Фармакопея 12 - 1 часть. Научный центр экспертизы средств медицинского применения
 Скачать 3.93 Mb.
|
|
| Компонент | Время удерживания, мин. | Переходы сканирования масс, Да | Энергия столкновений, эВ |
| Примесь В | 6,0 | 115,19 -> 71,92 | 19 |
| Примесь Б | 6,9 | 74,99 -> 59,04 | 15 |
| Примесь А | 7,3 | 59,97 -> 44,98 | 18 |
| 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата дигидрат | 8 | 147,0 -> 59,0 | 18 |
| Примесь Г | 12 | 161,19 -> 59,00 | 23 |
| Примесь Е | 15 | 175,19 -> 58,07 | 23 |
| Примесь Д | 17 | 189,26 -> 58,01 | 22 |
Хроматографируют раствор сравнения. Отношение "сигнал/шум" должно быть не менее 10 для примеси А, не менее 50 для примесей Б и В, не менее 200 для примеси Г и не менее 1000 для примесей Д и Е.
Хроматографируют испытуемый раствор.
Содержание каждой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:
S x a
1 0
X = -------------,
S x a x 10
0 1
где:
S - площадь пика соответствующей примеси на хроматограмме испытуемого
1
раствора;
S - площадь пика соответствующей примеси на хроматограмме раствора
0
сравнения;
a - навеска субстанции, в граммах;
1
a - навеска стандартного образца соответствующей примеси, в граммах.
0
Содержание любой примеси должно быть не более 0,1%, суммарное содержание примесей - не более 0,5%.
Вода. Не менее 19,7% и не более 21,0%. Определение проводят методом К.Фишера из точной навески около 0,12 г субстанции. Конец титрования определяют электрометрически.
Хлориды. 0,5 г субстанции растворяют в 25 мл воды. 10 мл полученного раствора должны выдерживать испытание на хлориды (не более 0,01% в субстанции).
Сульфаты. 10 мл раствора, полученного в испытании на Хлориды, должны выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,05% в субстанции).
Сульфатная зола. Не более 0,1%. Определение проводят из точной навески субстанции - около 1 г.
Тяжелые металлы. 1 г субстанции растворяют в 20 мл воды. 10 мл полученного раствора должны выдерживать испытание на тяжелые металлы (более 0,001% в субстанции).
Остаточные органические растворители. В соответствии с требования ОФС "Остаточные органические растворители".
Бактериальные эндотоксины. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг субстанции.
Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции (концентрация - 100 мг/мл).
Испытание проводят для субстанции, предназначенной для приготовлен инъекционных лекарственных форм в соответствии с требованиями ОФС "Бактериальные эндотоксины".
Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".
Количественное определение. Около 0,1 г (точная навеска) субстанции помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 40 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты потенциометрически или до появления голубовато-зеленого окрашивания (индикатор - 0,1 мл раствора кристаллического фиолетового).
Параллельно проводят контрольный опыт.
1 мл 0,1 М хлорной кислоты соответствует 14,62 мг C6H14N2O2.
Хранение. В сухом месте.
МЕТИЛУРАЦИЛ (ФС 42-0256-07)
6-Метил-1,2,3,4-тетрагидропиримидин-2,4-дион
C5H6N2O2 М.м. 126,12
Содержит не менее 99,0% C5H6N2O2 в пересчете на сухое вещество.
Описание. Белый кристаллический порошок без запаха.
Растворимость. Мало растворим в воде и спирте 96%, практически нерастворим в хлороформе.
Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия
-1
бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения
должен соответствовать рисунку спектра метилурацила (Приложение 1).
Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,001% раствора субстанции в области от 220 до 300 нм должен иметь максимум при 260 нм и минимум при 231 нм.
К 0,1 г субстанции прибавляют 10 мл бромной воды и встряхивают; бромная вода обесцвечивается в течение 5 мин.
Посторонние примеси. Определение проводят методом ТСХ.
Испытуемый раствор. 0,1 г субстанции растворяют в 1 мл 99,7% муравьиной кислоты, прибавляют 1 мл воды и перемешивают
Раствор сравнения. 0,5 мл испытуемого раствора разбавляют водой до 250 мл.
На линию старта пластинки со слоем силикагеля 60 F254 наносят 5 мкл (250 мкг) испытуемого раствора, 5 мкл (0,5 мкг) и 2,5 мкл (0,25 мкг) раствора сравнения. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру со смесью уксусная кислота ледяная - вода - бутанол (1:1:4) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе и просматривают в УФ-свете при 254 нм.
Пятно посторонней примеси на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности поглощения не должно превышать пятно на хроматограмме раствора сравнения (0,5 мкг) (не более 0,2%).
Результаты испытания считаются достоверными, если на хроматограмме раствора сравнения (0,25 мкг) четко видно пятно.
Хлориды. 0,75 г субстанции встряхивают с 25 мл воды в течение 1 мин. и фильтруют. 10 мл фильтрата должны выдерживать испытание на хлориды (не более 0,01% в субстанции).
Потеря в массе при высушивании. Около 1,0 г (точная навеска) субстанции сушат при температуре от 100 до 105 град. C до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,3%.
Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1,0 г (точная навеска) субстанции не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции).
Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители".
Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".
Количественное определение. Около 0,15 г (точная навеска) субстанции растворяют в 25 мл диметилформамида, предварительно нейтрализованного по индикатору 1% раствору тимолового синего в диметилформамиде, и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида в смеси метанола и бензола до появления сине-голубого окрашивания (индикатор - 0,2 мл 1% раствора тимолового синего в диметилформамиде), не исчезающего в течение 30 с.
1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 12,61 мг C5H6N2O2.
Хранение. Список Б. В сухом месте.
МЕТРОНИДАЗОЛ (ФС 42-0257-07)
2-(2-Метил-5-нитроимидазол-1-ил)этанол
C6H9N3O3 М.м. 171,16
Содержит не менее 99,0% C6H9N3O3 в пересчете на сухое вещество.
Описание. От белого до белого с желтоватым оттенком кристаллический порошок.
Растворимость. Мало растворим в воде, ацетоне и спирте 96%.
Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия
-1
бромидом, в области от 4000 до 400 см , по положению полос поглощения
должен соответствовать рисунку спектра метронидазола (Приложение 1).
Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,002% раствора субстанции в 1 М растворе хлористоводородной кислоты в области от 230 до 350 нм должен иметь максимум при 277 нм и минимум при 240 нм.
К 0,02 г субстанции прибавляют 0,01 г цинковой пыли, 1 мл воды и 0,25 мл хлористоводородной кислоты разведенной 8,3% и нагревают на водяной бане в течение 5 мин. Охлаждают во льду, прибавляют 0,5 мл раствора натрия нитрита и 1 мл 1% раствора сульфаминовой кислоты. 0,5 мл полученного раствора прибавляют к 0,5 мл 2% щелочного раствора бета-нафтола и 2 мл раствора натрия гидроксида; появляется оранжево-красное окрашивание.
Температура плавления. От 160 до 165 град. С (в пределах 2,5 град. С).
Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции растворяют в 20 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты. Раствор должен выдерживать сравнение с эталоном II.
Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен выдерживать сравнение с эталоном GY6.
Посторонние примеси. Испытание проводят методом ВЭЖХ.
Подвижная фаза (ПФ). Метанол - раствор калия фосфата однозамещенного с концентрацией 1,36 г/л (3:7).
Испытуемый раствор. 0,05 г субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в подвижной фазе (ПФ), доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают.
Раствор сравнения. 1 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают.
Раствор для проверки пригодности системы. 0,005 г 2-метил-4-нитроимидазола растворяют в 10 мл испытуемого раствора и разбавляют ПФ до 100 мл. 1 мл полученного раствора разбавляют ПФ до 100 мл.
Хроматографические условия
Колонка - 25 x 4,6 см с октадецилсилил силикагелем (C18),
5 мкм;
Температура - комнатная;
Скорость потока - 1,0 мл/мин.;
Детектор - спектрофотометрический, 315 нм;
Объем пробы - 10 мкл.
Хроматографируют раствор для проверки пригодности системы. Разрешение (R) между пиками метронидазола и 2-метил-5-нитроимидазола должно быть не менее 2,0.
Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 3 раза превышать время удерживания пика метронидазола.
На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика любой примеси должна быть не более площади пика метронидазола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%). Суммарная площадь пиков примесей должна быть не более удвоенной площади пика метронидазола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%).
Потеря в массе при высушивании. Около 1,0 г (точная навеска) субстанции сушат при температуре от 100 до 105 град. С до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,5%.
Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1,0 г (точная навеска) субстанции не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции).