Фармакопея 12 - 1 часть. Научный центр экспертизы средств медицинского применения
 Скачать 3.93 Mb.
|
|
Хроматографические условия Колонка - 20 х 0,46 см, силикагель с нитрильными группами (CN), 4 мкм; Скорость потока - 1,5 мл/мин.; Детектор - спектрофотометрический, 328 нм; Объем пробы - 25 мкл. Хроматографируют раствор для проверки пригодности системы. Время удерживания пика примеси С около 0,8 относительно времени удерживания пика примеси D. Разрешение (R) между пиками примесей С и D должно быть не менее 1,5. Пять раз хроматографируют раствор сравнения. Относительное стандартное отклонение для площади пика примеси D должно быть не более 5,0%. Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор и определяют площади пиков примеси D. Содержание примеси D в процентах (X) вычисляют по формуле: S x a x P 1 0 X = -------------, S x a 0 1 где: S - площадь пика примеси D на хроматограмме испытуемого раствора; 1 S - площадь пика примеси D на хроматограмме раствора сравнения; 0 a - навеска субстанции, в граммах; 1 а - навеска стандартного образца примеси D стандарта, в граммах; 0 Р - чистота стандартного образца примеси D, в процентах. Содержание примеси D должно быть не более 0,1%. Метод 1. Определение неидентифицированных примесей проводят методом ВЭЖХ одновременно с количественным определением. Содержание любой примеси в процентах (X) определяют по формуле: S x 100 i Х = ------------, SUM S x S i 1 где: S - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого i раствора; S - площадь пика ондансетрона на хроматограмме испытуемого раствора. 1 Содержание любой примеси должно быть не более 0,1%. Суммарное содержание примесей должно быть не более 0,5%. Метод 2. Определение примесей проводят методом ТСХ. Испытуемый раствор. 0,125 г субстанции растворяют в метаноле и разбавляют метанолом до 10 мл. Раствор сравнения А. 1 мл испытуемого раствора разбавляют метанолом до 100 мл. Раствор сравнения Б. 0,001 г стандартного образца примеси А (3-(диметила-минометиламино-1,2,3,9-тетрагидро-9-метил-4Н-карбазол-4-он; стандарт USP или аналогичного качества) растворяют в метаноле и разбавляют метанолом до 10 мл. Раствор сравнения В. 0,001 г стандартного образца примеси В (6,6'-метилен-бис-[(1,2,3,9-тетрагидро-9-метил-3-[(2-метил-1Н-имидазол-1-ил)-метил]-4Н-карбазол-4-он; стандарт USP или аналогичного качества) растворяют в метаноле и разбавляют метанолом до 10 мл. На линию старта пластинки со слоем силикагеля 60 F наносят 20 мкл (250 мкг) испытуемого раствора, 20 мкл (2,5 мкг) и 4 мкл (0,5 мкг) раствора сравнения. Рядом на ту же пластинку наносят 2 мкл (25 мкг) испытуемого раствора и в ту же точку по 10 мкл (1 мкг) растворов сравнения Б и В. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру со смесью хлороформ - этилацетат - метанол - раствор аммиака концентрированный 25% (90:50:40:1) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе и просматривают в УФ-свете при 254 нм. Пятно любой посторонней примеси на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности поглощения не должно превышать пятно на хроматограмме раствора сравнения (0,5 мкг) (не более 0,2%). Суммарное содержание примесей должно быть не более 1%. Результаты испытания считаются достоверными, если на хроматограмме смешанного раствора из общей точки нанесения четко видны три пятна. Вода. Не менее 9,0% и не более 10,5%. Определение проводят методом К. Фишера из точной навески около 0,25 г субстанции. Сульфаты. 0,15 г субстанции растворяют в воде и разводят водой до 10 мл. Раствор должен выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,015% в субстанции). Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г субстанции (точная навеска) не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции). Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители". Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота". Количественное определение. Подвижная фаза (ПФ). 2,74 г калия фосфата однозамещенного растворяют в 900 мл воды, доводят рН раствора до 5,4 +/- 0,1 1 М раствором натрия гидроксида. 500 мл полученного раствора смешивают с 500 мл ацетонитрила. Испытуемый раствор. Около 0,09 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в ПФ, объем раствора доводят ПФ до метки. 5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, объем раствора доводят ПФ до метки. Стандартный раствор. Около 0,09 г (точная навеска) стандартного образца ондансетрона гидрохлорида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в ПФ, объем раствора доводят ПФ до метки. 5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, объем раствора доводят ПФ до метки. Раствор для проверки пригодности системы. 0,001 г стандартного образца примеси А растворяют в стандартном растворе и разбавляют стандартным раствором до 10 мл. 1 мл полученного раствора разбавляют стандартным раствором до 10 мл. Хроматографические условия Колонка - 20 х 0,46 см, силикагель с нитрильными группами (CN), 4 мкм; Скорость потока - 1,5 мл/мин.; Детектор - спектрофотометрический, 216 нм; Объем пробы - 10 мкл. Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Время удерживания пика примеси А около 1,1 относительно времени удерживания пика ондансетрона. Разрешение (R) между пиками примеси А и ондансетрона должно быть не менее 1,5. Пять раз хроматографируют стандартный раствор. Относительное стандартное отклонение для площади пика ондансетрона должно быть не более 2,0%. Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы и определяют площади пиков. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 3 раза превышать время удерживания основного пика. Содержание C18H19N3O x HCl в процентах (X) вычисляют по формуле: S x a x P x 100 1 0 Х = ---------------------, S x a x (100 - W) 0 1 где: S - площадь пика ондансетрона на хроматограмме испытуемого 1 раствора Б; S - площадь пика ондансетрона на хроматограмме стандартного раствора 0 А; а - навеска субстанции, в граммах; 1 а - навеска стандартного образца ондансетрона гидрохлорида, в граммах; 0 W - содержание воды, в процентах; Р - содержание основного вещества в стандартном образце ондансетрона гидрохлорида, в процентах. Хранение. В сухом, защищенном от света месте. ПАПАВЕРИНА ГИДРОХЛОРИД (ФС 42-0267-07) 6,7-Диметокси-1-(3,4-диметоксибензил)изохинолина гидрохлорид C20H21NO4 x HCl М.м. 375,84 Содержит не менее 99,0% C20H21NO4 x HCl в пересчете на сухое вещество. Описание. Белые или почти белые кристаллы или белый или почти белый кристаллический порошок без запаха. Растворимость. Растворим в хлороформе, умеренно растворим в воде, мало растворим в спирте 96%. Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия -1 бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра папаверина гидрохлорида (Приложение 1). Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,0005% раствора субстанции в 0,01 М растворе хлористоводородной кислоты в области от 230 до 270 нм должен иметь максимум при 251 нм. Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,0025% раствора субстанции в 0,01 М растворе хлористоводородной кислоты в области от 270 до 350 нм должен иметь максимумы при 285 нм и 309 нм. К 0,1 г субстанции прибавляют 1 мл серной кислоты концентрированной и нагревают; появляется фиолетовое окрашивание. Субстанция дает характерную реакцию на хлориды. Прозрачность раствора. 0,5 г растертой субстанции растворяют в 25 мл воды при нагревании до 50 град. С. Раствор после охлаждения должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I. Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен выдерживать сравнение с эталоном BY6. рН. От 3,0 до 4,5 (2% раствор). Легко карбонизируемые примеси. К 0,05 г субстанции прибавляют 5 мл серной кислоты концентрированной и выдерживают раствор в течение 15 мин. Полученный раствор должен выдерживать сравнение с эталоном R4 или Y4. Посторонние примеси. Испытуемый раствор. 0,25 г субстанции растворяют в 5 мл хлороформа. Раствор сравнения. 0,5 мл испытуемого раствора разбавляют хлороформом до 100 мл. На линию старта пластинки со слоем силикагеля 60 F254 наносят 10 мкл (500 мкг) испытуемого раствора, 10 мкл (2,5 мкг) и 2 мкл (0,5 мкг) раствора сравнения. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру со смесью толуол - этилацетат - диэтиламин (7:2:1) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 20 мин. и просматривают в УФ-свете при 254 нм. Пятно любой посторонней примеси на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности поглощения не должно превышать пятно на хроматограмме раствора сравнения (0,5 мкг) (не более 0,1%). Суммарное содержание примесей, оцененное по совокупности величины и интенсивности поглощения их пятен на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с пятном на хроматограмме раствора сравнения (2,5 мкг), не должно превышать 0,5%. Пятно на старте в расчет не принимают. Результаты испытания считаются достоверными, если на хроматограмме раствора сравнения (0,5 мкг) четко видно пятно. Потеря в массе при высушивании. Около 0,5 г (точная навеска) субстанции сушат при температуре от 100 до 105 град. С до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,5%. Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г (точная навеска) субстанции не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции). Железо. Сульфатная зола из 1 г субстанции должна выдерживать испытание на железо (не более 0,003% в субстанции). Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители". Бактериальные эндотоксины. Не более 2,9 ЕЭ на 1 мг субстанции. Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции (концентрация - 10 мг/мл), а затем разводят его не менее чем в 100 раз. Испытание проводят для субстанции, предназначенной для приготовления инъекционных лекарственных форм. Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота". Количественное определение. Около 0,3 г (точная навеска) субстанции растворяют в 1 мл муравьиной кислоты, прибавляют 10 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до появления ярко-желтого окрашивания (индикатор - 0,15 мл 0,1% раствора кристаллического фиолетового). Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 37,58 мг C20H21NO4 x HCl. Хранение. Список Б. В сухом, защищенном от света месте. ПАРАЦЕТАМОЛ (ФС 42-0268-07) N-(4-Гидроксифенил)ацетамид C8H9NO2 М.м. 151,17 Содержит не менее 99,9% и не более 101,0% C8H9NO2 в пересчете на сухое вещество. Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок. Растворимость. Легко растворим в спирте 96%, растворим в ацетоне и растворах едких щелочей, умеренно растворим в воде. Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия -1 бромидом, в области от 4000 до 400 см должен соответствовать по положению полос поглощения рисунку спектра парацетамола (Приложение 1). 0,05 г субстанции растворяют в 100 мл спирта 96%. К 1 мл полученного раствора прибавляют 1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты и разбавляют спиртом 96% до 100 мл. Ультрафиолетовый спектр поглощения полученного раствора в области от 220 до 350 нм должен иметь максимум при 249 нм. 0,1 г субстанции встряхивают с 10 мл воды и прибавляют 0,5 мл 3% раствора железа(III) хлорида; появляется сине-фиолетовое окрашивание. Температура плавления. От 168 до 172 град. С (в пределах 3 град. С). рН. От 5,4 до 6,6 (0,5 г субстанции встряхивают в течение 2 мин. с 10 мл воды). Посторонние примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ. 0,05 М раствор натрия фосфата двузамещенного. 17,9 г натрия фосфата двузамещенного растворяют в воде и доводят объем раствора до 1000 мл. 0,05 М раствор натрия фосфата однозамещенного. 7,8 г натрия фосфата однозамещенного растворяют в воде и доводят объем раствора до 1000 мл. Раствор тетрабутиламмония гидроксида. 4,6 г 40% раствора тетрабутиламмония гидроксида (или 1,84 г тетрабутиламмония гидроксида 30-водного) растворяют в метаноле и доводят объем раствора спиртом метиловым до 1000 мл. Подвижная фаза (ПФ). 0,05 М раствор натрия фосфата двузамещенного - 0,05 М раствор натрия фосфата однозамещенного - раствор тетрабутиламмония гидроксида (37,5:37,5:25). Испытуемый раствор. Около 0,2 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в 2,5 мл раствора тетрабутиламмония гидроксида в метаноле, доводят объем раствора смесью 0,05 М раствор натрия фосфата двузамещенного - 0,05 М раствор натрия фосфата однозамещенного (1:1) до метки и перемешивают. Испытуемый раствор готовят непосредственно перед использованием. Раствор сравнения А. Около 0,05 г (точная навеска) 4-аминофенола, около 0,05 г (точная навеска) 4-хлорацетанилида и 0,05 г субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл, растворяют в метаноле, доводят объем раствора метанолом до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объем раствора подвижной фазой (ПФ) до метки и перемешивают. Раствор сравнения Б. 1 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. 5 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. Раствор сравнения В. 1 мл раствора сравнения Б помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают. Хроматогоафические условия Колонка - 25 х 0,46 см с октилсилил силикагелем (С8), 5 мкм; Скорость потока - 1,5 мл/мин.; Детектор - спектрофотометрический, 245 нм; Объем пробы - 20 мкл. Хроматографируют раствор сравнения А. Относительные времена удерживания компонентов: 4-аминофенол - около 0,8; парацетамол - 1,0 (около 4 мин.); 4-хлорацетанилид - около 11. Разрешение (R) между пиками 4-аминофенола и парацетамола должно быть не менее 4,0. Отношение сигнал/шум для пика 4-хлорацетанилида должно быть не менее 50. Хроматографируют растворы сравнения А, Б, В и испытуемый раствор. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 12 раз превышать время удерживания основного пика. Содержание примесей 4-аминофенола и 4-хлорацетанилида в субстанции в процентах (X) рассчитывают по формуле: S x a 1 0 X = -------------, S x a х 50 0 1 где: S - площадь пика 4-аминофенола (или 4-хлорацетанилида) на 1 хроматограмме испытуемого раствора; S - площадь пика 4-аминофенола (или 4-хлорацетанилида) на 0 хроматограмме раствора сравнения А; a - навеска субстанции, в граммах; 1 a - навеска 4-аминофенола (или 4-хлорацетанилида), в граммах. 0 Содержание любой неидентифицированной примеси в субстанции в процентах (X) рассчитывают по формуле: S 1 X = --------, S x 10 0 где: S - площадь пика неидентифицированной примеси на хроматограмме 1 испытуемого раствора; S - площадь пика парацетамола на хроматограмме раствора сравнения Б. 0 Содержание 4-аминофенола должно быть не более 0,005%, 4-хлорацетанилида - не более 0,001%, любой неидентифицированной примеси - не более 0,05%, суммарное содержание неидентифицированных примесей - не более 0,1% (пики, площадь которых менее площади пика на хроматограмме раствора сравнения В, не учитывают). Потеря в массе при высушивании. Около 1,0 г (точная навеска) субстанции сушат при температуре от 100 до 105 град. С до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,5%. Хлориды. 0,5 г субстанции встряхивают в течение 2 мин. с 25 мл воды и фильтруют. 10 мл фильтрата должны выдерживать испытание на хлориды (не более 0,01% в субстанции). Сульфаты. 10 мл фильтрата, полученного в испытании на Хлориды, должны выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,05% в субстанции). Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1,0 г (точная навеска) субстанции не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции). Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители". Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота". Количественное определение. Около 0,25 г (точная навеска) субстанции кипятят с обратным холодильником с 10 мл 50% раствора серной кислоты в течение 1 ч. Холодильник промывают 30 мл воды, количественно переносят содержимое колбы в сосуд для диазотирования, разбавляют водой до 80 мл, прибавляют 1 г калия бромида и титруют нитритометрически. Конец титрования устанавливают по йодкрахмальной бумаге. |