрининг жоқтығы анықталды, сол себептен осы зерттеу тәсілін жүргізу өзекті мәселе болып отыр. Зерттеудің мақсаты: химия-токсикологиялық зерттеулер үшін антиаритмиялық препараттардың идентификациялау әдістемесін жасау. |