Общая микробиология. Виды микроскопии назначение и принципы применения
 Скачать 1.57 Mb.
|
Вопросы для самоподготовки
Литература
Сложившиеся в процессе эволюции микробные биоценозы тела человека поддерживают его нормальное функционирование. Важную роль играет нормальная микрофлора тела человека в формировании естественного иммунитета макроорганизма, так как его постоянная микрофлора обладает выраженными антагонистическими свойствами относительно многих возбудителей инфекционных заболеваний. Причиной высокой антагонистической активности нормальной микрофлоры человека является выделение этими микроорганизмами бактериоцинов, антибиотиков, молочной кислоты, спиртов, жирных кислот, перекиси водорода и других веществ, подавляющих рост и размножение патогенных видов. Нарушение экологических взаимоотношений между биоценозами и организмом человека, а также изменения в самих биоценозах приводят к развитию дисбактериоза. Дисбактериоз – это качественное и количественное нарушение экологического баланса между микробными популяциями в составе микрофлоры организма человека. Причиной дисбактериозов может служить резкое снижение иммунитета при хронических инфекциях, воздействии радиации, нерациональное использование антибиотиков широкого спектра действия (тетрациклины, левомицетин и т. д.). При дисбактериозах возрастает количество гнилостных микробов из родов Pseudomonads, Proteus; дрожжеподобных грибов Candida albicans; количество E.coli, Klebsiella, Str. faecalis. Для изучения качественного состава нормальной микрофлоры организма человека используют микроскопию мазков, приготовленных из зубного налета, смывов со слизистой оболочки зева, носа, половых органов и т. д.; а также бактериологические методы исследования. Бактериоскопические методы: Обнаружение микроорганизмов зубного налета осуществляют с помощью стерильных палочек, при этом берут его с зубов, делают мазки, окрашивают по Граму, микроскопируют в иммерсионной системе. Для обнаружения подвижных микроорганизмов готовят препараты «раздавленная капля», микроскопируют их в темнопольном или фазово-контрастном микроскопе. При бактериологическом исследовании делают смывы с лица, рук, слизистых носа тампоном, смоченным в физиологическом растворе. Затем взятый таким образом материал высевают на чашки Петри с МПА, кровяным или сахарным агаром. Инкубируют при 37оС в течение 24 часов. С помощью отдельного тампона, помещенного в пробирку с глюкозо-пептонной средой для обнаружения бактерий группы кишечных палочек берут смывы с рук с последующим высевом на среду Эндо или розоловый агар, дальнейшее выделение кишечной палочки, аналогично стандартной методике обнаружения бактерий группы кишечных палочек. Кроме того можно использовать метод посева отпечатков пальцев на чашках с МПА, прикасаясь к поверхности питательной среды. О качественном составе микрофлоры рук судят через 24 часа экспозиции при 37 оС. Делают мазки из отдельных колоний, окрашивают по Граму. В мазках можно обнаружить стафилококки, дрожжи, грамположительные и грамотрицательные палочки. Количественное бактериологическое исследование смывов с рук также проводят с целью проверки соблюдения правил личной гигиены работниками аптечных учреждений. Смывы с рук получают путем тщательного протирания ладоней межпальцевых и подногтевых пространств влажным тампоном. Тампон помещают в пробирку, добавляют 8 мл стерильной воды, в которой тампон тщательно прополаскивают. Из исходных смывов в зависимости от предполагаемой степени бактериальной загрязненности готовят ряд десятикратных разведений. Смывы исследуют на общие бактериальные загрязнения (микробное число) по методике, описанной при определении микробного числа воды, на наличие бактерий группы кишечных палочек, золотистого стафилококка. Для определения бактерий группы кишечных палочек в пробирку с тампоном после взятия смыва наливают 5 мл среды Кесслера (1 л воды, 10 г пептона, 50 мл бычьей желчи, 10 г лактозы, 4 мл 1% р-ра генциана фиолетового – состав среды Кесслера). Затем пробирки термостатируют в течение 24 часов при 43 оС. При наличии роста производят высев на дифференциально-диагностическую среду Эндо. Рост на среде типичных красных колоний указывает на наличие в смывах кишечной палочки. Заканчивается исследование постановкой оксидазной пробы. Для обнаружения золотистого стафилококка смыв в количестве 3-4 капель засевают на чашки Петри с желточно-солевым агаром. После инкубирования в течение 24 часов при температуре 37 оС изучают свойства выделенных культур стафилококка. Результаты бактериологического исследования смывов с рук можно оформить в виде таблицы. Таблица 1
Задания к лабораторному занятию
Тема: Генетика микроорганизмов Цель: Изучить методы обнаружения мутаций и генетических рекомбинаций у бактерий, возможности применения генетических методов для создания лекарственныx средств. |