Издательский дом Питер
 Скачать 5.79 Mb.
|
|
Исследования при контроле качества эритроцитов, полученных методом афереза
* Этому требованию должны соответствовать не менее 90 % обследованных доз. Основные требования (стандарты) к консервированной крови 355 Требования Совета Европы к контролю эритроцитов, полученных методом афереза, представлены в табл. 97. Таким образом, существуют три способа получения трансфузионпых эритроцитсодержащих сред. Для этого используются: — эритроцитный концентрат (масса) из цельной крови, консервированный с «Глюгициром», CPD, CPDA; — эритроцитная взвесь в «Модежеле», SAGM, Adsol (AS-1), Nutricell (AS-3), PAGGS-S, PAGGS-M, MAP, Erythro-Sol; — получение на сепараторе клеток: MCS-Зр (Haemonetics, США), Mini Autopheresis С (Baxter, США), TRIMA (Cobe, США). , Восстановленная («омоложенная») ЭМ — это ЭМ, подвергшаяся биохимической модификации путем инкубации в специальном растворе, восстанавливающем ее морфофункциональную полноценность, в том числе кислород-транспортную функцию, утраченную в процессе длительного хранения. Такая ЭМ может быть подвергнута криоконсервированию с последующим длительным хранением. ЭМ, эритроцитная взвесь, ЭМ и ЭК, обедненные лейкоцитами и тромбоцитами, восстановленная («омоложенная») ЭМ должны отвечать следующим требованиям: сохранению целостности и герметичности упаковки; наличию оформленной этикетки с указаниями срока годности и групповой принадлежности; прозрачности надстоя; отсутствию резко выраженного гемолиза (красного окрашивания надстоя); равномерности эритроцитарного слоя, отсутствию видимых сгустков. Суть «омоложения» хранящихся эритроцитов — восстановление утраченных метаболитов, улучшение функционального состояния и посттрансфузи-онного переживания клеток. Омолаживающий раствор содержит пируват, инозин, фосфат и аденин. Этот раствор не предназначен для внутривенного применения; после тепловой инкубации с этим раствором эритроциты отмываются и либо хранятся при температуре 1-6 °С для переливания в течение 24 ч, либо замораживаются. При консервировании эритроцитов с CPD или CPDA-1 омолаживающий раствор может быть добавлен в любое время в период между 14-м днем после заготовки и 3-м днем после истечения срока хранения дозы эритроцитов. Эритроцитная масса замороженная — взвесь эритроцитов, сохраняемая непрерывно в замороженном состоянии при заданных температурных режимах в присутствии ограждающего раствора, который удаляется после размораживания с помощью процедуры отмывания. Метод замораживания (криоконсервирования) эритроцитов может быть любым из разрешенных к клиническому применению, но при этом должен соответствовать следующим основным критериям: 1) обеспечивать адекватное удаление в процессе отмывания криопротек-торов и продуктов клеточного разрушения. Содержание остаточного глице- 356 Глава 7. Трансфузионные среды рина во взвеси размороженных отмытых эритроцитов должно быть ниже 1 г %, уровень свободного гемоглобина перед трансфузией не должен превышать 2 г/л при гематокритной величине не менее 0,30 л/л; 2) обеспечивать сохранность после размораживания и отмывания не менее 80 % клеток и 24-часовую посттрансфузионную приживаемость не менее 70%. Эритроциты подвергают замораживанию не позднее 6 дней после заготовки крови от донора. Для удобства проведения изосерологических исследований после отмывания эритроцитов и их ресуспендирования в плазмозамещающем растворе, часть трубки полимерной емкости, в которой находится конечный продукт — размороженные отмытые эритроциты, следует заполнить этим компонентом и герметизировать, создав, таким образом, 2-3 сегмента. Для замороженных эритроцитов установлены следующие предельные сроки хранения: — в жидком азоте — до 5 лет; — в электрических рефрижераторах — до 3 лет при условии постоянного поддержания температуры ниже -65 °С; при температуре хранения -40 °С — до 2 лет; при температуре -30 °С — 1 год. Размороженные отмытые эритроциты, как и другие эритроцитарные среды, должны храниться до трансфузии при температуре 2-6 "С. Предельные сроки хранения размороженных отмытых эритроцитов при 2-6 °С составляют 24 ч после их оттаивания. Таблица 98 Исследования при контроле качества замороженных эритроцитов
* Окончательный взвешивающий раствор. ** Этому требованию должны соответствовать не менее 75 % обследованных доз. Основные требования (стандарты) к консервированной крови 357 СЕ. По правилам Совета Европы хранение замороженных эритроцитов производится: — при температуре от -60 до -80 °С в электрическом морозильнике, если используется метод криоконсервирования с высокой концентрацией глицерина; — при температуре от -140 до -150 °С в парах жидкого азота, если используется метод криоконсервирования с низкой концентрацией глицерина. Требования Совета Европы к контролю качества замороженных эритроцитов представлены в табл. 98. 7.7.3. Концентрат тромбоцитов Концентрат тромбоцитов (КТ), выделенный из донорской крови, — это суспензия жизнеспособных и гемостатически активных тромбоцитов в плазме, приготовленная методом серийного центрифугирования консервированной крови или методом тромбоцитафереза крови одного донора. КТ, приготовленный из обогащенной тромбоцитами плазмы (ОТП), — это КТ, полученный из одной дозы цельной крови методом, который предусматривает на I этапе мягкое центрифугирование цельной крови для выделения ОТП, а на II — жесткое центрифугирование ОТП для осаждения тромбоцитов. Такой КТ содержит в среднем 0,7x1011 тромбоцитов в 50-60 мл плазмы и имеет примесь эритроцитов (до 1,0x109) и лейкоцитов (до 0,2x109). КТ, приготовленный из лейкотромбослоя (ЛТС), — это КТ, полученный из одной дозы цельной крови методом, который предусматривает на I этапе жесткое центрифугирование цельной крови для выделения ЛТС с частью плазмы (около 70 мл), на II — мягкое центрифугирование, позволяющее отделить суспензию тромбоцитов от осадка лейкоцитов и эритроцитов. Такой КТ содержит в среднем 0,65x1011 тромбоцитов в 50-75 мл плазмы и имеет примесь лейкоцитов (до 0,05х109). КТ, полученный тромбоцитаферезом, — это КТ, заготовленный не менее чем из 1,5 л крови одного донора. Такой КТ содержит не менее 2,0x1011 тромбоцитов в 200-300 мл плазмы и имеет примесь эритроцитов (менее 1x109) и лейкоцитов (до 0,6х109). Концентраты тромбоцитов должны отвечать следующим требованиям при выборочном контроле: — не должны содержать макроскопических агрегатов, видимых сгустков, нитей фибрина; — в конце разрешенного срока хранения их рН должен быть не ниже 6,0; — до конца срока хранения содержание тромбоцитов в КТ, выделенных из отдельных доз консервированной крови, должно оставаться не менее 0,5x1011; в аферезных КТ — не менее 2,0x1011; — объем плазмы в КТ, выделенных из ОТП, 45-60 мл; в КТ, выделенных из ЛТС, — 45-75 мл; в КТ, выделенных методом афереза, — 200-300 мл; 358__________________________Глава 7. Трансфузионные среды — примесь лейкоцитов не должна превышать 0,2x109 в дозах КТ, выделенных из ОТП; 0,05х109 - в дозах КТ, выделенных из ЛТС; 1,0х109 - в КТ, полученных методом афереза; — примесь эритроцитов не должна превышать 1,0х109 в одной дозе КТ; — КТ должен иметь сохранную упаковку без нарушений герметизации и правильную маркировку. КТ должны храниться в условиях, которые гарантируют сохранность их жизнеспособности и гемостатической активности в соответствии с инструктивно-методическими материалами, утвержденными МЗ РФ. Для концентратов тромбоцитов, хранящихся при 20-24 °С более 24 ч, должно быть обеспечено непрерывное нетравматизирующее клетки автоматическое перемешивание на протяжении всего срока хранения в полимерных контейнерах. СЕ. Под стандартной терапевтической дозой тромбоцитов для взрослого пациента понимают количество тромбоцитов, эквивалентое выделенному из 4-6 доз цельной крови. При хранении тромбоцитов их концентрация не должна быть более 1xl09 /мл. Требования Совета Европы к контролю качества концентрата тромбоцитов, выделенного из цельной крови, представлены в табл. 99. До пулирования единицы тромбоцитов (как ЛТС, так и взвесь тромбоцитов) могут храниться в течение 5 дней после донации. После пулирования хранившихся тромбоцитов их переливание должно быть выполнено как можно быстрее, не позднее чем через 6 ч. На состояние клеток в хранящихся КТ влияют следующие факторы: — размер контейнера; — толщина контейнера; — материал контейнера; — проницаемость контейнера; — время хранения; — консервирующий раствор; — концентрация тромбоцитов и плазмы; — метод приготовления; — метод ресуспендирования; — помешивание; — величина рН. Для сохранения жизнеспособности клеток важен адекватный газообмен в контейнере. Источник энергии хранящихся тромбоцитов — окислительное фосфорилирование в митохондриях. Последнее угнетается при снижении содержания кислорода и уступает свое место анаэробному гликолизу. Молочная кислота, образующаяся в результате гликолиза, взаимодействует с бикарбонатом натрия с образованием лактата натрия и углекислоты, которая 359 Основные требования (стандарты) к консервированной крови Таблица 99 Исследования при контроле качества концентрата тромбоцитов, выделенного из цельной крови
* Этому требованию должны соответствовать не менее 75 % обследованных доз; ** этому требованию должны соответствовать не менее 90 % обследованных доз; *** измерение рН целесообразно проводить в закрытой системе во избежание выхода СО2. Измерение может быть выполнено при любой температуре; значение расчетным методом конвертировано применительно к рН при температуре 22 °С. диссоциирует на воду и диоксид углерода. Углекислый газ покидает контейнер сквозь газопроницаемую стенку. В случае накопления молочной кислоты рН среды снижается, что ведет к нарушению жизнеспособности тромбоцитов. Таким образом, для поддержания рН и функциональной полноценности клеток необходим адекватный газообмен. Вход кислорода внутрь контейнера и выход наружу углекислого газа облегчаются при помешивании КТ (хотя есть данные о сохранении нормального состояния тромбоцитов без помешивания в течение 24 ч). Существует несколько типов устройств — помешивателей. Помешиватели с циркулярным или эллиптическим режимом могут работать в режимах 1, 2 или 6 переворотов в 1 мин. Плоские помешиватели производят 70 колебаний в 1 мин на 2,5-4 см в сторону. Также адекватному газообмену способствует полупроницаемый материал контейнеров для хранения КТ. Первое поколение контейнеров (использующихся для хранения крови и сейчас) было изготовлено из поливинилхлорида (ПВХ) и 2-диэтилгексилф- 360__________________________Глава 7. Трансфузионные среды талата (ДЭГФ). Толщина стенки этих контейнеров затрудняла адекватный газообмен, следствием чего был срок хранения КТ не более 3 дней. Контейнеры второго поколения состояли из различных комбинаций пластиков и пластикаторов: полиолефина, ПВХ и тримеллитата, тонкостенные контейнеры из ПВХ с ДЭГФ. Хотя в таких контейнерах адекватный уровень рН (более 6,0) поддерживался более 5 дней, возникла другая проблема — элюция токсичных пластикаторов в трансфузионную среду. Материалы современных контейнеров — модифицированный полиолефин без пластикаторов либо ПВХ с пластикатором три-2-этилгексилтримеллитат. Автоматический тромбоцитаферез позволяет уменьшить риск аллоимму-низации реципиента и сократить вероятность передачи гемотрансмиссивных инфекций. В КТ, полученном методами аппаратного афереза, количество тромбоцитов может быть от 200 до 800x109 клеток. В процессе афереза получают количество клеток, эквивалентное 3-13 дозам цельной крови. Поэтому КТ, полученный при одной процедуре, может быть разделен на несколько лечебных доз. Для реципиентов с повторными посттрансфузионными реакциями или aHTH-IgA-антителами может быть выполнено отмывание КТ. Трехкратное отмывание физиологическим или забуференным раствором может сократить концентрацию белка в супернатанте более чем в 1000 раз, при этом теряется 10-20 % тромбоцитов. Если КТ нужно хранить более 6 ч, должна использоваться только закрытая система. Объем плазмы или взвешивающего раствора должен быть достаточным, чтобы обеспечить концентрацию тромбоцитов менее 1,5x109/мл и уровень рН между 6,8 и 7,4. КТ хранят при помешивании, при температуре от 20 до 24 °С. Жизнеспособность тромбоцитов сохраняется в течение 7 дней, однако в настоящее время рекомендованный срок хранения — 5 дней. Взвесь тромбоцитов должна быть однородной при визуальном осмотре. Требования Совета Европы к контролю качества концентрата тромбоцитов, полученного методом автоматического цитафереза, представлены в табл.100. Концентрат тромбоцитов (КТ) замороженный сохраняется при ультранизких температурах (в жидком азоте) в присутствии ограждающего раствора «Тромбокриодмац». После размораживания КТ пригоден для переливания больным. Для замораживания может быть использован КТ, полученный любым методом в соответствии с ныне действующими инструкциями, сохраняемый не более 2-4 ч после заготовки крови от донора или тромбоцитафереза. Лечебная доза размороженного КТ должна содержать не менее 2,0x1011 клеток. 361 Основные требования (стандарты) к консервированной крови Таблица 100 Исследования при контроле качества концентрата тромбоцитов, полученного методом автоматического цитафереза
* Этому требованию должны соответствовать не менее 75 % обследованных доз. При использовании некоторых аппаратов содержание остаточных лейкоцитов может быть значительно ниже. ** Этому требованию должны соответствовать не менее 90 % обследованных доз. При использовании некоторых аппаратов содержание остаточных лейкоцитов может быть значительно ниже. *** Измерение рН целесообразно проводить в закрытой системе во избежание выхода СО2- Измерение может быть выполнено при любой температуре; значение расчетным методом конвертировано применительно к рН при 22 °С. Для тромбоцитов, сохраняемых в замороженном состоянии с раствором «Тромбокриодмац», предельные сроки хранения в жидком азоте составляют 2г. СЕ. По правилам Совета Европы тромбоциты для криоконсервирования получают методом цитафереза и в течение 24 ч замораживают, сохраняя при температуре -80 °С или ниже. В основном используют два метода криоконсервирования тромбоцитов: — с диметилсульфоксидом (ДМСО), 6% в/о; — с очень низким содержанием глицерина, 5 % в/о. Перед использованием тромбоциты размораживают и отмывают (или взвешивают) в аутологичной плазме или изотоническом растворе хлорида натрия. Режимы хранения замороженных тромбоцитов: — при температуре -80 °С в электрическом морозильнике; — при температуре -150 °С в парах жидкого азота. Этот режим рекомендован, если планируется хранить клетки в течение года и более. 362__________________________Глава 7. Трансфузионные среды Таблица 101 Исследования при контроле качества замороженных тромбоцитов
После оттаивания тромбоциты сразу же переливают (допускается кратковременное хранение при температуре от 20 до 24 °С и адекватном помешивании). Требования Совета Европы к контролю качества замороженных тромбоцитов представлены в табл. 101. 7.7.4. Свежезамороженная плазма Свежезамороженная плазма (СЗП) — это плазма, полученная от одного донора методом плазмафереза или из консервированной крови посредством ее центрифугирования, и замороженная при температуре -45 °С в течение первых 4 ч с момента пункции вены. Применение гепарина при получении СЗП недопустимо. Замораживание плазмы проводят в спиртовой ванне замораживателя при температуре - 45 °С и ниже или в холодильнике с принудительным обдувом рабочей камеры воздухом при той же температуре. Перед замораживанием в спиртовой ванне каждый полимерный контейнер с плазмой должен быть помещен в полиэтиленовый пакет во избежание химического взаимодействия со спиртом и затекания его в выходящие из контейнера трубки. Свежезамороженная плазма может храниться в холодильнике при температуре -30 °С и ниже в течение 12 мес с момента пункции вены при условии сохранения герметичности упаковки. Перед переливанием свежезамороженную плазму оттаивают на водяной бане или под струей теплой воды при температуре 35 — 37 °С (не выше) при периодическом покачивании контейнера. Оттаявшая плазма должна быть прозрачной, соломенно-желтого цвета, без мути, хлопьев, нитей фибрина и признаков гемолиза и перелита немедленно или не позднее 24 ч при условии ее хранения при температуре 2-6 °С. Уникальность плазмы как компонента крови состоит в том, что она используется непосредственно для нужд трансфузионной терапии и для производства препаратов. Основные требования (стандарты) к консервированной крови 363 СЕ. В СЗП содержится не менее 70 % фактора VIII:С и по крайней мере такое же количество иных лабильных факторов свертывания и их ингибиторов. При получении плазмы из цельной крови используют жесткое центрифугирование, предпочтительно в течение 6 ч, но не более 18 ч после заготовки. Плазма может быть выделена из ОТП. Также плазму можно получать в течение 24 ч из цельной крови, которую сразу же после кроводачи поместили в специальное устройство, поддерживающее температуру от 20 до 24 °С. Плазму, полученную методом ручного или автоматического плазмафере-за, нужно в течение 6 ч заморозить методом, обеспечивающим полное замораживание до -30 °С в течение часа. Разрешенные режимы хранения: — 24 мес при температуре менее -30 °С; — 12 мес при температуре от -25 до -30 °С; — 3 мес при температуре от -18 до -25 °С. Требования Совета Европы к контролю качества свежезамороженной плазмы представлены в табл. 102. Необходимость пулирования плазмы при оценке уровня фактор VIII обусловлена различием его содержания в зависимости от группы крови: у лиц группы крови О (I) содержание фактора VIII ниже на 20-25 %. Если свежезамороженная плазма регулярно используется для получения других препаратов, чем фактор VIII:C, процедуры контроля дополняются другими исследованиями, позволяющими оценить эффективность производства. 7.7.5. Криопреципитат Криопреципитированный антигемофильный фактор (криопреципитат) представляет собой нерастворимую при охлаждении часть плазмы, полученную из свежезаморженной плазмы. Перед получением криопреципитата производится оттаивание свежезамороженной плазмы при температуре от 0 до 4 °С до консистенции подтаявшего снега, после чего проводится центрифугирование оттаявшей плазмы в рефрижераторной центрифуге при температуре от 0 до 2 °С. Отделение плазмы от осадка криопреципитата производят немедленно после окончания центрифугирования, оставляя в контейнере или бутылке 20-25 мл жидкости. Замораживание криопреципитата проводят немедленно после его получения при температуре -45 °С и ниже. Срок годности криопреципитата (при условии его хранения при температуре -30 °С и ниже) составляет 3 мес. 364 Глава 7. Трансфузионные среды Таблица 102 Исследования при контроле качества свежезамороженной плазмы
* Если исследование не выполнено при контроле качества цельной крови, из которой получена плазма. ** Исследование проводится методом, специально одобренным для обследования доноров. *** Клетки подсчитываются до замораживания. Возможно снижение пороговых величин при включении в протокол процедур элиминации клеток. 365 Основные требования (стандарты) к консервированной крови Активность фактора VIII в одной дозе криопреципитата должна быть не менее 90 международных единиц (ME). Перед переливанием криопреципитат оттаивают на водяной бане или под струей теплой воды при температуре 35-37 °С (не выше). Оттаявший криопреципитат должен быть прозрачным, желтоватого цвета, без сгустков и хлопьев, и перелит немедленно или не позднее 4 ч при условии его хранения при комнатной температуре. Криопреципитат может быть лиофильно высушен в соответствии с действующей нормативно-технической документацией. Срок годности лиофилизированного криопреципитата (при условии его хранения при температуре 2-6 °С) составляет 12 мес. СЕ. Разрешенные режимы хранения криопреципитата: — 24 мес при температуре менее -30 °С; — 12 мес при температуре от -25 °С до -30 °С; — 3 мес при температуре от -18 °С до -25 °С. Требования Совета Европы к контролю качества криопреципитата представлены в табл. 103. Если криопреципитат регулярно используется для получения других препаратов, нежели фактор VIII:C, процедуры контроля дополняются другими исследованиями, позволяющими оценить эффективность производства. В некоторых случаях показано пулирование до 10 единиц криопреципитата. Если это выполняется в открытой системе, то пул должен быть использован в течение часа, его нельзя повторно замораживать. 7.7.6. Другие гемокомпоненты Кроме перечисленных выше гемокомпонентов, Советом Европы регламентировано производство и применение криосупернатантной плазмы, грануло-цитов и клеток-предшественников гемопоэза. Таблица 103 Исследования при контроле качества криопреципитата
366 Глава 7. Трансфузионные среды Криосупернатантная плазма. Этот компонент представляет собой плазму после удаления криопреципитата. Содержание альбумина, иммуноглобу-линов и свертывающих факторов в такой плазме такое же, как и в свежезамороженной, за исключением лабильных факторов V и VIII, а также фибриногена. Режимы хранения — аналогично свежезамороженной плазме. Гранулоциты, полученные методом цитафереза. Лейкоцитаферез выполняют с помощью сепараторов клеток, использующих прерывистый и непрерывный метод центрифугирования — потока. Качество этого компонента улучшается при добавлении веществ, способствующих осаждению эритроцитов (гидроксиэтилкрахмал, низкомолекулярный декстран, модифицированный жидкий желатин). Содержание гранулоцитов В крови донора увеличивается после введения кортикостероидов и Г-КСФ, однако безопасность этой процедуры исследуется и пока она не рекомендована. Гемокомпонент нестабилен, поэтому его переливание следует проводить в максимально ранние сроки после заготовки. При отсутствии такой возможности гранулоциты можно хранить не более 24 ч при температуре от 20 до +24 °С. При контроле качества гранулоцитов проводятся такие же исследования, как и для цельной крови с дополнениями, представленными в табл. 104. Клетки-предшественники гемопоэза. Примитивные полипотентные клетки, способные к созреванию и дифференцировке, получают из четырех источников: — костного мозга; — печени плода; — периферической крови; — пуповинной крови. Приживление клеток-предшественников гемопоэза (как аутологичных, так и аллогенных) обеспечивает восстановление кроветворения. Размер и плотность клеток-предшественников гемопоэза аналогичны мо-нонуклеарам периферической крови. Выявляют клетки-предшественники гемопоэза по их способности к колониеобразованию invitroи по специфическим мембранным маркерам. Общепринято использовать антиген CD34 как для выделения/очистки, так и в качестве индикатора при контроле качества. Таблица 104 Исследования при контроле качества гранулоцитов
Основные требования (стандарты) к консервированной крови_________367 Поскольку клетки-предшественники гемопоэза недолго сохраняют жизнеспособность в жидкой среде, для их хранения используют криоконсерви-рование при температуре ниже -120 °С. Количество клеток-предшественников гемопоэза должно быть достаточным для восстановления кроветворения реципиента. При аллогенных трансплантациях критерии к донору такие же, как и к донору цельной крови. Если донор этим критериям не соответствует, дона-ция возможна только после письменного разрешения врачей донора и реципиента. Опасностью при аутологичной трансплантации может быть наличие у пациента гемотрансмиссивной инфекции. В этом случае все сотрудники, участвующие в обследовании, заготовке, обработке и хранении препарата должны быть информированы. При хранении должна быть гарантия отсутствия возможности контаминации других компонентов. Костный мозг забирают из полостей губчатых костей, затем фильтрацией очищают от костных фрагментов, центрифугируют и отбирают слой миело-кариоцитов. Клетки-предшественники периферической крови заготавливают методом аппаратного цитафереза. Предварительно донору вводят ростовые факторы, стимулирующие выход клеток-предшественников в периферическую кровь. Такая технология позволяет получить за одну процедуру афереза достаточно материала для успешной аутологичной трансплантации. Минимальная доза CD34+ клеток, необходимая для восстановления кроветворения, — 2x106клеток/кг массы тела реципиента. Пуповинную кровь получают из свежей плаценты через вену пуповины. Различные технологии допускают использование разных дополнительных процедур: — удаление гранулоцитов и эритроцитов; — элиминация (уменьшение содержания) злокачественных клеток в ауто-логичных образцах; — элиминация (уменьшение содержания) Т-лимфоцитов в аллогенных образцах для уменьшения риска болезни «трансплантат против хозяина»; — очистка (положительная селекция) клеток-предшественников; — накопление клеток-предшественников invitro(культивирование). Вследствие интервала между отбором и трансфузией аутологичных клеток-предшественников и клеток-предшественников пуповинной крови для хранения этого материала используют криоконсервирование. Клетки суспендируют в среде, содержащей криопротектор (чаще — ди-метилсульфоксид) и белок (аутологичную плазму или альбумин), и замораживают в специальных контейнерах со скоростью -1 °С в 1 мин. Хранят клетки-предшественники в парах азота. Размораживание осуществляют, помешивая контейнер в водяной бане, при температуре 37 °С. 368__________________________Глава 7. Трансфузионные среды Недостаток ДМСО — токсичность, поэтому перспективны разработки новых криопротекторов, методов отмывания и ультрафильтрации размороженных образцов. Для контроля качества необходимо готовить специальные референс-об-разцы. Всем донорам выполняют HLA-типирование. При контроле качества во всех образцах определяют жизнеспособность лейкоцитов (должна быть не менее 80 %) и стерильность. 7.8. Расчет нормы расхода компонентов донорской крови на одного пролеченного больного в год При расчете расхода компонентов крови на одного пролеченного больного необходимо иметь в виду, что в среднем только 30 % всех пролеченных больных нуждаются в проведении трансфузионной терапии. Количество больных, нуждающихся в трансфузионной терапии, определяется отношением: Число пролеченных больных на профильной койке за 1 год |