Фармакопея 12 - 1 часть. Научный центр экспертизы средств медицинского применения
 Скачать 3.93 Mb.
|
|
На линию старта пластинки со слоем силикагеля 60 F254 наносят 20 мкл (200 мкг) испытуемого раствора, 20 мкл (1 мкг) и 10 мкл (0,5 мкг) раствора сравнения. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру со смесью хлороформ - метанол - вода (90:10:1) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе и просматривают в УФ-свете при 254 нм. Пятно посторонней примеси на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности поглощения не должно превышать пятно на хроматограмме раствора сравнения (1 мкг) (не более 0,5%). Допускается пятно на линии старта. Суммарное содержание примесей должно быть не более 1,5%. Результаты испытания считаются достоверными, если на хроматограмме раствора сравнения (0,5 мкг) четко видно пятно. Хлориды. 0,3 г субстанции встряхивают в течение 1 мин. с 15 мл воды и фильтруют. 10 мл фильтрата должны выдерживать испытание на хлориды (не более 0,01% в субстанции). Потеря в массе при высушивании. Около 1,0 г (точная навеска) субстанции сушат при температуре от 100 до 105 град. C до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,5%. Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г (точная навеска) субстанции не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции). Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители". Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота". Количественное определение. Около 0,5 г (точная навеска) субстанции помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 20 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и осторожно, небольшими порциями, 5 г цинковой пыли. Остатки цинковой пыли смывают со стенок колбы 10 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и перемешивают до полного растворения цинковой пыли. Полученный раствор титруют нитритометрически. Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 32,31 мг C11H12Cl2N2O5. Хранение. Список Б. В сухом, защищенном от света месте. ЛИДОКАИНА ГИДРОХЛОРИД (ФС 42-0251-07) N-(2,6-Диметилфенил)-2-(диэтиламино)ацетамида гидрохлорид моногидрат C14H22N2O x HCl x H2O М.м. 288,82 Содержит не менее 99,0% и не более 101,0% C14H22N2O x HCl в пересчете на безводное вещество. Описание. Белый кристаллический порошок. Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96%. Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия -1 бромидом, в области от 4000 до 400 см должен соответствовать по положению полос поглощения спектру стандартного образца лидокаина гидрохлорида. 0,2 г субстанции растворяют в 10 мл воды и прибавляют 10 мл 1% раствора пикриновой кислоты. Полученный осадок (пикрат) промывают водой и сушат. Температура плавления пикрата должна быть от 227 до 233 град. C. 0,25 г субстанции растворяют в 10 мл воды, подщелачивают раствором натрия гидроксида и фильтруют. Осадок на фильтре промывают водой. Половину осадка растворяют в 1 мл спирта 96% и прибавляют 0,5 мл раствора кобальта нитрата; образуется голубовато-зеленый осадок. Субстанция дает характерную реакцию на хлориды. Температура плавления. От 74 до 79 град. C (метод 1, без предварительного подсушивания). Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I. Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном B9. pH. От 4,5 до 5,5 (0,5% раствор). 2,6-Диметиланилин. Испытуемый раствор. 0,25 г субстанции растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до 10 мл. Стандартный раствор. 0,05 г 2,6-диметиланилина растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до 100 мл. 1 мл полученного раствора разбавляют метанолом до 100 мл. В три одинаковые пробирки помещают: в первую пробирку - 2 мл испытуемого раствора; во вторую пробирку - 1 мл стандартного раствора и 1 мл метанола; в третью пробирку - 2 мл метанола (контрольный раствор). В каждую пробирку прибавляют по 1 мл свежеприготовленного 1% раствора диметиламинобензальдегида в метаноле и по 2 мл уксусной кислоты ледяной и выдерживают в течение 10 мин. при комнатной температуре. Появившееся желтое окрашивание в пробирке с испытуемым раствором должно быть более интенсивным, чем в пробирке с контрольным раствором и менее интенсивным, чем в пробирке со стандартным раствором (не более 0,01% в субстанции). Вода. Не менее 5,5% и не более 7,0%. Около 0,25 г (точная навеска) субстанции титруют реактивом К.Фишера. Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г (точная навеска) субстанции не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,002% в субстанции). Бактериальные эндотоксины. Не более 1,17 ЕЭ на 1 мг субстанции. Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции (концентрация 2 мг/мл), а затем разводят его не менее чем в 50 раз. Испытание проводят для субстанции, предназначенной для приготовления инъекционных лекарственных форм. Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители". Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота". Количественное определение. Около 0,22 г (точная навеска) субстанции растворяют в 50 мл спирта 96%, прибавляют 5 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты и титруют потенциометрически 0,1 М раствором натрия гидроксида. Расход титранта определяют по разности объемов титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования. 1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 27,08 мг C14H22N2O x HCl. Хранение. Список Б. В плотно закрытой упаковке в защищенном от света месте. ЛИЗИНОПРИЛ (ФС 42-0252-07) 1-[N2-[(S)-1-Карбокси-3-фенилпропил]-L-лизил]-L-пролин, дигидрат C21H31N3O5 x 2H2O М.м. 441,5 Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% C21H31N3O5 в пересчете на безводное вещество. Описание. Белый кристаллический порошок. Растворимость. Растворим в воде, умеренно растворим в метаноле, практически нерастворим в спирте 96% и ацетоне. Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия -1 бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца лизиноприла дигидрата. Удельное вращение. От -43 до -47 град. в пересчете на безводное вещество (1% раствор субстанции в растворе цинка ацетата). Раствор цинка ацетата. Смешивают 600 мл воды и 150 мл уксусной кислоты ледяной. В полученном растворе растворяют при перемешивании 54,9 г цинка ацетата. Продолжая перемешивать, прибавляют 150 мл раствора аммиака концентрированного 25%, охлаждают, pH раствора доводят до 6,4 раствором аммиака и разбавляют водой до 1000 мл. Посторонние примеси. Подвижная фаза (ПФ А). Смесь ацетонитрил - фосфатный буферный раствор с pH 5,0 (3:97). Фосфатный буферный раствор с pH 5,0. 3,12 г натрия фосфата однозамещенного растворяют в 900 мл воды, pH раствора доводят до 5,0 водным раствором натрия гидроксида с концентрацией 50 г/л и разбавляют водой до 1000 мл. ПФ Б. Смесь ацетонитрил - фосфатный буферный раствор с pH 5,0 (1:4). Испытуемый раствор. 0,02 г субстанции растворяют в ПФ А и разбавляют ПФ А до 10 мл. Раствор сравнения. 0,5 мл испытуемого раствора разбавляют ПФ А до 50 мл. Раствор для проверки пригодности системы. 0,02 г стандартного образца лизиноприла дигидрата для проверки пригодности (стандарт ВР или аналогичного качества) растворяют в ПФ А и разбавляют ПФ А до 10 мл. Хроматографические условия Колонка - 25 x 0,46 см с октадецилсилил силикагелем (C18), 3 мкм; Температура колонки - 50 град. C; Скорость потока - 1,8 мл/мин.; Детектор - спектрофотометрический, 210 нм; Объем пробы - 50 мкл. Градиентный режим ┌────────────────┬───────────────┬───────────────┐ │ Время(мин.) │ ПФ А (%) │ ПФ Б (%) │ ├────────────────┼───────────────┼───────────────┤ │ 0-35 │ 100 => 70 │ 0 => 30 │ ├────────────────┼───────────────┼───────────────┤ │ 35-45 │ 70 │ 30 │ ├────────────────┼───────────────┼───────────────┤ │ 45-50 │ 70 => 100 │ 30 => 0 │ ├────────────────┼───────────────┼───────────────┤ │ 50-0 │ 100 │ 0 │ └────────────────┴───────────────┴───────────────┘ Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Хроматограмма должна соответствовать хроматограмме, приложенной к стандартному образцу лизиноприла дигидрата для проверки пригодности. Пик примеси A и пик примеси E должны наблюдаться с двух сторон от пика лизиноприла. Измеряют высоты пиков примеси A и примеси E от уровня нулевой линии (соответственно A1 и A2), а также высоты нижней точки кривой, разделяющей пики этих примесей и пик лизиноприла (соответственно B1 и B2). Тест выдерживает испытание, если величины A1 и A2 не менее, чем в 9 раз больше величин B1 и B2 соответственно. При необходимости при помощи 85% фосфорной кислоты корректируют pH подвижной фазы до 4,5 и повторяют проверку. С некоторыми колонками может потребоваться дальнейшая коррекция pH до 4,0 для достижения удовлетворительного разделения пиков примеси A, лизиноприла и примеси E. Если при этом пики примесей C и D сдвигаются в область, где интегрирование становится трудным, увеличивают содержание подвижной фазы Б от 30 до 40% в интервале времени от 35 до 45 мин. и поддерживают это соотношение фаз в течение следующих 10 мин. Возвращают содержание подвижной фазы А до 100% в течение следующих 10 мин. до следующего ввода пробы в хроматограф. Хроматографируют испытуемый раствор и раствор сравнения. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика любой примеси должна быть не более 0,3 от площади пика лизиноприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3%). Суммарная площадь всех пиков примесей на хроматограмме испытуемого раствора должна быть не более половины площади пика лизиноприла на хроматограмме раствора сравнения (0,5%). При оценке содержания примесей не учитывают пик растворителя и пики, появляющиеся в первые 3 мин. Примесь A - (2RS)-2-амино-4-фенилбутановая кислота; Примесь C - (2S)-2-[(3S,8aS)-3-(4-аминобутил)-1,4-диоксогексагидро- пирроло[1,2-альфа]пиразин-2(1H)-ил]-4-фенилбутановая кислота (S,S,S-дикетопиперазин); Примесь D - (2S)2-[(3S,8aR)-3-(4-аминобутил)-1,4-диоксогексагидро- пирроло[1,2-альфа]пиразин-2(1H)-ил]-4-фенилбутановая кислота (R,S,S-дикетопиперазин); Примесь Е - (2S)-1-[(2S)-6-амино-2-[[(1R)-1-карбокси-3-фенилпропил] -амино]гексаноил]пирол-2-карбоновая кислота (лизиноприл R,S,S-изомер). Вода. Не менее 8,0% и не более 9,5%. Определение проводят методом К.Фишера из точной навески около 0,25 г субстанции. Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г субстанции (точная навеска) не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции). Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители". Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота". Количественное определение. Около 0,35 г (точная навеска) субстанции растворяют в 50 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически. 1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 40,55 мг C21H31N3O5. Хранение. В сухом, защищенном от света месте. МАГНИЯ СУЛЬФАТ (ФС 42-0253-07) Магния сульфат, гептагидрат MgSO4 x 7H2O М.м. 246,48 Содержит не менее 99,0% MgSO4 x 7H2O. Описание. Белый кристаллический порошок или бесцветные призматические кристаллы. Растворимость. Легко растворим в воде, очень легко растворим в кипящей воде, практически нерастворим в спирте 96%. Подлинность. Препарат дает характерные реакции на магний и сульфаты. Прозрачность раствора. 2 г субстанции растворяют в воде и разбавляют водой до 20 мл. Полученный раствор должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I. Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном B9. Кислотность или щелочность. К 5 мл раствора, полученного в испытании на Прозрачность раствора, прибавляют 5 мл воды и 0,05 мл 1% раствора фенолфталеина; раствор должен быть бесцветным. Розовое окрашивание должно появляться от прибавления не более 0,1 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида. Хлориды. К 5 мл раствора, полученного в испытании на Прозрачность раствора, прибавляют 5 мл воды. Раствор должен выдерживать испытание на хлориды (не более 0,004% в субстанции). Тяжелые металлы. 10 мл раствора, полученного в испытании на Прозрачность раствора, должны выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,0005% в субстанции). Железо. Раствор 1,5 г субстанции в 10 мл воды должен выдерживать испытание на железо (не более 0,002% в субстанции). Марганец. 1,25 г субстанции растворяют в 5 мл воды, прибавляют 0,5 мл серной кислоты концентрированной, 0,2 мл 0,1 М раствора серебра нитрата и нагревают до кипения. Прибавляют 2 мл 20% раствора аммония персульфата и снова нагревают до кипения. Проводят контрольный опыт с 5 мл воды и теми же реактивами. Оба раствора охлаждают и переносят в одинаковые пробирки. В пробирку с контрольным опытом прибавляют из микробюретки 0,01 М раствор калия перманганата до тех пор, пока окраска не сравняется с окраской испытуемого раствора. Сравнение окрасок проводят на белом фоне по оси пробирок. 1 мл 0,01 М раствора калия перманганата соответствует 0,11 мг марганца, которого в субстанции должно быть не более 0,004%. Препарат, предназначенный для приготовления стерильных лекарственных форм, не должен содержать марганца. Мышьяк. 0,25 г субстанции должны выдерживать испытание на мышьяк (не более 0,0002% в субстанции). Потеря в массе при прокаливании. Около 1 г (точная навеска) субстанции сушат в течение 2,5 ч при температуре от 100 до 105 град. C, а затем прокаливают при температуре красного каления до постоянной массы. Потеря в массе должна быть не менее 48,0 и не более 52,0%. Бактериальные эндотоксины. Не более 0,07 ЕЭ на 1 мг субстанции. Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции (концентрация - 250 мг/мл), а затем разводят его не менее чем в 100 раз. Испытание проводят для субстанции, предназначенной для приготовления инъекционных лекарственных форм. Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота". Количественное определение. Около 15 г субстанции (точная навеска) растворяют в 50 мл воды, прибавляют 5 мл аммиачного буферного раствора и титруют при энергичном перемешивании 0,05 М раствором натрия эдетата до появления синего окрашивания (индикатор - кислотный хром черный специальный). Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 12,32 мг MgSO4 x 7H2O. Хранение. В хорошо укупоренной таре. МЕЛОКСИКАМ (ФС 42-0254-07) 4-Гидрокси-2-метил-N-(5-метилтиазол-2-ил)-2H-1,2-бензотиазин-3-карбоксамид-1,1-диоксид C14H13N3O4S2 М.м. 351,41 Содержит не менее 99,0% C14H13N3O4S2 в пересчете на сухое вещество. Описание. Бледно-желтый порошок. Растворимость. Растворим в диметилформамиде, мало растворим в ацетоне, очень мало растворим в спирте 96% и метаноле, практически нерастворим в воде. Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия -1 бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца мелоксикама. Спектр поглощения 0,0015% раствора субстанции в метаноле в области от 240 до 450 нм должен иметь максимум при 354 нм. Посторонние примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ. Подвижная фаза А (ПФ А). 1 г калия фосфата однозамещенного растворяют в 1000 мл воды и доводят pH раствора раствором натрия гидроксида до 6,0 +/- 0,05. Подвижная фаза Б (ПФ Б). Метанол. 0,4 М раствор натрия гидроксида. 40 мл 1 М раствора натрия гидроксида разводят водой до 100 мл. Растворитель. Смешивают 30 мл 0,4 М раствора натрия гидроксида, 300 мл воды и 200 мл метанола. Испытуемый раствор. 0,2 г субстанции растворяют в 50 мл растворителя. 5 мл полученного раствора разбавляют смесью метанол - вода (2:3) до 10 мл. Раствор сравнения. 1 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора смесью метанол - вода (2:3) до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора той же смесью до метки и перемешивают. Раствор для проверки пригодности системы. 0,1 г стандартной смеси мелоксикама и примесей (Meloxicam impurity standard BPCRS) растворяют в 25 мл растворителя. 5 мл полученного раствора разбавляют смесью метанол - вода (2:3) до 10 мл. Хроматографические условия Колонка - 15 x 0,46 см с октадецилсилил силикагелем (C18), 5 мкм; ПФ - градиентное элюирование: ┌─────────────────┬──────────────┬───────────────┐ │ Время, мин. │ ПФ А, % │ ПФ Б, % │ |