Бактериальной клетки. Основные морфологические формы бактерий и методы их изучения. Принципы классификации бактерий по Берджи
 Скачать 3.01 Mb.
|
|
Возбудитель Clostridiumtetani. Морфология. По морфологии это крупные ГР(+) палочки, перитрихи, не способны образовывать капсулу. Образуют споры крупные, термально расположены, облигатные анаэробы. Культуральные свойства .Для культивирования необходимы строго анаэробные условия. При посеве материала в полужидкий агар через 24-48 часов формируются колонии в виде чечевички. На твердой питательной среде дает прозрачные серые, шероховатые колонии. Биохимическая активность. У возбудителя практически отсутствуют сахаролитические и протеолитические свойства. Антигенное строение : видоспецифический АГ; типоспецифические Н- антигены, по которым они подразделяются на 10 сероваров. Факторы вирулентности . У возбудителей столбняка существуют экзотоксины, состоящие из 2хфракций: тетаноспазмин- (нейротоксин, поражающий продолговатый мозг) и тетанолизина (гемолизин). Резистентность . Образование спор начинается на 2-3 день. Споры чрезвычайно устойчивы к влиянию факторов внешней среды. Эпидемиология. Источником является почва.Попав с испражнениями животных и человека в почву, возбудитель и споры накапливаются в ней.Путь передачи контактный. Этиопатогенез. Тетаноспазминыпроникают в ЦНС, по периневральным пространствам,распространено кровеносным и лимфатическим сосудам . Он фиксируется ганглиозидами клеток спинного мозга и ствола головного мозга. Токсин блокирует освобождение медиатора в синапсах двигательных нервов, что приводит к развитию резко выраженной гиперфлексии и резких спазмов скелетных мышц в ответ на любое раздражение. Нарушается синаптическая передача в мионевральных соединениях возможно следствие накопления ацетилхолина. Тетанолизин- мембранотропный токсин обладает гемолитическим, кардиотоксическим и летальными действиями. Клинические проявления : лихорадка, выраженная потливость; мышечные боли, напряженность мышц на месте травмы;напряжения и тризм жевательных и мимических мышц лица;сардоническая улыбка; ригидность, спазмы, судороги мышц грудной клетки, живота; тело вытягивается, становится прямым и неподвижным;судороги мышц;смерть наступает от асфиксии. Материалом для исследования от больного является промывные воды желудка, испражнения, кровь, моча, рвотные массы. Исследованию подлежат и продукты, послужившие причиной отравления. Методы исследования. Основаны на определении в крови больного столбнячного токсина в реакции токсиннейтрализации и пробе на мышах. Профилактика. 1.Плановая иммунопрофилактикастолбняка проводится детям первичная вакцинация в 3-6 месяцев АКДС вакциной,' ревакцинацию АДС и АС- М, а также военнослужащим и с/х работникам в составе вакцины Tabte. 2.Экстренная специфическая профилактика при обширных ранах используется противостостолбничный человеческий IG и столбнячный анатоксин. Столбнячный анатоксинвходит в состав трех зарегистрированных в России препаратов фирмы Авентис Пастер( Франция ) - это : - тетракокк - адсорбированная вакцина для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка и полиомиелита; - ДТ - ВАКС- адсорбированная вакцина для профилактики дифтерии и столбняка; - ИМОВАКС ДТ Адюльт- адсорбированная вакцина для профилактики дифтерии и столбняка при ревакцинации взрослых. Применение противостолбнячной антитоксической сыворотки или противостолбнячного человеческого иммуноглобулина для этиотропной терапии столбняка. Вопрос 73. Дифтерия. Биология возбудителя. Специфическая профилактика и терапия. Дифтерия – острая антропонозная бактериальная инфекция, протекающая с интоксикацией, фибринозным воспалением в месте входных ворот. Возбудитель : семейство Corynebacteriacae, род. Corynebacterium, вид Сorynebacterium diphtheriaе. Вид Сorynebacterium diphtheria является патогенным и внутри вида делится на токсигенные и нетоксигенные штаммы. Возбудителем дифтерии является C. diphtheriae tox +. Нетоксигенные штаммы не вызывают дифтерию. Все остальные представители рода обозначаются общим термином дифтероиды, или коринеформные бактерии, они не отличаются от C. diphtheriae по морфологическим и культуральным, но отличаются по биохимическим свойствам. Все они условно- патогенные, входят в состав нормальной микрофлоры (кожа, носоглотка, гениталии). Дифтероиды могут вызывать ГВЗ самой различной локализации, в иммунокомпроментированном организме. Морфологические свойства : тонкие, изогнутые палочки с закругленными концами, утолщенными на концах (булавовидные утолщения), спор и капсул не образуют, ГР(+). Для возбудителя характерен полиморфизм, проявляющийся в появлении карликовых, кокковидных, толстых форм с колбовидными утолщениями на концах, нитевидные и ветвящиеся формы. Вид C. diphtheriae внутри вида подразделяются на 4 биовара: gravis, mitis,intermedius, belfanti. Биовар gravisобразует короткие, неправильной формы палочки с метахроматическими гранулами. Биовар mitis – образует длинные изогнутые палочки, содержащие волютиновые зерна. Биовар intermedius – образует крупные с бочкообразными очертаниями и внутренними перегородками клетки. Культуральные свойства: факультативные аэробы, для бурного роста нужен свободный доступ О2, температурный оптимум 360С -370С, оптимум рН 7,4 - 8,0. - на сывороточных средах колонии появляются через 10-12 часов; - наиболее распространенная теллуритовая среда. Антигенная структура: Выделяют О и К Аг; - термостапбильные О-Аг – дают перекрестные реакция с антисыворотками к Аг микобактерий и накардий; - липидные и полисахаридные фракции – представлены межвидовыми Аг- термолабильные; - поверхностные термолабильные К-Аг (нуклеопротеиды, белки) – обеспечивают видовую специфичность; - корд-фактор, входит в состав микрокапсулы, К-Аг способствует адгезии микробов в месте входных ворот, препятствует фагоцитозу; Факторы вирулентности возбудителя: - факторы адгезии, колонизации, инвазии; - токсический гликопептид, содержащийся в клеточной стенке возбудителя, содержащий коринемиколовую и коринемиколиновую кислоты, он оказывает разрушающее действие на клетки ткани в месте размножения возбудителя; - экзотоксин, обуславливающий патогенность возбудителя и характер патогенеза. Экзотоксин синтезируется в виде единой полипептидной цепи. Его активация осуществляется протеазой, которая разрезает полоипептид на два пептида – пептид А и пептид В. Пептид В распознает рецептор, связывается с ним и формирует внутримембранный канал, через который в клетку поступает пептид А и реализует биологическую активность токсина. К токсинообразованию способны лишь лизогенные штаммы C. diphtheriaе, которые содержат несущий tox-ген, ответственный за синтез токсина. Эпидемиология. Источник инфекции – больной человек или носитель токсигеных штаммов, реконвалесценты, выделяющие возбудителя.Пути передачи – воздушно-капельный; контактно- бытовой; алиментарный.Восприимчивость всеобщая. Этиопатогенез. Входными воротами являются слизистые оболочки ротоглотки, реже носа и гортани, конъюнктивы, половых органов, кожи. Местные изменения при дифтерии чаще всего локализуются в области ротоглотки. Для дифтерии наиболее присуще фибринозное воспаление, характеризующееся белым и серым фибринозным налетом (пленка). На многослойном плоском эпителии возникает фибринозно-дифтеретическое воспаление (ротоглотка, половые органы), которое обусловлено тем, что пленка прочно спаяна с подлежащей тканью. На цилиндрическом эпителии (дыхательные пути, нос) возникает крупозное воспаление при котором пленка легко отделяется. Дифтерия ротоглотки начинается с миндалин. Поверхность слизистой покрывается массой фибрина,с примесью лейкоцитов и большого количества коринебактерий. В патологический процесс вовлекаются лимфатические узлы, в которых обнаруживается возбудитель. Лимфатические узлы увеличены. Возбудитель остается в месте входных ворот, там размножаетс экзотоксин и ферменты, что приводит к формированию очагов воспаления. Местное действие токсина выражается в некрозе эпителия, развитии гиперемии сосудов, стаза крови в капиллярах, повышение проницаемости стенок сосудов. Все перечисленные процессы приводят к тому, что экссудат с фибрином выходит из сосудов. На поверхности слизистой фибриноген превращается в фибрин. Образовавшаяся фибриновая пленка спаивается с многослойным эпителием зева и глотки. При генерализации токсина по лимфатическим и кровеносным сосудам развивается интоксикация, регионарный лимфаденит и отек окружающих тканей. Токсинемия способствует возникновению микроциркуляторных нарушений и развитию воспалительно-дегенеративных процессов в различных органах. Клинические проявления : инкубационный период от 2 до 12 дней. - пленчатые налеты на миндалинах, которые распространяются на небную занавеску, язычок, мягкое и твердое небо; - повышенная температура, лихорадка, общее недомогание, боли в горле; - гиперемия миндалин с синюшным налетом; - увеличение лимфатических желез. Материал для исследования: - при дифтерии носоглотки - дифтиретическая пленка или отделяемое пораженной слизистой оболочки зева, носа, глотки. - от микробоносителей – отделяемое слизистой оболочки носа и зева. Микробиологическая диагностика 1.Бактериологическое исследование, включающее выделение возбудителя, его идентификацию и проверку токсигенности выделенной культуры. 2. Специфические АТ в сыворотке крови выявляют с помощью РА, РПГА, ИФА. 3.Для обнаружения дифтерийного токсина – РНГА с антительным эритроцитарным диагностикумом, ИФА. 4.ПЦР – обнаружение нуклеотидных последовательностей, которые кодируют синтез экзотоксина. Профилактика . 1.Вакцинопрофилактика - вакцинация АКДС с 3х месяцев жизни (3х кратно с интервалом 30-40 дней. Через 9-12 месяцев ревакцинация. Для ревакцинации в 6, 7, 11, 16 лет – вакцина АДС-М. 2. Вакцина Тетракок – профилактика коклюша, дифтерии, столбняка, полиомиелита. 3. Вакцина Д.Т. Вакс – содержит дифтерийный и столбнячный анатоксины. 4. ДТ- Адьюлт – содержит дифтерийный и столбнячный анатоксины 5.АКДС В – дифтерийный, столбнячный анатоксины, коклюшные и гепатитные компоненты. Ревакцинация проводится под контролем определения антитоксического иммунитета. Ставят РПГА с дифтерийным эритроцитарным анатоксическим диагностикумом. Сorynebacterium non diphtheriaе вызывают ОРВИ в 11%; бронхиты, пиелонефриты, уретриты, эндокардиты, кольпиты, дерматиты, пневмонии, артриты и др. Чаще выделяли С. pseudobliphthericum и C. xerasis, C. ulcrans. Часто Сorynebacterium non diphtheriaе выделяли из клинического материала в ассоциации со стафилококками и стрептококками. В этих случаях факторы патогенности и резистентности к антибиотикам более выражены. Этиотропная терапия Лечение антитоксической сывороткой, которую вводят в дозе 10000-50000 АЕ, в зависимости от тяжести заболевания и возраста. Ревакцинация проводится под контролем определения антитоксического иммунитета. Ставят РПГА с дифтерийным эритроцитарным анатоксическим диагностикумом. Сorynebacterium non diphtheriaе вызывают ОРВИ в 11%; бронхиты, пиелонефриты, уретриты, эндокардиты, кольпиты, дерматиты, пневмонии, артриты и др. Чаще выделяли С. pseudobliphthericum и C. xerasis, C. ulcrans. Часто Сorynebacterium non diphtheriaе выделяли из клинического материала в ассоциации со стафилококками и стрептококками. В этих случаях факторы патогенности и резистентности к антибиотикам более выражены. Вопрос 74. Туберкулез и микобактериозы. Характеристика возбудителя. Микробиологичекая диагностика. Специфическая профилактика. Возбудитель туберкулеза Ежегодно в мире от туберкулеза погибают 3 млн. человек и регистрируется 8-9 млн. новых случаев заболеваний. За последние 10 лет заболеваемость в России повысилась в 2 раза, летальность – в 1,5 раза. Широко распространены штаммы, обладающие множественной лекарственной устойчивостью. По данным ВОЗ лечение больных, у которых туберкулез вызван множественноустойчивыми штаммами, обходится в 100 раз дороже, а эффективность лечения не превышает 65%.У больных с ВИЧ, туберкулез встречается в 500 раз чаще. Возбудитель: семейство Mycobacteriaceae, род Mycobacterium. Микобактерии туберкулезного комплекса: M. tuberculosis; M. bovis; M. africanum; M. microti. Основная роль M. Tuberculosis – 95%; M. Bovis – 5%. Остальные представители рода обозначаются как нетуберкулезные микобактерии (НТМБ). НТМБ - это условно патогенные бактерии, широко распространены в природе, могут заселять верхние и нижние отделы респираторного тракта и мочевыводящую систему. В настоящие время около 20 видов НТМБ могут вызывать различные заболевания (поражения кожи, подкожной клетчатки, костей, мягких тканей, воспалительные процессы в легких, менингиты и 6 дессиминированные процессы). По последним данным у ВИЧ - инфицированных 50- 56% вторичные инфекции вызывают НТМБ. Март 1882 г. Р. Кох – выделил возбудителя туберкулеза. Это палочки средней величины, тонкие, изящные, полиморфные. Встречаются ветвящиеся формы, внутри - включения - зерна Муха. Спор и капсул нет. Неподвижные. Снаружи от клеточной стенки – слой гликопептидов (в виде паутинки) – МИКОЗИДЫ – это микрокапсула, один из факторов вирулентности. Очень плохо воспринимают анилиновые красители. Для окраска по методу Грама нужно 24 часа → Грам +. Применяется метод Циля – Нильсена. Микобактерия характеризуется особенностями строения клеточной стенки: многослойная; клеточная стенка устроена значительно сложнее, чем у всех прокариот; в состав кл. стенки входит большое количество липидов (более 60% сухого вещества). Липиды КС разнообразны, но есть характерные для МБ - миколовые кислоты; они либо находятся фиксированно в каркасе клеточной стенке, либо в свободном состоянии - сульфатиды. Все слои клеточной стенки пронизываются липоарабиномананном. Манозные концы отвечают за способность туберкулезной бактерии взаимодействовать с рецепторами макрофага. Перечисленные особенности играют ключевую роль в физиологии микобактерий. Эти особенности объясняют кислото-, щелоче- и спиртоустойчивость микобактерий, они объясняют неспособность окрашиваться анилиновыми красителями; возбудители, попавшие в микрофаги, устойчивы к биоцидным свойствам макрофагов. По типу получения энергии они аэробы. Культуральные свойства 1. Требовательны к питательным средам, фактором роста является глицерин; используют яично- глицериновые, картофельно-глицериновые синтетические среды. 2. Поскольку они растут медленно, для подавления сопутствующей флоры добавляют бриллиантовый зеленый или генциан-виолетт. 3. Бактерии туберкулеза растут очень медленно; время генерации 14-16 часов. Видимый рост появляется через 21-28 дней. Медленный рост - один из признаков для дифференциации M. tuberculosis от других быстро растущих микобактерий. Способность к медленному росту объясняется строениемклеточной стенки. Благодаря гидрофобности, питательные вещества очень медленно проникают в цитоплазму, что приводит к снижению метаболизма. Этим же объясняется плохое проникновение анилиновых красителей. На плотных средах дают колонии желтоватого цвета, не сливаются, поверхность не ровная. В жидких средах растут в виде пленки. Биохимические свойства Изучение биохимических свойств используется для определения видовой принадлежности. Антигенное строение : сложное. Антигены: белки и фосфолипиды клеточной стенки, корд- фактор и эндотоксин. Факторы вирулентности Основные факторы вирулентности M. tuberculosis начинают продуцировать, только когда они попадают в организм (макроорганизм). Когда они находятся во внешней среде, эти факторы репрессированы. К факторам вирулентности относят: сульфатиды, микозиды,липоарабиномананн. Туберкулезные бактерии являются факультативными внутриклеточными паразитами, которые размножаются внутри макрофагов. Этиология Источником является человек. Путь заражения воздушно-капельный, контактно- бытовой и алиментарный. При аэрогенном пути заражения туберкулезная палочка попадает в альвеолы, где происходит контакт с альвеолярными макрофагами; размножение в них сопровождается развитием неспецифической доиммунной гранулемы. Они легко проникают через барьеры в регионарные лимфатические узлы, затем кровь и другие органы. Развитие специфической гранулемы или туберкулемы происходит только через 2-3 недели и связано с подключением Т - сенсибилизированных лимфоцитов. Эта специфическая гранулема еще называется первичным аффектом. В процессе вовлекаются регионарные лимфатические сосуды и узлы. Все вместе составляет первичный туберкулезный комплекс. У большинства людей он самоизлечивается, первичный аффект подвергается фибролизу и кальцификации. В других случаях (у детей) самоизлечение не наступает и развивается острый первичный туберкулез. Это всегда острый процесс у лиц, которые ранее не имели контакт с туберкулезными бактериями. Вторичный туберкулез – это хронический процесс, он возникает не ранее чем через 5 лет после первичного туберкулеза. Хронический туберкулез не излечивается без этиотропной терапии; хронический процесс - это всегда иммунопатология, относится к внутримакрофаговым инфекциям. Вторичный туберкулез в 80% случаев возникает в результате реактивации эндогенной инфекции и лишь 20% случаев является результатом экзогенного заражения. Чаще заболевание развивается при стрессе, плохих жилищных условиях. Причины, по которым происходит активация эндогенного туберкулеза, расплывчаты, вероятность его развития нельзя предсказать. Клиника Туберкулезный процесс может развиваться в любых органах: легкие, кости, мочеполовая система и др. Наиболее частая локализация – легкие Иммунитет Иммунитет при туберкулезе нестерильный, не стойкий. Антитела не играют защитной роли, решающую роль в механизме играет инфекционная аллергия. |