Практикум по бх. Практикум по биологической химии Для студентов лечебного и педиатрического
 Скачать 5.3 Mb.
|
Тема 5.3. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| | Опыт 1, мл | Опыт 2, мл | Стандарт, мл |
| Сыворотка крови | 0,01 | –– | –– |
| Моча (разведение 1:50) | –– | 0,01 | –– |
| Стандартный раствор мочевины | –– | –– | 0,01 |
| Рабочий реактив | 2,0 | 2,0 | 2,0 |
| | Перемешивают. Закрывают крышкой из фольги. Помещают под тягу, выдерживают 20 минут в кипящей водяной бане и охлаждают под проточной водой. Измеряют оптическую плотность проб против воды при 540 нм (зеленый светофильтр) не позже чем через 15 минут после охлаждения. | ||
Расчет
Концентрация мочевины сыворотки, ммоль/л =
Концентрация мочевины мочи, ммоль/сут =
, гдеЕоп и Ест – оптическая плотность опытной и стандартной проб, Сст – концентрация мочевины в стандартной пробе, 50 – разведение мочи, Д – величина диуреза (1300-1500 мл/сут).
Нормальные величины
| Сыворотка крови | дети | 1,8 6,4 ммоль/л |
| | взрослые | 2,5 8,3 ммоль/л |
| Моча | | 330 580 ммоль/сут |
Клинико-диагностическое значение
Уровень мочевины в сыворотке крови и моче зависит от скорости ее синтеза в печени и выделения через почки, от величины и направленности белкового обмена.
Сыворотка крови
Повышение уровня мочевины в крови наблюдается при заболеваниях почек (нарушении выделительной функции), нарушении почечной перфузии (застойная сердечная недостаточность), истощении запасов воды в организме при рвоте, поносах (относительное повышение концентрации), при повышенном катаболизме белка (лихорадки, голодание), при диете с высоким содержанием белка.
Снижение концентрации отмечается при диете с низким содержанием белка, при повышенной утилизации белка в тканях (дети, поздние сроки беременности), тяжелых заболеваниях печени, сопровождающихся нарушением синтеза мочевины (паренхиматозная желтуха, гепатиты, цирроз печени).
Моча
Определение мочевины в моче позволяет следить за состоянием процессов анаболизма и катаболизма белков в организме (азотистый баланс).
Повышение концентрации мочевины в моче наблюдается при отрицательном азотистом балансе, при избыточном белковом питании, в послеоперационный период, при гиперфункции щитовидной железы, при лихорадке, голодании.
Уменьшение выделения мочевины свидетельствует о положительном азотистом балансе и наблюдается во время беременности, в период роста.
Оформление работы
Указывают принцип метода, ход работы, нормальные величины и результаты исследования, отмечают клинико-диагностическое значение показателя и делают выводы о возможной патологии.
Лабораторная работа 2
Определение содержания креатинина
в сыворотке крови и моче
Принцип
Креатинин в щелочной среде образует с пикриновой кислотой пикрат креатинина оранжевого цвета. Интенсивность окраски раствора пропорциональна концентрации креатинина в биологической жидкости.
Реактивы
1) 10% р-р NaOH; 2) насыщенный р-р пикриновой кислоты; 3) 10% р-р трихлоруксусной кислоты (ТХУ).
Стандартный раствор креатинина, 177 мкмоль/л.
Материал исследования
Сыворотка крови, моча (разведение 1:50).
Проведение анализа
| | Опыт 1, мл | Опыт 2, мл | Стандарт, мл |
| Сыворотка крови Дистил. вода 10% р-р ТХУ | 0,5 1,0 0,5 | –– –– –– | –– –– –– |
| | Перемешивают, затем центрифугируют при 1500 об/мин или фильтруют, предварительно смочив фильтр дистиллированной водой | | |
| Фильтрат Дистил. вода | 1,0 –– | –– 0,5 | –– 0,5 |
| Моча (разведение 1:50) | –– | 0,5 | –– |
| Стандартный р-р креатинина | –– | –– | 0,5 |
| 10% р-р NaOH | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| Насыщенный р-р пикриновой кислоты | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| | Перемешивают, через 20 минут измеряют оптическую плотность проб против воды при длине волны 540 нм (зеленый светофильтр). | ||
Расчет
Концентрация креатинина сыворотки, мкмоль/л =
Концентрация креатинина мочи, мкмоль/сут =
, гдеЕоп и Ест – оптическая плотность опытной и стандартной проб,
Сст – концентрация креатинина в стандартной пробе,
2 – разведение сыворотки крови, 50 – разведение мочи,
Д – величина диуреза (1300-1500 мл).
Нормальные величины
| Сыворотка крови | дети до 1 года дети от 1 года до 12 лет | 18 35 мкмоль/л 27 62 мкмоль/л | |
| | женщины | 44 97 мкмоль/л | |
| | мужчины | 52 132 мкмоль/л | |
| Моча | | 4,4 17,7 ммоль/сут | |
Клинико диагностическое значение
Сыворотка крови
Концентрация креатинина в крови здоровых людей относительно постоянна и зависит от состояния мышечной массы.
Повышение уровня креатинина в крови в 2-7 раз отмечается при острой почечной недостаточности, в особо тяжелых случаях – в 15-25 раз. Кроме того, выход креатинина из миоцитов в кровь выражен при гипертиреозе, сахарном диабете, мышечной дистрофии, обширных ожогах, при лихорадочных состояниях, частых внутримышечных инъекциях.
Уменьшение содержания креатинина в крови диагностического значения не имеет.
Моча
Увеличение концентрации креатинина в моче наблюдают у лиц с повышенной физической активностью, с лихорадочными состояниями. Оно отмечается при выраженной недостаточности функции печени, при сахарном и несахарном диабете, при синдроме длительного раздавливания, острых инфекциях.
Снижение содержания креатинина в моче обнаруживается при хроническом нефрите и других заболеваниях почек, при мышечной атрофии, лейкозах и голодании.
Оформление работы
Указывают принцип метода, ход работы, нормальные величины и результаты исследования, отмечают клинико-диагностическое значение показателя и делают выводы о возможной патологии.