микроба. Задание с какой целью доставлен исследуемый материал в лабораторию Ответ
 Скачать 1.63 Mb.
|
|
Задание 179 Врача-педиатра вызвали к заболевшему 3-летнему мальчику Вове Т. Как сообщили родители ребенок болен уже сутки. Заболевание началось с повышения температуры до 38,5 и однократной рвоты. Жаловался на боли в горле при глотании появились одутловатость лица и адинамия. Обычно энергичный бегающий малыш прыгающий малыш был малоподвижен сонлив. При осмотре зева были видны грязно-белые пленки на миндалинах переходящие на дужки. Врач заподозрил дифтерию и немедленно машиной скорой помощи ребенок был доставлен в боксированное отделение детской инфекционной больницы. У больного был взят исследуемый материал и направлен в баклабораторию. Вопрос: Каким образом был взят исследуемый материал и что отправил врач в баклабораторию для подтверждения диагноза? Ответ: Для взятия материала используют стерильные сухие ватные тампоны тампон погружают в среду обогащения Материал лучше брать натощак. Перед взятием материала нужно ослабить пробку в пробирке чтобы она быстро вынималась и придерживая корень языка шпателем брать материал под контролем глаза не касаясь языка слизистой оболочки щек и зубов с наиболее пораженного места. При наличии налетов материал следует брать с границы пораженных и здоровых тканей слегка нажимая на них тампоном. Материал забирают двумя тампонами. Если имеется дифтеритическая пленка можно снять часть ее пинцетом если она поддается взятию. Отправлять материал в лабораторию следует как можно быстрее и по доставке немедленно засевать на питательные среды Вопрос: Какие исследования необходимо провести чтобы подтвердить или опровергнуть предполагаемый диагноз? Ответ: Бактериоскопическое исследование Один из доставленных тампонов используют для проведения бактериоскопического исследования. Готовят 3 мазка которые после фиксации в пламени горелки окрашивают один- по граму второй- синью леффлера третий- по нейссеру. В мазках приготовленных из пленки коринебактерии дифтерии имеют вид единичных палочек расположенных под углом подобно цифре V или растопыренным пальцам реже они образуют скопления напоминающие войлок или рассыпанные булавки. По граму они окрашиваются положительно. При окраске синью леффлера на полюсах клетки отчетливо выявляются интенсивно окрашенные гранулы волютина. При окрашивании по Нейссеру зерна волютина приобретают сине-черный цвет контрастирующий со светло-коричневой окраской всей микробной клетки. Ложно дифтерийные бактерии и дифтероиды располагаются параллельно и лишены гранул волютина Бактериологическое исследование Исследуемый материал из второго тампона засевают на одну из элективных сред в пробирку со свернутой сывороткой и в чашку Петри с теллуритовым кровяным агаром хинозольной средой Бучина При выделении коринебактерий дифтерии рекомендуется постоянно использовать одну из указанных сред так как это позволяет получать более четкие и сравнимые результаты. При посеве материал втирают тампоном в поверхность среды. Посевы выращивают в термостате при температуре 37 и исследуют спустя 20- 24 часа. Учитывая что на свернутой сыворотке коринебактерии дифтерии вырастают раньше других микроорганизмов в виде мелких несливающихся колоний можно проводить исследование и раньше- через 6- 12 часов Выросшие на чашке колонии рассматривают с помощью лупы. Колонии дифтерийных палочек на теллуритовых средах через 18-24 часа черные мелкие круглые плоско-выпуклые с четко выраженным более темным центром. Колонии типа gravis обычно крупные тусклые матовые выражена зазубренность края. Колонии типа mitis и intermedius мелкие блестящие с гладким краем. Дифтероиды растут в виде выпуклых влажных колоний серого или коричневого цвета. Ложнодифтерийные палочки образуют сухие мелкие слизистые колонии серого цвета. Для получения чистой культуры и определения токсигенности подозрительные колонии микроскопируют пересевают на сывороточную среду и в чашки с фосфатно- пептонным агаром для определения токсигенности Чистые культуры микроскопируют сеют в среды пестрого ряда среду с цистином- проба на цистиназу среду с мочевиной. Одновременно проводят реакцию агглютинации на стекле с моноспецифическими дифтерийными сыворотками 1-4-го сероваров. На чашках с фосфатно-пептонным агаром учитывают результаты определения токсигенности. Вопрос: На основании каких свойств выделенной чистой выделенной чистой культуры можно утверждать что это дифтерийная палочка? Ответ: При обнаружении грамположительных палочек располагающихся в препарате в виде цифры V или растопыренных пальцев зерен волютина на полюсах, дающих положительную пробу на цистиназу и специфические линии преципитации на фосфатно-пептонном агаре с анатоксической сывороткой можно такую культуру идентифицировать как токсигенные дифтерийные коринебактерии. Вопрос: Какой препарат необходимо обязательно включить в комплекс лечебных мероприятий как он готовится дозируется и вводится? Ответ: Противодифтерийную сыворотку очищенную и концентрированную методом Диаферм 3 ИЭМ АМН Противодифтерийная сыворотка используется главным образом с терапевтической целью. Основным фактором обеспечивающим эффективность лечения является максимально ранее от начала заболевания ее применения Сыворотку вводят подкожно или внутримышечно в любом случае после определения чувствительности к лошадиному белку при помощи внутрикожной пробы Дозировка сыворотки зависит от тяжести заболевания. В данном случае можно назначить 20000МЕ Если однократное введение сыворотки не даст достаточного клинического эффекта препарат можно ввести повторно Противодифтерийную сыворотку получают из крови лошадей гипериммунизированных дифтерийным анатоксином. Сыворотку пере выпуском практику подвергают очистке и концентрации методом ферментативного гидролиза. Действующим началом препарата является дифтерийный антитоксин способный нейтрализовать действие дифтерийного токсина Вопрос: Что нужно провести в очаге откуда был госпитализирован больной? Ответ: Нужно провести дезинфекцию помещения где жил больной ребенок дезинфекцию игрушек и предметов обихода с которым обращался обращался больной. Все эти мероприятия необходимо провести после госпитализации ребенка. Кроме того нужно провести бактериологические исследования отделяемого носоглотки родителей мальчика для исключения возможного бактерионосительства. Вопрос: С какой целью и какие исследования необходимо провести после выздоровления ребенка (перед выпиской из стационара)? Ответ: Перед выпиской из стационара у ребенка нужно взять на исследование слизь из носоглотки сухим стерильным ватным тампоном и отправить в баклабораторию для проведения бактериологического исследования. Бактериологическое исследование слизи из носоглотки у реконвалесцентов проводится однократно с целью обследования на носительство дифтерийных бактерий. Такое исследования проводятся по эпид-показаниям так как носители являются активными источниками инфекции. Выявленные носители подлежат лечению Задание 180 Больной К жалуется на быструю утомляемость плохой сон пониженный аппетит головные боли потливость по ночам и ранним утром лихорадку по типу субфебрильной (до 37,5) кашель с гнойной мокротой. На основании клинических и рентгенологических данных врач заподозрил у больного туберкулез легких Вопрос: Назовите возбудителя чаще всего вызывающего эту форму заболевания Ответ: Человеческий тип возбудителя туберкулеза Вопрос: Какой материал от больного необходимо взять для исследования? Ответ: Мокроту Вопрос: Каким методом диагностики можно выявить возбудителя в исследуемом материале? Ответ: Микроскопичеким Вопрос: Какой метод окраски мазков применяется для выявления возбудителя? Ответ: Окраска по цилю-нильсену Вопрос: Как выглядят возбудители в мазке из исследуемого материала? Ответ: На голубом фоне рубиново-красные тонкие палочки прямые или слегка изогнутые располагаются по одиночке или неправильными группами Вопрос: Как поступить если первичная микроскопия дает отрицательный результат при наличии типичных клинических симптомов? Ответ: Применить методы обогащения исследуемого материала Вопрос: Перечислите методы обогащения которые можно использовать в этом случае? Ответ: Гомогенизация флотации Задание № 181 Из центрифугата утренней порции мочи, взятой у больного с подозрением на туберкулез почек, был приготовлен мазок и окрашен по Цилю-Нильсену. В мазке обнаружены единичные кислотоустойчивые микробы имеющие палочковидную форму. Задания 1. Можно ли на основании проведенного исследования установить этнологию заболевания? 2. Какая сапрофитная микрофлора может определяться в мазке из мочи? 3. Как можно отдифференцировать сапрофитную микрофлору от туберкулезной палочки в мазках, окрашенных по Цилю-Нильсену? Эталоны ответов 1. Нет, нельзя 2. Микобактерии смегмы. 3. Произвести длительное ( в течении 45 -60 мин.) обесцвечивание в 3 % солянокислом спирте мазков, окрашенных по Цилю-Нильсену. Задание № 182 При лабораторном исследовании мокроты больного в микропрепарате обнаружены тонкие, длинные, слегка изогнутые или короткие, окрашенные в ярко-красный, рубиновый цвет, палочки, располагающиеся в виде жгутов («кос»). Задания 1. Назовите возбудителя заболевания. 2. Каким методом диагностики выявился возбудитель? 3. Как проводился этот метод диагностики? 4. Под влиянием какого фактора микроколонии имеют вид жгутов? («кос»). Эталон ответов 1. M. tuberculosis. 2. Ускоренным методом микрокультур Прайса 3. Мокроту наносят толстым слоем на несколько стерильных предметных стекол. Высушенный препарат обрабатывают 5 минут 6 % серной кислотой и промывают в изотоническом растворе натрия хлорида. Культивируют в цитратной крови. Через 48- 72 часа препараты извлекают, фиксируют и окрашивают по Цилю-Нильсену. 4. Под влиянием липидной фракции микобактерий ( корд-фактора). Задание № 183 При медицинском обследовании учащихся 1 класса поставлена проба Манту. Из 35 учащихся у 15 проба Манту была отрицательной. Задания 1. С какой целью были поставлены пробы Манту? 2. Как ставится проба Манту? 3. Какие препараты используют для постановки пробы Манту? 4. Через какое время и как проводится учет реакции Манту? 5. О чем свидетельствует положительная и отрицательная проба Манту? 6. Что необходимо сделать детям с отрицательной пробой Манту? 7. Каким препаратом и как проводится вакцинация и ревакцинация против туберкулеза? Эталоны ответов 1. С целью отбора учащихся для ревакцинации против туберкулеза и для эпидемиологического исследования инфицированности туберкулезом 2. На ладонную поверхность средней трети предплечья строго внутрикожно вводят 0,1 мл туберкулина. 3.1. Туберкуливы ( РРД; ППД-Л). 3.2. Более стабильным является туберкулин РРД – очищенный белок, приготовленный из фильтров культур микробактерий человеческого и бычьего типов, выращенных на синтетической среде. 4.1 Учитывается поперечный диаметр инфильтрата, если он не превышает 1 мм – реакция отрицательная. Положительной считается реакция при размере инфильтрата не менее 5 мм. 5. 5.1. Проба Манту бывает положительной, если учащийся инфицирован микобактериями или сохранилось аллергическое состояние после введения туберкулезной вакцины. Отрицательная реакция Манту свидетельствует о неинфицированности организма учащихся туберкулезными палочками. 6. Ввести вакцинацию 7.1 Вакцинация БЦЖ. 7.2 Вакцину вводят внутрикожно на наружную поверхность плеча левой руки – доза 0,05 мг БЦЖ в объеме 0,1 мл. 7.3 Первая прививка всем детям на 5 -7-й день жизни при отсутствии противопоказаний, первая вакцинация в 7 лет, вторая - в 12, третья - в 17 лет. Последующие ревакцинации с интервалом в 5 -7 лет до 30-летнего возраста. Задание № 184 Больной П. жалуется на боли в области поясницы, учащенные позывы на мочеиспускание, небольшие подъемы температуры ( до 37,5 ). Моча мутная ( гной, лейкоциты). При бактериологическом исследовании мочи туберкулезные палочки не выявлены. Посевы мочи на гноеродную микрофлору отрицательные. Клинически – туберкулез почек. Задания 1. Какой еще метод лабораторной диагностики Вы рекомендуете применить для уточнения диагноза заболевания? 2. Сколько времени находится животное под наблюдением и как его исследуют? 3. Какой метод окраски мазков рекомендуется применить для выявления туберкулезных палочек? Эталоны ответов 1. Биологический Заразить подкожно в паховую область неследуемым материалом морскую свинку 2. Через 2-3 недели зараженную морскую свинку взвешивают, определяют наличие и размеры регионарных лимфатических узлов. Для выявления инфицированности животного микробактериями ставят пробу Манту. Если на месте введения образуется покраснение и припухлость, это свидетельствует о том, что животное инфицировано туберкулезными бактериями. Через 2-4 месяца морская свинка погибает. О вирулентности штамма судят по количеству специфических изменений и органах, продолжительности жизни животного, падению массы тела. 3. Метод Циля-Нильсена. Окраска микроорганизмов по методу Циля-Нильсена включает следующие этапы: 1. Фиксированный мазок покрывают полоской фильтровальной бумаги и наливают на нее феноловый фуксии Циля ( можно пользоваться фильтровальной бумагой, предварительно пропитанной красителем и высушенной). Мазок подогревают над пламенем горелки до появления паров, затем отводят в сторону до охлаждения и добавляют новую порцию красителя. Подогревание повторяют 2-3 раза. После охлаждения снимают фильтровальную бумагу и промывают препарат водой. 2. Препарат обесцвечивают путем погружения или нанесения на него 5% раствора серной кислоты и промывают несколько раз водой. 3. Окрашивают препарат водно-спиртовым раствором метиленового синего 3-5 мин, промывают водой и высушивают. При окраске по методу Циля-Нильсена кислотоустойчивые бактерии приобретают интенсивно красный цвет, остальная микрофлора окрашивается в светло-синий. Задание № 185 Больная Д. обратилась к врачу по поводу обильных розовато-красных пятен на туловище и конечностях. На половых органах обнаружены свежие следы заживших язв. В паховых областях пальпируются слегка увеличенные лимфоузлы. С диагнозом «сифилис» больная направлена в венерологический диспансер. Задания 1. Какие исследования Вам необходимо назначить больной для подтверждения этого диагноза? 2. На основании каких данных можно прийти к заключению об этиологии заболевания больной Д.? Эталоны ответов 1. Микроскопическое исследование пункта лимфоузлов, серологические исследования крови 2. Предварительный диагноз можно поставить только на основании клинических данных и соответствующего анамнеза. Окончательный диагноз можно восстановить только на основании данных комплекса бактериоскопического и серологических исследований сыворотки крови ( реакция Вассермана, осадочные реакции). Задание № 186 Больной обратился с жалобами на появление двух язв на головке полового члена, которые появились 12 дней назад. За три недели до заболевания имел случайную половую связь с малознакомой женщиной. Микроскопическое исследование нативного мазка, приготовленного из отделяемого язвы, позволило обнаружить подвижные, спиралевидной формы бактерии, которые совершали поступательные, вращательные, сгибательные движения. Число оборотов спирали возбудителя – от 8 до 12. Завитки равномерны, вверху закруглены, расстояния между ними одинаковые , по направлению к концам уменьшаются. Задания 1. Какой микроорганизм обнаружен специалистом при исследовании препарата? 2. Какие основные морфологические признаки позволили его опознать? 3. Какой метод микроскопии использовался в этом случае? Эталоны ответов 1. В данном случае в препарате обнаружены бледные трепонемы. Клиническая картина, анамнез, типичная морфологическая картина возбудителя позволяют поставить диагноз «сифилис» 2. Извитая форма возбудителя, равномерность завитков и типичные движения. 3. Микроскопия нативного препарата в темном поле зрения. На прием к врачу-дерматовенерологу обратилась женщина с жалобами на появление язвы на большой половой губе, которая специалистом после осмотра охарактеризована, как твердый шанкр. В тканевой жидкости, полученной из этого шанкра, при микроскопии найдена бледная трепонема. Задания 1. На основании каких признаков найденные в мазке возбудители отнесены к бледной трепонеме? 2. Опишите технику взятия и приготовления препарата из тканевой жидкости для этого исследования? 3. Каким методом микроскопии необходимо воспользоваться? 4. Можно ли, используя, метод микроскопии, поставить диагноз «сифилис»? Эталоны ответов 1. Бледная трепонема в темном поле выглядит в виде тонкой спирали, освещенной ровным светом. Для нее характерны плавные движения и особенно маятникообразное движение. Иногда трепонема изгибается под углом. При окраске по Романовскому бледная трепонема окрашивается в бледно-розовый цвет. При обработке препаратов солями серебра ( по Морозову) трепонемы выглядят коричневыми или почти черными. 2. Результат исследования в значительной степени зависят от тщательности взятия материала. Поверхность эрозии или язвы тщательно освобождают от гноя прикладыванием ватки, смоченной физиологическим раствором, при этом растирают поверхность язвы во избежание кровотечения. Затем надавливанием прокаленной и остуженной металлической лопаточки, не торопясь, раздражают поверхность язвы; отделяемое появляется не сразу. Раздражать следует плотную часть шанкра, стараясь получить сок из глубины, так как там бледные трепонемы содержатся в чистом виде и сапрофитических трепонем почти не бывает. Небольшую каплю тканевого сока наносят на тонкое чистое предметное стекло и накрывают ее покровным стеклом. В тех случаях, когда сока очень мало, его вносят в каплю физиологического раствора, предварительно нанесенного на предметное стекло. Не следует делать большие капли, так как трепонемы будут плавать и их труднее обнаружить. Второй препарат нужно высушить на воздухе, фиксировать смесью Никифорова и окрашивать либо по Романовскому, либо серебрением по Морозову. 3. Исследование нативных препаратов в темном диагностики сифилиса в стадии твердого шанкра. 4. Можно, если правильно приготовить нативный препарат и изучать его в темном поле зрения светового микроскопа. |