Фармакопея 12 - 1 часть. Научный центр экспертизы средств медицинского применения
 Скачать 3.93 Mb.
|
|
Хлориды. 0,5 г субстанции помещают в коническую колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 10 мл воды, прибавляют 5 мл азотной кислоты разведенной 16% и осторожно кипятят в течение 5 мин. После охлаждения раствор переносят в пробирку, содержащую 0,15 мл 0,1 М раствора серебра нитрата, доводят объем раствора водой до 10 мл и через 1 мин. просматривают в проходящем свете. Параллельно проводят контрольный опыт. Не должно быть опалесценции, превышающей опалесценцию контрольного опыта. Сульфаты. 0,1 г субстанции растворяют в 10 мл воды и тотчас же проводят испытание (не более 0,1% в субстанции). Тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г субстанции должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции). Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители". Бактериальные эндотоксины. Не более 0,14 ЕЭ на 1 мг субстанции. Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции (концентрация 10 мг/мл), а затем разводят его не менее чем в 4 раза. Испытание проводят для субстанции, предназначенной для приготовления инъекционных лекарственных форм. Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота". Количественное определение. Около 0,15 г (точная навеска) субстанции помещают в сухую колбу, прибавляют 20 мл спирта 96%, 5 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты и тотчас титруют 0,1 М раствором йода при перемешивании до появления желтой окраски, не исчезающей в течение 30 с. 1 мл 0,1 М раствора йода соответствует 16,67 мг C13H16N3NaO4S. Хранение. Список Б. В сухом, защищенном от света месте. АРБИДОЛ (ФС 42-0216-07) Этилового эфира 6-бром-5-гидрокси-1-метил-4-(диметиламинометил)-2-(фенилтиометил)индол-3-карбоновой кислоты гидрохлорид, моногидрат C22H25BrN2O3S x HCl x Н2O М.м. 531,9 Содержит не менее 99,0% и не более 101,0% C22H25BrN2O3S x HCl в пересчете на безводное вещество. Описание. От белого до белого с зеленовато-желтоватым или кремовым оттенком кристаллический порошок. Растворимость. Мало растворим в хлороформе и спирте 96%, практически нерастворим в воде. Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия -1 бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра арбидола (Приложение 1). Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,001% раствора субстанции в смеси спирт 96% - 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты (9:1) в области от 210 до 400 нм должен иметь максимумы при 225 нм, 255 нм и 316 нм и минимумы при 244 нм и 284 нм. 0,1 г субстанции смешивают в фарфоровом тигле с 0,5 г смеси для спекания и прокаливают. По охлаждении остаток растворяют в 10 мл воды и фильтруют. 2 мл фильтрата дают характерную реакцию А на бромиды. 2 мл фильтрата дают характерную реакцию на сульфаты. 0,1 г субстанции встряхивают с 5 мл азотной кислоты разведенной 16% и фильтруют. Полученный фильтрат дает характерную реакцию на хлориды. Посторонние примеси. Испытуемый раствор. 0,05 г субстанции растворяют в 5 мл метанола. Раствор сравнения. 1 мл испытуемого раствора разбавляют метанолом до 100 мл. Немедленно после приготовления растворов на линию старта пластинки со слоем силикагеля 60 F254 наносят 20 мкл (200 мкг) испытуемого раствора, 10 мкл (1 мкг) и 5 мкл (0,5 мкг) раствора сравнения. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру со смесью хлороформ - ацетон - диэтиламин (5:4:1) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы пройдет около 3/4 пластинки, ее вынимают из камеры, сушат при температуре 120 град. C в течение 10 мин. и просматривают в УФ-свете при 254 нм. Суммарное содержание посторонних примесей, оцененное по совокупности величины и интенсивности поглощения их пятен на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с пятнами на хроматограммах раствора сравнения, не должно превышать 0,5%. Допускается пятно на линии старта (диэтиламина хлорид). Результаты испытания считаются достоверными, если на хроматограмме раствора сравнения (0,5 мкг) четко видно пятно. Вода. Не менее 3,0% и не более 4,0%. Определение проводят методом К.Фишера из точной навески около 0,5 г субстанции. Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г (точная навеска) субстанции не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции). Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители". Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота". Количественное определение. Около 0,5 г (точная навеска) субстанции растворяют в 1 мл муравьиной кислоты, прибавляют 30 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до желтого окрашивания (индикатор - 0,5 мл 0,1% раствора кристаллического фиолетового). Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 51,39 мг C22H25BrN2O3S x HCl. Хранение. Список Б. В защищенном от света месте. АРТИКАИНА ГИДРОХЛОРИД (ФС 42-0217-07) Метилового эфира 4-метил-[[2-(пропиламино)пропионил]амино]тиофен-2-карбоновой кислоты гидрохлорид C13H10N2O3S x HCl М.м. 320,84 Содержит не менее 98,5% и не более 101,0% C13H10N2O3S x HCl в пересчете на сухое вещество. Описание. Белый или белый с желтовато-зеленоватым оттенком кристаллический порошок. Растворимость. Легко растворим в воде, легко растворим или растворим в спирте 96%, мало растворим в ацетоне. Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия -1 бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра артикаина гидрохлорида (Приложение 1). Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,002% раствора субстанции в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты в области от 200 до 350 нм должен иметь максимум при 272 нм и минимум при 230 нм. Субстанция дает характерную реакцию на хлориды. Температура плавления. От 167 до 172 град. C (начало разложения, метод 1а). Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I. Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен выдерживать сравнение с эталоном BY6. pH. От 4,1 до 5,1 (4% раствор). Посторонние примеси. Определение проводят одним из методов. Метод ТСХ Испытуемый раствор. 0,05 г субстанции растворяют в 4,8 мл метанола, прибавляют 0,2 мл диэтиламина и перемешивают. Раствор сравнения. 0,5 мл испытуемого раствора разбавляют метанолом до 100 мл. Раствор для проверки пригодности системы. К 0,02 г субстанции прибавляют 0,1 мл уксусного ангидрида, выдерживают 30 мин., прибавляют 1,7 мл метанола, 0,2 мл диэтиламина и перемешивают до полного растворения. Подготовка пластинки. Пластинку со слоем силикагеля 60 F254 помещают в камеру с метанолом и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе, а затем при температуре 100-105 град. C в течение 15 мин. На линию старта подготовленной пластинки со слоем силикагеля 60 F254 наносят 5 мкл (50 мкг) испытуемого раствора, 10 мкл (0,5 мкг), 5 мкл (0,25 мкг) раствора сравнения и 5 мкл раствора для проверки пригодности системы. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру со смесью хлороформ - метанол (40:1) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы пройдет 3/4 пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 5 мин. и просматривают в УФ-свете при 254 нм. Суммарное содержание примесей, оцененное по совокупности величины и интенсивности поглощения их пятен на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с пятнами на хроматограммах раствора сравнения, не должно превышать 1%. Результаты испытания считаются достоверными, если на хроматограмме раствора для проверки пригодности системы обнаруживается не менее двух пятен, отличающихся по величинам Rf от пятна на хроматограммах раствора сравнения, и на хроматограмме раствора сравнения (0,25 мкг) четко видно пятно. Метод ВЭЖХ 0,01 М раствор натрия гептилсульфоната с pH 2,0. 2,02 г натрия гептилсульфоната и 4,08 г калия фосфата однозамещенного, растворяют в 900 мл воды, доводят pH раствора ортофосфорной кислотой до 2,0 и доводят объем раствора водой до 1000 мл. Испытуемый раствор. 0,01 г субстанции растворяют в 10 мл подвижной фазы (ПФ). Раствор примесей. 0,01 г стандартного образца примеси А артикаина ("ацетамидоартикаин" - метил 3-[[2-(пропиламино)ацетил]амино]--4-метилтиофен-2-карбоксилат; стандарт ВР или аналогичного качества) и 0,005 г стандартного образца примеси Е артикаина ("изопропилартикаин" - метил-4-метил-3-[[(2RS)-2-[(1-метилэтил)амино]пропионил]амино]тиофен-2-карбоксилат; стандарт ВР или аналогичного качества) растворяют в 100 мл ПФ. Раствор для проверки пригодности системы. 10 мг субстанции растворяют в 10 мл ПФ, прибавляют 0,2 мл раствора примесей и перемешивают. Раствор сравнения А. 1 мл испытуемого раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. Раствор сравнения Б. 1 мл раствора примесей переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. Хроматографические условия Колонка - 15 x 0,39 см с октадецилсилил силикагелем (C18), 5 мкм; ПФ - ацетонитрил - 0,01 М раствор натрия гептилсульфоната с pH 2,0 (25:750); Температура - 45 град. C; Скорость потока - 1,0 мл/мин.; Детектор - спектрофотометрический, 276 нм; Объем пробы - 10 мкл. Хроматографируют раствор для проверки пригодности системы. Время удерживания пика артикаина около 9,3 мин. Относительное время удерживания пика примеси А около 0,8, пика примеси Е около 0,86. Разрешение (R) между пиками примеси А и примеси Е должно быть не менее 1,2. Хроматографируют раствор сравнения А, раствор сравнения Б и испытуемый раствор. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 5 раз превышать время удерживания основного пика. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси А должна быть не более площади пика примеси А на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,2%); площадь пика любой другой примеси должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,1%); суммарная площадь пиков любых других примесей не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5%). Не учитывают пики, площадь которых менее половины площади пика на хроматограмме раствора сравнения А. Потеря в массе при высушивании. Около 0,5 г (точная навеска) субстанции сушат при температуре от 100 до 105 град. C до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,5%. Сульфатная зола. Не более 0,1%. Определение проводят из около 1 г (точная навеска) субстанции. Тяжелые металлы. Сульфатная зола из 0,5 г субстанции должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,002% в субстанции). Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители". Бактериальные эндотоксины. Не более 0,7 ЕЭ на 1 мг субстанции. Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции (концентрация 40 мг/мл), а затем разводят его не менее чем в 30 раз. Испытание проводят для субстанции, предназначенной для приготовления инъекционных лекарственных форм. Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота". Количественное определение. К около 0,2 г (точная навеска) субстанции прибавляют 10 мл уксусной кислоты ледяной и 4 мл раствора ртути окисной ацетата, перемешивают до растворения навески, прибавляют 0,09 мл 0,1% раствора кристаллического фиолетового и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. В конце титрования (при первом изменении цвета индикатора) прибавляют 10 мл уксусного ангидрида и продолжают титрование до появления голубовато-зеленого окрашивания. Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 32,08 мг C13H10N2O3S x HCl. Хранение. Список Б. В сухом защищенном от света месте. АСКОРБИНОВАЯ КИСЛОТА (ФС 42-0218-07) (5R)-5-[(1S)-1,2-Дигидроксиэтил]-2,3-дигидроксифуран-2(5H)-он C6H8O6 М.м. 176,12 Содержит не менее 99,0% C6H8O6. Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы; на свету постепенно темнеет. Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в хлороформе. Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия -1 бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра аскорбиновой кислоты (Приложение 1). Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,001% раствора субстанции в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты в области от 230 до 300 нм должен иметь максимум при 243 нм. 0,05 г субстанции растворяют в 2 мл воды и прибавляют 0,5 мл раствора серебра нитрата; выпадает темный осадок. К 1 мл 5% раствора субстанции прибавляют 2 мл 0,1 М раствора йода; реактив обесцвечивается. Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I. Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен выдерживать сравнение с эталоном BY7. Удельное вращение. От +20,5 до +21,5 град. (10% раствор; определяют тотчас после приготовления испытуемого раствора). pH. От 2,1 до 2,6 (5% раствор). Кислота щавелевая. Испытуемый раствор. 0,25 г субстанции растворяют в 5 мл воды, нейтрализуют по лакмусовой бумаге 10% раствором натрия гидроксида, прибавляют 1 мл 12% раствора уксусной кислоты и 0,5 мл 7,35% раствора кальция хлорида. Раствор сравнения. 0,070 г щавелевой кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл, растворяют в воде, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. К 5 мл полученного раствора прибавляют 1 мл раствора уксусной кислоты разведенной 12% и 0,5 мл 7,35% раствора кальция хлорида. Раствор готовят одновременно с испытуемым раствором. Через 1 ч опалесценция испытуемого раствора не должна превышать опалесценцию раствора сравнения (не более 0,2%). Медь. Исходный стандартный раствор меди (10 мкг/мл). Около 0,393 г (точная навеска) меди сульфата (эквивалент около 0,1 г меди) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки. Непосредственно перед использованием 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Стандартные растворы. 2 мл, 4 мл и 6 мл исходного стандартного раствора меди помещают в мерные колбы вместимостью 100 мл, доводят объемы растворов 0,1 М раствором азотной кислоты до метки и перемешивают. Используют свежеприготовленные растворы. Испытуемый раствор. Около 2,0 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в 0,1 М растворе азотной кислоты, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. Измеряют поглощение стандартных растворов на атомно-абсорбционном спектрометре при длине волны 324,8 нм, используя в качестве источника излучения лампу с полым медным катодом и воздушно-ацетиленовое пламя. Базовую линию устанавливают по 0,1 М раствору азотной кислоты. Строят калибровочный график зависимости величины поглощения от концентрации меди (мкг/мл). В тех же условиях измеряют поглощение испытуемого раствора. Содержание меди в препарате в процентах (X) вычисляют по формуле: C x 25 x 100 C x = ------------- = ---------, a x 1000000 a x 400 где: C - концентрация меди в испытуемом растворе, определенная по калибровочному графику, в мкг/мл; a - навеска субстанции, в граммах. Содержание меди в препарате должно быть не более 0,0005%. Железо. Исходный стандартный раствор железа (20 мкг/мл). Около 0,863 г (точная навеска) квасцов железоаммониевых (эквивалент около 0,1 г железа) помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл, растворяют в 50 мл 1 М раствора серной кислоты (если необходимо, при нагревании), доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Непосредственно перед использованием 10 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Стандартные растворы. 1 мл, 2 мл и 3 мл исходного стандартного раствора железа помещают в мерные колбы вместимостью 100 мл, доводят объемы растворов 0,1 М раствором азотной кислоты до метки и перемешивают. Используют свежеприготовленные растворы. Испытуемый раствор. Около 5,0 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в 0,1 М растворе азотной кислоты, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. Измеряют поглощение растворов сравнения на атомно-абсорбционном спектрометре при длине волны 248,3 нм, используя в качестве источника излучения лампу с полым железным катодом и воздушно-ацетиленовое пламя. Базовую линию устанавливают по 0,1 М раствору азотной кислоты. Строят калибровочный график зависимости величины поглощения от концентрации железа (мкг/мл). |