Фармакопея 12 - 1 часть. Научный центр экспертизы средств медицинского применения
 Скачать 3.93 Mb.
|
|
C38H72N2O12 x 2H2O М.м. 785,0 Содержит не менее 94,0% и не более 102,0% C38H72N2O12 в пересчете на безводное вещество. 1 мг C38H72N2O12 (азитромицина) соответствует специфической активности, равной одной единице действия (ЕД). Описание. Белый или почти белый порошок. Растворимость. Легко растворим в хлороформе и спирте 96%, практически нерастворим в воде. Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия -1 бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца азитромицина. Если в спектрах обнаруживаются различия, регистрируют спектры растворов субстанции и стандартного образца азитромицина с концентрацией 90 г/л в хлористом метилене. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора (раздел "Количественное определение") должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца азитромицина. Удельное вращение. От -45 до -49 град. в пересчете на безводное вещество (2% раствор субстанции в этаноле). Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 50 мл этанола должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I. Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном B9. pH. От 9,0 до 11,0 (0,1 г субстанции растворяют в 25 мл метанола и разбавляют водой до 50 мл). Посторонние примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях, описанных в разделе "Количественное определение". Хроматографируют испытуемый раствор А, раствор сравнения А и раствор сравнения Б. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора А должно не менее чем в 3 раза превышать время удерживания пика азитромицина. На хроматограмме испытуемого раствора А площадь пика примеси В должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 2,0%); площадь пика любой другой примеси должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,0%); суммарная площадь пиков примесей должна быть не более пятикратной площади пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 5,0%). Хлориды. 0,75 г субстанции встряхивают с 25 мл воды в течение 1 мин. и фильтруют. 10 мл фильтрата должны выдерживать испытание на хлориды (не более 0,01% в субстанции). Вода. Не менее 1,9% и не более 6,5%. Определение проводят методом К.Фишера из точной навески около 0,5 г субстанции. Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ. Буферный раствор с pH 6,5. 34,84 г калия фосфата двузамещенного растворяют в 900 мл воды, доводят pH раствора до 6,5 85% фосфорной кислотой, разбавляют водой до 1000 мл и перемешивают. Испытуемый раствор А. Около 0,1 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в смеси ацетонитрил - вода (2:3), доводят объем раствора той же смесью до метки и перемешивают. Испытуемый раствор Б. 5 мл испытуемого раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 20 мл, доводят объем раствора смесью ацетонитрил - вода (2:3) до метки и перемешивают. Стандартный раствор А. Около 0,05 г (точная навеска) стандартного образца азитромицина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в смеси ацетонитрил - вода (2:3), доводят объем раствора той же смесью до метки и перемешивают. Раствор сравнения А. 1 мл стандартного раствора А разбавляют смесью ацетонитрил - вода (2:3) до 25 мл. Раствор сравнения Б. 0,002 г стандартного образца примеси В азитромицина (3-дезоксиазитромицин; стандарт ВР или аналогичного качества) растворяют в 25 мл смеси ацетонитрил - вода (2:3). Раствор для проверки пригодности системы. 0,002 г азитромицина и 0,002 г стандартного образца примеси А азитромицина (6-дезметилазитромицин; стандарт ВР или аналогичного качества) растворяют в 20 мл раствора сравнения Б. Хроматографические условия Колонка - 250 x 4,6 мм с октадецилсилил силикагелем (C18), 5 мкм; Температура - 70 град. C; Подвижная - буферный раствор с pH 6,5 - ацетонитрил - вода фаза(ПФ) (2:7:11); Скорость потока - 1 мл/мин.; Детектор - спектрофотометрический, 215 нм; Объем пробы - 100 мкл; Хроматографируют раствор для проверки пригодности системы. Время удерживания пика азитромицина около - 26 мин. Относительное время удерживания пика примеси А - около 0,42, пика примеси В - около 1,7. Разрешение (R) между пиками азитромицина и примеси А должно быть не менее 7,0. Пять раз хроматографируют стандартный раствор А. Относительное стандартное отклонение для площади пика азитромицина должно быть не более 2,0%. Хроматографируют испытуемый раствор Б и стандартный раствор А и определяют площади пиков азитромицина. Содержание C38H72N2O12 в процентах (X) вычисляют по формуле: S1 x a 0 x P x 100 X = -------------------, S0 x a1 x (100 - W) где: S1 - площадь пика азитромицина на хроматограмме испытуемого раствора Б; S0 - площадь пика азитромицина на хроматограмме стандартного раствора А; a1 - навеска субстанции в граммах; a0 - навеска стандартного образца азитромицина в граммах; W - содержание воды, в процентах; P - содержание основного вещества в стандартном образце азитромицина в процентах. Хранение. Список Б. В сухом месте. АМЛОДИПИНА БЕСИЛАТ (ФС 42-0214-07) 5-Метилового 3-этилового эфира (RS)-2-[(2-аминоэтокси)метил]-6-метил-4-(2-хлорфенил)-1,4-дигидропиридин-3,5-дикарбоновой кислоты бензолсульфонат C20H25ClN2O5 x C6H6O3S М.м. 567,1 Содержит не менее 97,0% и не более 102,0% C20H25CIN2O5 x C6H6O3S в пересчете на безводное вещество. Описание. Белый или почти белый порошок. Растворимость. Легко растворим в метаноле, умеренно растворим в спирте 96%, мало растворим в воде. Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия -1 бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра амлодипина бесилата (Приложение 1 - не приводится). Ультрафиолетовый спектр 0,005% раствора субстанции в смеси метанол - 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты (99:1) в области от 300 до 400 нм должен иметь максимум поглощения при 360 нм. Посторонние примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ. Буферный раствор с pH 3,0. 7 мл триэтиламина растворяют в 1000 мл воды и доводят pH раствора ортофосфорной кислотой до 3,0 +/- 0,1. Испытуемый раствор. 0,01 г субстанции растворяют в 10 мл подвижной фазы (ПФ). Раствор сравнения. 3 мл испытуемого раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. Раствор для проверки пригодности системы. 0,005 г субстанции растворяют в 5 мл водорода пероксида и выдерживают при температуре 70 град. C в течение 45 мин. Хроматографические условия Колонка - 15 x 0,39 см с октадецилсилил силикагелем (C18), 5 мкм; ПФ - ацетонитрил - метанол - буферный раствор с pH 3,0 (15:35:50); Скорость потока - 1,0 мл/мин.; Детектор - спектрофотометрический, 237 нм; Объем пробы - 10 мкл. Хроматографируют раствор для проверки пригодности системы. Относительные времена удерживания компонентов: примесь D амлодипина (3-этил 5-метил 2-[(2-аминоэтокси)метил]-4-(2-хлорфенил)-6-метоксипиридин-3,5-дикарбоксилат) - около 0,5; амлодипин - 1,0 (около 7 мин.). Разрешение (R) между пиками должно быть не менее 4,5. Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 3 раза превышать время удерживания основного пика. Удвоенная площадь пика примеси D на хроматограмме испытуемого раствора должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3%); сумма площадей всех других пиков посторонних примесей должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3%). Не учитывают пик бензилсульфоната (относительное время удерживания около - 0,2) и пики, площадь которых составляет менее 0,1 площади пика на хроматограмме раствора сравнения (0,03%). Вода. Не более 0,5%. Около 3,0 г субстанции (точная навеска) титруют реактивом К.Фишера. Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г субстанции (точная навеска) не должна превышать 0,2% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции). Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями общей статьи "Остаточные органические растворители". Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота". Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях, описанных в разделе "Посторонние примеси". Испытуемый раствор. Около 0,05 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в ПФ, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. 5 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. Стандартный раствор. Около 0,05 г (точная навеска) стандартного образца амлодипина бесилата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в ПФ, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. 5 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. Пять раз хроматографируют стандартный раствор. Относительное стандартное отклонение площади пика амлодипина должно быть не более 2%. Хроматографируют испытуемый и стандартный растворы. Содержание C20H25ClN2O5 x C6H6O3S в субстанции в процентах (X) в пересчете на безводное, свободное от остаточных органических растворителей вещество, вычисляют по формуле: S x a x P x 100 1 0 x = -------------------, S x a x (100 - W) 0 1 где: S - площадь пика амлодипина на хроматограмме испытуемого раствора; 1 S - площадь пика амлодипина на хроматограмме стандартного раствора; 0 a - навеска субстанции, в граммах; 1 a - навеска стандартного образца амлодипина бесилата, в граммах; 0 W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, в процентах; P - содержание основного вещества в стандартном образце амлодипина бесилата, в процентах. Хранение. Список Б. В сухом, защищенном от света месте. АНАЛЬГИН (ФС 42-0215-07) [(1,5-Диметил-3-оксо-2-фенил-2,3-дигидро-1H-пиразол-4-ил)(метил)амино]-метансульфонат натрия, моногидрат C13H16N3NaO4S x H2O М.м. 351,36 Содержит не менее 99,0% C13H16N3NaO4S в пересчете на сухое вещество. Описание. Белый или белый с едва заметным желтоватым оттенком кристаллический порошок без запаха. Растворимость. Очень легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%, практически нерастворим в хлороформе. Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия -1 бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра анальгина (Приложение 1). Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,002% раствора субстанции в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты в области от 245 до 280 нм должен иметь максимум при 258 нм. 0,05 г субстанции растворяют в 1 мл водорода пероксида. Раствор окрашивается в слегка голубой цвет, который быстро исчезает, и через несколько минут раствор становится красным. 0,1 г субстанции смачивают 0,1 мл воды, прибавляют 5 мл спирта 96% и 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведенной 8,3%. После растворения субстанции прибавляют 5 мл 0,1 М раствора калия йодата; раствор окрашивается в малиновый цвет; при дальнейшем прибавлении реактива окраска усиливается и выделяется бурый осадок. Субстанция дает характерную реакцию Б на натрий. Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 5 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I. Цветность раствора. 6,25 г субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до метки и перемешивают (испытуемый раствор). Не более чем через 10 мин. проводят испытание одним из методов. А. Окраска испытуемого раствора не должна быть интенсивнее окраски эталона GY6. Б. Оптическая плотность испытуемого раствора, измеренная в кювете с толщиной слоя 10 мм при длине волны 400 нм относительно воды, должна быть не более 0,1. pH. От 6,0 до 7,5 (10% раствор). Посторонние примеси. Определение проводят одним из методов. Метод ТСХ Испытуемый раствор. 1 г субстанции помещают в колбу с притертой пробкой вместимостью 50 мл, прибавляют 25 мл безводного хлороформа, встряхивают в течение 5 мин. и фильтруют через бумажный фильтр, смоченный безводным хлороформом, отбрасывая первые порции фильтрата. Раствор сравнения А. 0,01 г 4-аминоантипирина растворяют в 50 мл безводного хлороформа. Раствор сравнения Б. 10 мл раствора сравнения А разбавляют безводным хлороформом до 25 мл. Раствор 4-метиламиноантипирина. 0,035 г субстанции растворяют в 5 мл предварительно охлажденного до 10 град. C 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты и прибавляют по каплям при перемешивании 0,1 М раствор йода до появления желтой окраски, не исчезающей в течение 1 мин., следя за тем, чтобы температура раствора не превышала 10 град. C. К полученному раствору прибавляют по каплям 0,1 М раствор натрия гидроксида до pH 8 и дважды экстрагируют 4-метиламиноантипирин хлороформом порциями по 5 мл. Объединенные хлороформные извлечения сушат в течение 30 мин. над 0,5 г натрия сульфата безводного. 1 мл полученного раствора разбавляют безводным хлороформом до 25 мл. На линию старта пластинки со слоем силикагеля 60 F254 наносят 10 мкл (эквивалент 400 мкг анальгина) испытуемого раствора, 10 мкл (2 мкг) раствора сравнения А, 10 мкл (0,8 мкг) раствора сравнения Б и в одну точку 5 мкл (0,4 мкг) раствора сравнения Б и 5 мкл (около 0,4 мкг) раствора 4-метиламиноантипирина. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин., помещают в камеру со смесью хлороформ - метанол (4:1) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы пройдет 3/4 длины пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 5 мин. и просматривают в УФ-свете при 254 нм. Пятно посторонней примеси на хроматограмме испытуемого раствора, находящееся на одном уровне с пятном 4-метиламиноантипирина на хроматограмме из общей точки нанесения, по совокупности величины и интенсивности поглощения не должно превышать пятно на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5%); пятно любой другой посторонней примеси не должно превышать пятно на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,2%). Суммарное содержание примесей не должно превышать 0,5%. Пятно вблизи линии старта (анальгин) в расчет не принимают. Результаты испытания считаются достоверными, если на хроматограмме из общей точки нанесения четко видны два полностью разделенных пятна. Метод ВЭЖХ Буферный раствор с pH 7,0. 6,0 г натрия фосфата однозамещенного растворяют в 1000 мл воды, прибавляют 1 мл триэтиламина и доводят pH раствора 10% раствором натрия гидроксида до значения 7,0. Испытуемый раствор. 0,050 г субстанции растворяют в 10 мл метанола. Раствор анализируют тотчас же. 0,05% раствор 4-аминоантипирина. 0,010 г 4-аминоантипирина растворяют в 20 мл метанола. Раствор сравнения. 1 мл 0,05% раствора 4-аминоантипирина разводят метанолом до 20 мл. Раствор для проверки пригодности системы. 0,02 г субстанции растворяют в 10 мл метанола и кипятят с обратным холодильником в течение 10 мин., охлаждают и разводят метанолом до 20 мл. К 5 мл полученного раствора прибавляют 5 мл 0,05% раствора 4-аминоантипирина и перемешивают. Условия хроматографирования Колонка - 25 x 0,46 см с октадецилсилил силикагелем (C18), 5 мкм; Подвижная фаза (ПФ) - буферный раствор с pH 7,0 - метанол (72:28); Скорость потока - 1,0 мл/мин.; Детектор - спектрофотометрический, 254 нм; Объем пробы - 10 мкл. Хроматографируют раствор для проверки пригодности системы. На хроматограмме должно наблюдаться 3 пика с относительными временами удерживания 1,0 (анальгин), около 1,4 (4-аминоантипирин) и около 2,0 (4-метиламиноантипирин). Разрешение (R) между пиками анальгина и 4-аминоантипирина должно быть не менее 2,2; между пиками 4-аминоантипирина и 4-метиламиноантипирина - не менее 3,0. Последовательно хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 1,5 раза превышать время удерживания пика 4-метиламиноантипирина. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика 4-метиламиноантипирина должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%), площадь пика любой другой примеси должна быть не более 40% от площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%), суммарная площадь пиков примесей должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%). Не учитывают пики, площадь которых составляет 5% и менее от площади пика на хроматограмме раствора сравнения. Потеря в массе при высушивании. Около 0,5 г (точная навеска) субстанции сушат при температуре от 100 до 105 град. C до постоянной массы. Потеря в массе должна быть не менее 4,7% и не более 5,5%. |