Билет 1 Вопрос Строение бактериальной клетки
 Скачать 3.25 Mb.
|
|
Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) становятся патогенными только при определенных условиях: Комплекс должен быть образован в умеренном избытке Аг (антигена) и иметь растворимую форму; Должно произойти повышение проницаемости сосудистой стенки В состав комплекса должны входить такие антитела, которые способны фиксировать и активировать комплемент; Должны быть созданы условия, способствующие длительной циркуляции комплекса. Это возможно при длительном поступлении в организм или образовании в нем антигенов или при нарушении механизмов, с помощью которых происходит очищение крови от комплексов. Комплексы, образующиеся местно в тканях, задерживаются обычно в месте своего образования более длительное время. Там, где проницаемость сосудов повышена, там и происходит преимущественное отложение ЦИК. Они обнаруживаются в сосудах, их базальных мембранах и окружающих тканях. Проявления в полости рта Стоматиты, хейлиты, глосситы. При легкой степени Проявляются зудом, жжением, нарушением вкусовой чувствительности, сухостью и болезненностью при приеме пищи. гиперемия, отек слизистой, на что указывают отпечатки зубов на боковых поверхностях языка и щек. При этом заболевании применяется как местное лечение в виде полосканий антисептическими средства и приема обезболивающих препаратов, так и общее: отмена лекарства При более тяжелой степени проявляется гиперемией и отечностью неба, десен, губ, языка и щек, появлением пузырей с прозрачным содержимым, после вскрытия которых образуются эрозии, покрытые фибринозным налетом. Эти симптомы сопровождаются болезненностью, которая усиливается при приеме пищи и разговоре. Может появиться слабость, потеря аппетита, повышение температуры тела до 38С. Так же в запущенных случаях На слизистых сильная гиперемия и отечность с очагами некроза желтовато-серого цвета. Наблюдается некроз межзубных сосочков, слизистая оболочка покрыта грязно-серым фибринозным налетом, после снятия которого обнажается язвенная, кровоточащая поверхность. Лечение основано на отмене препарата, вызвавшего аллергию, назначении антигистаминных средств, а в тяжелых случаях назначают кортикостероиды, Местное лечение включает антисептическую обработку, удаление некротических масс, путем использования протеолитических ферментов, обезболивающие средства, кератопластики. Вопрос 3. вирусные гепатиты,передаваемые фекально-оральным способом,классификация,свойства.методы исследования Вирус гепатита А Семейство Picornaviridae Род Hepatovirus Сферическая форма Геном– однонитевая (+) РНК Тип симметрии капсида – кубический Вирусный гепатит А - острая энтеровирусная циклическая инфекция с преимущественно фекально-оральным механизмом заражения. Вирус гепатита А устойчив к окружающей среде: при комнатной температуре может сохраняться в течение нескольких недель, а при 4°С - несколько месяцев. Однако его можно инактивировать кипячением в течение 5 минут, автоклавированием, ультрафиолетовым облучением или воздействием дезинфектантов. Источник инфекции - чаще всего больной человек на начальной стадии Ведущий механизм заражения ГА - фекально-оральный, реализуемый водным, пищевым и контактно-бытовым путями передачи. Существует возможность реализации данного механизма и половым путем. Наиболее часто это происходит при повторном применении игл и шприцев внутривенными пользователями наркотиков. Культивирование вирус выращивают в культурах клеток. Цикл репродукции длинный, цитопатический эффект не выражен. Эпидемиология Вирус выделяется с фекалиями начиная со второй половины инкубационного периода . С появлением желтухи выделение вируса снижается. Вирус распространен повсеместно , но в основном в местах с дефицитом воды, плохими системами канализации м низким уровнем гигиены населения. Болеют в основном дети от 4 до 15 лет. Патогенез После заражения репликация вирусов происходит в кишечнике, а оттуда через портальную вену они проникают в печень и реплицируются в цитоплазме гепатоцитов. Повреждение гепатоцитов происходит не за счет прямого цитотоксического действия, а в результате иммунопатологических механизмов. Клиника Инкубационный период 15-50 дней, чаще около месяца. Начало острое с повышением температуры и явлениями со стороны жкт(тошнота рвота). Возможно появление желтухи на 5-7 день. Продолжительность 2-3 недели. Диагностика материал для исследования - сыворотка и испражнения. Диагностика основана на определении в крови IgM с помощью ИФА, РИА и иммунной электронной микроскопии. Так же можно обнаружить вирусный антиген в фекалиях Лечение - симптоматичекое Профилактика - повышение санитарной культуры населения, улучшение водоснабжения и условий приготовления пищи. Иммуноглобулин по эпидемическим показаниям. Иммунитет сохраняется около 3 месяцев. Применяется инактивированная культурная концентрированная вакцина. Инактивированный формалином вирус гепатита А, накопленный на культуре клеток Схема вакцинации: двукратно, 0 день – 6 (12 или 18) месяцев. Вирус гепатита Е Семейство Hepeviridae Род Hepevirus Hepatitis E virus Сферическая форма Геном – однонитевая (+) РНК Тип симметрии капсида – кубический Эпидемиология и клиника - источник - больные люди. Основной путь передачи - водный. Инкубационный период 2-6 недели. Умеренное поражение печени, интоксикация, желтуха. Прогноз благоприятный, кроме беременных - у них может привести к летальному исходу. Иммунитет после заболевания стойкий Диагностика - серологический метод - в сыворотке, плазме крови с помощью ИФА определяют - антитела к вирусу. молекулярно-генетический метод - применяют ПЦР для определения РНК вируса в кале и сыворотке крови больных в острой фазе инфекции. Лечение - симптоматическое. беременным- специфический иммуноглобулин. Профилактика - улучшение санитарно - гигиенических условий и снабжение качественно питьевой водой. Неживые цельновирионные вакцины Билет 13. Вопрос 1 Отличия Грам+ от Грам- Группа Грам+ бактерии Грам- бактерии Окраска по Граму фиолетовые розовые Толщина КС 20- 60 нм 10- 20 нм Процентное содержание липидов 1,6% 2-22,6% Структура пептидогликана Пептиды пептидогликанов связаны через пептидный мостик из 5 остатков глицина Ацетилмурамовые кислоты каждой гликановой цепи связаны через два однотипных тетрапептида Процентное содержание пептидогликана 40-90% Многослойный 5-10% Однослойный Наличие тейхоевых кислот Имеются Отсутствуют Особенность выделения ферментов Ферменты выделяются непосредственно в окружающую среду Ферменты выделяются в периплазматическое пространство, находящееся между клеточной стенкой и цитоплазматической мембраной Представители Все болезнетворные кокки, кроме гонококка и менингококка, бациллы и клостридии Энтеробактерии, вибрионы, трепонемы Вопрос 2 . Серологические реакции, их применение Взаимодействие антитела с антигеном являются основой диагностических реакций в лабораториях. Реакция между АГ и АТ состоит из специфической и неспецифической фазы. В специфическую фазу происходит быстрое специфическое связывание активного центра антитела с детерминантой АГ. Неспецифическая фаза проявляется видимыми физическими явлениями (образование хлопьев, «зонтика», линии преципитации в виде помутнения). Иммунные реакции используют при диагностических и иммунологических исследованиях у больных и здоровых людей. С этой целью применяют серологические методы (от serum– сыворотка). В микробиологии широко применяются реакции агглютинации, преципитации, нейтрализации, реакции связывания комплемента, иммуноферментный анализ, иммунофлюоресцентный метод, иммуноблотинг. Реакция агглютинации – РА, при которой происходит связывание антителами корпускулярных антигенов (бактерий, эритроцитов), она протекает при наличии электролитов. РА используют для: 1. определения антител в сыворотке крови больного, например при бруцеллезе, брюшном тифе и паратифах, туляремии, коклюше; 2. определения возбудителя, выделенного от больного; 3. определения групп крови. Применяются различные варианты реакции агглютинации: развернутая,ориентировочная Для определения у больного антител ставят в пробирках развернутую реакцию агглютинации: к разведениям сыворотки крови больного добавляют диагностикум (взвесь убитых микробов) и через несколько часов инкубации при 37 0 С отмечают наибольшее разведение сыворотки (титр сыворотки), при котором произошла агглютинация. Если необходимо определить возбудитель, выделенный от больного, ставят ориентировочную реакцию агглютинации на предметном стекле. К капле диагностической агглютинирующей сыворотки в разведении 1:10 или 1:20 добавляют чистую культуру возбудителя. Рядом ставят контроль: вместо сыворотки наносят каплю физиологического раствора. При появлении в капле с сывороткой и микробами хлопьевидного осадка ставят развернутую реакцию агглютинации в пробирках. Одновременно учитываются контроли: сыворотка, разведенная изотоническим раствором натрия хлорида должна быть прозрачной, взвесь микробов в том же растворе равномерно мутной без осадка. В ориентировочной РА пользуются адсорбированными агглютинирующими сыворотками, из которых удалены перекрестно реагирующие антитела. Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА) основана на использовании эритроцитов с адсорбированными на их поверхности АГ или АТ, взаимодействие которых с соответствующими АТ или АГ сыворотки крови больных вызывает склеивание и при положительных результатах происходит выпадение эритроцитов на дно полистироловой пластины в виде фестончатого осадка. При отрицательной реакции эритроциты оседают на дно пластины в виде «пуговки».РНГА применяют для диагностики инфекционных болезней (дифтерии, дизентерии, сальмонеллеза, туляремии и др.), определения гонадотропного гормона в моче при установлении беременности, для выявления повышенной чувствительности к лекарственным препаратам, гормонам. Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) основана на блокаде, подавлении антигенов вирусов антителами иммунной сыворотки, в результате чего вирусы теряют свойство агглютинировать эритроциты. РТГА применяют для диагностики многих вирусных болезней (гриппа, кори, краснухи, клещевого энцефалита). Реакция преципитации– это формирование и осаждение комплекса растворимого молекулярного антигена с антителами с антителами в виде помутнения, называемого преципитатом. Реакции преципитации ставят в пробирках (р.кольцепреципитации), в гелях, питательных средах. Трупный материал, кожевенное и меховое сырье, из которого трудно выделить сибиреязвенные бациллы, подвергают серологическому исследованию с помощью реакции термопреципитации (реакция Асколи).Реакцию кольцепреципитации проводят в узких преципитирующих пробирках с иммунной сывороткой, на которую наслаивают растворимый антиген. В положительных результатах на границе этих двух растворов образуется непрозрачное кольцо преципитата.Реакция преципитации в агаре для определения дифтерийного экзотоксина……. Реакция связывания комплемента (РСК). Для постановки реакции связывания комплемента необходимы следующие ингредиенты: 1)испытуемая сыворотка (АТ); 2)антиген – убитая взвесь возбудителей того или иного заболевания; 3) комплемент; 4) гемолитическая сыворотка; 5) эритроциты барана. РСК заключается в том, что при соответствии друг другу антигены и антитела образуют иммунный комплекс, к которому присоединяется комплемент, т.е. происходит связывание комплемента комплексом антиген-антитело. Если же комплекс антиген-антитело не образуется, то комплимент остается свободным. РСК проводят в две фазы: 1-я фаза – инкубация смеси, содержащей три компонента антиген + антитело+ комплемент; 2-я фаза индикаторная – выявление в смеси свободного комплемента путем добавления к ней гемолитической системы, состоящей из эритроцитов барана и гемолитической сыворотки, содержащей к ним антитела. В положительной реакции из-за связывания комплемента с комплексом антиген-антитело гемолиз эритроцитов не произойдет и они осядут на дно пробирки в виде «зонтика». В отрицательных случаях связывание комплемента с комплексом антиген-антитело не происходит, он остается свободным и присоединятся к комплексу эритроции-гемолитическая сыворотка, тем самым вызывая гемолиз эритроцитов. РСК применяют для диагностики многих инфекционных заболеваний, в частности сифилиса (р.Вассермана), сыпного тифа и др. Реакция нейтрализации проводят путем введения смеси антиген-антитело лабораторным животным. Например, для обнаружения ботулинического токсина белым мышам подкожно или внутрибрюшинно вводят вытяжку из остатков пищи (грибы) с антитоксическими ботулиническими сыворотками типов А, В, С, Е. Сыворотки получают из крови лошадей или крупного рогатого скота гипериммунизированых ботулиническими токсинами. При отсутствии у животных повреждающего действия микроорганизмов, их токсинов (мышь осталась жива) говорят о нейтрализующем действии иммунной сыворотки и ,следовательно, о специфичности взаимодействия комплекса АГ-АТ. Реакция иммунофлюоресценции РИФ (метод Кунса). Прямой метод РИФ основан на том, что антигены тканей или микробы, обработанные иммунными сыворотками с антителами, меченными флюорохромами, способны светиться в УФ-лучах люминисцентного микроскопа. Бактерии в мазке, обработанные такой люминисцирующей сывороткой светятся в виде каймы зеленого цвета. Данный метод является методом экспресс- диагностики для выявления антигенов микробов или антител. Иммуноферментный метод (ИФА). Принцип метода следующий: на твердофазном носителе (поверхность лунок полистиролового планшета) фиксируется АГ возбудителя инфекции, антитела к которому необходимо выявить. Антиген, иммобилизованный на поверхности твердого носителя, называют иммуносорбентом. В ходе инкубации иммуносорбента с испытуемой сывороткой при наличие в ней АТ к данному АГ происходит их связывание в комплекс «антиген-антитело». Затем следует инкубация с меченными ферментом антителами к иммуноглобулинам человека (конъюгатом), в ходе которой на поверхности носителя происходит присоединение к комплексу антител, меченых ферментом ( в качестве фермента чаще всего используется пероксидаза хрена). Конъюгат получают на основе поликлональных антивидовых АТ, например кроличьи АТ или моноклональных АТ, направленных против человеческих иммуноглобулинов определенного классаM,G,A. В дальнейшем при добавлении субстрата происходит его взаимодействие с ферментом, в результате чего развивается цветная реакция, интенсивность которой зависит от количества связанных сывороточных АТ. При использовании пероксидазного конъюгата в качестве субстрата применяют перекись водорода в сочетании с ортофенилдиамином. Результаты реакции оцениваются спектрофотометрически с выводом цифровых данных, что исключает субъективность оценки антител. ИФА применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных болезней, в частности для диагностики ВИЧ-инфекций, гепатита В, цитомегаловирусной инфекции, герпесной, токсоплазменной, а также определения гормонов, ферментов, лекарственных препаратов и других биологически активных веществ. Иммунный блоттинг.В России в настоящее время стандартной процедурой лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции является обнаружение антител к ВИЧ с последующим подтверждением их специфичности в реакции иммунного блоттинга. Обнаружение антител к ВИЧ включает два этапа. На первом этапе проводится выявление суммарного спектра антител (ИФА), на втором этапе методом иммунного блоттинга проводится определение антител к отдельным белкам вируса, иммобилизованным на нитроцеллюлозную мембрану. Отрицательными считаются сыворотки, в которых не обнаруживается антител ни к одному из белков. Вопрос 3. Грибы рода Candida Род Candida включает около 150 видов грибов. Семь основных видов — C.albicans, C.tropicalis, C.kruseu, C.kefyr, C. glabrata, C.guilliermondii, C.parapsilosis Морфология и физиология овальные почкующиеся дрожжевые клетки, псевдогифы и септированные гифы. Аэробы. На простых питатльных средах при темп. 25-27градусах образуют дрожжевые и псевадогифальные клетки. Колонии выпуклые, блестящие, сметанообразные, непрозрачные с различными оттенками.Д Для C.albicans характерно образование "ростковой трубки" из почки при помещении их в сыворотку. Так же образует хламидоспоры- толстостенные двухконтурные крупные овальные споры. В тканях кандиды растут в виде дрожжей и псевдогиф. Эпидемиология Кандиды обитают на растениях, плодах, являются частью нормальной микрофлоры млекопитающих и человека. Виды рода Кандида, являющиеся частью нормальной микрофлоры могут вторгаться в ткань и вызывать кандидоз у пациентов с ослабленной иммунной защитой. Реже передается детям при рождении, при кормлении грудью. При передачи половым путем - урогенитальный кандидоз. Патогенез и клиника Развитию кандидоза способствуют неправильное назначение антибиотиков, обменные и гормональные нарушения, иммунодефициты, повышенная влажность кожи, повреждения кожи и слизистых. Наиболее часто кандидоз вызывает C.albicans которая обладает такими факторами вирулентности, как: продукция протеазы и поверхностных интергриноподобных молекул для адгезии к экстрацеллюлярным матриксным белкам. При кандидозе рта на слизистых оболочках развивается так называемая молочница с развитием белого творожистого налета, возможно развитие атрофии или гипертрофии, гиперкератоз сосочков языка. При кандидозе влагалища - отек и эритема слизистых оболочек, белые творожистые выделения. Поражение кожи чаще развивается у новорожденных, на туловище и ягодицах мелкие узелки. |