Билет 1 Вопрос Строение бактериальной клетки
 Скачать 3.25 Mb.
|
|
Фагоцитоз – это древнейшая форма неспецифичной защиты, которая представляет собой процесс активного поглощения и переваривания клетками организма микробов или других посторонних тел, которые попали к нему. Фагоцитами называют клетки организма, которые способные к фагоцитозу. Среди фагоцитов различают профессиональные и факультативные фагоциты. К профессиональным фагоцитам принадлежат нейтрофилы, моноциты крови и макрофаги тканей. Полиморфноядерные нейтрофилы (микрофаги) обеспечивают основную защиту организма от патогенных бактерий. Макрофаги (моноциты крови, тканевые макрофаги) являются основными клетками в борьбе с бактериями, вирусами. Макрофаги в иммунных реакциях выступают в качестве клеток, которые презентируют антиген, являются продуцентами цитокинов, которые играют важную роль в развитии и регуляции иммунных реакций. Распознание профессиональными фагоцитами инородных агентов происходит при помощи рецептора с лектинотропными свойствами через антитела, С 3 – комплемент, или через АТ и С 3 , которые могут быть фиксированы на инородном веществе или на фагоците. К факультативным фагоцитам принадлежат фибробласты соединительной ткани, ендотелиоциты синусов селезенки и печени, ретикулярные клетки костного мозга, селезенки, лимфатических узлов, эозинофилы крови. Эти клетки имеют слабую фагоцитарную активность и на своей поверхности не несут рецепторов к АТ и С 3 – комплемента. В процессе фагоцитоза различают три стадии: 1 стадия – адгезии частей или молекул на фагоците; 2 стадия – поглощение, когда твердые и растворимые частички поглощаются клеткой образуя фагосому, которая в свою очередь сливается с лизосомами клетки, образовывая фаголизосому. 3 стадия – стадия переваривания. Для разрушения поглощенных микробов и вирусов фагоцитирующие клетки используют кислородозависимые и кислородо-независимые механизмы. В случае действия кислородозависимого механизма уничтожения поглощенных объектов происходит в результате влияния на них надпероксидных анионов (ОБ 2 - ), пероксиду водорода (Н 2 О 2 ), гидроксильных радикалов. При кислородонезависимом механизме уничтожение микробных клеток происходит за счет протеиназного эффекта. В этом случае разрушение бактерий происходит путем расщепления мукопептидов их стенки катионными белками и лизоцимом. Фагоцитированные микробы под влиянием бактерицидных систем в большинстве случаев гибнут внутри фагоцита. Процесс, который сопровождается гибелью бактерий, называется завершенным фагоцитозом. В некоторых случаях поглощенные микроорганизмы в результате сниженной бактерицидной активности фагоцитов или высокой стойкости микробов к действию бактерицидных факторов могут выживать и активно размножаться внутри фагоцитов, обуславливая хроническое воспаление или хронический ход инфекции. Это явление получило название незавершенного фагоцитоза. Наблюдается оно при туберкулезе, бруцеллезе, туляремии, гонореи и других инфекциях. Вопрос 3 Менингококки Менингококковая инфекция — острая инфекционная болезнь, характеризующаяся поражением слизистой оболочки носоглотки, оболочек головного мозга и септицемией; антропоноз. возбудитель Neisseria meningitidis (менингококк) относится к отделу Gracilicutes, семейству Neisseriaceae, роду Neisseria. Морфологические свойства. Мелкие диплококки. Характерно расположение в виде пары кофейных зерен, обращенных вогнутыми поверхностями друг к другу. Неподвижны, спор не образуют, грамотрицательные, имеют пили, капсула непостоянна. Культуральные свойства. Относятся к аэробам, культивируются на средах, содержащих нормальную сыворотку или дефибринированную кровь лошади, растут на искусственных питательных средах, содержащих специальный набор аминокислот. Элективная среда должна содержать ристомицин. Повышенная концентрация СО 2 в атмосфере стимулирует рост менингококков. Антигенная структура: Имеет несколько АГ: родовые, общие для рода нейссерии (белковые и полисахаридные, которые представлены полимерами аминосахаров и сиаловых кислот); видовой (протеиновый); группоспецифические(гликопротеидный комплекс); типоспецифические (белки наружной мембраны), которые разграничивают серотипы внутри серогрупп В и С. Биохимическая активность: низкая. Разлагает мальтозу и глюкозу до кислоты, не образует индол и сероводород. Ферментация глюкозы. и мальтозы – диф.-диагностический признак. Не образует крахмалоподобный полисахарид из сахарозы. Обладает цитохромоксидазой и каталазой. Отсутствие β-галактозидазы, наличие γ-глютаминтрансферазы. Факторы патогенности: капсула – защищает от фагоцитоза антител, образующиеся к полисахаридам капсулы, проявляют бактерицидные свойства. Токсические проявления менингококковой инфекции обусловлены высокотоксичнымэндотоксином. Для генерализованных форм менингококковой инфекции характерны кожные высыпания, выраженное пирогенное действие, образование AT. Пили, белки наружной мембраны, наличие гиалуронидазы и нейроминидазы.Пили являются фактором адгезии к слизистой оболочке носоглотки и тканях мозговой оболочки. Менингококки выделяют IgA- протеазы, расщепляющие молекулы IgA, что защищает бактерии от действия Ig. Резистентность. Малоустойчив во внешней среде, чувствителен к высушиванию и охлаждению. В течение нескольких минут погибает при повышении температуры более 50 °С и ниже 25 °С. Чувствительны к пенициллинам, тетрациклинам, эритромицину, устойчивы к ристомицину и сульфамидам. Чувствительны к 1 % раствору фенола, 0,2 % раствору хлорной извести, 1 % раствору хлорамина. Эпидемиология, патогенез и клиника. Человек — единственный природный хозяин менингококков. Носоглотка служит входными воротами инфекции, здесь возбудитель может дли- тельно существовать, не вызывая воспаления (носительство). Механизм передачи инфекции от больного или носителя воздушно-капельный. Инкубационный период составляет 1—10 дней (чаще 2—3 дня). Различают локализованные (назофарингит) и генерализованные (менингит, менингоэнцефалит) формы менингококковой инфекции. Из носоглотки бактерии попадают в кровяное русло (менингококкемия) и вызывают поражение мозговых и слизистых оболочек с развитием лихорадки, геморрагической сыпи, воспаления мозговых оболочек. Иммунитет. Постинфекционный иммунитет при генерализованных формах болезни стойкий, напряженный. Микробиологическая диагностика: Материал для исследования - кровь, спинномозговая жидкость, носоглоточные смывы. Бактериоскопический метод – окраска мазков из ликвора и крови по Граму для определения лейкоцитарной формулы, выявления менингококков и их количества. Наблюдают полинуклеарные лейкоциты, эритроциты, нити фибрина, менингококки – грам «-», окружены капсулой. Бактериологический метод – выделение чистой культуры. Носоглоточная слизь, кровь, ликвор. Посев на плотные, полужидкие питательные среды, содержащие сыворотку, кровь. Культуры инкубируют в течение 20 ч. При 37С с повышенным содержанием СО 2 .Оксидазаположительные колонии – принадлежат в данному виду. Наличие N.meningitidis подтверждают образованием уксусной кислоты при ферментации глк. и мальтозы. Принадлежность к серогруппам – в реакции агглютинации (РА). Серологический метод – используют для обнаружения растворимых бактериальных АГ в ликворе, или АТ в сыворотке крови. Для обнаружения АГ применяют ИФА,РИА. У больных, перенесших менингококк – в сыворотке специфические АТ: бактерицидные, агглютинины, гемагглютинины. Лечение. В качестве этиотропной терапии используют антибиотики - бензилпенициллин (пенициллины, левомицетин, рифампицин), сульфамиды. Профилактика. Специфическую профилактику проводят менингококковой химической полисахаридной вакциной серогруппы А и дивакциной серогрупп А и С по эпидемическим показаниям. Неспецифическая профилактика сводится к соблюдению санитарно- противоэпидемического режима в дошкольных, школьных учреждениях и местах постоянного скопления людей. Билет 10 Вопрос 1. Значение работ Коха в микробиологии 1) - введение в практику анилиновых красителей - использование в микроскопии иммерсионной системы и конденсора - разработка метода культивирования на биологических жидкостях и плотных питательных средах - разработка метода дробных пересевов - открытие возбудителя сибирской язвы, холеры( холерный вибрион Коха), туберкулеза( палочка Коха) и туберкулина(представляющий собой вытяжку из культуры туберкулезных бактерий. Хотя туберкулин не обладает лечебным действием, его с успехом применяют для диагностики туберкулеза.) 2) Кох начал свои исследования в то время, когда роль микроорганизмов в этиологии инфекционных заболеваний подвергалась серьезным сомнениям. Для ее доказательства требовались четкие критерии, которые были сформулированы Кохом и вошли в историю под названием «триады Генле — Коха». Суть триады заключалась в следующем: 1) предполагаемый микроб-возбудитель всегда должен обнаруживаться только при данном заболевании, не выделяться при других болезнях и от здоровых лиц; 2) микроб-возбудитель должен быть выделен в чистой культуре; 3) чистая культура данного микроба должна вызвать у экспериментальных зараженных животных заболевание с клинической и патологической картиной, аналогичной заболеванию человека. Вопрос 2. ИФА, иммуноблотинг. Практическое применение Иммуноферментный анализ( ИФА) — выявление антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой (пероксидазой хрена, бета-галактозидазой или щелочной фосфатазой). После соединения антигена с меченной ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется ферментом и изменяется цвет продукта реакции — интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител. ИФА применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных болезней, в частности для диагностики ВИЧ-инфекций, гепатита В и др., а также определения гормонов, ферментов, лекарственных препаратов и других биологически активных веществ, содержащихся в исследуемом материале в минорных концентрациях. Твердофазный ИФА— вариант теста, когда один из компонентов иммунной реакции (антиген или антитело) сорбирован на твердом носителе, напр., в лунках планшеток из полистирола. Компоненты выявляют добавлением меченых антител или антигенов. При положительном результате изменяется цвет хромогена. Каждый раз после добавления очередного компонента из лунок удаляют несвязавшиеся реагенты путем промывания При определении антител в лунки планшеток с сорбированным антигеном последовательно добавляют сыворотку крови больного, антиглобулиновую сыворотку, меченную ферментом, и субстрат(хромоген) для фермента. При определении антигена в лунки с сорбированными антителами вносят антиген (напр. сыворотку крови с искомым антигеном), добавляют диагностическую сыворотку против него и вторичные антитела (против диагностической сыворотки), меченные ферментом, а затем субстрат (хромоген) для фермента. Конкурентный ИФАдля определения антигенов: искомый антиген и меченный ферментом антиген конкурируют друг с другом за связывание ограниченного количества антител иммунной сыворотки. Другой тест - конкурентный ИФА для определения антител: искомые антитела и меченные ферментом антитела конкурируют друг с другом за антигены, сорбированные на твердой фазе. Иммуноблоттинг — высокочувствительный метод выявления белков, основанный на сочетании электрофореза и ИФА или РИА. Иммуноблоттинг используют как диагностический метод при ВИЧ-инфекции и др. Антигены возбудителя разделяют с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, затем переносят их из геля на активированную бумагуили нитроцеллюлозную мембрану и проявляют с помощью ИФА. Фирмы выпускают такие полоски с «блотами» антигенов. На эти полоски наносят сыворотку больного. Затем, после инкубации, отмывают от несвязавшихся антител больного и наносят сыворотку против иммуноглобулинов человека, меченную ферментом.Образовавшийся на полоске комплекс [антиген + антитело больного + антитело против Ig человека] выявляют добавлением хромогенного субстрата, изменяющего окраску под действием фермента. Вопрос 3. Шигеллы Энтеробактерия(семейство Enterobacteriacea) Род Shigella 4 вида: S. dysenteriae (12 сероваров), S. flexneri (9 сероваров), S. boydii( 18 сероваров), S. sonnei (1 серовар) Морфология: неподвижные палочки. спор и капсул не образуют, факультативно - анаэробные, грамотрицательные. Культуральные свойства : хорошо культивируются на простых питательных средах. На плотных средах образуют гладкие мелкие блестящие полупрозрачные колонии, на жидких средах (селинитовый бульон) - диффузное помутнение Биохимические свойства: слабая б\х активность, отсутствует продукция сероводорода, не ферментируют мочевину. Наименьшей ферментативной активностью обладают штаммы S.dysenteriae ферментирующие только глюкозу без газообразования, в отличие от других шигелл этот вид является маннит - отрицательным. Шигеллы Флекснера ферментируют маннит, образуют индол, но не ферментируют лактозу, дульцит и ксилозу. Шигеллы Бойда имеют близкую биохимическую активность, однако ферментируют дульцит, ксилозу и арабинозу Шигеллы Зонне способны медленно ферментировать лактозу и сахарозу, имеют биохимические типы и фаготипы. Резистентность: Выживаемость шигелл на предметах обихода колеблется от нескольких дней до нескольких месяцев ( зависит от температуры, влажности, рН и вида возбудителя). Наиболее неустойчив S. dysenteria. Шигеллы погибают быстро под воздействием прямых солнечных лучей и при нагревании( при 100 градусах мгновенно). Благоприятная среда - пищевые продукты. S. sonnei в молоке и молочных продуктах - не только живут но и размножаются. Дезинфицирующие средства ( хлорамин, гипохлориты) убивают шигелл. Антигенная структура: соматический О - антиген, антигены наружной мембраны. S. sonnei - антиген К. Могут превращаться в L форму. Факторы патогенности: - взывают инвазию с последующим межклеточным распространением и размножением в эпителии слизистой толстого кишечника --продуцируют шига и шигаподобные белковые токсины. шига токсин - S. dysenteria, остальные - шигаподобные токсины. - эндотоксин защищает шигеллы от действия низких значений рН и желчи - лецитиназа и муциназа - проникновение сквозь слой слизи Эпидемиология Вызывают заболевание - шигеллезы (старое - бактериальная дизентерия) - антропонозная инфекция с фекально-оральной передачей ( так же может быть контактно -бытовой путь (S. dysenteria), водный - S. flexneri, алиментарный - S. sonnei) Микробиологическая диагностика: основной метод - бактериологический ( испражнения) , вспомогательный метод - серологический с постановкой РНГА Профилактика личная гигиена, санитарный правила приготовления и хранения пищевых продуктов Лечение: Антибиотики. При дисбактериозе - прибиотики. Нитрофурановые препараты, левомицетин, сульфаниламиды, поливалентный дизентерийный бактериофаг Билет 11 Вопрос 1 Российские ученые, их вклад в микру Значение работ Коха в микробиологии 1) - введение в практику анилиновых красителей - использование в микроскопии иммерсионной системы и конденсора - разработка метода культивирования на биологических жидкостях и плотных питательных средах - разработка метода дробных пересевов - открытие возбудителя сибирской язвы, холеры( холерный вибрион Коха), туберкулеза( палочка Коха) и туберкулина(представляющий собой вытяжку из культуры туберкулезных бактерий. Хотя туберкулин не обладает лечебным действием, его с успехом применяют для диагностики туберкулеза.) 2) Кох начал свои исследования в то время, когда роль микроорганизмов в этиологии инфекционных заболеваний подвергалась серьезным сомнениям. Для ее доказательства требовались четкие критерии, которые были сформулированы Кохом и вошли в историю под названием «триады Генле — Коха». Суть триады заключалась в следующем: 1) предполагаемый микроб-возбудитель всегда должен обнаруживаться только при данном заболевании, не выделяться при других болезнях и от здоровых лиц; 2) микроб-возбудитель должен быть выделен в чистой культуре; 3) чистая культура данного микроба должна вызвать у экспериментальных зараженных животных заболевание с клинической и патологической картиной, аналогичной заболеванию человека. Вклад Пастера в микробиологию Важнейшие открытия в микробиологии принадлежат французскому ученому Луи Пастеру (1822— 1895). Пастер заложил основы нового направления в микробиологии — физиологического, доказав роль микроорганизмов как возбудителей многих биохимических процессов и заболеваний человека и животных. После установления причин брожения вина - сферой интересов ученого становятся микроорганизмы. Он показал, что каждый тип брожения (спиртовое, молочнокислое и др.) имеет своих возбудителей. Им открыто явление анаэробиоза, опровергнута возможность самопроизвольного зарождения живого, доказана микробная природа процессов гниения, введено в практику микробиологии множество методов исследования. Изучение Л. Пастером возбудителей заболеваний началось с работы с насекомыми. Он установил, что причиной гибели шелковичных червей являются микроорганизмы и для предотвращения заболеваний необходимы профилактические меры. Открытие инфекционных болезней у насекомых послужило базой для разработки в дальнейшем биологических методов борьбы с вредителями сельскохозяйственных растений. Пастера считают создателем медицинской микробиологии. Им открыта причина «родильной горячки», уносившей жизни рожениц; заложены основы асептики, антисептики, дезинфекции. Разработаны принципы аттенуации (ослабления вирулентности) патогенных штаммов микроорганизмов, что легло в основу иммунопрофилактики инфекционных болезней. В его лаборатории были впервые приготовлены живые аттенуированные вакцины для профилактики холеры кур, краснухи свиней, сибирской язвы у животных. Имя Луи Пастера стало известно во всем мире после создания вакцины против бешенства, спасшей жизни сотням людей, укушенных больными животными. Несмотря на успехи, путь Пастера в науке был трудным и требовал невероятного трудолюбия и мужества. Преодолев все, Пастер заслужил признание. В 1888 г. на народные средства, собранные по подписке в разных странах, в Париже был построен научно-исследовательский институт, первым директором которого стал Л. Пастер. |