Ситуационные задачи микра. сит.задачи. Назовите микробы, чаще всего вызывающие инфекционные гепатиты
 Скачать 266.8 Kb.
|
|
Задания по теме: «Микробиологическая диагностика туберкулеза и лепры». Решить ситуационные задачи. Задача № 1. При рентгенологическом исследовании в легких обнаружен инфильтрат. Подозревают туберкулез легких. а) При бактериоскопическом и бактериологическом исследовании мокроты микробактерии туберкулеза не обнаружены. Исключает ли это туберкулез легких у данного больного? Какой метод микробиологической диагностики более чувствительный? Как Вы его проведете? Нет, не исключает наличие туберкулеза легких. Провести метод микрокультур Прайса. На нескольких предметных стеклах делают толстые мазки из исследуемого материала, высушивают, обрабатывают несколько минут 2-6% серной кислотой и нейтрализуют. Затем стекла опускают во флаконы с гемолизированной цитратной кровью в разведении 1/4-1/8 и ставят в термостат. Через 4-14 дней извлекают стекла, фиксируют препарат, окрашивают по Цилю–Нильсену и микроскопируют. Вирулентные штаммы образуют микрокультуры, имеющие вид кос или жгутов. б) После п./к введения морской свинке мокроты больного, животное погибло после заражения через 1,5 месяца. На вскрытии обнаружены казеозные паховые лимфоузлы и увеличенная селезенка, на поверхности которой несколько желтоватых бугорков. Как Вы будете расценивать эту биологическую пробу? Какой диагноз поставите больному на основании этой пробы? Оценивается как положительный результат. Диагноз- туберкулез. Задача №2 В клинику поступил больной с жалобами на боли при мочеиспускании и кровь в моче. При бактериоскопическом исследовании осадка мочи обнаружены кислотоустойчивые палочки. Как Вы будите расценивать эту находку? Поставите ли Вы больному диагноз «туберкулез почек» на основании этих данных. Если нет, то, какое исследование мочи Вы порекомендуете провести? Какие кислотоустойчивые сапрофитные палочки могут присутствовать в моче? Ускоренный метод бактериологической диагностики. Микобактерии туберкулеза Задача №3. Двухлетний ребенок имел контакт с больным туберкулезом легких. Как выяснить заразился ли он, т.е. инфицирован ли он? Провести подкожную пробу Манту Задача №4. У больного ребенка 7 -ми лет при рентгенологическом обследовании обнаружены изменения в легких. Ребенок кашляет, но мокроты для бактериологического исследования собрать не удается. Какой материал можно взять у ребенка для бактериологического исследования на микробактерии туберкулеза? Какие еще методы диагностики можно применить? Промывные воды бронхов. Бактериоскопическое, биологическое, ПЦР,РИФ Задача №5. При посеве мокроты на среду Левенштейна - Иенсена через 4 дня обнаружены гладкие, влажные колонии желтого цвета. ИЗ колоний сделан мазок и окрашен по Цилю - Нильсену. При бактериоскопии мазка обнаружены кислотоустойчивые палочки. Какое Вы дадите заключение? Получен ли рост микробактерий туберкулеза или нет? Был получен рост микробактерий туберкулеза. Необходимо сделать дополнительное серологическое исследование чтобы подтвердить диагноз. Задача № 6. Ребенок 4-лет находится в контакте с больным туберкулезом отцом. Как уберечь его от заражения? В роддоме проводят вакцинацию новорожденным препаратом БЦЖ. Задача №7. У подростка 16-ти лет реакция Манту в разведении 1:2000 отрицательная. Подлежит ли он ревакцинации? Можно ли ревакцинировать взрослых с отрицательными туберкулиновыми кожными реакциями? Необходимо провести ревакцинацию. Да, можно ревакцинировать взрослых с отрицательной кожной пробой, т. к . они не имеют иммунитет к туберкулезу. Вопросы 2.Ответить на вопросы: А) Какие заболевания вызывают вирусы Коксаки и ECHO? Вирус Коксаки А вызывает у человека гепарингу (герпетиформные высыпания на задней стенке глотки, сопровождающиеся дисфагией, лихорадкой, анорексией), пузырчатку в полости рта и конечностей, полиомиелитоподобные заболевания. Вирус Коксаки А24 вызывает геморрагический конъюктивит. Вирус Коксаки В вызывают полиомиелитоподобные заболевания энцефалит, миокардит, пери- и эндокардиты, спорадические параличи. Вирусы ЕСНО вызывают ОРВИ, асептический менингит, полиомиелитоподобные заболевания , фульминантный энцефаломиокардит у новорожденных. Б) Какие методы применяются для обнаружения и выделения вирусов Коксаки? Используют вирусологический метод, выделяя вирус из фекалий, отделяемого носоглотки путем одновременного заражения культур клеток и мышей-сосунков. В) Как обнаруживают и идентифицируют вирусы Коксаки А и В? Вирусы идентифицируют в РТГА,РСК,РН,ИФА, учитывая также характер патологических изменений у зараженных мышей. Г) Какие методы применяются для обнаружения и выделения вирусов ECHO?  Проводятся вирусологические и серологические методы. Вирус выделяют из цереброспинальной жидкости, отделяемого носоглотки, заражая культуры клеток почек обезьян. Идентификацию вируса проводят в РТГА, РСК, РН, ИФА. Серологическую диагностику проводят , определяя в парных сыворотках крови нарастания титра антител, используя РТГА, РСК, РН, ИФА. А) Какие ускоренные методы применяются для обнаружения C. Perfringens? Центрифугирование исследуемого материала с его последующим исследованием. Проводят реакцию нейтрализации, так же проводят экспресс-диагностику методами Риф и/или газовой хроматографии. При наличии в исследуемом материале C. Perfringens, обнаруживают крупные прямые палочки со свечением по периферии. Б) Какие микробиологические методы используются для диагностики анаэробных инфекций? Используют материал: кусочки некротизированных тканей, экссудат, гной, отделяемое ран, кровь, секционный материал. Микроскопический метод. Микроскопия окрашенных по Граму, Цилю-Нильсену и Гинсу-Бурри мазков, приготовленных из материала от больного с целью обнаружения крупных грамположительных палочек, образующих капсулы и центрально или субтерминально расположенные споры Бактериологический метод. Производят посев исследуемого материалана среды Цейсслера (анаэробный кровяной МПА), Китт-Тароцци, железо-сульфитный агар (ЖСА) и молоко. В молоке через 3-4 часа образуется губкообразный сгусток, погруженный в прозрачную жидкость. На среде Китт-Тароцци через сутки регистрируется помутнение и образование газа, на ЖCA - черные колонии в глубине агарового столбика, на среде Цейсслера – шероховатые (реже – гладкие), крупные, плоские сероватые колонии с зоной гемолиза. В глубине плотных питательных сред образуются колонии в виде чечевичек, дисков, комочков ваты и т.д. В мазках из колоний обнаруживают крупные грамположительные палочки . Для выделения чистой культуры возбудителей газовой гангрены типичные колонии пересевают на среду Китт-Тароцци и идентифицируют до вида В) Какие типы токсина продуцирует возбудитель ботулизма и что поражает токсин? Продуцирует экзотоксин, поскольку в организме возбудитель практически не размножается. Токсин состоит из двух субъединиц: одна отвечает за адсорбцию на рецепторах чувствительных клеток, другая за проникновение внутрь путем эндоцитоза. Проникнув из кишечника в кровь, токсин поступает в периферические нервные окончания, где блокирует слияние синаптических пузырьков с мембраной. Поражаются бульбарные нервные образования, нарушается зрение, возникает асфиксия. Г) Назовите принципы идентификации анаэробов. Идентификация производится путем выявления и типирования экзотоксинов. Для этого исследуемый материал подвергают реакции нейтрализации.  А) Какой материал берется для исследования при подозрении на дифтерию и при обследовании на бактерионосительство и какие микробиологические методы применяются для диагностики дифтерии? Ответ: исследуемым материалом служат дифтерические пленки или отделяемое пораженной слизистой оболочки зева, носа( при других формах- отделяемое ран, наружных половых органов или конъюктивы глаза и, как от микробоносителей, - отделяемое слизистой оболочки зева и носа). По требованию эпидемиолога исследуют пищевые продукты ( молоко, мороженное), смывы с различных предметов. Для диагностики дифтерии применяют бактериологический метод ( посев материала производят на одну из элективных сред в чашках Петри: кровяно-теллуритовый агар, кровяной агар, среду Клауберга 2, сывороточно-теллуритовую среду с цистином ( по Тинсдалю), хинозольную среду Бучина) Модификационный метод Илека Микроскопия Серодиагностическое исследование Б) Какими методами и как определяют токсигенность возбудителя дифтерии? Ответ: определение токсигенности культур in vitro, модификционный метод Илека, высокочувствительные методы- РНГА с антительным эритроцитарным дифтерийным диагностикумом, ИФА с моноклональными антителми, причем ИФА И РНГА позволяют также обнаружить токсин в сыворотке крови, ПЦР, проба Шика В) Как и с какой целью ставят пробу Шика? Ответ: Это кожная проба для оценки восприимчивости человека к дифтерии, одна из аллергических диагностических проб. Проводится путем внутрикожного введения разведенного активного дифтерийного токсина . Г) Какими факторами патогенности обладает возбудитель дифтерии? Ответ: поверхностные структуры липидной и белковой природы (корд-фактор, вместе с К-антигенами и коринеформными некислотоустойчивыми миколовыми кислотами, входящими в состав микрокапсулы, ферменты и токсины) C. diphtheria образует ферменты агрессии и инвазии: нейраминидазу и N-ацетилнейрамиатлиазу, гиалуронидазу, гемолизин, дермонекротоксин Д) Что поражает (какие органы и системы органов) дифтерийный токсин? Каковы природа и структура дифтерийного токсина? Ответ: Локализация процесса при дифтерии определяется входными воротами инфекции. Возможно возникновение дифтерии носа, гортани, трахеи, глаз, уха, половых органов у девочек, дифтерии кожи и ран. При одновременном поражении двух органов и более диагностируется комбинированная форма дифтерии.  Дифтерийный гистотоксин синтезируется виде единой полипептидной цепи ( протоксина), который активируется под действием протеолитических ферметнов, что ведет к образованию А-В- фрагментов токсина. Фрагмент В отвечает за специфическое взаимодействие с ганглиозидными рецепторами клетки и участвует в образовании транспортного канала для фрагмента А. Активированный фрагмент А обладает ферментативной АДФ-рибозилтрансферазной активностью. Его мишень- фактор элонгации трансфераза 2, необходимая для построения пептидных цепей на рибосомах эукариотической клетки. Блокада фермента ведет к нарушению синтеза белка на стадии элонгации и к в результате некроза гибели клеток. Дифтерийный гистотоксин обладает специфичностью действия, поражая клетки сердечно-сосудистой, нервной систем, почек и надпочечников. А) Характеристика токсинов и ферментов патогенности. гемолизины альфа, бетта, гамма, сигма повреждают мембраны клеток(мембранотоксины). Они образуют каналы в цитоплазматической мембране эритроцитов, лейкоцитов и других клеток, нарушая их осмотическое давление и приводя к лизису. Лейкоцидин избирательно действует лейкоциты, разрушая их. Энтеротоксины (A-F) относятся к гистотоксинам, вызывая пищевую интоксикацию. Энтеротоксины характеризуются высокой термостабильностью и устойчивостью к протеолитическим ферментам. вызывают поликлональную стимуляцию Т-лимфоцитов с последующей гиперсекрецией цитокинов и вторичной интоксикацией. Экзотоксин, вызывающий синдром токсического шока, является суперантигеном. Его продукция связана с наличием профага (лизогенная конверсия). Эксфолиативный токсин разрушает межклеточные контакты в эпидермисе, что ведет к отслоению поверхностных слоев эпидермиса и образованию изъязвляющих пузырей. Ферменты: Плазмокоагулаза вызывает свертывание плазмы крови. Каталаза защищает стафилококк от действия кислородзависимых бактерицидных механизмах фагоцитоза. Лецитовителлаза разрушает оболочки клеток , жировые пробки в устье волосяных фолликулов, подавляет фагоцитоз. Гиалуронидаза разрушает гиалуроновую кислоту, способствует распространению возбудителя, расширению зоны поражения. Фибринолизин разрушает фибриновые сгустки с образованием инфицированных микротромбов и способствует генерализации инфекции. Мурамидаза растворяет клеточные стенки бактерий, подавляяет фагоцитоз. Нейраминидаза расщепляет сиаловые кислоты в слизи, оболочках клеток, способствует проникновению в клеки и распространению в межклеточном пространстве. Б) Какова роль стрептококков при скарлатине? Возбудитель β- гемолитический стрептококк А. главными путями передачи является воздушно-капельный, контактный, пищевой. Патогенез заболевания связан с продукцией токсинов и ферментов : гемолизин, стрептолизин, стрептокиназы А и В, дезоксирибонуклеазы, гиалуронидазы. Со стрептококковой инфекцией также связано невролгических расстройств у детей. В) Как и с какой целью осуществляют фаготипирование стафилококков? Фаготипирование необходимо для идентификации штаммов бактерий, вызвавших тот или иной всплеск инфекционных заболеваний. Так как стафилококков множество видов, при лечении необходимо точно знать какой возбудитель вызвал данное заболевание, используют для определения вида фагов. В несколько чашек с питательной средой высевают бактерии неизвестного возбудителя или известного возбудителя, но его неуточненного штамма. В каждую из них наносят капли специфических фагов, заранее известных. Если в чашке оказывается культура бактерий, чувствительных к конкретному фагу, то происходит лизисбактерии (точнее ее оболочки), при котором она разрушается. А в чашке появляются видимые стерильные зоны. Это означает, что штамм бактерии определен. Если такие зоны не образуются, значит, тип запущенного в колонию бактерий фага не соответствует этой бактерии.  А) На основании каких признаков делается заключение об обнаружении гонококков в микропрепарате из гнойного отделяемого? Выявление Neisseria gonorrhoeae в клинических образцах путем определения антигена (методом ИФА или непрямой иммунофлуоресценции – РНИФ) или обнаружение нуклеиновой кислоты возбудителя (методом полимеразной цепной реакции). В случае определения антигена или нуклеиновой кислоты гонококка у детей инфекция может быть зарегистрирована только при наличии культуральной диагностики с определением каталазного теста, или обнаружение грамотрицательных внутриклеточных диплококков в мазках из уретры у мужчин Б) Как осуществляют бактериологическую и серологическую диагностику гонококковых заболеваний? Бактериологическое исследование Посев производят непосредственно после взятия материала. Для культивирования гонококка используют МПА (pH 7,4) с добавлением асцетической жидкости (1/3)- асцит-агар. Для подавления роста сопутствующей микрофлоры в среду рекомедуется добавить антибиотики: полимиксин М (25 ЕД/мл среды), ристомицина сульфат (20 ЕД/мл среды). Посевы культивируют при 37 С в атмосфере с 10% СО2. Гонококк дает рост обычно через 24ч в виде мелких колоний, напоминающих росу, бесцветных или слегка желтоватых. Края колонии ровные, поверхность блестящая и гладкая. Характерным признаком является ранний аутолиз центральной части колоний. Выделенные чистые культуры идентифицируют по морфологическим, тинкториальным и биохимическим свойствам. У выделенных культур обязательно проверяют чувствительность к антимикробным препаратам, в первую очередь пенициллинам. Серологическое исследование Серодиагностику, проводят при хронической гонорее, когда у больного отсутствуют выделения и провести бактериоскопическое и бактериологическое исследование не представляется возможным. В этих случаях сыворотку крови больного исследуют в РСК или РНГА со стандартным гонококковым антигеном. В) Какой материал берется на исследование при разных формах менингококковых заболеваний и как он исследуется? Материалом для исследования при менингококковой инфекции служат спинно-мозговая жидкость (при менингите), кровь (при менингококкцемии) и отделяемое носоглотки (при назофарингите и обследовании на носительство). Спинномозговую жидкость берут иглой асептично из спинномозгового канала в объеме 2–5 мл в стерильную посуду. Сразу же переносят в 2 центрифужные пробирки. Одну для бактериологического (2,0 мл), другую для клинического исследования (1 мл). Пробирки для бактериологического исследования оберегают от охлаждения, так как менингококки очень чувствительны к понижению температуры, они отмирают при температуре (±1 градус). Пробирку завертывают в вату, помещают в контейнер, где поддерживают температуру 37 градусов. От момента сбора материала до его посева не должно пройти более 2–3 часов. Кровь забирают из локтевой вены асептично в объеме 5–10 мл и сразу же помещают в бульон с 0,1% агаром. Посевной материал и питательную среду берут в соотношении 1:10. Отделяемое носоглотки собирают стерильным ватным носоглоточным тампоном, укрепленном на проволоке. Конец тампона, где накручена вата, изгибают под углом 135 градусов. Стерильным шпателем, держа его в левой руке, прижимают корень языка, вводят тампон концом вверх под мягкое небо в носоглотку и легкими движениями снимают слизь. Извлекают тампон осторожно, чтобы не задеть щеку, язык, не коснуться зубов.  |