Все методички по частной микробиологии. Стафилококки (гнойные инфекции, пищевые интоксикации, сепсис, вби, стафилоносительство, и др.) билеты 5, 29, 32
 Скачать 344.73 Kb.
|
|
Частная микробиология Микробиологические аспекты лабораторной диагностики гнойно-воспалительных инфекций Стафилококки (гнойные инфекции, пищевые интоксикации, сепсис, ВБИ, стафилоносительство, и др.) – билеты 5, 29, 32 Классификация. Патогенные кокки Семейство: Micrococcaceae (Гр+) Streptococcaceae (Гр+) Neiseriaceae (Гр-) Роды: Staphilococcus Streptococcus Neiseria Виды: aureus pyogenes meningitidis epidermidis viridians gonorrhoeae saprophiticus pneumoniae    Гнойно-воспалительные инфекции характеризуются образованием воспалительных очагов в различных органах и тканях с последующим гнойным отделяемым из пораженного органа. Возбудители этой группы инфекций относятся к разным семействам, родам и видам. Одними из основных возбудителей гнойно-воспалительных инфекций являются бактерии шаровидной формы. В основе их классификации лежат морфология и окраска по методу Граму. На втором месте стоят грамотрицательные бактерии родов – Escherichia, Proteus, Klebsiella, Pseudomonas. Эпидемиология Источник инфекции - больной человек, бактерионосители, больное животное. Стафилококки,являясь постоянными обитателями кожи и слизистых, могут вызвать аутоинфекцию. Микроорганизмы этой группы могут вызывать внутрибольничную инфекцию. Путь передачи - контактно-бытовой, воздушно-капельный, алиментарный. Патогенез Стафилококки проникают в любые органы и ткани. Это свойство связано с наличием у них факторов патогенности - экзотоксина и ферментов агрессии. Экзотоксин пантропен и состоит из множества фракций, обладающих органотропностью. Фракции экзотоксина: гемотоксин, лейкотоксин, некротоксин, нейротоксин, летальный токсин, энтеротоксин, эксфолиативные токсины, экзотоксин, вызывающий синдром токсического шока и т.д. Стафилококк имеет весь набор ферментов агрессии - гиалуронидазу, плазмокоагулазу, лецитиназу, фибринолизин и другие. Клиника Стафилококки проникают в организм через повреждения кожи и слизитых оболочек, вызывая самые разнообразные заболевания - от банальной угревой сыпи до тяжелейшего перитонита, эндокардита, сепсиса и септикопиемии, менингита, пневмонии, при которых летальность достигает до 80%.Стафилококки играют ведущую роль в гнойной хирургии. Инфицирование стафилококками пищевых продуктов - частая причина пищевых отравлений (пищевых интоксикаций). Лабораторная диагностика. Исследуемый материал зависит от клинических проявлений инфекции. Это могут быть кровь, спинномозговая жидкость, мокрота, гнойное отделяемое пораженного органа, рвотные массы. 1. Микроскопический метод - определяет род. В мазках из исследуемого материала - грамположительные бактерии шаровидной формы в виде гроздьев винограда. 2. Бактериологический метод - ведущий, служит для определения вида стафилококка. Исследуемый материал засевают на элективные среды - желточно-солевой агар (ЖСА) с целью выделения чистой культуры. Кровь и спинномозговую жидкость предварительно обогащают на 1% сахарном бульоне. В бульоне возбудитель дает равномерное помутнение, на агаре - гладкие, пигментированные колонии с ровными краями. Идентификацию стафилококка проводят по факторам патогенности: лецитиназная активность определяется на ЖСА (вокруг колоний отмечается перламутровая зона помутнения среды); гемолитическая активность определяется путем посева культуры стафилококка на кровяной агар; плазмокоагулаза определяется посевом в цитратную плазму; биохимическая активность - посевом в пестрый ряд. По патогенности выделяют три вида стафилококка (см. таблицу). Для обнаружения типа энтеротоксина используют реакцию преципитации в геле (РП). С целью определения источника инфекции проводят фаготипирование с помощью типового стафилококкового бактериофага. 3. Серологический метод - реакция пассивной гемагглютинации (РПГА), иммуно- ферментная реакция (ИФА) для определения специфических антител в сыворотке крови больного к тейхоевой кислоте, содержащейся в клеточной стенке стафилококка. 4. Биологический метод - биопроба на котятах (пероральное введение фильтрата бульонной культуры стафилококка) для обнаружения энтеротоксина. Токсины вызывают у котят рвоту и понос. 5. Аллергический метод не применяется. Лечение и специфическая профилактика. Этиотропная терапия назначается с учетом антибиотикочувствительности. Для лечения используют главным образом В-лактамные антибиотики, макролиды, полипептидные антибиотики. Специфическая иммунотерапия применяется при тяжелых и хронических стафилококковых инфекциях - в виде противостафилококкового человеческого иммуноглобулина, антистафилококковой плазмы. Специфическая плановая профилактика - стафилококковый анатоксин. Показана беременным женщинам перед родами. Иммунитет кратковременный. # Синегнойная палочка (гнойные инфекции) – билет 27. В учебнике! # Гонококки (гонорея) Гонорея - инфекционное венерическое заболевание с воспалительными проявлениями в мочеполовых путях и конъюнктиве глаза (у новорожденных). Возбудитель - Neisseria gonorrhoeae относится к семейству Neisseriaceae. Эпидемиология Источник инфекции - больной человек. Инфекция - антропонозная. Путь передачи - контактно-половой. Входные ворота - слизистая уретры, цервикального канала, глаз, прямой кишки. Во внешней среде неустойчив. Патогенез Основной фактор патогенности - пили, с помощью которых гонококк осуществляет адгезию и колонизацию цилиндрического эпителия слизистой мочеполового тракта. Возбудитель всегда остается на месте входных ворот. При его гибели высвобождается эндотоксин, распространяется по протяжению. Редко, но может проникать в кровь и поражать суставы, вызывая гонорейный артрит. Поражение конъюнктивы глаз называют гонобленнореей. Клиника Инкубационный период от 3 до 4 дней до 3-4 недель. Типичным симптомом острой гонореи является воспаление уретры и шейки матки, сопровождающееся обильными гнойными выделениями. Различают гонорейную инфекцию нижних отделов мочеполового тракта (уретрит, цервицит) и верхних (эндометрит, эпидидимит, воспалительные заболевания тазовых органов). Перенесенное заболевание не оставляет иммунитета к повторному заражению. Лабораторная диагностика. Исследуемый материал - гнойное отделяемое из уретры, цервикального канала, прямой кишки, отделяемое конъюнктивы глаза, сыворотка крови. 1. Микроскопический метод - ведущий при острой гонорее. Из исследуемого материала готовят 2 мазка. Один красят по методу Грама, другой - щелочной синькой. При простом способе окраски - диплококки бобовидной формы внутри лейкоцитов (незавершенный фагоцитоз), по Граму – грамотрицательные. .При хронической гонорее микроскопический метод используют после провокации. Биологическая провокация - это стимуляция специфических и неспецифических факторов иммунного ответа в виде фагоцитоза и гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ), ее используют перед началом лечения хронической формы инфекции. Для этого больному внутримышечно по схеме вводят гоновакцину. Провокация может быть также механической (бужирование уретры) и алиментарной (прием острых продуктов). Иммунолюминесцентная микроскопия (прямая) - для сероидентификации возбудителя в исследуемом материале. 2. Бактериологический метод - посев исследуемого материала на асцит-агар. Рост характеризуется абсолютно прозрачными колониями в виде капель росы. Биохимическая идентификация - разлагает только глюкозу до кислоты. 3. Серологический метод - при хронической гонорее. В сыворотке крови определяют специфические антитела с помощью реакции связывания комплемента (РСК) (по автору реакция Борде-Жангу) и реакция непрямой или пассивной гемагглютинации (РИГА). 4. Биологический метод не применяется. 5. Аллергический метод - при хронической гонорее. Ставится кожно-аллергическая проба. Аллергеном служит гоновакцина (взвесь гонококков, убитых нагреванием). 6. Метод молекулярной биологии - цепная полимеразная реакция (ПЦР). Лечение и специфическая профилактика. Специфическая профилактика не разработана. Для неспецифической профилактики гонобленнореи у новорожденных используют введение им в конъюнктивальный мешок сульфацила натрия или 2 капли 3% масляного раствора пенициллина. Этиотропная терапия острой и хронической гонореи проводится антибиотиками пенициллинового, тетрациклинового ряда. # Хронический уретрит гонококковой природы – билет 10 # Менингококки (менингит, менингококцемия) – билеты 25, 40 Менингит - инфекционное респираторное заболевание с гнойно-воспалительными проявлениями мозговых оболочек спинного и головного мозга. Возбудитель - Neisseria meningitidis относится к семейству Neisseriaceae. Эпидемиология Источник инфекции - больной человек либо бактерионоситель. Инфекция - антропонозная. Путь передачи инфекции - воздушно-капельный. Входные ворота - слизистая носоглотки. Во внешней среде неустойчив. Патогенез С помощью пилей и белков наружной мембраны возбудитель осуществляет адгезию и колонизацию эпителия носоглотки, где происходит его первичное размножение. Из носоглотки возбудитель проникает в лимфатические сосуды и в кровь, а затем в центральную нервную систему, где оседает на мягких мозговых оболочках и, интенсивно размножаясь, вызывает их воспаление. При гибели возбудителя выделяется эндотоксин, обладающий пирогенным, некротическим и летальным действием. Главный фактор патогенности - капсула, защищающая менингококк от фагоцитоза. Клиника Инкубационный период 2-4 дня. Менингококки могут вызывать следующие клинические формы болезни: назофарингит (наиболее легкая форма); менингококцемия (менингококковый сепсис); эпидемический цереброспинальный менингит. Клинические проявления - головная боль, сыпь, симптомы интоксикации. После перенесенного заболевания формируется прочный длительный антимикробный иммунитет. Лабораторная диагностика. Исследуемый материал - ликвор, кровь. Ликвор перед исследованием центрифугируют. 1. Микроскопический метод -ведущий. Из осадка спинномозговой жидкости готовят 2 мазка. Один красят по методу Грама, другой - щелочной синькой. При окраске по методу Грама в мазке - грамотрицательные диплококки бобовидной формы. При простом методе окраски - диплококки внутри лейкоцитов (незавершенный фагоцитоз). Для определения серотипа менингококка ставится реакция преципитации надосадочной жидкости с преципитирующей антименингококковой сывороткой. По О- антигену у возбудителя различают 13 серотипов. Основные - А, В,Д,\А/-135, Y 2. Бактериологический метод.Посев исследуемого материала (осадок спинномозговой жидкости) осуществляют на кровяной агар, где возбудитель дает нежные, прозрачные колонии, размером 2-3 мм. Полученные колонии микроскопируют по методу Грама (в мазках из колоний грамотрицательные диплококки). Серотип менингококка определяют в реакции агглютинации чистой культуры с агглютинирующей антименингококковой сывороткой. Биохимическая идентификация - разлагает глюкозу и мальтозу до кислоты. Иммунолюминесцентная микроскопия (прямой метод) - для экспресс - индикации антигена менингококка в исследуемом материале. Метод встречного иммуноэлектрофореза используют для экспресс - индикации возбудителя в исследуемом материале 3. Серологический метод на 5-6 день заболевания: реакция непрямой или пассивной гемагглютинации (РИГА), иммуноферментная реакция (ИФА) с парными сыворотками. 4. Аллергический метод не применяется. 5. Биологический метод не применяется. Особенности лабораторной диагностики менингококкового носительства Исследуемый материал - слизь из носоглотки. К числу нормальных обитателей носоглотки относятся следующие нейссерии: Moraxella catarrhalis, Neisseria flavescens, Neisseria sicca, Branchamella. В связи с этим возникает необходимость их дифференциации. Neisseria meningitidis: в отличие от остальных разлагает глюкозу и мальтозу до кислоты, растет только на белковых средах (кровяной агар). Сероидентификация возбудителя - в реакции агглютинации (РА) со специфической сывороткой, соответствующих серотипов. Лечение и специфическая профилактика. Для специфической профилактики - вакцина менингококковая типа А. Для специфической терапии и экстренной профилактики применяют нормальный человеческий иммуноглобулин. Для этиотропной терапии - сульфаниламидные препараты и антибиотики (пенициллин, рифампицин). # Пиогенные стрептококки (острый тонзиллит, острый гломерулонефрит и др.) – билеты 34, 45. В учебнике! # Пневмококковая инфекция (пневмония) – билеты 42 Пневмония - острое или хроническое гнойно - воспалительное заболевание легких, одним из возбудителей которой является Streptococcus pneumoniae, относящийся к семейству Streptococcaceae. Эпидемиология Источник инфекции - больной человек, бактерионоситель. Инфекция - антропо- нозная. Путь передачи инфекции - контактный, воздушно-капельный. Входные ворота - слизистая дыхательных путей. Во внешней среде неустойчив. Патогенез Через верхние дыхательные пути Streptococcus pneumoniae проникает в нижние отделы дыхательных путей, где способствует формированию воспалительных инфильтратов, сопровождающихся нарушением гомеостаза легочной ткани Основной фактор вирулентности - капсула, обладающая антифагоцитарным свойством. Из легких возбудитель может проникать в плевральную полость и перикард, либо гема- тогенно диссеминировать и вызывать эндокардиты, менингиты, сепсис, поражать суставы. Большую часть пневмококковых антител составляют антитела к антигенам капсулы.Существует более 23 серотипов возбудителя. Клиника Основные клинические проявления пневмонии - внезапное начало, высокая температура, кашель, боли в груди. Пневмококк также может поражать роговицу глаза (ползучая язва роговицы) и вызывать нагноительные процессы лор-органов, серозных оболочек и т.д. Постинфек- ционный иммунитет нестойкий, типоспецифический, формируются антитела к типовому капсульному полисахариду. Лабораторная диагностика. Исследуемый материал - мокрота, гной, спинномозговая жидкость, кровь. Микроскопический метод - ведущий. Из исследуемого материала готовят два мазка, один из которых окрашивают по Граму, а другой по Бурри - Гинсу для обнаружения капсулы. В мазках по Граму - грамположительные диплококки ланцетовидной формы, по Бурри-Гинсу - диплококки с выраженной капсулой. Для определения серотипа пневмококка используют реакцию микроагглютинации на стекле с типовыми пневмококковыми сыворотками и феномен набухания капсулы. В присутствии гомологичной сыворотки наблюдается склеивание пневмококка и резкое набухание капсулы пневмококка. Реакция микроагглютинации ставится с исследуемым материалом (мокрота, гной, осадок спинномозговой жидкости). Бактериологический метод. Выделяют чистую культуру пневмококка путем посева исследуемого материала (мокрота , гной, осадок спинномозговой жидкости) на кровяной агар, где возбудитель дает мелкие, округлой формы колонии, окруженные зеленой зоной. Кровь засевают на 1 % сахарный бульон - для пневмококка характерен придонно-пристеночный рост. Для дифференцировки пневмококка от зеленящего стрептококка используется проба с инулином (пневмококк ферментирует инулин до кислоты), проба с оптохином (оптохин угнетает рост пневмококка), а также чувствительность к желчи (пневмококк лизируется желчью). Серологический метод: иммуноферментная реакция(ИФА), непрямой иммуно- флюоресцентный метод (ИЛ), реакция латекс-агглютинации на стекле. Аллергический метод не применяется. Биологический метод не применяется. Лечение и специфическая профилактика. Для специфической профилактики - поливалентная вакцина, приготовленная из высокоочищенных капсульных антигенов. Этиотропная терапия проводится антибиотиками после определения чувствительности к ним пневмококка (цефалоспорины 2го и 3-го поколения, фторхинолоны, полусинтетические р-лактамные антибиотики). # Микробиологические аспекты лабораторной диагностики бактериальных зоонозных инфекций Бруцеллез (билет 20) - зоонозная инфекция с затяжным течением, повторными волнами лихорадки, тяжелой интоксикацией и хрониосепсисом. После перенесенной инфекции у больных пожизненно наблюдается поражение опорно-двигательного аппарата, нервной и других систем. Бруцеллы мелкие, неподвижные, грамотрицательные коккобактерии, капсул не образуют. Аэробы, ультивируются в особых условиях повышенного содержания С02, растут медленно. Эпидемиология. Возбудитель поражает домашних животных. Путь передачи инфекции алиментарный - через молочные продукты и при контакте с больными животными (овцы, коровы, свиньи и др.(.Человек заражается только от животных, больной человек не является источником инфекции (исключение - легочная форма чумы и сибирской язвы) Классификация. Возбудитель относится к роду Brucell, включает основные виды: Brucella melitensis (типовой вид), Brucella abortus, Brucella suis и др.. Патогенез. Основные факторы вирулентности: эндотоксин, обладающий высокой инвазив- ностью, гиалуронидаза разрушает гиалуроновую кислоту (основа соединительной ткани) и белки наружной мембраны определяют адгезивную активность микроба. Распространение микроба в организме зависит от инфицирующей дозы. Могут существовать внутриклеточно и вызывать незавершенный фагоцитоз. Хроническое течение инфекции, наряду с гуморальным ответом, формирует развитие реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ - воспаление, диффузные изменения сосудов, внутренних паренхиматозных органов, лимфоидной системы ). Клиника. Инкубационный период: 1-3 недели, может длиться несколько месяцев. Заболевания проявляются лихорадкой, ознобом, потливостью, болями в суставах, поражением сердечно-сосудистой , мочеполовой систем и опорно-двигательного аппарата. Клинические формы инфекции: острый бруцеллез (до 3 месяцев), подострый (до 6 месяцев),хронический( с давностью более 6 месяцев) и может быть латентный бруцеллез.Возможна реинфекция.Иммунитет нестерильный, клеточно-гуморальный. Лабораторная диагностика (осуществляется в специализированных лабораториях особо опасных инфекций) Исследуемый материал - кровь,пунктат костного мозга, моча, трупный материал. Микроскопический метод: обнаружение возбудителя в остром периоде или во время обострения болезни.Большой диагностической значимости не имеет. Микробиологический метод - выделение чистой культуры на печеночных средах ( рост более недели) в двух флаконах: в обычных условиях и при повышенном содержании С02. Идентификация бруцелл представлена в таблице.
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||