Методика. Анальгин. Около 0,35 г (точная навеска) порошка растертых таблеток помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 20 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида и перемешивают в течение 5 минут.
Непосредственно перед началом титрования в колбу приливают 2 мл кислоты серной разведенной, 0,3 мл раствора крахмала и титруют 0,1 н. раствором йода при интенсивном перемешивании до появления неисчезающего в течение 1 минуты синего окрашивания.
Параллельно проводят контрольный опыт.
1 мл 0,1 н. раствора йода соответствует 0,01757 г анальгина (Cl3H,6N304SNa ■ Н20).
Расчет содержания анальгина (в г/ 1 таблетку) проводят по формуле:
(Vi
Vi2) ' ki2'Tl2/анальгин ' b о.о к.0
X = (37)
анальгин а
(гЛтабл)
Подлинность парацетамола подтверждают с помощью метода дифференциальной спектрофотометрии, потому, что остальные препараты поглощают в той же области УФ-спектра.
Методика, (см. количественное определение, метод I).
Испытание подлинности анальгина основано на выраженных восстановительных свойствах данного лекарственного вещества. Так, анальгин при взаимодействии с йодом в кислой среде, сначала обесцвечивает реактив и только при добавлении большого избытка йода, по завершении окисления, дает осадок бурого цвета.
Методика. 0,035 г порошка растертых таблеток помещают в пробирку, прибавляют 2 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, перемешивают 3 минуты, затем прибавляют 0,2 мл кислоты серной разведенной, 0,03 мл раствора крахмала, перемешивают. При добавлении к полученному раствору 0,5 мл 0,1 М раствора йода раствор после перемешивания должен быть бесцветным. Параллельно проводят контрольный опыт: в пробирку прибавляют 2 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, 0,2 мл кислоты серной разведенной, 0,03 мл раствора крахмала и 0,1 мл 0,1 М раствора йода. Раствор после перемешивания должен быть окрашен в интенсивный синий цвет.
Все лекарственные вещества, входящие в состав таблеток «Пентал-гин ICN», можно идентифицировать с помощью хроматографии в током слое сорбента.
Методика. 0,2 г порошка растертых таблеток помещают в коническую колбу с притертой пробкой, прибавляют 0,1 мл спирта и 4 мл хлороформа и встряхивают в течение 3 минут, фильтруют через бумажный фильтр. 0,005 мл полученного раствора наносят на линию старта пластинки Kieselgel 60 F254 «Мегск» размером 5 х 15 см. Рядом наносят 0,005 мл раствора свидетелей (
20 мкг парацетамола, -15 мкг анальгина,
12,5 мкг кофеина,
2,5 мкг фенобарбитала,
2 мкг кодеина фосфата). Пластинку подсушивают на воздухе в течение 10 минут и помещают в предварительно насыщенную камеру со смесью растворителей: ацетон - толуол - диэтиламин (19,5 : 5 : 0,5). Когда фронт подвижной фазы дойдет до линии финиша, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 10 минут и просматривают в УФ- свете при 254 нм. Пятна на хроматограмме вытяжки из препарата по интенсивности окраски и положению должны соответствовать пятнам на хроматограмме раствора свидетелей.
Еще более надежным способом идентификации компонентов данной лекарственной смеси является высокоэффективная жидкостная
Парацетамол. Около 0,1 г (точная навеска) порошка растертых таблеток помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 30 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида, встряхивают в течение 10 минут, объем раствора доводят до метки 0,1 н. раствором натрия гидроксида и перемешивают. Полученный раствор фильтруют, отбрасывая первые 15 мл фильтрата.
По 1 мл фильтрата помещают в две мерные колбы вместимостью 50 мл. В первую колбу прибавляют 5 мл 1н. раствора натрия гидроксида, объем раствора доводят водой до метки, перемешивают (раствор I). Во вторую колбу прибавляют 5 мл фосфатного буферного раствора с рН 6,5 и 1 мл 0,1 М раствора кислоты хлороводородной, объем раствора доводят водой до метки и перемешивают (раствор II).
Измеряют оптическую плотность раствора I испытуемого препарата относительно раствора II испытуемого препарата на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 267 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.
Параллельно проводят измерение оптической плотности раствора I РСО парацетамола относительно раствора II РСО парацетамола.
Массу парацетамола в одной таблетке в граммах вычисляют по формуле:
А,- а0-1 ■ 50 • 50 ■ Ь Ага„Ь
X = -1- = (38)
(парацетамол А0- а, ■ 100 50 ■ 1 А0' а,■ 2
г/1 таблетку)
где Ai - оптическая плотность раствора I порошка растертых таблеток;
Ао - оптическая плотность раствора I РСО парацетамола;
а0 - навеска РСО парацетамола, (в г); -
а, - навеска порошка растертых таблеток, (в г);
b - средняя масса таблетки, (в г).
Приготовление растворов I и II РСО парацетамола. Около 0,075 г (точная навеска) парацетамола, отвечающего требованиям ФС, помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл 0,1 н. раствора натрия гироксида, встряхивают до растворения, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и переманивают.
В две мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 1 мл полученного раствора. В первую колбу прибавляют 5 мл 1 М раствора на-
трия гидроксида, а во вторую - 5 мл фосфатного буферного раствора с рН 6,5 и 1 мл 0,1 М раствора кислоты хлороводородной, доводят объемы растворов в обеих колбах водой до метки и перемешивают (соответственно растворы I и II РСО парацетамола).
Кофеин, кодеина фосфат, фенобарбитал. Определение проводят методом ВЭЖХ.
Условия разделения:
колонка из нержавеющей стали 25 х 0,46 см; сорбент Nucleosil 10 С is;
■.1 * .'
подвижная фаза (ПФ) - смесь 0,055 М раствора калия дигидрофос-фата, спирта метилового и 0,05 М раствора натрия октансульфоната
(540:280:180);
расход ПФ - 0,6 мл/мин;
УФ-детектор с рабочей длиной волны 216 нм.
Приготовление испытуемого раствора. Около 0,08 г (точная навеска) порошка растертых таблеток помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 20 мл хлороформа, встряхивают 2 минуты, доводят объем суспензии хлороформом до метки, перемешивают и фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,5 мкм. Первую порцию фильтрата (2 мл) отбрасывают. Точно 1 мл фильтрата выпаривают досуха. Остаток растворяют точно в 1 мл смеси спирт метиловый - вода (7 : 3). Раствор сохраняют в колбе с притертой пробкой.
Последовательно хроматографируют по 0,005 мл полученного раствора и раствора рабочих стандартных образцов кофеина, кодеина фосфата и фенобарбитала.
Содержание кофеина, фенобарбитала и кодеина фосфата в пересчете на среднюю массу одной таблетки рассчитывают по формулам:
где Si - площадь пика определяемого компонента на хроматограмме испытуемого раствора;
S0j - площадь пика определяемого компонента на хроматограмме рабочих стандартных образцов;
a0j - навеска рабочего стандартного образца определяемого компонента, в г;
а - навеска порошка растертых таблеток, в г;
b - средняя масса таблетки, в г.
Приготовление исходного раствора кодеина фосфата. Около 0,04 г (точная навеска) кодеина фосфата, отвечающего требованиям ФС, предварительно высушенного до постоянной массы при температуре 100 С, помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и растворяют в 20 мл смеси спирта метилового и воды (7 : 3), доводят объем раствора до метки той же смесью и перемешивают.
Приготовление исходного раствора фенобарбитала. Около 0,05 г (точная навеска) фенобарбитала, отвечающего требованиям ФС, помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и растворяют в 20 мл смеси спитра метилового и воды (7 : 3), доводят объем раствора до метки той же смесью и перемешивают.
Приготовление раствора рабочих стандартных образцов. Около 0,05 г (точная навеска) кофеина безводного, отвечающего требованиям ФС, помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и растворяют в 20 мл смеси спирта метилового и воды (7 : 3), прибавляют по 5 мл исходных растворов кодеина фосфата и фенобарбитала, доводят объем раствора до метки той же смесью, перемешивают. 5 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора той же смесью до метки, перемешивают.
Метод 2. Анальгин, парацетамол, кофеин, фенобарбитал и кодеина фосфат определяют методом ВЭЖХ.
Методика. Около 0,4 г (точная навеска) порошка растертых табле-
ток, 0,15 г натрия сульфита помещают в мерную колбу вместимостью
100 мл, прибавляют 10 мл ацетонитрила, 15 мл воды, встряхивают в те-
чение 10 мин и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Раствор фильтруют через бумажный фильтр «синяя лента», отбрасывая
первые 15 мл фильтрата. щ
5 мкл полученного раствора и 5 мкл раствора стандартного образца попеременно хроматографируют на жидкостном хроматографе «Мили-хром» с УФ-детектром, получая не менее 3 хроматограмм каждого раствора.
Условия проведения анализа:
1. Жидкостной хроматограф должен быть снабжен:
- УФ-детектором с рабочей длиной волны 210 нм;
колонкой размером 80 х 2 мм, заполненной сорбентом Сепарон SGX С-18 зернением 7 мкм, или колонкой других размеров, заполненной тем же или други подходящим сорбентом;
устройством подачи подвижной фазы, обеспечивающим создание градиента концентраций в трехкомпонентной подвижной фазе.
Расход подвижной фазы 150 мкл/мин.
Состав подвижной фазы:
до выхода пиков анальгина, парацетамола и кофеина - смесь ацетонитрила и воды (16 : 84);
после выхода пика кофеина и до выхода пика фенобарбитала -смесь ацетонитрила и воды (30 : 70);
после выхода пика фенобарбитала и до выхода пика кодеина фосфата - смесь ацетонитрила и 0,025 М раствора калия дигидрофос-фата (40 : 60).
По окончании хроматографирования колонка и узел ввода пробы промываются подвижной фазой - смесью ацетонитрила и воды (16 : 84) в течение не менее 2 минут.
Количество анальгина, парацетамола, кофеина, фенобарбитала и кодеина фосфата в пересчете на среднюю массу одной таблетки (X) в граммах вычисляют по формулам:
(41)
а
анальгин, парацетамол, кофеин (г/1 табл)
S: ■ а0; ■ b • 10
X = (42)
кодеина фосфат, "oi а '100
фенобарбитал
(г/1 табл)
Методика. К 0,2 мл препарата прибавляют 0,5 мл 0,2% раствора глиоксальгидроксанила в спирте, 0,2 мл раствора натрия гидроксида и 0,2 мл раствора натрия карбоната. Встряхивают с 1 - 2 мл хлороформа и прибавляют 1 - 2 мл воды. Слой хлороформа окрашивается в красный цвет.
Натрий-ион и калий-ион. Определяют методом пламенной фотометрии (см. количественное определение).
Хлорид-ион. К 2 мл препарата прибавляют 0,5 мл кислоты азотной разведенной и 0,5 мл раствора серебра нитрата; образуется белый творожистый осадок, нерастворимый в кислоте азотной разведенной и растворимый в растворе аммиака.
Ацетат-ион. К 5 мл препарата прибавляют 2 мл кислоты серной концентрированной, 1 мл спирта и нагревают; ощущается запах этил-ацетата.
Количественное определение. Ионы калия и натрия в данном препарате определяют с помощью метода пламенной фотометрии. Метод основан на определении интенсивности спектральной линии анализируемых атомов, возникающей при воздействии высокотемпературного пламени (эмиссионная пламенная спектрометрия), или уменьшении интенсивности резонансной линии вследствие ее поглощения атомами анализируемого элемента (атомно-абсорбционная дламенная спектрометрия) в зависимости от концентрации определяемых атомов. Метод позволяет детектировать как следовые количества атомов, так и проводить их количественное определение.
Методика. Натрий-ион. 1 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и с помощью пламенного фотометра измеряют интенсивность спектральной линии при длине волны 5^9 нм. По калибровочной кривой определяют содержание ионов натрия в препарате (в мг/л).
Содержание ионов натрия в препарате (в миллимолях на литр) вычисляют по фйрмуле:
С • 250 С • 250
X = = (43)
натрий-ион 1 • 22,99 22,99
(ммоль/л)
где С - содержание ионов натрия в разведенном препарате,
найденное по калибровочной кривой, в мг/л; 22,99 - молярная масса натрия, г/моль.
Построение калибровочной кривой.
Из раствора рабочего стандартного образца натрия хлорида, содержащего 100 мг ионов натрия в 1 л, готовят рабочие растворы с концентрацией ионов 5, 10, 15, 20, 25, 30 мг/л. Для этого в мерную колбу вместимостью 50 мл помещают соответственно 2,5, 5,0; 7,5, 10,0, 12,5 мл раствора рабочего стандартного образца натрия хлорида, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и измеряют на пламенном фотометре интенсивность спектральной линии.
Строят калибровочный график, откладывая на оси ординат показания гальванометра, а на оси абсцисс - концентрацию ионов натрия (в мг/л).
Калий-ион. 1 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и измеряют интенсивность спектральной линии при длине волны 770 нм. По калибровочному графику определяют содержание ионов калия в разведенном препарате (в мг/л). Содержание ионов калия в препарате (в миллимолях на литр) вычисляют по формуле:
С • 250 С ■ 250
X = = (44)
калий-ион 1 ■ 39,098 39,098 (ммоль/л)
где С - содержание ионов калия в разведенном препарате,
найденное по калибровочной кривой, (в мг/л); 39,098 - молярная масса калия, г/моль
Построение калибровочной кривой.
Из раствора рабочего стандартного образца калия хлорида, содержащего 100 мг ионов калия в 1 л, готовят рабочие растворы с концентрацией 1, 2,-3, 4, 5 мг/л ионов калия. Для этого в мерную колбу вместимостью 250 мл помещают соответственно 2,5, 5,0, 7,5, 10,0, 12,5 мл раствора рабочего стандартного образца калия хлорида, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и измеряют интенсивность спектральной линии. Строят калибровочный график, откладывая на оси ординат показания гальванометра, а на оси абсцисс - концентрацию ионов калия (в мг/л).
Кальций-ион. В препарате "Квинтасоль" совместно присутствуют ионы кальция и магния. Однако в щелочной среде с индикатором му-рексидом можно трилонометрически определить только кальций-ион.
■
Методика. 10 мл препарата помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 25 мл воды, 2 мл раствора натрия гидроксида, 0,03 г индикаторной смеси мурексида и титруют 0,005 М раствором трилона Б до перехода окраски раствора из розовой в фиолетовую.
1 мл 0,005 М трилона Б соответствует 0,0005550 г СаС12
Расчет кальций-иона (в миллимолях на литр) проводят по формуле:
V • к ■ 0,0005550 ■ 1000 • 1000
X = (45)
кальций-ион 10 ■ 111,0
(ммоль/л)
где V - объем 0,005 М раствора трилона Б, пошедшего на титрование испытуемой пробы, в"мл; к - коэффициент поправки на титрованный раствор; 10 - объем препарата, взятый для анализа, в мл; 1000, 1000 - коэффициенты пересчета; 111,0 - молярная масса кальция хлорида, г/моль.
Магний-ион. Для анализа иона магния определяют комплексоно-метрически сумму ионов магния и кальция в среде аммиачного буферного раствора. Расчет содержания магний-иона проводят по разности
объемов титранта между вторым титрованием (определение суммы ионов) и первым (определение кальций-иона).
Методика. 10 мл препарата помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 25 мл воды, 2 мл аммиачного буферного раствора, 0,05 г индикаторной смеси эриохрома черного Т и титруют 0,005 М раствором трилона Б до перехода окраски из фиолетово-красной в голубую.
1 мл 0,005 М раствора трилона Б соответствует 0,0004759 г MgCl2 Расчет магний-иона (в миллимолях на литр) проводят по формуле:
(Ч- V,)- к • 0,0004759 • 1000 ■ 1000
X = (46)
магний-ион 10 95,21
(ммоль/л)
где V2 - объем 0,005 М раствора трилона Б, пошедшего на титрование испытуемой пробы, в мл; Vi - объем 0,005 М раствора трилона Б, пошедшего на титрование кальция хлорида, в мл; к - коэффициент поправки на титрованный раствор; 10 - объем препарата, взятый для анализа, в мл; 1000, 1000 - коэффициенты пересчета; 95,21 - молярная масса магния хлорида, г/моль.
Хлорид-ион. В данной лекарственной смеси сумму хлоридов можно беспрепятственно определять прямым аргентометрическим титрованием по методу Мора.
Методика. 5 мл препарата помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 25 мл воды и титруют ОД н. раствором серебра нитрата до красновато-коричневого окрашивания (индикатор -калия хромат).
1 мл 0,1 н. раствора серебра нитрата соответствует 0,003545 г хлорид-иона.
Содержание хлорид-иона в препарате (в миллимолях на литр) рассчитывают по формуле:
V ■ к 0,003545 • 1000 ■ 1000
X = (47)
хлорид-ион 5 ■ 35,45
(ммоль/л)
где V - объем 0,1 н. раствора серебра нитрата, пошедшего на титрование испытуемой пробы, в мл; к - коэффициент поправки на титрованный раствор; 5 - объем препарата, взятый для анализа, в мл; 1000, 1000 - коэффициенты пересчета; 35,45 - молярная масса хлорид-иона, г/моль.
Ацетат-ион. Содержащиеся в препарате хлориды не мешают количественному определению ацетат-иона.
Методика. 20 мл препарата помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 4 капли индикатора бромфенолового синего и титруют 1 н. раствором кислоты хлороводородной до желтой окраски.
1 мл 1 н. раствора кислоты хлороводородной соответствует 0,05902 г ацетат-иона.
Содержание ацетат-иона в препарате (в миллимолях на литр) рассчитывают по формуле:
V • к ■ 0,05902 • 1000 • 1000
X = (48)
ацетат-ион 20 ■ 59,04-
(м моль/л)
где V - объем 1 н. раствора кислоты хлороводородной, пошедшей на титрование испытуемой пробы, в мл; к - коэффициент поправки на титрованный раствор; 20 - объем препарата, взятый для анализа, в мл; 1000, 1000 - коэффициенты пересчета; 59,04 - молярная масса ацетат-иона, г/моль.
Лекарственное средство баралгин (пропись 51) выпускают в виде таблеток и раствора для инъекций. В состав препарата, наряду с анальгином, входят питофенона гидрохлорид - 4 -(пиперидиноэтокси)-карбметоксибензофенона гидрохлорид и фенпивериния бромид - 2,2-дифенил-4-пиперидилбутирамида бромметилат.
о
фенпивериния бромид питофенона гидрохлорид
ПРОПИСЬ 51 Баралгин, раствор для инъекций
Состав раствора одной ампулы на 5 мл: Метамизола натрия (анальгина) 2,5 г (0,5 г/мл) Питофенона гидрохлорида 0,01 г (0,002 г/мл) Фенпивериния бромида 0,0001 г (0,00002 г/мл)
Содержание анальгина в лекарственном средстве на несколько порядков превышает содержание фенпивериния бромида и питофенона. Это позволяет определять анальгин в присутствии других ингредиентов с помощью метода ультрафиолетовой спектрофотометрии (фенпивериния бромид и питофенон из-за малого содержания не влияют на результат определения). |
Скачать 2.86 Mb.