Бактериальной клетки. Основные морфологические формы бактерий и методы их изучения. Принципы классификации бактерий по Берджи
 Скачать 3.01 Mb.
|
|
Лабораторная диагностика 1.Бактериологическое исследование: 2 мазка (по Цилю-Нильсену и флюорохромами). В процессе лечения они могут терять клеточную стенку ( превращаясь в L- форму). С потерей клеточной стенки они теряют кислото- щелочоустойчивость, не обнаруживаются при окраске по Цилю-Нильсену. 2. Бактериологическое исследование: посев на специальные среды (28 дней). Определяется чувствительность к противотуберкулезным препаратам. 3. Серодиагностика. ИФА. Антитела не играют защитной роли, но они образуются. 4. ПЦР. 5. Аллергические диагностические пробы. Этиотропная терапия Возбудители природно-устойчивы к большинству антибиотиков. Выделяют особую группу противотуберкулезных препаратов. Основная комбинация в настоящее время – рифампицин + изониазид. Однако процент штаммов, обладающих лекарственной устойчивостью, быстро растет. Для лечения применяется комбинированная терапия, как минимум 2 препарата, лечение длительное (6 месяцев и более). Специфическая профилактика Существует вакцина БЦЖ – живая вакцина (бактерии Кальметта и Герена). Вводится в роддоме, на 3-5 день после рождения. Ревакцинация проводится в школе, под контролем пробы Манту. Ревакцинируют лиц с отрицательной пробой Манту. и лабораторной диагностики, специфической профилактики и этиотропного лечения дифтерии и туберкулеза. Вопрос 75. Микоплазмозы. Характеристика возбудителей респираторных и урогенитальных микоплазмозов. Микробиологическая диагностика. Микоплазмы - это прокариоты, отличительной биологической особенностью которых является отсутствие регидной клеточной стенки; это самостоятельная группа живых организмов, они не произошли ни от каких бактерий и не могут реверсировать в какие-либо виды бактерий. Они принадлежат семейству Mycoplasmatacea. Это семейство включает два рода, играющих определенную роль в патологии человека. ( Mycoplasma –включает 07 видов, Ureoplasma – 7 видов). Основные биологические особенности микоплазм: - отсутствует клеточная стенка, ее функции выполняет цитоплазматическая мембрана (ЦПМ). - микоплазмы полиморфны, пластичны и характеризуются осмотической хрупкостью. Они имеют малые размеры и проходят через фильтры -0,2 мкм. - устойчивы ко всем антибиотикам - ингибиторам клеточной стенки (β –лактамным антибиотикам и гликопептидам). - не окрашиваются по Граму, для их изучения используют окраску по Романовскому –Гимзе. - имеют самые малые размеры генома для прокариот - 450-500 МД, что ограничивает их биосинтетические возможности - требовательны к питательным средам, в силу ограниченных биосинтетических способностей; - низкое соотношение пар Г-Ц в ДНК; у большинства видов около 30% - имеют минимальный набор органелл: нуклеоид, рибосомы и ЦПМ. - важной биологической особенностью микоплазм является их способность паразитировать на мембране клетки, т.е. они являются мембранными паразитами, с чем во многом связан патогенез микоплазма - инфекции. -микоплазмы могут изменять антигенную специфичность клеток макроорганизма, что ведет к развитию аутоиммунных процессов. - микоплазмы имеют антигены, перекрестно реагирующие с тканями организма человека. Морфология -обладают выраженным полиморфизмом. Имеют различные формы. При выращивании на плотных питательных средах в основном имеют круглые формы. -В мазке из одной колонии одновременно можно увидеть любые формы. -По морфологии микоплазмы разных видов не отличаются. Культуральные свойства -они очень требовательны к питательным средам; растут на средах с добавлением 30% сыворотки или на основе сердечно-мозгового перевара. -видимые колонии микоплазм на поверхности агара появляются только на 3-5 сутки; уреоплазм - через 24-48 часов; 6 -колонии очень мелкие (диаметр 0,1-0,3 мм. у уреоплазм 0,01-0,03 ) и видны только под большим увеличением микроскопа; - колонии более плотные в центре с ажурной периферией – «яичница- глазунья», врастают в среду; -колонии микоплазм разных видов не отличаются друг от друга. В жидкой среде они растут, давая легкую аполисценцию. Определение ферментативных свойств используются для определения видовой принадлежности. Способы репродукции множественны: почкование, сегментация ветвистых форм, бинарное деление. Факторы вирулентности Микоплазмы широко распространены во внешней среде, из 107 видов микоплазм 16 входят в состав нормальной микрофлоры; основные биотопы – полость рта, нижние дыхательные пути, слизистая мочеполового тракта; в настоящее время только один вид M. pneumonia считается патогенным все остальные относятся к условно патогенным. Наиболее часто вызывают заболевания у человека M. hominis, M. genitalium, M. urealytikum. Патогенным потенциалом обладают M. fermentans и M. penetrans. В качестве основного фактора вирулентности микоплазм рассматриваются их способность адсорбироваться на рецепторах клетки хозяина и взаимодействовать с ними. Некоторые виды микоплазм имеют специальные органеллы для связывания с клеткой. Предполагается наличие нейротоксинов у некоторых штаммов M. pneumonia. Экзотоксин имеют M. pneumonia и M. fermentans. Эндотоксин микоплазмы пневмонии повреждает реснички респираторного эпителия и нейтрофилы человека. Гемолизины – микоплазмы пневмонии вызывает β-гемолиз эритроцитов человека. Микоплазмы могут продуцировать ферменты агрессии и защиты: нейроминидазу, протеазы, нуклеазы. М. urealytikum разрушает ДНК сперматозоидов. Микоплазмы, расположенные внутри клеток и паразитирующие на мембране клеток, резистентны к механизмам защиты хозяина. Микоплазмы обладают иммуномодулирующим действием. Особенности микоплазмозов: - не имеют собственных клинических проявлений; - заболевание может протекать остро, но чаще всего микоплазмозы имеют хроническое рецидивирующее течение; характерно длительное носительство микоплазм в составе ЦИК - обладают способностью “ускользать” от иммунного надзора хозяина. 7 - чаще они развиваются на фоне имунносупресии и сопровождаются различными иммунопатологическими реакциями - микоплазмы могут проникать в клетку где и встречаются с вирусами - микоплазмы могут поражать любые органы и ткани M. pneumoniaе – вызывает атипичную пневмонию, бронхиты и т. д. Источник - человек, путь передачи воздушно-капельный. Внелегочные проявления M. pneumoniaе инфекции: гематологические (гемолитическая анемия, тромбоцитопения) неврологические (менингит, менингоэнцефалит, периферические и черепно- мозговые невриты) дерматологические (полиморфная эритема) желудочно-кишечные (гастроэнтерит) мышечно-скелетные (миалгия, артралгия, полиартрит) сердечнососудистые (перикардит, миокардит) генерализованные проявления. Микробиологическая диагностика: -Серодиагностика -ПЦР -Иммуноиндикация Урогенитальные микоплазмозы Источник - человек, путь передачи – половые контакты, относится к ИППП. Возбудители - M. hominis, M. genitalium, M. urealytikum; вызывают поражения моче- полового тракта. Осложнения - патология беременности, родов и заболевания новорожденных. Микробиологическая диагностика: - иммуноиндикация - культуральный метод – микоплазмы считаются возбудителями, если их количество составляет ≥ 104 КОЕ/мл. Специфической профилактики нет. Этиотропная терапия: макролиды тетрациклины фторхиналон 76. Респираторные и урогенитальные хламидиозы. Характеристика возбудителей. Микробиологическая диагностика. Хламидии представляют собой большую группу облигатных внутриклеточных энергетических паразитов. Зависимость хламидий от клеток объясняется их неспособностью синтезировать аденозинтрифосфат (АТФ). Это - энергетические паразиты. Хламидии неподвижные, кокковидные, Гр (-) микроорганизмы. Спор и капсул не имеют. Размножаются в цитоплазме клеток хозяина, проходя определенные стадии развития. Хламидии содержат ДНК, рибосомы, клеточную стенку. Антигенное строение сложное. Они имеют: 1. Общий, групповой, родоспецифический антиген, представленный термостабильными липополисахаридами (LPS) - эндотоксин. 2. Видоспецифический и типоспецифический антигены – позволяющие дифференцировать хламидии на серовары. 3. Основной белок наружной мембраны МОМР (ОМП 1 ) – это структурный белок, который формирует мембранные поры ( порины). 4. Общий протеин наружней мембраны (ОМП - 2). 5. Белок теплового шока хламидий hsp 60. Существуют в 3 основных формах: 1. Элементарные тельца - внеклеточная собственно инфекционная форма хламидий, представляющая из себя овальные ,электронно - плотные образования, имеющая компактный нуклеоид и ригидную трехслойную клеточную стенку. 2. Инициальные (ретикулярные) тельца – форма внутриклеточного существования хламидий в виде цитоплазматических включений и обеспечивающая их репродукцию. Эта вегетативная форма хламидий. 3. Промежуточные и персистентные формы хламидий. Хламидии относятся к самостоятельному порядку Chlamydiales семейству Chlamydiaceae, включающему 2 рода. Это род Chlamydophyla и род Chlamydia. Род Chlamydophyla включает следующие виды : Chlamydophyla pneumoniae и Chlamydophyla pssittaci. Род Chlamydia вид Chiamydia trachomatis, который делится на два биовара. Первый биовар – трахомы и паратрахомы. Второй биовар – это биовар венерической лимфогранулемы. Урогенитальные хламидиозы. Заболевание, вызываемое C. Trachomatis относится к антропонозам. Основной механизм заражения - контактный, путь передачи - половой. Источник инфекции - больные люди. Урогенитальные хламидиозы относятся к числу ИППП. Заболевание широко распространено. Характеризуется разнообразными проявлениями, острыми и хроническими изменениями тканей в области паховых узлов. Хламидии не являются представителями нормальной микрофлоры, поэтому их обнаружение у здоровых людей (без клинических проявлений) является доказательством хронического бессимптомного течения хламидиоза. Развитие болезни складывается из нескольких стадий: -заражение ; -первичная стадия – поражения в области половых органов. Период между заражением и первичными проявлениями поражений (папулы, пузырьки) длится 10-15 дней, иногда дольше. Первичные поражения обычно заживают без лечения. -вторичная стадия – поражения лимфатических узлов и окружающих тканей. Вторичный период наступает через 5- 30 дней, он характеризуется поражением лимфатических узлов. В последующем болезнь прогрессирует наступает 3,4 стадии. Болезнь продолжается от 2 месяцев до нескольких лет Образовавшие рубцы могут быть причиной нарушения лимфообращения в половых органах, промежности, области заднего прохода. Могут появляться паппиломатозные разрастания, абсцессы, язвы. Заболевание протекает менее остро чем гонорея, а у 50-60% - вообще бессимптомно. У мужчин это уретриты, простатиты, эпидидимиты. У женщин – вульвовагиниты, эндометриты, сальпингиты. Угроза хламидийной инфекции состоит в следующем – протекает бессимптомно и ведет к ведет к бесплодию у мужчин и женщин. В сыворотке крови переболевших формируются противохламидийные антитела, но они не защищают от повторного заражения, так как не являются протективными. После перенесенного заболевания иммунитет не формируется. Лабораторная диагностика. Поскольку хламидии - это внутриклеточные паразиты, то для их культивирования используют заражение культуры ткани. Алгоритм бактериологического исследования. 1 этап – иммуноиндикация – РИФ. Это скрининговый метод, который недостаточен для постановки диагноза. Так как с помощью этого метода мы обнаруживаем АГ хламидий. Это не значит, что они живые и активно размножаются. При положительном результате иммуноиндикации возможно 2 варианта. 1.вариант – это культуральный метод, 2 вариант серодиагностика - ИФА определение классов иммуноглобулинов А.М,G. За острый процесс говорит обнаружение иммуноглобулинов, класса А и М, обнаружение иммуноглобулинов G - может быть инфицирован в детском возрасте. Профилактика. Специфической профилактики нет. Этиотропная терапия – макролиды и тетрацтклины. Если хламидии находятся в персистентной форме, они недоступны для антибиотиков и АТ, поэтому в плане терапии рекомендуют АТ. Респираторные хламидиозы. Следующий род Clamydophyla включает два вида – Ciamydophyla pneumoniaе, Clamydophyla pssittaci. Chlamydia pneumoniaе вызывает у человека пневмонии. Это антропоноз. Источник ифекции - человек. Путь передачи – наиболее часто воздушно – капельный. Помимо пневмонии могут вызывать респираторные заболевания. Считается, что человек может многократно болеть и к 30 годам практически у подавляющего большинства обнаруживаются АТ к этому возбудителю. Основная клиническая форма болезни – мелкоочаговая пневмония. Возбудитель обладает тропизмом к эпителию респираторных путей - вызывая бронхопневмонии. Инкубационный период 1-2 недели. Для начальной стадии типичны поражения верхних отделов дыхательных путей, позднее к ним присоединяется бронхопневмония. Хламидии попадают в легкие человека через верхние дыхательные пути. Обладая выраженным тропизмом к эпителию респираторного тракта, они вызывают воспаление верхних отделов респираторного тракта и легких, вызывая фарингит, бронхит, синусит). Элементарные тельца имеют копьевидную форму и своим заостренным концом они прикрепляются к эпителиальным клеткам респираторного тракта. Токсины хламидий и продукты распада клеток организма вызывают патологические изменения в различных органов и системах. Clamydia psittaci. Заболевание относится к зооантропонозам. Источником являются птицы, в основном это попугайчики. В настоящее время участились случаи пситтакоза. Путь передачи воздушно - капельный. Этот возбудитель при таком пути передачи способен вызывать пневмонию. Возбудитель чаще попадает в организм через слизистые оболочки верхних дыхательных путей. Обладая эпителиотропностью, он проникает в эпителий бронхов и альвеол, где размножается разрушая клетки. Развивается воспаление. Токсины микробов и продукты распада клеток вызывают интоксикацию. Хламидии попадают в кровь (бактериемия), разносятся по организму, поражая паренхиматозные орган, ЦНС, сердечно - сосудистую систему, суставы. При орнитозе имеет место аллергизация организма. Но в последние годы появились данные о том, что передача инфекции возможна и алиментарным путем. В этих случаях Clamydia psittaci могут вызвать различные по клинике проявления – генерализованные хламидийные инфекции. Лечение сульфамидаминам не эффективно. Используют антибиотики тетрациклин, макролидды. Профилактика – специфическая мало разработана. Общая профилактика заключается в осуществлении комплекса ветиринарно – санитарных мероприятий. 77.Риккетсиозы. Характеристика возбудителей. Эпидемический сыпной тиф. Бартоннелезы. Риккетсии- это прокариоты. Отличительной биологической особенностью их является то, что они являются облигатными внутриклеточными паразитами. Изучение риккетсий показало, что они утратили способность к самостоятельному синтезу ферментов, что и побудило их перейти к паразитическому образу жизни с тем, чтобы получать эти вещества в готовом виде. Это метаболические паразиты. Классификация.В настоящее время термин риккетсии объединяет группу близкородственных организмов, которые делятся на три группы L,B,G. В свою очередь L делится L1 L2 подгруппы. Итак, L1 подгруппа семейство Rickettsiaceae которое делится на два триба: триб – Ehrlichieae и триб – Rickettsia Триб Ehrlichiaeae включает род , Ehrlichiea, который делится на виды canis и sennetsu. Триб Rickettsia включает род, который в свою очередь делится на 2 группы: 1группа – это группа тифов. Сюда относятся Rickettsia prowazekii – возбудители эпидемического сыпного тифа и Rickettsia typhi – возбудители крысино – блошиного тифа. 2 группа – это группа пятнистых лихорадок или группа клещевых риккетсиозов. Сюда относят много видов. Назовем основные : Rickettsia rickettsii – возбудители пятнистой лихорадки скалистых гор и Rickettsia conori – возбудители средиземноморской лихорадки ( два года назад у наших соседей в Астрахане была вспышка этого заболевания.). Подгруппа L2 включает семейство Bartonellaceae род Bartonella. - два вида Bartonella quintana – возбудители траншейной или 5- дневной лихорадки и Bartonela hensele – вызывает болезнь кошачьих царапин. Следующая группа – y группа. Сюда относят род Coxiella и вид Coxiella burnetii – возбудители Ку - лихорадки (встречается в Саратовской области.) Группа B – у человека заболеваний не вызывает. Морфология носит полиморфный характер. Различают 4 формы : Форма А – кокковидные, овальные клетки, размером) О,3- О,4 мкм. Форма В – палочковидные – 1-1,8 мкм. Форма С – бациллярные – 3 – 5 мкм. Форма Д – нитевидные ( ветвящиеся ) – 10 – 40. мкм. При этом формы А и В встречаются при остром течении заболевания, а С и Д лишь при начальных стадиях развития , либо при хронических формах.При обострении заболевания формы С и Д начинают усиленно размножаться и превращаться в В и А. Взаимодействие риккетсий с клеткой 1. Адгезия на рецепторах чувствительных клеток – эндотелиальные клетки капилляров. 2. В месте адгезии возникает инвагинация и риккетсии попадают в клетку путем пиноцитоза в составе вакуоли, стенки которой образованы мембраной клетки. В дальнейшем одни продолжают свой цикл внутри вакуоли, а другие – свободно лежат в цитоплазме. После этого они подрастают и делятся обычным бинарным делением (ф .А, В, С) , а форма Д размножается путем дробления в результате образуются формы А, В, С. Далее происходит разрыв мембраны клетки и риккетсии попадают в межклеточное пространство с тем, чтобы заражать новые клетки. Т.О. в пользу того , что риккетсии – это бактерии, говорит следующее: Они имеют клеточную организацию. Имеют два типа нуклеиновых кислот. Репродукция осуществляется на клеточном уровне - (а не на генетическом, как у вирусов). По своей организации риккетсии сходны с Гр (-) бактериями, спор нет, капсул нет, жгутиков нет. |