Микробиология. билеты все (копия). Строение бактериальной клетки. Споры и капсулы структура, расположение в клетке. Значение для бактериальной клетки. Методы обнаружения спор и капсул. Методы обеззараживания спороносной культуры
 Скачать 382.85 Kb.
|
|
История открытия Первые попытки практического использования микробного антагонизма принадлежат Л. Пастеру и И.И. Мечникову. Пастер 1977г. установил, что гнилостные бактерии подавляют рост сибиреязвенных бацилл при совместном выращивании их на питательных средах. В результате чего он предложил использовать явление антагонизма бактерий для лечения инфекционных заболеваний. Мечников (1894), изучая роль гнилостных бактерий кишечника, установил, что они отравляют организм продуктами жизнедеятельности, что приводит к раннему старению. Также, он обнаружил, что молочнокислые бактерии (болгарская палочка) подавляет рост гнилостных бактерий кишечника и предложил использовать явление антагонизма бактерий как один из методов борьбой со старостью. Русские ученные Манассейн и Полотебнов (1871-1872) за много лет до открытия антибиотиков применяли зеленую плесень пенециллиум для лечения гнойных рад и др. поражений кожи. Из синегнойной палочки был получен первый антибиотик – пиоционаза (Эммерих, Лев), но он не нашел широкого применения. Советский микробиолог Ермольева применила для получения пенициллина другой вид плесени- Penicilliumcrustosum (1942) и явилась одним из организатора производства пенициллина во время ВОВ. Классификация: 1. По происхождению: а) антибиотики, получаемые из бактерий (полимиксин); б) антибиотик, полученный из актиномицета (тетрациклин, левомицетин); в) антибиотики, полученные из плесневых грибов (пенициллин). 2.По спектру действия: а) широкого-оказывает как на Гр+, так и на Гр- бактерии (тетрациклины, стрептомицин); б) узкого оказывает действие на определенный вид м.о. Оказывает действие на Гр+ бактерии (кокковая флора) (пенициллин). А также антибактериальные- используются для лечения антибактериальной и инфекции, могут быть как широкого, так и узкого действия. Противогрибковые-используются для лечения грибковых заболеваний (нистатин). Противоопухолевые (рубомицин). 3.По химическому составу: а) азотсодержащие гетероциклические соединения (цефалоспорины); б) ароматические соединения производные диоксиаминофенилпропана (левомицетин); в) Тетрациклины; г) аминогликозиды имеют в своем составе аминосахара (стрептомецин) ; д) макролиды- эритромецин; е) ацекличес кие соединения с несколькими сопряженными двумя связями (противогрибковые препараты). 4. По механизму действия: а) синтез пепидогликана (пенициллин); б) ЦПМ-адсорбируются на мембране грибов, происходит потеря воды и компонентов – гибель клетки(нистатин); в) нарушение синтеза белка (тетрациклины); г) нуклеиновая кислота – нарушение функции и синтезу нуклеиновых кислот ДНК, РНК (олевомицин). Источником для полученияслужат разнообразные м.о, обладающие антимикробной активностью. Антибиотики выделяют из плесневых грибов (пенициллин), актиномицетов в (стрептомицин), бактерий (грамицидин), вещества обладающие антибиотическим действием получают из высших растений и тканей животных (лизоцин). Возможные осложнения некоторые антибиотики вызывают аллергически реакции, которые развиваются в виде сыпи-крапивницы, оттеков век, губ, носа, дерматитов. Наиболее серьезным осложнением явл. анафилактический шок. Введение в орг. Больших доз антибиотиков широкого спектра действия сопровождается гибелью нормальной микрофлоры организма, в результате чего условно-патогенные бактерии и грибы рода кандида вызывают вторичные инфекции, т.кони устойчивы к этим антибиотикам. 2. Возбудители вирусных инфекций. Вирусы – возбудители ОКИ. Семейство Энтеровирусов, вирус полиомиелита. Характеристика биологических свойств. Методы вирусологической диагностики полиомиелита. Вирусы – возбудители ОКИ: Ротавирусы, аденовирусы, астровирусы, калицивирусы, вирусы Норфолк и Бреда, простого герпеса, цитомегаловирус, вирус гепатита А. Энтеровирусные инфекции — группа острых антропонозных заболеваний, вызываемых Coxsackievirus, Echovirus (неполиомиелитные энтеровирусные инфекции) и полиовирусами (полиомиелит), характеризующихся разнообразными клиническими проявлениями поражения кожи, мьшц, верхних дыхательных путей, кишечника, центральной нервной системы, миокарда. Полиомиелит – острая энтеровирусная антропонозная инфекция, характеризующаяся поражением нервной системы с развитием вялых параличей и парезов, воспалительными изменениями слизистой оболочки кишечника и носоглотки. Морфология: мелкие, просто организованные вирусы, сферической формы, состоят из одноцепочечной РНК и капсида. Культуральные свойства. Вирусы не культивируются в куриных эмбрионах, не обладают гемагглютинирующими свойствами, хорошо репродуцируются в первичных и перевиваемых культурах клеток из тканей человека и приматов. Размножение вирусов сопровождается цитопатическим эффектом. В культурах клеток под агаровым покрытием энтеровирусы образуют бляшки. Антигенные свойства: Различают 3 серотипа внутри вида: 1, 2, 3, не вызывающие перекрестного иммунитета. Все серотипы патогенны для человека. Эффективность вирусологической диагностики зависит от правильного сбора материала и времени взятия проб, а также от соблюдения правил их транспортировки в лабораторию в оптимальных условиях. Материал для исследования: испражнения, смывы с носоглотки от больных и вирусоносителей; секционный материал-головной и спинной мозг, содержимое кишечника. Алгоритм: заражение культуры клеток – наличие ЦПД (бляшкообразование) – типовая идентификация в РН, РИФ, ИФА. 3.Участковый педиатр заподозрил у больного ребенка колиинфекцию. Вместе с тем, по клинике невозможно исключить диагнозы таких заболеваний как дизентерия и сальмонеллез. 1. Испражнения, рвотные массы,кровь, промывные воды желудка 2Микробиологическим 3. Дифф-диагн Эндо, Плоскирева 4. Как доказать выделение диареегенных кишечных палочек? Развернутая реакция АГ с прогретой и живой культурой, Провести развернутую РА с живой и гретой культурой для определения О-АГ. Развернутую реакцию агглютинации ставят в двух рядах пробирок. Сыворотку в обоих рядах разводят в соотношении 1:50 - 1:100 (в 1-й пробирке) до титра, указанного на этикетке ампулы с сывороткой. В первый ряд добавляют по 2 капли живой культуры, во второй - по 2 капли гретой культуры. Пробирки встряхивают и помещают в термостат на 18-24 ч. Учет пробирочной реакции агглютинации проводят при помощи лупы или агглютиноскопа. Агглютинация с живой культурой крупнохлопчатая, с убитой - мелкозернистая. Возможны три варианта реакции: 1) гретая культура агглютинируется сывороткой в больших разведениях, чем живая, реакция - положительная; 2) живая и гретая культура дают агглютинацию в одинаковых разведениях сыворотки. Такой результат может свидетельствовать об отсутствии в культуре К-антигена; агглютинация живой и гретой культур вызвана О-антигеном. В этих случаях необходима повторная постановка реакции агглютинации; 3) агглютинация живой культуры при отсутствии агглютинации гретой позволяет дать отрицательный ответ. 13 билет 1.. Течение инфекционного процесса, источники, стадии, формы генерализованнойинфекции (бактериемия, септицемия, септикопиемия, товсинемия). Формы течения инфекции (острая, хроническая, атипичная, выраженная). Источником возбудителей инфекций являются человек и животные. Все инфекционные болезни человека по характеру источников подразделяются на две группы: антропонозы, при которых источником возбудителей является человек, и зоонозы - заболевания, присущие животным, но к которым восприимчив и человек. В зависимости от пути проникновения возбудителя в организм хозяина различают экзогенные и эндогенные инфекции. Экзогенные инфекции возникают в результате поступления возбудителей из окружающей среды. При эндогенной (аутоинфекции) инфекции возбудители находятся в организме в составе облигатной или транзиторной флоры. При ослаблении защитных свойств организма они могут быть причиной возникновения заболевания. В зависимости от локализации возбудителей в организме больного различают очаговую инфекцию, при которой микробы находятся в местном очаге, не распространяются за его пределы (например, ангина, фурункулез), и генерализованную, когда силы агрессии микроорганизмов превышают силу защитных механизмов организма хозяина и возбудители из местного очага распространяются по организму. Состояние, когда возбудители инфекции циркулируют в течение определенного времени в крови, но не размножаются в ней (например, брюшной тиф), называют бактериемией. В том случае, когда возбудитель длительно находится в крови, накапливается там и даже размножается, возникает сепсис или септицемия от лат. sepsis-гноекровие). Такое наводнение микроорганизмами бывает при чуме, сибирской язве. Сепсис вызывают также гноеродные кокки. Особой чертой сепсиса является то, что клиническая картина не зависит от вида возбудителя. Образование в результате сепсиса гнойных очагов в различных органах называется септикопиемией. Циркуляция в крови токсина называется токсинемией, циркуляция вирусов-вирусемией. По продолжительности течения различают острые и хронические инфекции. Острые характеризуются сравнительно кратковременным (от 1 нед до 1 мес) течением (например, грипп, корь, холера, брюшной тиф и др.), хронические - затяжным течением (в течение месяцев - лет) (например, малярия, сифилис, туберкулез, бруцеллез, лепра). Атипичная Возбудитель размножается в организме, но не вызывает развития типичных патологических процессов, а клинические проявления носят невыраженный, стёртый характер. Атипичность инфекционного процесса может быть вызвана пониженной вирулентностью возбудителя, активным противодействием защитных факторов его патогенным потенциям, влиянием проводимой антимикробной терапии и совокупностью указанных факторов. Явная инфекции -наиболее яркая, клинически выраженная форма инфекции.(ясно выражены клинические признаки и общие особенности, характерные для инфекционного заболевания). 2.Возбудители бактериальных зооантропонозных инфекций. Туляремия. Характеристика биологических свойств возбудителя туляремии. Методы микробиологической диагностики туляремии. Морфология -мелкие коккобактерии( 0,3 – 0,6 * 0,1 – 0,2 мкм); могут проходить через бактериальные фильтры;-полиморфны - в мазках встречаются шарообразные, нитевидные и другие;-образуют нежную капсулу;-неподвижны, спор не образуют;-грамотрицательны. Культуральные свойства *факультативные анаэробы; *опт t 36-37 С, pH 6,8-7,2; *требовательны к питательным средам, растут очень медленно… Для культивирования используют: *свернутую желточную среду. *агаровые мясных или рыбные среды с добавлением цистина, крови, глюкозы. *Образуют мелкие, беловатого цвета, выпуклые, блестящие, с ровными краями колонии, 1 – 3 мм в диаметре. *Вирулентные штаммы находятся в S-форме, вакцинные штаммы в SR-форме, R-форма – авирулентна. Биохимические свойства Сахаролитические свойства: ферментируют глюкозу, мальтозу, маннозу, левулезу с образованием кислоты без газа. Протеолетические свойства: некоторые штаммы расщепляют глицерин, иногда образуют сероводород. Подвиды туляремийного микроба отличаются по биохимическим особенностям: голарктический – не ферментирует цитруллин, глицерин; неарктический – ферментирует глицерин, не ферментирует цитруллин; среднеазиатский – ферментирует глицерин и цитруллин. Содержимое бубона. Собирают стерильным шприцем. Если материал собрать не удается, вводят в бубон 0,1 мл стерильного изотонического раствора натрия хлорида. После чего материал отсасывают шприцем Отделяемое слизистой глаз. Собирают стерильным тампоном Испражнения. Собирают в широкогорлую стерильную банку Мокрота. То же Кровь. 2-3 мл берут стерильным шприцем и помещают в стерильную пробирку Методы микробиологической диагностики туляремии. Аллергическая проба (2 способа): Накожно – используют тулярин; пробу ставят на наружной поверхности плеча. Положительная реакция – гиперемия и отек вокруг насечки диаметром 1 – 2 см через 48 – 72ч. Внутрикожно – используют убитую нагреванием взвесь бактерий; пробу ставят на ладонной поверхности предплечья. Положительная реакция – отечность и гиперемия (через 24 – 48ч). Реакцию считают положительной при наличии инфильтрата и гиперемии не менее 0,5 см. Биологическая проба: Патологический материал смешивают с небольшим количеством изотонического раствора натрия хлорида (0,3 – 0,5 мл) и вводят подкожно белой мыши или морской свинке (погибает на 4 – 6 сутки). Культуру туляремийных бактерий от павших животных выделяют посевом на специальные питательные среды (свернутую желточную), из селезенки и печени готовят мазки – отпечатки. Серологическая диагностика Кровь ( с 10-15 дня заболевания) Линейная реакция агглютинации: 2-3 мл крови из локтевой вены -берут в стерильную пробирку. Полученную сыворотку разводят от 1:50 до 1:1600. Диагностическим титром является положительный результат реакции в разведении сыворотки от 1:100 и выше. Реакция наблюдается в динамике. Далее титр нарастает и достигает 1:400— 1:800, затем снижается до 1:10-1:50 через 6-12 мес и на этом уровне он сохраняется в течение многих лет. Антигеном служит туляремийныйдиагностикум- убитая формалином взвесь туляремийных бактерий, в 1 мл которого содержится 25 млрд. микробных тел Кровь(с конца 1- начала 2 недели)Реакция непрямой гемагглютинации РНГА Наиболее чувствительный метод диагностики. Сыворотку разводят от 1:100 до 1:10 000. Антигеном служит туляремийныйэритроцитарныйдиагностикум. Диагностическим титром считают титр 1:100 и выше (через 1-1,5 мес титр РНГА может достигать 1:10 000. Затем титр снижается и в разведении 1:100. 3.Больной П. доставлен в инфекционную больницу на шестой день от начала заболевания с диагнозом дизентерия. 1.Биологическая проба на морских свинках, заражение через слизистую глаза 2.Кровь на серодиагностику для выявления АТ 3.Приём антибиотиков негативно влияет на исследование, у м/о вырабатывается устойчивость к этим препоратам. 14 билет 1.Инф процесс. Характеристика инф процесса Инфекция или инфекционный процесс (от лат. infectio - заражать,загрязнять) - это совокупность явлений, возникающих и развивающихся в макроорганизме при внедрении и размножении в нем болезнетворных микроорганизмов. Проявления инфекции разнообразны, что зависит от свойств микроорганизма, состояния макроорганизма и условий окружающей среды. Крайней степенью выраженности инфекционного процесса является инфекционная болезнь. Характеристика инфекционного процесса Выраженность клинических признаков инфекционного заболевания определяется количеством и степенью вирулентности возбудителя, с одной стороны, а с другой, – иммунитетом че ловека. Различают три степени тяжести заболевания – легкая, средняя и тяжелая, встречаются и стертые формы – со слабо выраженными признаками. Инфекционное заболевание протекает в виде последовательных стадий (периодов). С момента проникновения возбудителя и до появления первых клинических признаков заболевания проходит скрытый или инкубационный период, длительность которого может составлять от нескольких часов до нескольких месяцев и лет (табл. 1). Продромальный (период предвестников) характеризуется появлением первых, обычно неспецифических, симптомов (повышение температуры, слабость, недомогание и т.д.). Этот период длится от нескольких часов до 2-3 дней и до 4 нед. при гепатите. Период развития болезни (возникновение клинических проявлений) характеризуется симптомами интоксикации (головная боль и снижение аппетита, нарушение сна, лихорадка, сыпь, мышечные боли), как правило, общими для многих инфекций. Специфичные для определенной болезни симптомы зависят от локализации возбудителя в тканях и органах человека, свойственной данному паразиту. В течение заболевания могут присоединяться осложнения, обусловленные основной инфекцией или вызванные другим возбудителем. В период реконвалесценции (выздоровления) происходит восстановление нормального функционального состояния организма. Исходом инфекционного заболевания в большинстве случаев является полное выздоровление с освобождением от возбудителя или переход в хрони- ческую форму. При ряде инфекций стойкое нарушение функций приводит к инвалидности, иногда – к смерти. Источником возбудителей инфекций являются человек и животные. Все инфекционные болезни человека по характеру источников подразделяются на две группы: антропонозы, при которых источником возбудителей является человек, и зоонозы - заболевания, присущие животным, но к которым восприимчив и человек. Механизмы передачи возбудителей инфекций различны, но определенны для каждого вида микроорганизмов и обусловлены локализацией в организме больного (или носителя), а также путем выделения. В соответствии с первичной локализацией возбудителей в организме различают 4 типа механизмов передачи: - фекально-оральный-возбудители локализуются в кишечнике (брюшной тиф, дизентерия, холера), передаются алиментарным путем-с пищей, водой; - воздушно-капельный-возбудители локализуются в дыхательных путях (грипп, коклюш и др.), передаются воздушно-капельным, воздушно-пылевым путем; - трансмиссивный- возбудители локализуются в кровеносной системе (малярия, сыпной тиф, возвратный тиф и др.), передаются кровососущими насекомыми; - контактный: а) прямой - передача возбудителей происходит при непосредственном соприкосновении (венерические болезни); б) непрямой -- через зараженные предметы окружающей обстановки (игрушки, на которых могут находиться возбудители, например, дизентерии). Возбудители локализуются на коже, слизистых оболочках, поверхности ран. Большое значение для возникновения инфекционного заболевания имеет место проникновения возбудителя-входные ворота, а также инфицирующая доза. |