Билет 1 Вопрос Строение бактериальной клетки
Скачать 3.25 Mb.
|
Лечение Препараты нистатина, леворина, клотримазола, кетоконазонола, флуконазола Профилактика направлена на контроль асептики, стерильности инвазивных процедур(катетеризация) Билет 14 Вопрос 1. Морфология грибов. Роль грибов в развитии патогенных процессов в полости рта Грибы относятся к царству Fungi . Это многоклеточные или одноклеточные нефотосинтезирующие (бесхлорофильные) эукариотические микроорганизмы с клеточной стенкой. Грибы имеют ядро с ядерной оболочкой, цитоплазму с органеллами, цитоплазматическую мембрану и многослойную, ригидную клеточную стенку, состоящую из нескольких типов полисахаридов, а также белка, липидов и др. Некоторые грибы образуют капсулу. Цитоплазматическая мембрана содержит гликопротеины, фосфолипиды и эргостеролы. Грибы являются грамположительными микробами, вегетативные клетки — некислотоустойчивые. Грибы состоят из длинных тонких нитей (гиф), сплетающихся в грибницу, или мицелий. Гифы низших грибов — фикомицетов — не имеют перегородок. У высших грибов — эумицетов — гифы разделены перегородками; их мицелий многоклеточный. Различают гифальные и дрожжевые формы грибов. Гифальные (плесневые) грибы образуют ветвящиеся тонкие нити (гифы), сплетающиеся в грибницу, или мицелий (плесень). Гифы, врастающие в питательный субстрат, называются вегетативными гифами (отвечают за питание гриба), а растущие над поверхностью субстрата — воздушными или репродуктивными гифами (отвечают за бесполое размножение). Гифы низших грибов не имеют перегородок. Они представлены многоядерными клетками и называются ценоцитными. Гифы высших грибов разделены перегородками, или септами с отверстиями. Дрожжевые грибы (дрожжи), в основном, имеют вид отдельных овальных клеток (одноклеточные грибы). По типу полового размножения они распределены среди высших грибов — аскомицет и базидиомицет. При бесполом размножении дрожжи образуют почки или делятся, что приводит к одноклеточному росту. Могут образовывать псевдогифы и ложный мицелий (псевдомицелий) в виде цепочек удлиненных клеток — «сарделек». Грибы, аналогичные дрожжам, но не имеющие полового способа размножения, называют дрожжеподобными. Они размножаются только бесполым способом — почкованием или делением. Грибы размножаются спорами половым и бесполым способами, а также вегетативным путем (почкование или фрагментация гиф). Грибы, размножающиеся половым и бесполым путем, относятся к совершенным. Несовершенными называют грибы, у которых отсутствует или еще не описан половой путь размножения. Бесполое размножение осуществляется у грибов с помощью эндогенных спор, созревающих внутри круглой структуры — спорангия, и экзогенных спор — конидий, формирующихся на кончиках плодоносящих гиф. Типы грибов. Выделяют 3 типа грибов, имеющих половой способ размножения (так называ- емые совершенные грибы): зигомицеты (Zygomycota), аскомицеты (Ascomycota) и базидиомицеты (Basidiomycota). Отдельно выделяют условный, формальный тип/группу грибов — дейтеромицеты (Deiteromycota), у которых имеется только бесполый способ размножения (так называемые несовершенные грибы). Аскомицеты (или сумчатые грибы) объединяют группу грибов, имеющих септированный мицелий и отличающихся способностью к половому размножению. Свое название аскомицеты получили от основного органа плодоношения — сумки, или аска, содержащего 4 или 8 гаплоидных половых спор (аскоспор). К аскомицетам относятся представители родов Aspergillus, Penicillium и др., отличающиеся особенностями формирования плодоносящих гиф. У Aspergillus (леечная плесень) на концах плодоносящих гифконидиеносцев имеются утолщения — стеригмы, на которых образуются цепочки спор — конидии. Некоторые виды аспергилл могут вызывать аспергиллезы и афлатоксикозы. Базидиомицеты — шляпочные грибы с септированным мицелием. Дейтеромицеты — несовершенные грибы (Fungi imperfecti) — являются условным классом грибов, объединяющим грибы с септированным мицелием, не имеющих полового размножения. Они размножаются только бесполым путем, образуя конидии. К несовершенным грибам относятся грибы рода Candida, поражающие кожу, слизистые оболочки и внутренние органы (кандидоз). Они имеют овальную форму,; делятся почкованием (бластоспоры), образуют псевдомицелий (почкующиеся клетки из ростковой трубочки вытягиваются в нить), на концах которого находятся хламидоспоры. Эти грибы называют дрожжеподобными. Истинные дрожжи (аскомицеты) образуют аскоспоры, не имеют псевдомицелия и хламидоспор. Подавляющее большинство грибов, вызывающих заболевания у человека (микозы), относятся к несовершенным грибам. При кандидозе рта на слизистых оболочках развивается так называемая молочница с развитием белого творожистого налета, возможно развитие атрофии или гипертрофии, гиперкератоз сосочков языка. Вопрос 2. Реакция агглютинации Реакция агглютинации – РА, при которой происходит связывание антителами корпускулярных антигенов (бактерий, эритроцитов), она протекает при наличии электролитов. РА используют для: 1. определения антител в сыворотке крови больного, например при бруцеллезе, брюшном тифе и паратифах, туляремии, коклюше; 2. определения возбудителя, выделенного от больного; 3. определения групп крови. Применяются различные варианты реакции агглютинации: развернутая,ориентировочная Для определения у больного антител ставят в пробирках развернутую реакцию агглютинации: к разведениям сыворотки крови больного добавляют диагностикум (взвесь убитых микробов) и через несколько часов инкубации при 37 0 С отмечают наибольшее разведение сыворотки (титр сыворотки), при котором произошла агглютинация. Если необходимо определить возбудитель, выделенный от больного, ставят ориентировочную реакцию агглютинации на предметном стекле. К капле диагностической агглютинирующей сыворотки в разведении 1:10 или 1:20 добавляют чистую культуру возбудителя. Рядом ставят контроль: вместо сыворотки наносят каплю физиологического раствора. При появлении в капле с сывороткой и микробами хлопьевидного осадка ставят развернутую реакцию агглютинации в пробирках. Одновременно учитываются контроли: сыворотка, разведенная изотоническим раствором натрия хлорида должна быть прозрачной, взвесь микробов в том же растворе равномерно мутной без осадка. В ориентировочной РА пользуются адсорбированными агглютинирующими сыворотками, из которых удалены перекрестно реагирующие антитела. Вопрос 3. Холера Семейство: Vibrionaceae Типовой род Vibrio Pacini Типовой вид Vibrio Cholerae Серогруппы О1 и О139 Морфология и культуральные свойства холерный вибрион имеет один полярно расположенный жгутик . Грамотрицательны, спор не образуют. Под действием пенициллина - образуются L формы. Факультативные анаэробы с преобладанием аэробных свойств. Не требователен к питательным средам. Температурный оптимум 37, рН 7,6-8 На плотных средах - мелкие кргулые прозрачные S - колонии с ровными краями, маслянистые голубоватые. Колонии старых культур желтеют. На скошенном агаре - желтоватый налет. В желотиновом столбике - воронкообразное разжижение. На жидких средах - пленка Биохимические свойства биохимически активны. Сбраживают до кислоты глюкозу, мальтозу, сахарозу, маннит, лактозу, гликоген, крахмал. Не сбраживают арабинозу, рамнозу, инулин, инозит. По Хейбергу все вибрионы делятся на 6 групп по отношению к 3 сахарам( манноза сахароза арабиноза). Первую группу (истинные возбудители холеры) - разлагают маннозу и сахарозу и не разлагают арабинозу. Они так же разжижают желатин , гидролизуют казеин, разлагают белки. Антигенная структура Н- антиген (родоспецифический) О-антиген, (группо- и типоспецифический) Фракции О-антигена: А, В, С Серовары О1-группы: • ОГАВА (АВ) • ИНАБА (АС) • ГИКОШИМА (АВС) Серовар О139-группы: • О139 (Бенгал) Резистентность плохо переносят солнечную радиацию, высушивание, конкуренцию со стороны другой микрофлоры. В водоемах сохраняются до 2-3 недель. Биовар Эль-Тор более устойчив чем елассический вибрион. Эпидемиология Холера это острая кишечная инфекция с фекально-оральным механизмом передачи. Наиболее распространеные пути передачи - водный и пищевой, реже - контактно-бытовой. Источник инфекции - больной человек или вибрионоситель. Резервуар инфекции - вода. Факторы передачи - вода, продукты( молочные, овощи, фрукты) , объекты окружающей среды, несоблюдение правил личной гигиены. Факторы патогенности • ПОДВИЖНОСТЬ, ХЕМОТАКСИС • АДГЕЗИЯ И КОЛОНИЗАЦИЯ( пили) • ФЕРМЕНТЫ АГРЕССИИ (МУЦИНАЗА - разжижает слизь, ПРОТЕИНАЗА, ЛЕЦИТИНАЗА, НЕЙРАМИНИДАЗА - усиливает связь холерогена с эпителием слизистой кишечника) • ФАКТОР, ПОВЫШАЮЩИЙ ПРОНИЦАЕМОСТЬ КАПИЛЛЯРОВ • ХОЛЕРОГЕН • ЦИТОТОКСИН (НЕКРОТИЧЕСКИЙ, ШИГАПОДОБНЫЙ) • ЭНДОТОКСИН - запускает каскад арахидоновой кислоты - синтезирует простагландин Клиника инкубационный период от нескольких часов до 5 дней. Боли в животе, тенезмы, рвота, диарея. В тяжелых случаях - почечная недостаточность , гипотермия, сердечная недостаточность. Иммунитет- гуморально-клеточный Диагностика - выделение и идентификация возбудителя. Материал - выделения от больного (рвота, желчь, испражнения) . Для экспресс диагностики РИФ, ПЦР Лечение 1) регидратация( восполнение потрь жидкости и электролитов - изотонический солевой раствор , плазмозаменяющие жидкости внутривенно) 2) антибактериальная терапия (антибиотики широкого спектра действия: тетрациклины, хлорамфеникол) Профилактика вакцина - комплексный препарат состоящий из холероген-анатоксина и химического О-антигена, биоваров и сероваров (Огава и Инаба). прививка обеспечивает выработку вибриоцидных антител и антитоксинов в высоких титрах Билет 15 Вопрос 1 Биохимическая активность микробов. Их роль в микробиологии Для определения способности МКО ферментировать углеводы (сахаролитические свойства) используют короткий и длинный «пестрый» ряд. К первому относятся жидкие питательные среды Гисса с моно- и дисахаридами: глюкозой, лактозой, мальтозой и с 6-атомным спиртом - маннитом. В длинный пестрый ряд наряду с этими углеводами вводят среды с разнообразными моносахаридами (арабиноза, ксилоза), полисах. (инулин, крахмал) и спиртами (глицерин, инозит). В качестве индикатора ко всем средам добавляют индикатор – реактив Андреде или ВР. Чистую культуру засевают петлей в среды «пестрого» ряда. Инкубируют при темп. 37 град. в течении 18- 24 ч. Если бактерии ферментируют углеводы до образования кислых прод., наблюдается изменение цвета среды; при разложении до кислоты и газа помимо изменения цвета появляется пузырек газа в поплавке. Если используются среды с полужидким агаром, то образование газа регистрируется по разрыву столбика. Т.к бактерии ферментируют не все, а только определенные для каждого вида углеводы, входящие в состав среды Гисса, наблюдается довольно пестрая картина, отсюда и название. Для определения протеолитических ферментов производят посев культуры бактерий уколом в столбик 10-20% желатина, пептонную воду. Посевы в желатине инкубируют при температуре 20-22 град. в теч. нескольких дней. При наличии протеолитич. ферментов бактерии разжижают желатин, образую фигуру, напоминающую воронку или елочку. Реакция на аммиак. Узкую полоску лакмусовой бумаги укрепляют под пробкой так, чтобы она не соприкасалась с питат. средой. Посинение бумаги свидет. об образовании аммиака. Реакция на индол. Способ Эрлиха: в пробирку с культурой бактерий прибавляют 2-3 мл эфира, содержимое перемешивают и добаляют несколько капель реактива Эрлиха (спиртовой раствор парадиметиламидобензальегида с хлороводородной кислотой). В присутствии индола наблюдается розовое окрашивание, при осторожном наслаивании образуетсяся розовое кольцо. Реакция на сероводород. Делают посев культуры бакт. уколом в столбик с питательной средой, содержащей реактивы для выявления сероводорода (смесь солей: сульфат железа, тиосульфат натрия, сульфат натрия). При наличии сероводорода происходи почернение агара. Обнаружение каталазы. На предметное стекло наносят каплю 1-2% р-ра пероксида водорода и вносят в нее петлю с бактеиальной культурой. Каталаза разлагает перекись на кислород и воду. Выделение пузырьков кислорода свидететельствует о наличии каталазы. Вопрос 2. Реакция преципитации. Механизм и виды постановки Реакция преципитации (РП)– это осаждение растворимого антигена при действии антител в присутствии электролита. Видимый эффект реакции (феномен преципитации) – помутнение (образование мутного кольца или осадка – преципитата). РП применяют для обнаружения неизвестного антигена при ряде инфекционных заболеваний: при сибирской язве, туляремии, менингите, оспе. В судебной медицине ее используют для определения видовой принадлежности крови, спермы; в санитарно-гигиенических исследованиях – для установления фальсификации пищевых продуктов. РП отличается очень высокой чувствительностью и позволяет обнаружить антиген в разведении 1:1 000 000 и 1: 10 000 000. Компоненты реакции преципитации. 1. Антиген (преципитиноген) - это антиген молекулярной природы, находящийся в мелкодисперсном (растворимом) состоянии. Преципитиногены – это различные лизаты или экстракты тканей и др. Преципитиноген отличается от агглютиногена размером частиц антигена. Агглютиноген имеет размеры клеток (это не разрушенные целые клетки), а размеры преципитиногена соизмеримы с размерами молекул (это белки и их комплексы с углеводами или липидами). Раствор преципитиногена прозрачный. 2. Антитела (преципитины) находятся в сыворотке крови человека или в иммунных диагностических преципитирующих сыворотках, которые содержат известные антитела. 3. Электролит – изотонический раствор хлорида натрия. Получение преципитиногена. Получаютпутемизмельчения материала и извлечения из него белковых антигенов кипячением или другими способами. Примеры преципитиногенов: лизаты или экстракты различных органов и тканей, чужеродная сыворотка крови (сыворотка - это раствор, в первую очередь, различных белков), фильтраты бульонных культур микробов, солевые экстракты микробов, аутолизаты и др. Получение преципитирующих сывороток. Получают путем гипериммунизации кроликов соответствующими преципитиногенами. Такие сыворотки содержат антитела к тем преципитиногенам, которыми иммунизировали кроликов. Примеры преципитирующих сывороток: преципитирующая сибиреязвенная сыворотка (содержит антитела к антигенам возбудителя сибирской язвы), преципитирующая противоменингококковая сыворотка (содержит антитела против антигенов возбудителя менингита) и др. Титр преципитирующей сыворотки – это наибольшее разведение преципитиногена, при котором сыворотка еще дает реакцию преципитации. Способы постановки РП. 1. Реакция кольцепреципитации – проводится в специальных преципитационных пробирках (диаметр – 0,4-0,5 см, высота – 7-8 см). В пробирку вносят 0,2 – 0,3 мл преципитирующей сыворотки и по стенке длинным носиком пастеровской пипетки осторожно наслаивают такое же количество преципитиногена. Затем осторожно из горизонтального положения пробирки ставят вертикально. Учет результатов реакциипроводят по появлению белого кольца на границе антиген- антитело. При положительной реакции наблюдается образование такого кольца. В этом случае антиген соответствует антителу и происходит их связывание. Если в качестве преципитиногена используют прокипяченные и профильтрованные водные экстракты органов и тканей, то реакция называется реакцией термокольцепреципитации (например, при диагностике сибирской язвы). 2. Реакция преципитации в геле – проводится в чашках Петри или на предметных стеклах, куда помещают слой агарового геля. При застывании геля в нем вырезают лунки, в которые помещают антигены или антитела, или и то и другое. Различают 2 метода РП в геле: а) метод простой (радиальной) иммунодиффузии: один из компонентов реакции иммунитета (антиген или антитело) помещают в лунку, а другой компонент – смешивают с агаром; при положительном результате(антиген соответствует антителу) вокруг лунки образуется кольцо преципитата; б) метод двойной иммунодиффузии: и антитело и антиген помещают в отдельные лунки, они диффундируют в агаровом геле навстречу друг другу; при положительном результатена месте встрече антитела и антигена образуются линии преципитации. Примером РП в геле являетсяреакция двойной иммунодиффузии по Оухтерлони при диагностике дифтерии Вопрос 3. Актиномицеты классификация виды свойства. Роль в патологии полости рта Семейство Actinomycetaceae Род Actinomyces Морфология ветвящиеся бактерии, грамположительные. имеют вид тонких прямых или слегка изогнутых палочек , часто образуют нити. Способны образовывать хорошо развитый мицелий. в мазке располагаются по одиночке, парами или в виде палисада. некислотоустойчивы. Типовой вид Actinomyces bovis. Культуральные свойства облигатные и факультативные анаэробы. Растут медленно. температурный оптимум 37. На простых питательных средах растут плохо, лучше растут на белковых средах - прозрачные бесцветные пастообразные гладкие колонии. Биохимическая активность хемоорганотрофы. ферментируют углеводы с образованием кислоты без газа, продукты ферментации - уксусная, муравьиная и молочная кислоты, индол не образуют Антигенная структура в ИФА выделяют 6 групп - A,B,C,D,E,F Основная среда обитания -почва. обнаруживаются в воде, на предметах, растениях, животных и на человеке. При попадании на воздух мгновенно погибают. Чувствительны к пенициллинам, тетрациклину, эритромицину, к обычным антисептикам и дезинфикаторам. Источник инфекции - почва. Чаще всего механизм передачи - контактный, а путь - раневой. Актиномикоз - хроническая инфекция человека и животных, которая характеризуется гранулематозным воспалением. |