Практикум по бх. Практикум по биологической химии Для студентов лечебного и педиатрического

• Название: Практикум по биологической химии Для студентов лечебного и педиатрического
• Анкор: Практикум по бх.doc
• Дата: 28.01.2017
• Размер: 5.3 Mb.
• Имя файла: Практикум по бх.doc
• Тип: Практикум; #885
• страница: 4 из 38

Тема 2.1.
Жирорастворимые витамины

Актуальность

Жирорастворимые витамины – гидрофобные органические вещества. В организме они не синтезируются и являются незаменимыми пищевыми факторами. Исключением является витамин D, синтезируемый в коже, но в недостаточном количестве. При недостаточном поступлении витаминов в организм развиваются тяжелые состояния (гипо- и авитаминозы), приводящие к нарушениям метаболизма. Биологическая роль жирорастворимых витаминов связана с регуляцией обменных процессов в организме, так как эти витамины влияют на синтез структурных белков и ферментов, что особенно актуально в детском возрасте.

Теоретические сведения о витаминах, а также практические навыки качественного и количественного определения этих веществ в различных биологических объектах нужны врачу для профилактики гипо- и авитаминозов, для использования витаминов в качестве неспецифического средства при лечении заболеваний кожи, печени, мышечной и костной системы и т.п.

Цель

Изучить свойства, химическую структуру, классификацию, биологическую роль жирорастворимых витаминов, клиническую картину авитаминозов.

Научиться проводить качественные реакции со стандартными растворами жирорастворимых витаминов.

Использовать полученные навыки для обнаружения жирорастворимых витаминов в биологических объектах.

Вопросы для самоподготовки

1. 
   Дайте общую характеристику витаминов, опишите их роль. Классификация и номенклатура витаминов.
   
2. 
   Характеристика гипо- и авитаминозов, гипервитаминозов, их экзогенные и эндогенные причины. Причины гиповитаминозов у детей.
   
3. 
   Провитамины –  каротин, эргостерол, 7 дегидрохолес­терол. Превращение провитаминов в витамины на примере  каротина. Понятие о каротиноидах и их роли в организме.
   
4. 
   Понятие об антивитаминах. Использование антивитаминов в качестве лекарственных средств. Механизм действия и область применения дикумарола как антивитамина К.
   
5. 
   Характеристика отдельных жирорастворимых витаминов по плану:
   

• 
  строение витаминов А, Е, К, D₂ и D₃, F;
  
• 
  строение активных форм витаминов А и D;
  
• 
  пищевые источники;
  
• 
  минимальная суточная потребность;
  
• 
  биохимические функции, примеры реакций и/или процессов, в которых принимает участие витамин;
  
• 
  картина гипо- и авитаминоза, гипервитаминоза.
  

6. 
   Биохимические проявления недостаточности витамина D, витамин D зависимого и витамин D резистентного рахита. Роль заболеваний печени и почек в развитии картины гиповитаминоза D.
   
7. 
   Качественные реакции на ретинол, токоферол, викасол, кальциферол. Принцип методов.
   
8. 
   Качественные реакции обнаружения витаминов А, Е и D в биологическом материале.
   
9. 
   Составьте таблицу по жирорастворимым витаминам
   

Название витамина (буквенное, химическое, физиологическое)	Химическая формула	Суточная доза	Биологическая роль	Признаки гипер-, гипо- и авитаминоза	Пищевые источники	Лекарственные формы

Темы для реферативных сообщений

1. 
   История открытия витаминов. Работы отечественных и зарубежных ученых.
   
2. 
   Рахит – виды, биохимические причины, профилактика, лечение. Рахитоподобные состояния.
   
3. 
   Витамин А, его активные формы ретиналь и ретиноевая кислота. Участие в обмене веществ и фотохимическом акте зрения.
   
4. 
   Витамин D, его активные формы. Участие в обмене веществ.
   

Лабораторная работа 1

Качественные реакции на жирорастворимые витамины

Качественная реакция на ретинол

Принцип

Метод основан на способности концентрированной серной кислоты отнимать воду от ретинола с образованием окрашенных продуктов.

Реактивы

1) Конц. H₂SO₄, 2) бутанол.

Материал исследования

Витамин А, 3,44% масляный раствор.

Проведение анализа

В пробирку вносят 2 капли раствора витамина А и 5 капель бутанола. Оставляют на 1 минуту, периодически встряхивая. Затем добавляют 1-2 капли конц. H₂SO₄. Появляется синее окрашивание, переходящее в фиолетовое, затем в красно-бурое.

Качественная реакция на холекальциферол

Принцип

При взаимодействии витамина D₃ с оксиметилфурфуролом, образующимся из сахарозы под действием концентрированной серной кислоты, появляется красно-фиолетовое окрашивание.

Реактивы

1) Конц. H₂SO₄, 2) бутанол, 3) 20% р-р сахарозы.

Материал исследования

Витамин D₃, масляный раствор, 15 тыс МЕ/мл.

Проведение анализа

В пробирку вносят 3 капли раствора витамина D₃ и 5 капель бутанола, добавляют 3 капли раствора сахарозы и 3 капли конц.H₂SO₄. Появляется красно-фиолетовое окрашивание, переходящее в черно-бурое.

Качественная реакция на токоферол

Принцип

При взаимодействии токоферола с концентрированной азотной кислотой образуется соединение хиноидной структуры красного или желтовато-красного цвета.

Реактивы

Конц. HNO₃.

Материал исследования

Витамин Е, 30,0 % масляный раствор.

Проведение анализа

В сухую пробирку вносят 2 капли раствора витамина Е и добавляют 10 капель конц. HNO₃. Пробирку встряхивают и наблюдают появление красного окрашивания. Для ускорения реакции пробирку можно поместить на 3 минуты в кипящую водяную баню.

Качественная реакция на витамин К

Принцип

Викасол (синтетический аналог витамина К₁) в присутствии цистеина в щелочной среде окрашивается в лимонно-желтый цвет.

Реактивы

1) 0,025% р-р цистеина, 2) 10% р-р натрия гидроксида.

Материал исследования

0,05% р-р викасола.

Проведение анализа

К 5 каплям раствора викасола добавляют 5 капель раствора цистеина и 1 каплю 10% раствора NaOH. Развивается лимонно-желтое окрашивание.

Клинико-диагностическое значение

Качественные реакции на витамины позволяют установить подлинность (достоверность) витаминных лекарственных препаратов, а также использовать их для обнаружения и количественного определения витаминов в пищевых объектах и лекарственных растениях.

Оформление работы

Исследуемые витамины	Используемый метод и реактивы	Результат

Отмечают принцип методов, ход работы, регистрируют результаты анализа в таблице и делают вывод о возможности обнаружения витаминов данным методом.

Лабораторная работа 2

Оценка пищевых продуктов по наличию в них
жирорастворимых витаминов

Материал исследования

Плоды шиповника, дрожжи, растительное масло, молоко, рыбий жир.

Проведение анализа

Плоды шиповника предварительно измельчают. К измельченному шиповнику и дрожжам добавляют по 1 мл бутанола, экстрагируют в течение 5 минут. В дальнейшей работе используют экстракт.

В работе используются методы и количественное соотношение реагентов точно так, как в работе "Качественные реакции на жирорастворимые витамины".

Оформление работы

Регистрируют результаты анализов в таблице. Сравнивают результаты с табличными данными. Делают вывод о лучших пищевых источниках витаминов А, Е и D.

Исследуемые витамины	Материал исследования	Окрашивание	Вывод о наличии витамина в продукте
Витамин А	Рыбий жир Растительное масло Молоко Плоды шиповника
Витамин Е	Рыбий жир Растительное масло Молоко Плоды шиповника
Витамин D	Рыбий жир Растительное масло Молоко Сухие дрожжи