Лаб. практикум. Практикум по биологической химии методические указания к проведению лабораторных работ по биологической химии для студентов второго курса

• Название: Практикум по биологической химии методические указания к проведению лабораторных работ по биологической химии для студентов второго курса
• Дата: 13.01.2019
• Размер: 1.02 Mb.
• Имя файла: Лаб. практикум.doc
• Тип: Практикум; #63483
• страница: 10 из 27

Лабораторная работа №14

Открытие пероксидазы

Как и каталаза, пероксидаза – геминсодержащий фермент. Пероксидаза катализирует окисление некоторых веществ (фенолы, полифенолы, ароматические амины) в присутствии перекиси водорода. От субстратов под действием пероксидазы переносятся электроны на перекись водорода. Образуется окисленный субстрат и вода. В организме млекопитающих слабой пероксидазной активностью обладают гемоглобин, миоглобин и цитохромы. Пероксидаза содержится почти во всех растительных клетках.

Принцип метода. От бензидина под действием пероксидазы переносятся электроны и протоны на перекись водорода. В результате образуется окисленный бензидин и вода. Окисленный бензидин приобретает зеленую, синюю, постепенно переходящую в бурую окраску.
Исследуемый материал и реактивы

1. Кровь. 2. Спирт. 3. Вата. 4. Скарификатор. 5. Раствор бензидина в ледяной уксусной кислоте (1%). 6. Перекись водорода (3%). 7. Вода.
Ход работы

В две пробирки наливают по 5 капель 1% раствора бензидина в ледяной уксусной кислоте и по 5 капель 3% раствора перекиси водорода. В первую пробирку добавляют 5 капель крови, во вторую – 5 капель воды. Наблюдают за изменением окраски.
Указания к оформлению лабораторной работы

В тетради для лабораторных работ запишите принцип метода, ход работы, зарисуйте полученные результаты (окраска проб) и сделайте выводы.
Контрольные вопросы

1. 
   Назовите фермент, субстрат и продукт реакции проведенной Вами лабораторной работы.
   
2. 
   Какое значение для организма имеет фермент пероксидаза?
   
3. 
   Какие соединения в организме обладают пероксидазной активностью?
   

Лабораторная работа №15

Получение тирозиназы и окисление тирозина в присутствии кислорода

В организме человека и животных фермент тирозиназа катализирует превращение адреналина в физиологически неактивный красный пигмент адренохром. Последний, конденсируясь, превращается в бурый пигмент меланин. Если к раствору тирозина прибавить вытяжку из картофеля, содержащую фермент тирозиназу, и смесь для контакта с воздухом встряхивать, то жидкость через некоторое время постепенно окрашивается в розовый, бурый и, наконец, в черный цвет.

Принцип метода. Реакция обусловлена окислением тирозина кислородом воздуха и протекает благодаря каталитическому действию тирозиназы. В процессе окисления тирозина образуется красный пигмент галахром и затем темный пигмент меланин:


Исследуемый материал и реактивы

1. Клубень сырого картофеля. 2. Вода. 3. Раствор тирозина (0,1%) или раствор адреналина (0,1%). 4. Марля.
Ход работы

А. Получение тирозиназы из картофеля. 1г картофеля растирают в ступке с 3 мл воды и процеживают через двойной слой марли.

Б. Окисление тирозина кислородом воздуха в присутствии тирозиназы. В две пробирки наливают по 1 мл вытяжки из картофеля, содержащей фермент тирозиназу. Содержимое одной пробирки кипятят 1-2 мин и охлаждают в стакане с холодной водой. В обе пробирки добавляют по 5-10 капель 0,1% раствора тирозина, перемешивают и обе пробирки помещают в баню при 40-45⁰С. Каждые 5 мин пробирки вынимают и содержимое их сильно встряхивают. Жидкость в пробирке с активной вытяжкой постепенно принимает сначала розовую, затем бурую и черную окраску. В контрольной пробе с прокипяченной вытяжкой цвет жидкости не изменяется.

Аналогичную работу можно проделать, взяв вместо тирозина 0,1% раствор адреналина.

Указания к оформлению лабораторной работы

В тетради для лабораторных работ запишите ход работы, зарисуйте полученные окраски проб, запишите химизм реакции и сделайте выводы.
Контрольные вопросы

1. 
   К какому классу ферментов относится тирозиназа?
   
2. 
   Какова биологическая роль фермента тирозиназы у человека?
   

Обмен углеводов

Углеводы наряду с белками – наиболее распространенные соединения, участвующие в построении клетки и используемые в процессе её жизнедеятельности. Углеводами называют полигидроксикарбонильные соединения, содержащие альдегидную или кетонную группу либо образующие их при гидролизе.

Углеводам в организме принадлежат разнообразные функции: энергетическая, структурная, опорная, защитно-механическая, гидроосмотическая, кофакторная.

С углеводами связаны многие эффекты лекарственной терапии. В медицинской практике углеводы и их производные широко используют как фармпрепараты, как вспомогательные вещества при приготовлении различных лекарственных форм (глюкоза, фруктоза, сахароза, лактоза, крахмал, пектины, целлюлоза и др.) и как плазмозаменяющие растворы на основе декстрана (полиглюкин, реополиглюкин, реоглюман, рондекс и др.).