Шпаргалка для экзамена по микробиологии. Экзаменационные вопросы по курсу ветеринарной микробиологии
 Скачать 1.47 Mb.
|
|
РТГА Одной из простейших серологических реакции является реакция торможения гемаглютинации. Она основана на том, что АТ при встрече с гомологичным АГ нейтрализуют не только его инфекционную, но и гемагглютинирующую активность, т.к. блокируют рецепторы вирионов, ответственные за гемагглютинацию, образуя с ними комплекс «АГ+АТ». Принцип РТГА состоит в том, что в пробирке смешивают равные объемы сыворотки крови и суспензии вируса и после экспозиции определяют, сохранился ли в смеси вирус, путем добавления суспензии эритроцитов. Агглютинация эритроцитов указывает на наличие, а отсутствие гемагглютинации – на отсутствие вируса в смеси. Исчезновение вируса из смеси вирус + сыворотка расценивается как признак взаимодействия АТ сыворотки и вируса. РТГА позволяет решать следующие задачи: определять титр АТ к гемагглютинирующему вирусу в сыворотке; идентифицировать неизвестный гемагглютинирующий вирус по известным сывороткам; установить степень АГ родства двух вирусов. Достоинства РТГА: простота техники, быстрота, не требуется стерильной работы, специфичность, дешевизна. Недостаток РТГА: возможна только с гемагглютинирующими вирусами. Принцип титрования АТ в РТГА состоит в следующем: готовят ряд последовательных (обычно 2-х кратных) разведений исследуемой сыворотки в одинаковых объемах (чаще по 0,25 или 0,2 мл); к каждому разведению добавляют такие же объемы гомологичного вируса в титре 4 ГАЕ; смеси выдерживают определенное время при определенной температуре, ко всем смесям добавляют равные объемы 1-% суспензии отмытых эритроцитов; после экспозиции оценивают гемагглютинацию в каждой смеси в крестах.
РПГ — метод выявления антигенов и антител, основанный на диффузии компонентов через слой агарового (агарозного) геля и образования видимого преципитата на участках, где создаются их эквивалентные концентрации. Чаще всего используется метод двойной (встречной) диффузии, предложенный О. Ухтерлони в 1948 г., при котором антигены и сыворотки вносятся в противостоящие лунки, вырезанные в пластинке геля; через определенное время в толще геля образуются преципитационные полосы, соответственно числу антигенов и антител совпадающей специфичности. Кроме того, метод позволяет проводить сравнение нескольких антигенов между собой при некой стандартной сыворотке: в случае их идентичности образуемые ими полосы преципитации сливаются в сплошную линию и, наоборот, полосы пересекаются, если сравниваемые антигены имеют различия (т. н. феномен “шпоры”). Другим преимуществом РПГ является то, что смеси антигенов могут разделяться за счет разной скорости диффузии и выявляться индивидуально; по этой же причине могут отделяться и ингибиторы преципитации, если они содержатся в испытуемом материале. Недостатком метода считают его низкую чувствительность, иначе, разрешающую способность. РПГ широко использовалась как тест на обнаружение антигенов вируса гепатита В и антител к ним в 60 — 70-е годы, в частности, с помощью этой реакции было установлено наличие в составе вируса е-антигена или HBeAg. Реакция преципитации характеризуется осаждением специфических мелкодисперсных антигенов эквивалентным количеством антител в присутствии электролита. Выпадение нерастворимого комплекса антиген — антитело в виде осадка наблюдается лишь при эквивалентных соотношениях ингредиентов. Образовавшийся комплекс может раствориться в избытке антигена или антител. Антиген должен иметь характер прозрачного коллоидного раствора. В лабораторной диагностике инфекционных заболеваний реакция преципитации служит главным образом для выявления или идентификации антигена (преципитиногена) по известной преципитирующей сыворотке, содержащей антитела (преципитины). Для приготовления коллоидных антигенов, участвующих в реакции преципитации, используют различные методы их экстракции из исследуемого материала: физические, химические и биологические. Реакция преципитации. Проводится с прозрачными коллоидными растворимыми антигенами, экстрагированными из патологического материала, объектов внешней среды и чистых культур бактерий. Один из распространенных методов химической экстракции антигенов бактерий — получение комплексного антигена по Буавену с помощью гидролиза бактерий трихлоруксусной кислотой. В реакции используются прозрачные диагностические преципитирующие сыворотки с высокими титрами антител. За титр преципитирующей сыворотки принимают то наибольшее разведение антигена, которое при взаимодействии с иммунной сывороткой вызывает образование видимого преципитата — помутнения. Реакция кольцепреципитации. Ставится в узких пробирках (диаметр 0,5 см), в которые вносят по 0,2-0,3 мл преципитирующей сыворотки. Затем пастеровской пипеткой медленно, по стенке, держа пробирку в наклонном положении, наслаивают 0,1-0,2 мл раствора антигена. Пробирки осторожно переводят в вертикальное положение. Результаты опыта протоколируют . Учет реакции производят через 1—2 мин. В случае положительной реакции в первой пробирке на границе между сывороткой и исследуемым антигеном появляется преципитат в виде белого кольца. В остальных (контрольных) пробирках преципитат не образуется. Реакция преципитации в геле (агаре). Чашки заливают агаром, в котором вырезают несколько луночек на равном расстоянии друг от друга. В центральную лунку вносят сыворотку, содержащую антитела, в остальные — различные испытуемые антигены или один и тот же антиген в различных разведениях. При диффузии реагентов в агаре в зонах оптимальных соотношений на месте встречи антигена и антител образуются мутные полосы —дуги преципитации. В случае постановки реакции преципитации с различными разведениями антигена можно установить титр преципитиру-ющей сыворотки—максимальное разведение антигена, которое дает преципитацию с данной сывороткой. Одна из разновидностей реакции преципитации в геле позволяет определять токсигенность исследуемых бактерий (например, дифтерийной палочки) с помощью антитоксической сыворотки. Для этого в чашку Петри на питательную среду помещают полоску стерильной фильтровальной бумаги, пропитанную антитоксической противодифтерийной сывороткой. Затем чашку подсушивают в термостате и засевают испытуемыми культурами в виде штрихов, перпендикулярных к полоске бумаги, на расстоянии 0,6-0,8 см от ее края. В качестве контроля используют заведомо токсигенную культуру. Чашки инкубируют при 37°С в течение суток. При наличии токсигенной культуры в месте взаимодействия токсина с антитоксином образуются линии преципитации в виде дуг. Иммуноэлектрофорез. Исследование проводится в два этапа: 1) электрофоретическое разделение исследуемого материала в агаре; 2) иммунологический анализ. В агаре параллельно оси миграции электрофоретических фракций вырезают траншеи, в которые вносят иммунную сыворотку, содержащую антитела к исследуемым антигенам. В случае реакции между антигенами и диффундирующими в агар антителами формируется преципитат в виде дискретных дуг, соответствующих индивидуальным системам антиген—антитело Иммунофлюоресцентный метод. На предметном стекле готовят мазок из испражнений больного ко-лиэнтеритом, фиксируют на пламени и обрабатывают иммунной сывороткой, содержащей антитела к возбудителям колиэнтерита. Для образования комплекса антиген — антитело препарат помещают во влажную камеру и инкубируют при 37°С в течение 15 мин, после чего тщательно промывают изотоническим раствором хлорида натрия — удаляют несвязавшиеся с антигеном антитела. Затем на препарат наносят флюоресцирующую антиглобулиновую сыворотку, выдерживают в течение 15 мин при 37°С и препарат тщательно промывают изотоническим раствором хлорида натрия. В результате связывания флюоресцирующей антиглобулиновой сыворотки с фиксированными на антигене специфическими антителами образуются светящиеся комплексы антиген — антитело, которые обнаруживаются при люминесцентной микроскопии.
Для постановки реакции лизиса и реакции связывания комплемента (РСК) используют комплемент, который содержится в сыворотке крови морских свинок. Гемолитическая активность комплемента термолабильна и полностью утрачивается при прогревании сыворотки в течение 30 мин при 56°С. При адсорбции комплемента на комплексе антиген — антитело его действие проявляется в реакции лизиса антигена, если это клетки, или не сопровождается никакими видимыми изменениями, если это мелкодисперсные или растворимые антигены. Для учета результатов данной реакции РСК вводят вспомогательную (индикаторную) гемолитическую систему. Она состоит из взвеси эритроцитов барана в изотоническом растворе хлорида натрия и гемолитической сыворотки кролика, полученной путем его иммунизации упомянутыми эритроцитами. Положительная РСК характеризуется задержкой гемолиза вследствие адсорбции комплемента системой антиген — антитело (рис. 60). Отрицательная РСК характеризуется наличием гемолиза, поскольку свободный комплемент связывается с системой эритроциты барана — гемолитическая сыворотка кролика. РСК обладает высокой чувствительностью й специфичностью, что позволяет использовать ее для серодиагностики многих заболеваний, а также для выявления антигенов в крови больного. Кроме того, ее применяют для идентификации бактерий, вирусов и других антигенов.
Реакция связ-ния комплемента Сущность РСК в том, что если в сыворотке, полученной от больного животного, есть АТ, то они со специфическими АГ могут образовать комплекс, связывая комплемент, и гемолиза не будет, реакя «+» Компоненты: 1. Сыворотки – исследуемая, позитивная и нормальная – в разведении 1:5 или 1:10, инактивные. 2. Антиген в разведении согласно титру. 3. Гемолизин (гемолитическая сыворотка). 4. Комплемент. 5. Эритроциты барана. 6. Физиологический раствор. Этапы постановки РСК: 1.разведение и титрование гемолизина 2.титрование комплемента в гем. и бакт. системе. 3.проведение основной реакции. Главный опыт РСК Комплимент+сыворотка больного+антиген + Гемолизин+эритроциты барана= гемолиза нет, реакция «+», животное больное Оценка реакции ++++ полное осаждение, нет гемолиза +++ жидкость над осадком желтовата + резко выражен гемолиз – реакция «-» Стандартная схема постановки РСК предусматривает проведение первой фазы —соединение антигена, испытуемой сыворотки и комплемента при 37°С в течение 30 мин. При постановке РСК на холоду эту фазу проводят при 0—4°С в течение 18—20 ч, что повышает чувствительность реакции. Стандартная схема постановки РСК предусматривает проведение первой фазы —соединение антигена, испытуемой сыворотки и комплемента при 37°С в течение 30 мин. При постановке РСК на холоду эту фазу проводят при 0—4°С в течение 18—20 ч, что повышает чувствительность реакции. После добавления в каждую пробирку по 0,4 мл гемолитической системы пробирки встряхивают и выдерживают 20—30 мин при 37°С. Результаты опыта оценивают, отмечая наличие или отсутствие гемолиза во всех пробирках (см. табл. 19): реакцию считают положительной при полной задержке гемолиза, когда жвдкость в пробирке бесцветна и эритроциты оседают на дно, отрицательной—при полном лизисе эритроцитов, когда жидкость интенсивно окрашена («лаковая кровь»). Степень задержки гемолиза оценивают в зависимости от интенсивности окраски жидкости и величины осадка эритроцитов на дне.
Серодиагностика (от лат. serum — сыворотка и диагностика), метод распознавания заболеваний человека, животных и растений, основанный на способности антител сыворотки крови специфически реагировать с соответствующими антигенами. В медицине применяется для диагностики, в том числе экспресс-методами (иммунолюминесценция), инфекционных и некоторых неинфекционных заболеваний. К С. относятся также определение антигенов в биологических жидкостях (крови, моче и т. п.) и тканях при помощи реакций связывания комплемента, торможения пассивной гемагглютинации и т. п., определение вида бактерий и вирусов, выделенных от больных, и установление видовой принадлежности белков и групп крови человека при помощи специфических сывороток. Особая разновидность С. — диагностика заболеваний путём регистрации характерных изменений сыворотки крови при воздействии на нее определенными неспецифическими реактивами (например, осадочные реакции с липидами при сифилисе, желатинизация сыворотки под воздействием формальдегида при лейшманиозе и т. п.). См. также Серология, Иммунодиагностика. В ветеринарии С. применяется для массовой диагностики инфекционных болезней животных. Позволяет диагностировать болезнь до появления клинических признаков. В зависимости от исследуемого материала и предполагаемого заболевания применяют реакции агглютинации, преципитации, связывания комплемента и др.; часто комбинируют с аллергическими реакциями. Серотерапия (от лат. serum — сыворотка и терапия), метод лечения заболеваний человека и животных (преимущественно инфекционных) при помощи иммунных сывороток. Лечебный эффект основан на явлении пассивного иммунитета — обезвреживании микробов (токсинов) антителами (антитоксинами), содержащимися в сыворотках, которые получают путём гипериммунизации животных (главным образом лошадей). Для С. применяют также очищенные и концентрированные сыворотки — гамма-глобулины; гетерогенные (полученные из сывороток иммунизированных животных) и гомологичные (полученные из сывороток иммунизированных или переболевших людей). Сыворотки иммунные применяют при лечении дифтерии (преимущественно в начальной стадии болезни), ботулизма, при укусах ядовитых змей; гамма-глобулины — при лечении гриппа, сибирской язвы, столбняка, оспы, клещевого энцефалита, лептоспироза, стафилококковых инфекций (особенно вызванных антибиотикоустойчивыми формами микробов) и других заболеваний. Для предупреждения осложнений С. (анафилактический шок, сывороточная болезнь) сыворотки и гетерогенные гамма-глобулины вводят по специальной методике с предварительной кожной пробой. В ветеринарной практике иммунные сыворотки, в том числе гамма-глобулины, применяют при лечении сибирской язвы, геморрагической септицемии крупного рогатого скота, овец и свиней, анаэробной дизентерии ягнят, рожи свиней и т. п. Вакцинопрофилактика Эффект иммунологической памяти может быть достигнут при введении в организм т.н. ослабленных микробов, родственных микробов или их отдельных компонентов. Вакцинами называются препараты, предназначенные для создания искусственного активного иммунитета. Некоторые вакцины применяют для лечения инфекционных заболеваний. Вакцины делят на живые и убитые, корпускулярные и химические. К вакцинным препаратам относятся также анатоксины. Живые вакцины готовят из микроорганизмов, обладающих стойко сниженной вирулентностью, но сохранивших иммуногенные свойства. Убитые (температурой или действием химических веществ) корпускулярные вакцины содержат инактивированные микроорганизмы. Химические вакцины готовят из антигенов, экстрагированных из бактериальных клеток химическими методами. Анатоксины готовят из экзотоксинов, обезвреженных формалином. Вакцины выпускают в жидком и сухом виде. Сухие вакцины состоят из микроорганизмов, высушенных методом лиофилизации. В качестве вакцин используются антигены разного происхождения, это могут быть живые и убитые бактерии, вирусы, анатоксины, а также антигены, полученные с помощью генной инженерии и синтетические. От состава вакцин во многом зависят их иммунобиологические свойства, способность индуцировать специфический иммунный ответ. Однако некоторые составные части вакцин могут вызвать и нежелательные реакции, что следует учитывать при проведении иммунизации. Существующее многообразие вакцин можно подразделить на две основные группы: на живые и убитые (инактивированные) вакцины. В свою очередь какждая из этих групп может быть разделена на подгруппы 1. Живые вакцины - из аттенуированных штаммов возбудителя (штаммы с ослабленной патогенностью). 2. Убитые вакцины - Молекулярные, полученные путем: а) биологического синтеза; б) химического синтеза. - Корпускулярные: а) из цельных микробов; б) из субклеточных надмолекулярных структур. В последние годы созданы синтетические молекулярные вакцины, а так же плазмидные (генные) вакцины. Постановка вопроса о предпочтительном выборе либо живых, либо убитых вакцин нам кажется неоправданной, так как в каждом конкретном случае эти принципиально разные препараты имеют свои преимущества и свои недостатки. Традиционные вакцины а) инактивированные Инактивированные вакцины получают путем воздействия на микроорганизмы химическим путем или нагреванием. Такие вакцины являются достаточно стабильными и безопасными, так как не могут вызвать реверсию вирулентности. Они часто не трубуют хранения на холоде, что удобно в практическом использовании. Однако у этих вакцин имеется и ряд недостатков, в частности, они стимулируют более слабый иммунный ответ и требуют применения нескольких доз (бустерные иммунизации). б) живые аттенуированнные Хотя живые вакцины требуют специальных условий хранения, они продуцируют достаточно эффективный клеточный и гуморальный иммунитет и обычно требуют лишь одно бустерное введение. Большинство живых вакцин вводится парентерально (за исключением полиомиелитной вакцины). На фоне преимуществ живых вакцин имеется и одно предостережение, а именно: возможность реверсии вирулентных форм, что может стать причиной заболевания вакцинируемого. По этой причине живые вакцины должны быть тщательно протестированы. Пациенты с иммунодефицитами (получающие иммуносупрессивную терапию, при СПИДе и опухолях) не должны получать такие вакцины. в) анатоксины Многие микроорганизмы, вызывающие заболевания у человека, опасны тем, что выделяют экзотоксины, которые являются основными патогенетическими факторами заболевания (например, дифтерия, столбник). Анатоксины, используемые в качестве вакцин, индуцируют специфический иммунный ответ. Для получения вакцин токсины чаще всего обезвреживают с помощью формалина.
1. Используют: 1)для обнаружения вируса в ПМ 2)первичного выделения вируса из ПМ 3)накопления вирусной массы 4)поддержания вируса в лабе в активном сост. 5)титровании вируса 6)в качестве тест-объекта в РН 6)получение гипериммунных сывороток. Использ. жив.: белые мыши, белые крысы, Мор. свинки Кролики
Патогенные стафилококки - вызывает гнойно-воспалительные процессы различной локализации: местные – фу-рункулы, абсцессы и др.; в отдельных органах – маститы, эндометриты и др.; общее поражение – пиемия и септицемия. пищевые токсикозы (токсикоинфекции) Классификация: род: Staphylococcus виды: S.aureus - наиболее патогенный S.epidermidis – наименее патогенный S.saprophyticus – очень редко вызывает болезни. Восприимчивы все виды животных, включая человека и птиц. АГ : пептидогликан, тейхоевые к-ты, протеин A Патогенез и факторы вирулентности: проникает в организм через поврежденную кожу и слизистые оболочки; энтеротоксины – с пищевыми продуктами (мясо, молоко и др.); образуют и выделяют экзотоксины: гематоксин, лейкоцидин, энтеротоксин, некротоксин; образуют и выделяют ферменты: коагулазу, фибринолизин, гиалуронидазу, ДНК-азу. Методы диагностики Бактериологический метод: материал для исследования: раневой экссудат, гной абсцессов, ран, молоко при маститах, выделение из половых органов при эндометритах, кровь при септицемии; микроскопия: методы окраски: простой метод и по Граму; микрокартина: шаровидные клетки располагаются беспорядочно, диаметр 0,5-1,5 мкм; грамположительные; спор не образуют; капсулу не образуют. культивирование: посев на питательные среды: МПА, МПБ, МПА с 15% хлорида натрия, кровяной МПА. особенности выделения чистой культуры: факультативные анаэробы; оптимальная температура 370C; срок культивирования 18-20 часов. культуральные свойства: на МПА – колонии округлые, диаметром 2-5 мм, с ровным краем, могут быть окрашены в золотистый цвет (S.aureus), белый (S. epidermidis), лимонно-желтый (S.saprophyticus). на жидких средах: на МПБ – равномерное помутнение с выпадением рыхлого хлопьевидного осадка. биохимические свойства (ферментативная активность): ферментация маннита без газа (в анаэробных условиях); гемолиз на кровяных средах; ДНК – азная активность; Рост на элективных средах; Плазмокоагуляция. Биопроба для определения свойств: летальных – на кроликах; дерматонекротических – на кроликах; токсических – на котятах Серологическая и аллергическая диагностика: в ветеринарии не используется Антигенное строение; серотины; фаготипы Патогенные и непатогенные стафилококки могут быть также дифференцированы с помощью реакции адсорбации. С помощью адсорбированных сывороток пиогенные стафилококки были разделены на 7 специфических типов и 8 типов с менее специфическими реакциями. Большое значение имеет метод фаготипажа стафилококков. С помощью специфических стафилококковых фагов стафилококки отнесены к различным фаготипам. Метод фаготипирования позволяет выявить патогенность штаммов стафилококка. Для фагодиагностики стафилококков с помощью специфического фага, применяются фаги, принадлежащие к пяти группам. Основными фагами удается пикетировать до 60 % выделяемых бактерий, процент пикетируемых фагами стафилококков достигает 73,7 %. По степени патогенности и токсичности стафилококки могут быть разделены на 3 группы: стафилококки первой группы дают значительный гемолиз на 5 % кровяном агаре с кровью кролика и барана в течение 1 - 2 ч. Стафилококков этой группы выделяют при фурункулезе, гидраденитах, остеомиелитах, флегмонах, сепсисе и при ряде других гнойных заболеваниях. Стафилококки, принадлежащие к первой группе считаются патогенными; стафилококки второй группы вызывают незначительный гемолиз на 5 % кровяном агаре с кровью кролика и барана. Они считаются условно патогенными. Они встречаются часто на открытых поверхностях кожи, при фолликулитах, иногда на поверхности ран; стафилококки третьей группы не вызывают гемолиза на 5 % кровяном агаре с кровью кролика или барана. Эти стафилококки следует считать сапрофитами, их часто выделяют с поверхности здоровой кожи, а также с различных предметов. Для выделения стафилококков производят посев на чашку Петри с молочно-солевым агаром. Одновременно засевают чашки с 5 % кровяным агаром с кровью кролика или барана. Через 18 - 20 ч инкубации при 37 °С выросшие на чашках колонии микроскопируют, делают мазок и окрашивают по Граму. Колонии стафилококков затем пересевают на пробирки с питательной средой и помещают в термостат при 37 °С. Через 12 - 18 ч роста после микроскопирования мазков из выросшей культуры, окрашенных по Граму, ставят реакцию плазмокоагуляции, а из оставшейся культуры готовят взвесь и вводят кролику внутрикожно. Реакцию учитывают через 24 - 48 ч (появление некроза).
Патогенные стрептококки – возбудители гнойно-воспалительных процессов различной локализации (мыт лошадей, маститы у животных, стрептококковая септицемия птиц, кроликов, стрептококковый полиартрит), а также смешанных и вторичных инфекций (абсцесс, фурункул, нефрит, пиемия, сепсис и др.). Фекальные стрептококки могут вызвать воспаление кишечника и мочеполовых путей. Пищевые токсикозы (токсикоинфекции). Классификация возбудителей: Сем. Streptococcaceae Род. Streptococсus, включает 17 серологических групп Виды. Str.pyogenes (гнойно-воспалительный процессые) Str. Ebui (мыт у лошадей) Str. Agalactiiae (мастит) Str. Disgaiactiae (стрептококковый полиартрит ягнят) Str. Sooepidemicus (стрептококковая септицемия птиц) Патогенез и факторы вирулентности: многие патогенные стрептококки относятся к нормальной микрофлоре кожи и слизистых оболочек и проявляют свою патогенность при снижении общей резистентности; образуют экзотоксины – гемолизин, лейкоцидин, летальный некротоксин; продуцируют ферменты – гиалуронидаза, фибринолизин, ДНК-азу, РНК-азу, нейрамидазу и др; образуют термостабильные эндотоксины. Методы диагностики Бактериологический метод: материал для исследования: при жизни – гной, молоко, кровь, кал; посмертно – пораженные органы. микроскопия: методы окраски: простой метод по Граму; микрокартина: шаровидные клетки до 1 мкм, располагающиеся в короткие и длинные цепочки; грамположительные; спор не образуют; капсулу не образуют; неподвижны. культивирование: посев на питательные среды: МПА и МПБ, с сывороткой крови, с сахаром, с кровью; особенности выделения возбудителя: факультативные анаэробы; оптимальная температура 37oС; срок культивирования 18-20 часов; культуральные свойства: на плотных средах – мелкие, прозрачные с ровным краем колонии; на жидких средах – незначительное помутнение, крошковидный осадок. биохимические свойства: ферментируют углеводы – глюкозу, сахарозу и др. (без газа); не обладает протеолитическими свойствами; на кровяном МПА вызывают гемолиз. биопроба: заражают подкожно белых мышей, кроликов. Серологические методы: применяют реакцию преципитации для типизации выделенных культур. орфология стрептококков- это неподвижные шаровидные или овальные кокки диаметром 0,8-1 мкм, образующие цепочки различной длины и положительно окрашиваются по Граму. Часть штаммов образует капсулу. Длина цепочек связана с условиями выращивания. В жидкой питательной среде они длиннее, на плотных средах нередко расположены в виде коротких цепей и пучков. Кокки перед делением могут быть овоидными. Деление происходит перпендикулярно по отношению к цепи. Каждый кокк делится на 2. Биология стрептококков: культуральные свойства. На агаре с кровью стрептококк образует мелкие (1-2 мм в диаметре) полупрозрачные палочки, сероватые или бесцветные, которые хорошо снимаются петлей. Величина зоны гемолиза варьирует у разных штаммов: группа А образует зону гемолиза несколько превышающую диаметр колонии, группа B дают большую зону гемолиза. Стрептококки типа А образуют зеленоватую или зеленовато-коричневую зону гемолиза, мутноватую или прозрачную, варьирующую по величине и интенсивности окраски. В некоторых случая сама колония приобретает зеленоватое окрашивание. В жидких питательных средах для стрептококков характерен придонный часто поднимающийся по стенкам рост. При взбалтывании зернистая или хлопьевидная взвесь. Общепринятые среды для выращивания: мясопептонный агар с добавлением крови кролика или барана, полужидкий агар с сывороткой. Хороший рост и токсинообразование могут быть обеспечены на "комбинированном бульоне" или на средах, содержащих казеиновый гидролизат и дрожжевой экстракт. Гемолитические стрептококки метаболизируют глюкозу с образованием молочной и других кислот, что является фактором, лимитирующим рост микробов в питательной среде. Устойчивость к физическим химическим факторам. Гемолитические стрептококки группы А в течении длительного времени могут сохраняться на предметах, в пыли в высушенном состоянии. Однако эти культуры, сохраняя жизнеспособность, утрачивают вирулентность. Стрептококк группы А высокочувствителен к пенициллину, который оказывает на него бактерицидное действие. Сульфаниламид действует на стрептококк А бактериостатически. Для бактериологического исследования материал, собранный тампоном со слизистой зева и носа, засевают на чашку Петри с кровяным агаром, ставят в термостат на 3-4 ч при 37°С. При наличии стрептококков через сутки на агаре вырастают характерные палочки. Для микроскопического исследования изолированную колонию пересевают в жидкую питательную среду (мясопептонный бульон с сывороткой) и через 24 ч выращивания в термостате подвергают исследованию. Мазки окрашивают по Граму или метиленовым синим по Леффлеру. Затем изучают биохимические свойства культур и определяют тип стрептококка с помощью реакции агглютинации на стекле и реакции преципитации с типовыми сыворотками. Из серологических реакций применяют реакцию связывания комплемента (РСК) с сывороткой иммунизированного кролика.
Мастит- Str. Agalactiae В лабораторию – молоко, гной из абсцессов, гнойные выделения из пораженных частей вымени. Гр +, сп —, кп —, двж—. Мелкий кок, цепи до 100 шт, извитые. Аэроб кров. МПА - -выявление скрытой гемолитич акт-ти МПБ, МПА с глюкозой Биохим ; желатина – молоко – лактоза + глюкозу, лактозу, сахарозу, мальтозу, салицин до к-ты, камп-метод на кровяном агаре с β-гемолитическим стафилакокком, рядом доп. Гемолиз стрептококка. Среда Гиса с цветным рядом. Биопроба – морск свинку внутрибрюшинно 0,3-0,5мл, гибель через 24-48 часов. Препп:Мастицит, мастит-форте, синтомициновая и ихтиоловая мази, мазь Вишневского, бактериофаги. Имм: Непрод, слаб, нестерильный Факт пат: гемолизин, лейкоцидин, летальный, некротоксин, ферменты, тстаб эндотокс Леч: А/б, с/а
Мыт лошадей (Adenitis equorum) — остро протекающая болезнь жеребят, реже лошадей (если они ранее не болели мытом); изредка наблюдают заболевания ослов и мулов. 6 мес - 5 лет цельнокопытные кошки, мыши Возбудитель (Str. equi) серогруппы С окрашивается всеми анилиновыми красками, грамположителен, спор не образует, неподвижен. В мазках из гноя (из абсцессов).лимфатических узлов больных животных заметны в виде длинных и коротких цепочек, состоящих из десятков кокков. В мазках из носового истечения мытный стрептококк может быть в ассоциации с другими микробами. Лучше всего возбудитель растет на сыворотке крови лошади, в сывороточном и сахарном бульонах. На МПА растет в виде мельчайших слизистых капелек росы, но затем они становятся серо-белыми, непрозрачными. На кровяном агаре отмечают гемолиз. На МПБ (через 24 ч при 37°С) на дне колбы образуются в обильном количестве нежные, беловатые, пушистые хлопья, тогда как бульон остается прозрачным. В бульонных культурах мытного стрептококка обнаруживают гематоксин, лейкотоксин, токсин общего действия и агрессины. Наиболее чувствительны к мытному стрептококку белые мыши, однако погибают и котята; кролики и морские свинки — менее чувствительны. В навозе, соломе, сене, в волосах лошадей возбудитель сохраняется до 30 дн., на глинобитном полу — до 9 мес, в сухом гное — до года. Солнечные лучи убивают мытного стрептококка через 6—8 дн., кипячение — моментально. В растворах креолина (3%-ные), карболовой кислоты (5%-ные), сулемы (1 ; 1000) возбудитель мыта погибает за 10—15 мин. Эпизоотологические данные. К заболеванию мытом предрасполагают недостаточное содержание витаминов и минеральных веществ в рационе, холодная погода, сквозняки в помещениях, большая скученность животных. Основные пути заражения — алиментарный или воздушно-капельный (контактирование больных со здоровыми, а также контаминированные возбудителем кормушки, пастбища, предметы ухода за животными и др.). Клинические признаки. Инкубационный период — 5—18 дн., иногда сокращается до 1—2 дн. клинически мыт проявляется в типичной, абортивной и осложненной формах. Для первой характерны повышение температуры тела до 40—41°С, угнетенное состояние, потеря аппетита, катар слизистой оболочки носа, из которого сначала вытекает прозрачный, а затем слизисто-гнойный экссудат. Отмечается воспаление глотки, миндалин, подчелюстных лимфатических узлов. Последние самопроизвольно вскрываются, температура снижается, иногда раны заживают. Болезнь продолжается 15—25 дн. Для абортивной формы мыта характерны нередко выраженные клинические признаки: температура тела 39—39,5°С, незначительное увеличение подчелюстных лимфатических узлов, не всегда отмечают гнойное их воспаление, регистрируют незначительное истечение слизисто-гнойного экссудата из носовой полости. Очень быстро болезнь заканчивается выздоровлением. Для осложненной метастатической (тяжелой) формы мыта характерно образование абсцессов в околоушных, плечевых, коленных, иногда и в лимфатических узлах грудной и брюшной полостей. Отмечают также гнойное воспаление суставов. Возможны гнойный плеврит и перитонит. Течение может быть длительным и с летальным исходом. Патологоанатомические изменения. Из носовых отверстий выделяется гной, подчелюстные и заглоточные лимфатические узлы увеличены, слизистая оболочка глотки гиперемирована, в бронхиальных, мезентериальных лимфатических узлах обнаруживают гнойные очаги размером с грецкий орех и больше, а в лимфатических узлах брюшной полости — величиной с голову человека. Гнойные очаги могут быть и в легких, печени, почках, в головном и спинном мозге. В грудной полости содержится несколько литров серозно-фибринозной жидкости. Диагноз и дифференциальный диагноз основаны на анализе эпизоотологических, клинических и бактериологических данных. В лабораторию направляют гной из невскрывшихся абсцессов. Длинные извитые цепочки стрептококков в мазках свидетельствуют о заболевании мытом. Данную болезнь необходимо дифференцировать от сапа и гриппа лошадей, ринита и фарингита неинфекционного происхождения. Иммунитет. После переболевания мытом у лошадей создается стойкий пожизненный иммунитет. Профилактика и меры борьбы. При возникновении в хозяйстве мыта больных животных немедленно изолируют в теплое, светлое, хорошо вентилируемое помещение без сквозняков. В теплое время года лучше содержать больных индивидуально на открытом воздухе. При затрудненном глотании корм следует давать в виде болтушки из отрубей или муки. Леч: пенициллины, окситетрациклин Био: «Антивирус» - 20 сут. бульон. культ. Микр: Грам, Ром Факт пат: фибринолизин, гиалуронидаза |