Общая микробиология
 Скачать 0.8 Mb.
|
|
4. Микробная флора при воспалительных процессах в полости рта: одонтогенном воспалении, пульпите, периодонтите, пародонтите, периостите, остеомиелите, флегмонах. Материал и методы микробиологической диагностики. Микробная флора при пульпитах При остром серозном пульпите могут быть обнаружены зеленящие и негемолитические стрептококки. При остром диффузном пульпите большое значение имеют золотистые стафилококки и βгемолитические стрептококки. При хроническом пульпите в некротизированной пульпе обнаруживаются в большом количестве анаэробы: пептострептококки, бактероиды, спирохеты, актиномицеты. Микробная флора при периодонтитах В периодонтальную щель микроорганизмы проникают через отверстие верхушки зуба или патологический десневой карман. По мере развития патологического процесса в периодонте и смены формы заболевания (острый серозный верхушечный периодонтит, острый гнойный верхушечный периодонтит, хронический гранулематозный периодонтит) происходят изменения в микробных ассоциациях и/или замена одних бактерий другими. При остром серозном верхушечном периодонтите выявляются зеленящие и негемолитические стрептококки, стафилококки. При остром гнойном периодонтите воспаление вызывают микробные ассоциации, включающие стафилококки, стрептококки, грам(+) и грам(-) палочки. При переходе острого периодонтита в хронический главную роль играет стрептококковая анаэробная флора, т.е. пептострептококки. В апикальных гранулемах обнаруживаются актиномицеты, бактероиды, спирохеты, вибрионы. Острый гнойный периостит – наиболее частое осложнение периодонтита, при котором из гноя выделяется смешанная инфекция: золотистые стафилококки, β-гемолитические стрептококки, иногда грамположительные и грамотрицательные палочки. При флегмонозном воспалении в ткань иногда проникают клостридии – возбудители анаэробной газовой инфекции. Одонтогенный остеомиелит – гнойно-некротический воспалительный процесс в костной ткани челюстей, который возникает как результат проникновения в кость микрофлоры из очага периодонтита. Микрофлора смешанная, но в микробных ассоциациях ведущую роль играют стафилококки. При остром остеомиелите челюсти гнойный процесс может через надкостницу распространяться на прилегающую клетчатку, вызывая абсцесс или флегмону. Абсцесс – ограниченный гнойный очаг, являющийся результатом гнойного расплавления участка клетчатки. Одонтогенные абсцессы вызываются микробными ассоциациями: стафило- и стрептококки, грамположительные и грамотрицательные палочки. Флегмона – острое разлитое гнойное воспаление клетчатки. При флегмонах выделяются βгемолитические стрептококки, бактероиды, клостридии. Для установления этиологии гнойно-воспалительных одонтогенных инфекций производят забор материала для микробиологического исследования из глубины гнойника (пунктат, биоптат). Исследуемый материал засевают на набор питательных сред для выделения чистых культур аэробных и анаэробных бактерий с последующей идентификацией по культуральным, морфологическим, тинкториальным, биохимическим, антигенным свойствам; определяют чувствительность выделенных культур к антибиотикам. Из остатка материала готовят мазки и окрашивают их по методу Грама для ориентировочной идентификации. При необходимости проводят количественное бактериологическое исследование. 5. Кокковая микрофлора полости рта и ее значение при патологических процессах. Стафилококки (род Staphylococcus). Стафилококки — грамположительные кокки. В чистой культуре располагаются в виде скоплений, напоминающих виноградные гроздья, а в 8 патологическом материале — небольшими скоплениями кокков. Неподвижны. Факультативные анаэробы. Входят в состав нормальной микрофлоры тела человека, обитая в носоглотке, ротоглотке и на коже. Стафилококки в полости рта здорового человека встречаются в среднем в 30% случаев. В зубном налете и на деснах здоровых людей присутствуют в основном Staphylococcus epidermidis. У некоторых людей в полости рта могут обнаруживаться и Staphylococcus aureus (наиболее патогенный вид). Обладая значительной ферментативной активностью, стафилококки принимают участие в расщеплении остатков пищи в полости рта. Патогенные стафилококки (коагулазоположительные), встречающиеся на слизистой носоглотки и в полости рта, являются частой причиной эндогенных инфекций, вызывая различные гнойно-воспалительные процессы полости рта. Стрептококки (род Streptococcus). Стрептококки — кокки неправильной округлой формы, располагающиеся в виде цепочек или попарно. Неподвижны, спор не имеют; некоторые образуют капсулы. Грамположительные, факультативные анаэробы. Для выращивания необходимы специальные питательные среды (кровяной агар, сахарный бульон). Во внешней среде они менее устойчивы, чем стафилококки. Стрептококки являются основными обитателями полости рта (в 1 мл слюны — до 108—1011 стрептококков). Обладая значительной ферментативной активностью, стрептококки сбраживают углеводы с образованием молочной кислоты. Кислоты, появляющиеся в результате брожения, подавляют рост ряда гнилостных микробов, встречающихся в полости рта. Кроме того кислоты, образующиеся стрептококками, снижают рН в ротовой полости и способствуют развитию кариеса. Также важна способность стрептококков синтезировать нерастворимые полисахариды из сахарозы. Стрептококки, вегетирующие в ротовой полости, составляют особую экологическую группу и получили название «оральных». К ним относятся следующие виды: S.mutans, S.salivarius, S.sanguis, S.mitis, S.oralis и др. Оральные стрептококки отличаются друг от друга по способности ферментировать углеводы и образовывать перекись водорода. На кровяном агаре они формируют точечные колонии, окруженные зеленоватой зоной αгемолиза. Колонизация оральными стрептококками различных участков ротовой полости имеет качественные и количественные вариации в зависимости от условий жизни. S.salivarius и S.mitis в 100% случаев присутствуют в полости рта. S.mutans и S.sanguis обнаруживаются в большом количестве на зубах, a S.salivarius — главным образом на поверхности языка. S.mutans и S.sanguis выявлялись в ротовой полости только после повреждения зубов. Пептострептококки (род Peptostreptococcus) Пептострептококки — грамположительные кокки, располагающиеся парами или цепочками. Неподвижны. Облигатные анаэробы. плохо ферментируют углеводы. Растут на сложных питательных средах с добавлением крови. В ротовой полости встречаются следующие виды: P. anaerobus, P. magnus, P. micros. Пептострептококки вызывают гнойно-воспалительные заболевания различной локализации в ассоциации с другими микробами. Пептококки (род Peptococcus) Пептококки — грамположительные кокки, располагающиеся парами, тетрадами, в виде неправильных скоплений или короткими цепочками. Неподвижны. Облигатные анаэробы. Они требовательны к питательным средам, лучше растут в присутствии жирных кислот. Пептококки обладают слабой сахаролитической активностью, расщепляют пептоны и аминокислоты. Чаще всего пептококки встречаются в ассоциациях с фузобактериями и спирохетами при глубоких пульпитах, пародонтите, абсцессах челюстнолицевой области. Типовой вид — Peptococcus niger. Вейлонеллы (род Veillonella). Вейлонеллы — грамотрицательные кокковидные бактерии, располагающиеся парами или — реже — по одиночке, иногда небольшими скоплениями. Неподвижны. Спор не образуют. Облигатные анаэробы. Они плохо растут на питательных средах, но их рост заметно улучшается при добавлении лактата, являющегося для них источником энергии. Они хорошо разлагают низкомолекулярные продукты обмена углеводов — лактат, пируват, ацетат — до СО2 и Н2, способствуя повышению рН среды. Концентрация вейлонелл (вид – V. parvula) в слюне приблизительно такая же, как зеленящих стрептококков. В полости рта здоровых людей они присутствуют постоянно в больших количествах (в 1 мл слюны до 107 - 1011). Считается, что за счет катаболизма образованной зеленящими стрептококками молочной кислоты вейлонеллы могут оказывать противокариозное действие. Самостоятельно обычно не вызывают развития патологических процессов, но могут входить в состав смешанных групп патогенов. Количество их возрастает при воспалительных процессах, при одонтогенных абсцессах полости рта. Нейссерии (род Neisseria). Нейссерии — грамотрицательные диплококки, располагающиеся в виде пары кофейных зерен, обращенных вогнутыми поверхностями друг к другу. Неподвижны, спор не образуют. Аэробы. Нейссерии всегда в большом количестве встречаются в полости рта здоровых людей (до 1—3 млн. в 1 мл слюны). Нейссерии активно редуцируют кислород, что снижает окислительно-восстановительный потенциал среды и создает условия для развития анаэробной микрофлоры. Различают пигментообразующие виды и виды, не образующие пигмент. Последние чаще всего находятся в пульпе и периодонте при остром серозном воспалении и при катаральном воспалении слизистой оболочки полости рта. 6. Факторы врожденного и приобретенного иммунитета полости рта. Факторы противовирусного иммунитета ротовой полости. Факторы врожденного и адаптивного иммунитета полости рта. Ротовая полость – «входные ворота» для патогенов. Но заболевания возникают реже, чем следовало ожидать. Это обусловлено: 1.Особенностями строения слизистой: обильное кровоснабжение, иннервация; 2. Мощными механизмами иммунитета. Слюна – жидкий секрет, продуцируемый околоушными, подъязычными и подчелюстными железами, а также мелкими железами слизистой оболочки щек, языка, губ. Слюна состоит: 94% Н2О, 6% - сухой остаток (хлориды, фосфаты, Na+ , K+ , Ca+ , микроэлементы, неорганические (33%) и органические вещества (67%), ферменты). Факторы слюны, формирующие адаптивную резистентность полости рта. ∙ Лизоцим – низкомолекулярные белки, встречается у всех форм живой материи от бактериофагов до человека. Расщепляет гликозидные связи полиаминосахаридов бактериальных пептидогликанов путем гидролиза. ∙ Лактоферрин – железосодержащий транспортный белок, конкурирует с бактериями за железо дыхательных ферментов. Отмечен синергизм лактоферрина с антителами. ∙ Пероксидаза синтезируется в околоушных железах и гранулоцитами крови. В комплексе с Н2О2 обладает бактерицидным действием. ∙ Тетрапептид сиалин нейтрализует кислые продукты, образующиеся в результате жизнедеятельности микрофлоры полости рта. ∙ Β-лизины действуют на цитоплазматическую мембрану, вызывая лизис бактерий (в основном в отношении анаэробов). ∙ Белки, богатые пролином (основные белки) обладают бактериостатическим действием на стрептококки. ∙ Белки, богатые гистидином подавляют транспорт глюкозы => блокируют процесс гликолиза => бактерицидное действие. ∙ Кислые гликопротеины – агглютинины неиммуноглобулиновой природы, способны блокировать нейраминидазу вирусов . ∙ Муцины – слизистые гликопротеины, определяют вязкость слюны, агглютинируют микроорганизмы. Комплемент – многокомпонентная система белков из 9 фракций. В слюне находится в незначительном количестве фракция С3. Активация этой фракции происходит при воспалительных процессах в слизистой рта, т.к. из крови поступают другие фракции. Лейкоциты поступают в слюну в большом количестве из десневых щелей и миндалин. Часть из них выделяет ферменты, обезвреживающие патогенную флору. Другая часть участвует в фагоцитозе. Калликреин слюны и образующиеся при его участии кинины обладают хемотаксической активностью, обеспечивая регуляцию миграции лейкоцитов в полости рта при воспалительных процессах. Специфические защитные факторы слюны и слизистых Наиболее значимый фактор – секреторные иммуноглобулины класса А (s IgA). S IgA – димер. Он имеет 2 молекулы мономера IgA, соединенные γ-цепью и гликопротеином SC (секреторный компонент), который обеспечивает устойчивость s IgA к протеолитическим ферментам слюны, т.к. блокирует точки их приложения. IgA и IgG из кровяного русла быстро инактивируются протеазами слюны, поэтому не выполняют защитную функцию. IgM, IgE, IgD выявляются в слюне в незначительных количествах. IgE отражают аллергическую настроенность организма. S IgA в секрете ротовой полости могут находиться в свободной форме (связывает антиген Fabфрагментом) или быть зафиксированными Fc-фрагментом на поверхности слизистой. Фиксированные S IgA закрывают рецепторы адгезии для патогенной флоры. Защитные функции s IgA: ∙ связывает антигены и вызывает их лизис; ∙ подавляет адгезию бактерий и вирусов в клетках слизистой оболочки полости рта; ∙ препятствует проникновению аллергенов через слизистую. S IgA, связанные со слизистой образуют с антигеном (аллергеном) иммунные комплексы, которые при участии макрофагов элиминируются. Синтез s IgA способен стимулировать лизоцим, витамин А, микроэлементы. Противовирусный иммунитет связан в основном с двумя факторами слюны – интерфероном и s IgA. 7. Дисбактериоз полости рта. Причины. Принципы лабораторной диагностики. Дисбактериоз - это стойкое качественное и количественное изменение микрофлоры, выходящее за пределы физиологической нормы, при этом отдельные представители микробиоценоза получают преимущества для роста и размножения и становятся доминирующими. Однако, учитывая тот важный факт, что микробиоценоз как в норме, так и при патологии представлен не только бактериями, но и вирусами, грибами, бактероидами, споровыми формами микроорганизмов и пр., решено в клиническую практику ввести другой термин, наиболее адекватно отражающий патофизиологическую сущность нарушений экологии ротовой полости – дисбиоз Нерегулярная и неграмотная гигиена полости рта: злоупотребление бактерицидными ополаскивателями и специальными зубными пастами. Неправильный прикус. Запущенный множественный кариес. Наличие воспалительных процессов ротовой полости. Нарушение функций носового дыхания, глотания, слюноотделения, жевания. Присутствие протезов и имплантов в ротовой полости. Ослабление иммунитета на фоне других заболеваний. Хронический дисбактериоз может привести к развитию кандидоза. Так, грибковые микроорганизмы находят ротовую полость человека благоприятной для размножения. Продолжительное лечение антибиотиками приводит к существенному нарушению микрофлоры и ослаблению местного иммунитета, в результате чего полость рта населяют многомиллионные колонии болезнетворных микроорганизмов. Синдром дисбактериоза ротовой полости в начальных стадиях развития выявляется при лабораторных исследованиях. Для диагностики дисбактериоза полости рта применяют микробиологическое исследование мазка со слизистой полости рта или слюны. При диагностировании определяют количество условно-патогенных микроорганизмов в исследуемом материале. 8. Кандиды. Морфология. Особенности биологии. Роль в патологии челюстно-лицевой области и рта. Микробиологическая диагностика кандидоза. Возбудителями большинства микозов, поражающих слизистую оболочку полости рта, являются дрожжеподобные грибы рода Candida, вызывающие кандидоз. Наиболее патогенным из всех видов грибов рода Candida (а их насчитывается около 150) является С. albicans. Как и другие грибы кандиды являются эукариотами. Они могут существовать в виде дрожжей, гиф (несептированный мицелий) и псевдогиф (псевдомицелий) — тонких удлиненных клеток, располагающихся друг за другом в виде нитей и не имеющих общей оболочки. По типу дыхания кандиды являются аэробами. Микроорганизмы достаточно устойчивы во внешней среде. Они лучше выживают на влажных поверхностях, чем на сухих неживых объектах, но при достаточной степени загрязнения могут сохраняться на последних до 24 часов. Если говорить о путях инфицирования, то наиболее часто встречается эндогенное развитие кандидоза, обусловленное носительством грибов. В норме допускается небольшое содержание этих грибов в полости рта, а также на протяжении всего ЖКТ, в половых путях (особенно у женщин) и на поверхности кожи. При снижении резистентности слизистых оболочек (недостаточности неспецифических и специфических защитных факторов, а также антагонистического действия индигенной микрофлоры) количество дрожжеподобных грибов начинает нарастать. Также возможно экзогенное инфицирование (особенно в клинических стационарах). Но развитие заболевания происходит только на фоне иммунодефицитных состояний, обусловленных возрастными особенностями, длительной антибактериальной терапией, применением кортикостероидов, химиотерапией при онкозаболеваниях, ВИЧ-инфекцией и т.д. Классификация кандидозов слизистой оболочки полости рта (А.М. Ариевич, 1965). По клиническому течению различают: 1. Острый кандидоз: Псевдомембранозный (молочница); Атрофический. 2. Хронический кандидоз: Гиперпластический; Атрофический. По степени поражения: поверхностный и глубокий. По распространенности: генерализованный и очаговый. Местное проявление кандидоза, или первичный кандидоз в полости рта, протекает в форме острого псевдомембранозного кандидоза (молочницы). При этом полость рта покрывается белым налетом и имеет вид свернутого молока. Заболевание часто встречается у новорожденных, особенно недоношенных и с родовыми травмами, а также детей, находящихся на искусственном вскармливании. У взрослых псевдомембранозный кандидоз встречается редко и поражает главным образом лиц с тяжелыми вторичными иммунодефицитными состояниями - при онкозаболеваниях, после применения стероидных гормонов, цитостатиков, на фоне лучевой терапии. Как следствие острого псевдомембранозного кандидоза может развиваться острый атрофический кандидоз. Характеризуется болезненностью, жжением, сухостью в полости рта. Слизистая оболочка полости рта огненно-красная, сухая. При локализации на языке его спинка становится малиново-краснoгo цвета, сухая, блестящая, нитевидные сосочки атрофированы. Налет отсутствует или сохраняется в глубоких складках, снимается с трудом, представляет собой конгломерат слущенного эпителия и большого количества грибов рода Candida в стадии активного почкования (мицелия, псевдомицелия). Хронический атрофический кандидоз развивается часто в результате ношения протезов. Поражаются, в основном, изолированные участки губ (кандидозный хейлит), углов рта (заеды), языка (глоссит). Гиперплатический кандидоз характеризуется появлением на гиперемированной слизистой оболочке крупных, иногда сливающихся белых папул. Поражаются, главным образом, слизистая оболочка щёк рядом с углами губ, спинка языка и задняя часть нёба. Заболевание приобретает хроническое течение и может рассматриваться как предраковое заболевание. Диагностику проводят с использованием микроскопического,микологического, серологического и аллергологического исследований. Микробиологическая диагностика основана на обнаружении грибов Candida при микроскопическом или микологическом иследовании (с обязательным учетом их количества и динамики обсемененности; иногда определяют также признаки патогенности выделенных культур): подтверждает диагноз обнаружение возбудителя в таких субстратах, как кровь, ликвор, моча, пунктат плевральной полости и т. п., а также обнаружение инвазивного роста (псевдомицелиальной формы) в биоптатах. Используют методы выявления в сыворотке крови антигенов гриба и антител к нему (в РСК, РА, ИФА, иммуноэлектрофорезе) и методы аллергодиагностики (кожно-аллергическая проба). |