Рководство по туберкулезу. Стратегия и организация национальной программы по контролю над туберкулезом в республике казахстан 1 Цель контроля над туберкулезом в рк
 Скачать 1.83 Mb.
|
|
3.5.2 Техника чтения мазка При микроскопировании следует просматривать не менее 100 полей зрения, чтобы дать количественную оценку препарату и обнаружить единичные микобактерии. В том случае, если результат такого исследования оказывается отрицательным, для подтверждения рекомендуется просмотреть все 300 полей зрения. При значительном количестве кислотоустойчивых микобактерии достаточно исследовать 20 - 50 полей зрения при окраске по Циль - Нильсену. При микроскопическом исследовании препарата необходимо быть уверенным, что ни одно поле зрения препарата не просматривается повторно, поэтому рекомендуется просматривать препарат всегда по одной и той же схеме: три параллельные линии по длине препарата. 26 Просматривать препарат начинают с левого верхнего выбранного в мазке поля зрения, постепенно передвигаясь вдоль продольной оси препарата до конца мазка, и затем вновь опускаясь вниз и двигаясь в противоположном направлении и т.д., проходя все поля зрения до границы мазка (рисунок 1).
Рисунок 1. Линии просмотра мазка размером 1x2 см. 324 - порядковый номер из журнала ТБ 04; 2 - номер порции мокроты По окончании микроскопического исследования предметное стекло следует освободить от препаратодержателя; а) снять предметное стекло со столика микроскопа; б) сверить номер на стекле и направлении ТБ 05 и записать результат микроско- пии в журнале ТБ 04; в) для удаления иммерсионного масла опустить мазок на несколько секунд в баночку с ксилолом, или в случае отсутствия ксилола, протереть мазок сухой салфеткой; г) очищенный от иммерсионного масла мазок поместить в коробку для последу- ющего хранения Туберкулезные бактерии - маленькие красные палочки, слегка изогнутые, более или менее зернистые, изолированные, парами, группами, хорошо видны на голубом фоне мазка. Подсчитать количество кислотоустойчивых бактерий (КУБ) и записать результат. Перед следующим мазком протереть иммерсионные линзы чистой салфеткой. 3.5.3 Результаты исследования Число обнаруженных бактерий определяет тяжесть заболевания и опасность больного для окружающих. Следовательно, исследование должно быть не только качественным, но и количественным. Регистрация результатов с указанием числа обнаруженных КУБ проводится следующим образом: Таблица 3 - Регистрация результатов микроскопического исследования
Отправка результатов исследования Результаты исследования всех препаратов должны регистрироваться в лабораторном журнале ТБ-04. Затем на основании записей в ТБ-04 результаты вносятся в форму ТБ-05, после чего ее отправляют в медицинское учреждение как можно быстрее.3.5.4 Уничтожение исследованных мазков   Мазок с обнаруженными на нем КУБ помещают в специальный ящик и хранят в лаборатории для последующего контроля качества. После проведенного контроля качества мазки с КУБ (+) подлежат вывозу на свалку после предварительного обеззараживания (погружение в дезраствор, кипячение, ав-ток лавирование). Предметные стекла с отрицательными результатами мазков можно использовать повторно после обеззараживания при отсутствии механических повреждений (сколы, царапины и т.д.). 3.6 Люминесцентная микроскопия Люминесцентная микроскопия использует подсветку от кварцевой или галогеновой лампы, либо от ртутной лампы высокого давления. Преимущество люминесцентной микроскопии заключается в том, что мазки просматриваются при меньшем увеличении, тем самым охватывается большая область и как результат, времени на просмотр затрачивается значительно меньше. Недостатком люминесцентной микроскопии является вероятность принятия кислотоупорных артефактов за кислотоустойчивые палочки. Поэтому рекомендуется проверять все найденные сомнительные палочки под большим увеличением, а положительные мазки подтверждать окрашиванием по методу Циля-Нильсена. 3.6.1 Приготовление реактивов Аурамин О
Аурамин является канцерогенным веществом и поэтому следует избегать прямого контакта с порошком или раствором красителя. Фенол
Смешайте растворы №1 и №2. Реактив хранится в прочно закрытой емкости из темного стекла в темноте, вдали от источников тепла. Раствор хранится при комнатной температуре в течение 3 месяцев. Реактив может помутнеть во время хранения, но это не отражается на качестве окрашивания. Обесцвечивающий раствор:
Осторожно добавьте концентрированную соляную кислоту к 70% этиловому спирту. Всегда медленно добавляйте кислоту в спирт, не наоборот. Смесь может нагреться. Приготовленный реактив хранится во флаконе из темного стекла. Раствор может храниться при комнатной температуре до 3 месяцев. Соляно-кислый спирт 3,0%: - Концентрированная соляная кислота 3 мл - 95% этиловый спирт (можно технического качества) 97 мл Осторожно добавьте концентрированную соляную кислоту к 95% этиловому спир- 28 ту. Всегда медленно добавляйте кислоту в спирт, не наоборот. Смесь может нагреться. Приготовленный реактив хранится во флаконе из темного стекла. Раствор может храниться при комнатной температуре до 3 месяцев. Фоновое окрашивание В качестве красителей возможно использование перманганата калия, акридинового оранжевого; 0,25% водного раствора метиленового синего и кислого фуксина. Перманганат калия
Растворите перманганат калия в дистиллированной воде. Приготовленный реактив хранится в хорошо укупоренном флаконе из темного стекла. Раствор может храниться при комнатной температуре до 3 месяцев. Акридиновый оранжевый
Приготовленный реактив хранится во флаконе из темного стекла в темноте и вдали от источников тепла. Раствор может храниться при комнатной температуре до 3 месяцев. Кислый фуксин
Метиленовый синий (0,25% водный раствор)
Растворите метиленовый синий в дистиллированной воде. Раствор может храниться при комнатной температуре до 3 месяцев. На всех флаконах с реактивами написать название реактива, дату приготовления и срок хранения. 3.6.2 Методика окраски Поместите пронумерованные мазки на мостик в количестве, удобном и безопасном для работы (максимум 12). Убедитесь, что мазки не соприкасаются друг с другом.
29 
Предосторожности во время окрашивания:
3.7 Контроль качества бактериоскопических исследований Программа контроля качества бактериоскопической лаборатории представляет собой систему, предназначенную для постоянного улучшения эффективности, повышения надежности работы этой службы, что позволит сделать бактериоскопию средством выбора при диагностике и мониторинге. Компонентами программы являются:
3.7.1 Внутренний контроль качества бактериоскопической лаборатории - это процесс эффективного и систематического отслеживания рутинной работы в лаборатории на регулярной основе. Функционирование этой программы гарантирует, что информация, полученная в ходе исследований, точна, надежна и воспроизводима. Внутренний контроль качества это ответственность всего лабораторного персонала. Контроль должен быть направлен на следующее:
Ключевыми аспектами успешной программы внутреннего контроля качества являются:
30
3.7.1.1 Использование контрольных (положительных и отрицательных) мазков: - ежедневно вместе с текущими мазками необходимо включать контрольные (заведомо положительный и отрицательный) мазки 3.7.1.2 Контроль качества растворов и реактивов:
3.7.1.3 Контроль качества центровки светового источника бинокулярного микроскопа. Оборудование должно регулярно (каждые 6 месяцев) контролироваться для гарантии точности и правильности его регулировки специалистом по медоборудованию. 3.7.2 Внешний контроль качества Вешняя оценка качества (ВОК) по стандартам ВОЗ относится к целевой ретроспективной системе сравнения результатов из различных лабораторий посредством программ, организуемых внешними агентствами, такой как референс-лаборатория. Главная цель ВОК - достигнуть сопоставимости результатов различных лабораторий, в соответствии со стандартами. Выявленные недостатки позволят направить усилия на их устранение и улучшить качество. Существуют три метода ВОК, которые используются для оценки работы лабораторий:
3.7.3 Улучшение качества Процесс, посредством которого различные аспекты работы лаборатории подвергаются постоянному анализу для улучшения достоверности, эффективности и использования лабораторных данных. Ключевым компонентом этого процесса является сбор данных и их анализ, а также творческое решение возникающих проблем. 3.8 Культуральные методы выделения МВТ Вопросы культурального исследования описаны в Методических рекомендациях НЦПТ МЗ РК "Культуральные методы выявления микобактерий туберкулеза и определения лекарственной чувствительности к противотуберкулезным препаратам 1-й линии", 2004г. Культуральное или бактериологическое исследование (посев) применяется для подтверждения диагноза "туберкулез" в случае отрицательного результата микроскопии мазка мокроты и внелегочного туберкулеза, а также для определения лекарственной чувствительности МБТ. 31  Культуральный метод выделения МБТ следует использовать:
Результаты культурального исследования Интенсивность роста обозначают по 4-х балльной системе: Таблица 4 - Оценка результатов культурального исследования   единичные, до 20 колоний (скудное бактериовыделение) от 20 до 100 колоний (умеренное бактериовыделение) более 100 колоний (массивное бактериовыделение) сплошной рост колоний (массивное бактериовыделение)    В настоящее время в международной практике используются методы ускоренной диагностики туберкулеза - детекция микобактерий и определение их чувствительности к лекарственным препаратам с использованием жидких сред и полностью автоматизированных микробиологических систем, как например БАКТЕК-Миджит-960. Ускоренные методы диагностики туберкулеза имеют ряд преимуществ: короткие сроки установления бактериовыделения и определение чувствительности к препаратам; выбор адекватного лечения с учетом чувствительности к ПТП первого ряда. |
