технология лек 2. Учебник соответствует учебной программе и предназначен для студентов фармацевтических высших учебных заведений и факультетов
 Скачать 5.32 Mb.
|
|
2%. Сок алоэ — мутноватая жидкость светло-оранжевого цвета, горького вкуса, под влиянием света темнеет. Применяют при гастритах, запорах. Наружно используют при гнойных ранах, ожогах. Выпускают во флаконах по 100 мл. Сок капусты белокочанной (Succus Brassica capitha). Получают из листьев капусты белокочанной (Brassica capitha) по технологии, разработанной в институте фармакохимии АН Грузии. Препарат содержит большое количество витамина U (метилметионинсульфанит U). Это белая со слегка желтоватым оттенком жидкость, мутноватая, сладковато-горького вкуса, своеобразного ароматного запаха. Применяют при желудочных заболеваниях нервного характера, при лечении язвенной болезни и хронического колита, при недостаточном кровообращении слизистой оболочки желудка. 242 10.9. Сгущенные соки Экстракт клюквы (Extracti Oxycoci). Выжимают сок из зрелых ягод клюквы болотной (Oxycocus palustris Pers.) сем. брусничных (Vacinaceae) по типовой схеме. После чего проводят сбраживание сока для удаления пектиновых веществ, которыми богата клюква. Отделяют пектиновые вещества центрифугированием. Сгущают сок до концентрации густого экстракта в вакуум-аппаратах, внутри высеребреных, при разрежении 0,6—0,65 атм до содержания 10% сухих веществ. В сгущенном соке до 3,6% сахаров, 3,25% лимонной кислоты, аскорбиновая кислота, витамин Р (цитрин). Применяют как витаминный сок и вкусовое средство при лихора- дочных состояниях. 10.10. Сухие соки В последние годы многие исследовательские работы посвящены получению стабильных соков из свежих растений в сухом виде. Так, Н. Е. Чернов и Г. П. Пивненко (Харьков) разработали методики получения стабильных сухих соков чистотела, ландыша, ноготков, паслена птичьего, кровохлебки, лука репчатого и др. Сушка соков сублимацией сохраняет первоначальное качество биологически активных веществ (особенно летучих фитонцидов) и улучшает их свойства путем концентрации ценных компо- нентов. Получают соки путем замораживания с последующей сублимацией. Рассмотрим принципиальную схему получения сухих соков. Для получения 100 частей сухого стабильного сока чистотела исходное сырье берут в следующих количествах: измельченное сырье (трава с цветками) до кашицеобразной массы — 3090 частей, спирта этилового 96% — 360 частей. Вначале грубо измельчают сырье на траво- и корнерезке. Тотчас же вторично измельчают на механическом измельчителе или на машине-волчке до кашицеобразной массы. Затем сырье заворачивают в льняные салфетки и выжимают в перфорированном цилиндре из нержавеющей стали под прессом с предельной нагрузкой. Сок собирают в отстойник, где для консервирования и осаждения балластных веществ добавляют 360 частей 96% этилового спирта, чтобы в полученном жидком соке содержалось его 20%. Затем сок декантируют, центрифугируют 10 мин на осадительной центрифуге и затем фильтруют. Прозрачный отфильтрованный сок оставляют на семидневное отстаивание в герметически закрытом отстойнике. Если после 7 дней хранения выпадет осадок, то сок вторично 5 мин центрифугируют на осадительной 243 центрифуге. Далее из сока выпаривают этиловый спирт в вакуум- аппарате при остаточном давлении 160 мм рт. ст. и температуре не выше 50 °С до 80% первоначального объема. Частично упаренный сок разливают в специальные склянки для сушки и хранения и замораживают методом накатывания на сушилке КС-6 (Чехия) в течение 1 ч. Замороженный сок сушат на указанной сушилке 18—20 ч при остаточном давлении в системе 100—160 мм рт. ст. и температуре внутреннего и наружного котлов не выше +55 °С. Полученный препарат представляет собой гигроскопический аморфный порошок бурого цвета, пористой структуры, горького вкуса, с характерным запахом экстракта чистотела большого. Хорошо растворим в воде, в 20% этаноле, при этом почти пол- ностью восстанавливаются первоначальные свойства свежего сока. 10.11. Экстракционные препараты из свежих растений Из свежих растений извлечения биологически активных веществ получают в тех случаях, когда данное сырье малосочное и прессование оказывается недостаточно эффективным. В данном случае необходимо тонкое измельчение сырья, так как живая клетка находится в состоянии тургора и протоплазма, обладая свойством полупроницаемости, не пропускает наружу БАВ. Поэтому для извлечения последних клеточные стенки необходимо разрушить. Это достигается путем использования специальных машин-волчков, устроенных по типу механизированных мясорубок и вальцов, так как свежее сырье содержит до 80% влаги и обладает высокой упругостью. На данных машинах растительный материал вначале раздавливается, а затем истирается. Для получения экстракционных препаратов из свежего сырья применяют метод мацерации крепким (90%) этиловым спиртом. Процесс экстракции продолжается 14 сут и должен интенсифицироваться частым и энергичным перемешиванием содержимого мацера- ционных сосудов. Затем мацераты отфильтровывают, остатки отжимают на прессе и отжатый сок присоединяют к извлечению. Отстаивают 7 сут при температуре не выше 8 °С, отфильтровывают от выпавшего коллоидного осадка, затем отфильтровывают еще раз через фильтр Сальникова. Полученные фильтраты пригодны к применению. Применяют также метод бисмацерации, при этом измельчен- ное сырье первый раз заливают 96% этанолом и настаивают 7 сут; второй раз — 20% этанолом на 3 сут. Объединенные извлечения отстаивают, фильтруют и получают настойки с содержанием 40— 50% этанола. Их стандартизуют по тем же показателям, что и 244 настойки, получаемые из высушенных растений. В современной номенклатуре имеются сложные препараты, в которые наряду с извлечениями из свежих растений вводятся многие другие лекарственные средства. Настойка валерианы (Tinctura Valerianae). Готовится на 70% этаноле в соотношении 1:5 из свежих корней валерианы лекарственной (Valeriana officinalis G) сем. валериановые (Valerianaceae) методом перколяции. Это прозрачная жидкость красновато-бурого цвета с характерным запахом и сладковато- горьким пряным вкусом. Химический состав: эфирное масло, валериановая кислота, борнеол, сложный эфир борнеола и изовалериановой кислоты, следы алкалоидов, органические кислоты, дубильные вещества, сахара. Применяют вовнутрь взрослым по 20—30 капель на прием 3—4 раза в день. Выпускают во флаконах по 30—50 мл. Кардиовален (Cardiovalenum). Препарат содержит следующие ингредиенты: сок желтушника раскидистого — 17,2 г (актив- ностью 150 ЛЕД в 1 мл), получаемый из свежей травы, в которой содержатся гликозиды эрихрозид, элизилин, близкие по действию к гликозидам группы наперстянки; адонизид — 30,0 г (актив- ностью 85 ЛЕД в 1 мл); настойка валерианы из свежих корней — 46,9 г; жидкий экстракт боярышника — 2,1 г; камфора — 0,4 г; этанол 96% — 1,6 г; натрия бромид — 2,0 г; хлорбутанолгид- рат — 0,25 г. Оказывает комбинированное действие на сердечно-сосудистую и нервную систему. Холелитин (Cholelytinum). Смеси настоек различных разведе- ний 48% спиртом. Применяется в основном при лечении желчно-каменной болезни. Ангиноль (Anginolum). Это комплексные препараты, состоящие из разведенных настоек растительного происхождения и растворов неорганических ингредиентов. Применяется при лечении ангины. 245 Глава 11. ПРЕПАРАТЫ ГОРМОНОВ Гормоны (от греч. hormao — приводить в движение, возбуждать) — биологически активные вещества разной химической природы, образующиеся специализированными клетками желез внутренней секреции, которые выделяются непосредственно в кровь, лимфу и регулируют обмен веществ и физиологические функции организма. Сейчас известно около 60 биологически активных секретов, которые продуцируются эндокринными железами и имеют гормональную активность. В табл. 11.1 представлены гормоны, вырабатываемые центральными и периферическими железами. Чаще всего гормоны и гормональные препараты классифицируют по химической структуре. Различают несколько групп гормонов. 1. Гормоны белковой природы: простые (инсулин, пролактин, гормон роста) и сложные (фолатропин, лютропин, тиротропин) белки. 2. Гормоны пептидной природы: глюкоген, кальцитонин, соматостатин, вазопрессин, окситоцин. Таблица 11.1 Гормоны эндокринных желез 246 3. Гормоны — производные аминокислот: адреналин, норадреналин, окситоцин. 247 4. Гормоны липоидной природы (стероидные гормоны): кортикостероиды, андрогены-эстрогены, простагландины. 5. Парагормоны, тканевые гормоны: гастрин, секретин, гепарин. По характеру действия гормоны разделяют на пусковые (тропные факторы, гормоны ЦНС) и исполнительные (гормоны периферических желез). В организме действие гормонов контролируется ЦНС. Поток информации о состоянии внутренней и внешней среды поступает к ЦНС, где вырабатываются регулирующие сигналы (нервные и гуморальные). Получают гормоны эндокринных желез путем химического синтеза, методом генной инженерии. Синтезированы инсулин и некоторые белковые гормоны гипофиза (кортикотропин, соматотропин) и т. д. Препараты стероидных гормонов, производных аминокислот и пептидов (окситоцин, вазопрессин) получают путем химического синтеза. Но химический синтез полипептидных гормонов, состоящих из десятков аминокислотных остатков, многостадиен и нерентабелен. В настоящее время интенсивно развиваются физико- химическое и генетическое направление в биотехнологии, что позволило создать новые технологии веществ белковой природы. Методами генной инженерии получены штаммы-продуценты пептидных гормонов: инсулина, соматотропина, кальцитонина и др. Получение гормонов методом биосинтеза является экономически более эффективным, так как не требует использования высоких температур, катализаторов, давления и т.д. 11.1. Препараты поджелудочной железы Инсулин (Insulinum, от лат. insula — остров) — гормон поджелудочной железы, который вырабатывается ?-клетками островков Лангерганса. Химическая природа его — белок. Молекула инсулина человека состоит из двух полипептидных цепей — А и В, соединенных двумя дисульфидными связями. А-цепь содержит 21, а В-цепь — 30 аминокислотных остатков. Молекулярная масса инсулина 58 тыс. Впервые в 1921 г. в Торонто канадские исследователи Ф. Г. Бентинг и Ч. Х. Бест выделили инсулин из поджелудочной железы собаки при обработке ее подкисленным этанолом. Первые кристаллы инсулина были получены в 1952 г., благодаря применению новейших методов очистки гормона (иммуноэлектро- форез и жидкостная хроматография высокого разрежения) от других гормональных веществ. В настоящее время существует несколько технологий выделения инсулина из поджелудочных желез рогатого скота и свиней. Ниже приведен наиболее перспективный способ, применяемый на фармацевтических предприятиях. 248 Получение инсулина состоит из следующих стадий: 1. Измельчение замороженных поджелудочных желез и экстракция кислым спиртовым раствором. 2. Осаждение балластных белков (рН 7,5) и освобождение от липидов. 3. Изоэлектрическое осаждение фракции инсулина (при рН 5,5) и осаждение спиртом, ацетоном, эфиром. 4. Очистка инсулина: осаждение солями, фракционирование методами хроматографии, гель-фильтрации и др. 5. Осаждение инсулина в виде кристаллов. 6. Переосаждение цинк-инсулина. Свежие или замороженные поджелудочные железы измельчают на мясорубке-волчке и экстрагируют способом бисмацерации первый раз 80—85% этанолом в реакторе с мешалкой. Второй раз экстрагируют 57% этанолом, который подкислен ортофосфорной кислотой (хлороводородной или серной) до значения рН 2,8—3. Экстракцию проводят 1,5—4 ч при постоянном перемешивании. Подкисленный спирт способствует инактивации фермента трипсина, находящегося в поджелудочной железе, благодаря чему удается сохранить инсулин в неизмененном состоянии. На Минском заводе эндокринных препаратов используют роторно-пульсационный аппарат для экстракции, что в значительной мере определяет интенсивность экстрагирования инсулина (1,5 ч). Полученные вытяжки объединяют, оставляют на холоду на 48 ч для освобождения от нежелаемых белков, которые выпадают в виде осадка. Осадок отделяют центрифугированием и удаляют. Затем для выделения и очистки инсулина применяют ионообменную хроматографию (наиболее прогрессивный способ очистки). Осуществляют сорбцию инсулина из прозрачной жидкости на макропористом сульфокатионите КУ-33-30/100 при значении рН 3,0—3,3 в режиме псевдоожижения. Жир удаляют путем промывки катионита 65—67% этанолом, при этом балласт- ные белки удаляют промыванием 0,3 М раствором ацетатного буфера (рН 5,3). Десорбцию инсулина осуществляют быстро с помощью 0,01— 0,05 М раствора аммонийного буфера (при рН 10) и немедленно подкисляют кислотой хлороводородной до значения рН 4,5 и добавляют ацетон. Выпавший осадок балластных веществ удаляют. Инсулин осаждают раствором цинка ацетата (при рН 6,2) — получают цинк-инсулин, который очищают кристаллизацией. Цинк-инсулин растворяют в воде, подкисленной кислотой лимонной до значения рН 2,8. Раствор отстаивают 1 ч, выпавший осадок балластных белков удаляют фильтрованием через кизельгур. Фильтрат смешивают с ацетоном, добавляют цинк хло- ристый и фенол, охлаждают до температуры 0 °С. Для медленной 249 кристаллизации инсулина создают условия с последовательным постепенным изменением рН раствора. Раствор подщелачивают до значения рН 8,5; оставляют на 2—3 мин, затем создают значение рН 6,8, перемешивают 1 ч; при значении рН 6,5 перемешивают 2 ч; при значении рН 6,2 и 6,0 перемешивают 2 ч и отстаивают 20 ч; при значении рН 5,8 перемешивают 2 ч и отстаивают 48— 96 ч при температуре 5 °С. Выпавшие кристаллы инсулина отделяют центрифугированием, промывают на воронке Бюхнера последовательно ледяной дистиллированной водой, ацетоном, эфиром. Досушивание проводят на воздухе, в вытяжном шкафу и эксикаторе. Многие фармацевтические предприятия и компании проводят широкомасштабные исследования по усовершенствованию технологии получения инсулина. Так, датская компания «Ново индастри» производит инсулин человеческий методом генной инженерии, в основе которого лежит замена остатка аланина, в цепи В на остаток треонина. Этого удалось достигнуть путем ферментативного замещения с последующей хроматографической очисткой продукта; в результате чего был получен однокомпо- нентный инсулин человека, содержащий 99% чистого препарата. Исследования американской компании «Эли Лилли» привели к более высокому техническому уровню производства и процессов очистки инсулина. Начиная с 1980 г. все выпускаемые инсулины изготовляются с применением ионообменной хроматографии на стадии дополнительной очистки. Компания «Эли Лилли» — один из крупнейших центров по разработке технологии создания инсулина методами генной инженерии. В частности, в непатогенных Е-12 штаммах клеток E. Coli осуществлен биосинтез инсулина. Для этого на РНК проинсулина с помощью обратной транскриптазы синтезировали ее ДНК-копию. Молекула проинсулина сворачивается и после образования дисульфидных связей образует молекулу инсулина. Процедура строгой очистки, связанная с производством инсулина человеческого на основе рекомбинантной ДНК, включает в себя изоэлектрическое осаждение и кристаллизацию, гель-фильтра- ционную хроматографию, ионообменную хроматографию. В настоящее время выпускается несколько разновидностей инсулина. Инсулин для инъекций (Insulinum pro injectionibus). Получают путем растворения кристаллического инсулина в воде, подкисленной кислотой хлороводородной до значения рН 3,0— 3,5. К раствору добавляют солюбилизатор (1,6—1,8% глицерина) и в качестве консерванта — фенол (0,25—0,3%). Раствор стерилизуют фильтрованием через стерилизующие фильтры. В 1 мл содержится 40 или 80 ЕД. 250 Суинсулин (Suinsulinum). Раствор кристаллического инсулина, получаемого из поджелудочной железы свиней, в ацетатном буфере. Раствор имеет значение рН 7,0—7,5; в качестве консер- ванта используется нипагин. В 1 мл содержится 40 или 80 ЕД. Применяют оба препарата главным образом для лечения сахарного диабета. Они оказывают относительно непродолжитель- ное сахароснижающее действие. Эффект обычно наступает через 15—20 мин после инъекции, общая продолжительность действия до 6 ч. Суинсулин реже вызывает аллергические реакции. Форма выпуска по 5 или 10 мл во флаконах, укупоренных резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками. Выпускают ряд пролонгированных препаратов инсулина. Суспензия инсулин-протамина для инъекций (Suspensio insulin-protamini pro injectionibus). Готовят из кристаллического инсулина с добавлением протамина сульфата и натрия фосфата двузамещенного; консервируется мета-крезолом, фенолом или нипагином с добавлением глицерина. Сахароснижающий эффект наступает через 2—4 ч после инъекции и продолжается 16—18 ч. Суспензия цинк-инсулина аморфного для инъекций (Suspensio zinc-insulini amorphi pro injectionibus). Это стерильная суспензия инсулина с хлоридом цинка в буферном (ацетатном) растворе. Готовят из кристаллического инсулина, который находится в суспензии в виде аморфных частиц, нерастворимых в воде. Содержит в 1 мл 40 или 80 ЕД инсулина и соответственно 80 или 160 мкг цинка. Консервируется фенолом (0,25—0,3%), рН 7,1—7,5. Сахароснижающий эффект наступает через 1—1,5 ч, продолжается 10—12 ч. Суспензия цинк-инсулина для инъекций (Suspensio zinc- insulini pro injectionibus). Стерильная суспензия цинк-инсулина аморфного и цинк-инсулина кристаллического (3:7) в ацетатном буфере. Содержит в 1 мл 40 ЕД инсулина и 80—100 мкг цинка; рН 7,1—7,5. Сахароснижающий эффект наступает через 2—4 ч, умеренно усиливается, достигает максимума через 8—10 ч и продолжается 20—24 ч. По характеру действия близка к зарубежному препарату «Insulinum lente». Протамин цинк-инсулин для инъекций (Protamin zinc- insulinum pro injectionibus). Получают путем прибавления к раствору кристаллического инсулина раствора протамина сульфата цинка хлорида и фосфата натрия. Стерильная водная суспензия белого цвета, при встряхивании не должна содержать крупных частиц. При хранении расслаивается с образованием осадка и бесцветной жидкости. Консервируется фенолом (0,25—0,3%); |