Биохим_15. Учебное пособие Хабаровск 2015 методические указания составили поступаев валерий Васильевич, д м. н., профессор

• Название: Учебное пособие Хабаровск 2015 методические указания составили поступаев валерий Васильевич, д м. н., профессор
• Дата: 23.03.2022
• Размер: 2.47 Mb.
• Имя файла: Биохим_15.doc
• Тип: Учебное пособие; #410084
• страница: 6 из 52

Тестовые задания

1. 
   Определите суммарный заряд (в условных единицах) данного пептида при растворении его в воде при нейтральной реакции среды:
   

Н₂N-лей-лиз-тир-лиз-три-арг-асп-СООН

1) +1;

2) +2;

3) +3;

4) 0;

5) -1.

2. 
   Определите суммарный заряд пептида:
   

Н₂N-ала-лиз-вал-арг-глу-лиз-асп-СООН в кислой среде при пол-

ном подавлении диссоциации карбоксильных групп.

1) +1;

2) +2;

3) +3;

4) +4;

5) +5.

3. 
   Укажите характер заряда белка при рН 7,0, если его изоэлектрическая точка равна 9,0.
   
4. 
   Присоединение к пептиду ала-вал-гли-тре одного из трипептидов придает ему
   

   А. Кислотные свойства Б. Основные свойства

   1) сер-арг-лиз; 2) асп-лиз-лей; 3) лей-три-фен; 4) глу-глн-иле; 5) фен-цис-три.

5. 
   Определите, в какой среде находится изоэлектрическая точка белков гистонов, богатых аминокислотами лизин и аргинин.
   
6. 
   Расположите в логической последовательности приемы, позволяющие выделить из ткани индивидуальный белок
   

   гель-фильтрация; гомогенизация; экстракция;

   высаливание; кристаллизация.

7. 
   Укажите, в какой последовательности будут выходить белки при гель-фильтрации их смеси через колонку, заполненную сефадексом:
   

1. 
   трансферрин (молекулярная масса 88000);
   
2. 
   интерферон (молекулярная масса 26000);
   
3. 
   иммуноглобулин (молекулярная масса 95000);
   
4. 
   инсулин (молекулярная масса 6000);
   
5. 
   Яичный альбумин (молекулярная масса 45000).
   

8. 
   Укажите причину створаживания прокисшего молока
   

1. 
   кислотный гидролиз казеина;
   
2. 
   денатурация казеина в кислой среде;
   
3. 
   денатурация альбумина в кислой среде;
   
4. 
   достижение изоэлектрической точки казеина и его агрегация;
   
5. 
   образование комплекса белка с органическими кислотами.
   

9. 
   Определите направление движения в электрическом поле (к аноду или к катоду) белка, изоэлектрическая точка которого рН 9,0 в нейтральном буфере (рН 7,0).
   
10. 
    Для разделения смеси белка и сульфата аммония можно использовать
    

электрофорез; высаливание; афинную хроматографию;

гель-хроматографию; диализ.

Занятие 4. Структурная организация белков

Мотивация: Знание структурной организации белков необходимо для понимания свойств белковых молекул, причин возникновения заболеваний, связанных с нарушением структуры и свойств белков.

Цель занятия: Изучить структурную организацию белковых молекул, химические связи, формирующие ее; изменения свойств белков при денатурации; причины протеинопатий; классификацию белков.

Студент должен:

Знать	Уметь
Уровни структурной организации белковых молекул. Типы химических связей, формирующих структуры белка. Методы изучения белковых структур. Денатурацию белка. Денатурирующие агенты. Использование процессов денатурации белка в	1. Объяснить изменение свойств белков при нарушении его первичной структуры (на примере гемоглобина). 2. Провести реакции осаждения белка в различных условиях.
медицине. Гидролиз белка. Виды гидролиза. Классификацию белков. Основные представители отдельных классов белков, их значение для жизнедеятельности. Биологически активные пептиды, их роль.

Вопросы, изученные ранее и необходимые для данного занятия:

	Вопросы	Где изучались
1.	Свойства различных групп аминокислот	Кафедра органической химии
2.	Виды связей в органических соединениях	Там же

Содержание обучения.

Граф логической структуры темы

Уровни_белковых_структур'>Уровни белковых структур

Первичная

В торичная

Третичная

Четвертичная

Связи, их стабилизирующие

Пептидная

Водородная

Водородная, ионная, дисульфидная, гидрофобная

Водородная, ионная, гидрофобная

Нарушение белковой структуры

Денатурация

Гидролиз

Уровни нарушения

четвертичная

третичная

вторичная

первичная

Факторы, ее вызывающие

Высокая температура, ионизирующее излучение, соли тяжелых металлов, экстремальные значения рН, алкалоидные реактивы

Кипячение в кислой среде, кипячение в щелочной среде, протеолитические ферменты

Классификация простых белков

Глобулярные

Фибриллярные

Примеры

альбумины глобулины протамины гистоны

миозин актин фибриноген

Классификация сложных белков

Липопротеины Фосфопротеины Металлопротеины Гликопротеины Нуклеопротеины Хромопротеины

Небелковый компонент

углеводы липиды нуклеиновые фосфат гем, катионы кислоты вит. В2, А металлов

Вопросы и задания для самоподготовки

1. 
   Выясните зависимость физико-химических свойств белков от их первичной структуры.
   
2. 
   Изучите понятие «видовая специфичность белка». На примере инсулина различных видов животных покажите видовую специфичность первичной структуры.
   
3. 
   Выясните, что такое первичная структура белка, какие связи участвуют в ее образовании. Охарактеризуйте эти связи.
   
4. 
   Выясните, как образуется вторичная структура белка, какие связи ее стабилизируют, какие типы ее выделяют.
   
5. 
   Изучите третичную структуру белка, поясните механизм образования связей стабилизирующих ее. Используя учебник биохимии, представьте на рисунке примеры связей, стабилизирующих нативную конформацию белка.
   
6. 
   Выясните, что такое четвертичная структура белка, какие связи участвуют в ее образовании. Укажите роль шаперонов в формировании конформации белков.
   
7. 
   На примере гемоглобина выясните сущность кооперативных изменений конформации протомеров и зависимость биологической активности от четвертичной структуры.
   
8. 
   Выясните механизм денатурации белков, определите, какие связи разрушаются при денатурации и как это сказывается на белковых структурах.
   
9. 
   Изучите процесс гидролиза белка, перечислите факторы, которыми он вызывается. Назовите вид гидролиза характерный для живых организмов.
   
10. 
    Рассмотрите классификацию белков, отметьте отличие простых белков от сложных, назовите простетические группы сложных белков.
    

Ориентировочная карта действия

№	Вопросы, подлежащие изучению	Последовательность работы и способ оформления результатов
1.	Осаждение белков при нагревании.	Ход работы: В 5 пробирок наливают по 0,5 мл раствора яичного белка. Содержимое первой пробирки нагревают и наблюдают появление опалесценции (помутнение раствора). К раствору яичного белки во второй пробирке добавляют осторожно одну каплю 1%-ного раствора уксусной кислоты, нагревают и наблюдают в на-
		чале появление опалесценции, а при дальнейшем нагревании выпадение белого хлопьевидного осадка белка. Это объясняется тем, что белок теряет заряд и находится в изоэлектрическом состоянии. К раствору яичного белка в третьей пробирке добавляют 1-2 капли 10% раствора уксусной кислоты и нагревают. Осадок при этом не образуется, так как частицы белка перезаряжаются, приобретают положительный заряд. К раствору яичного белка в четвёртой пробирке добавляют 1-2 капли 10% раствора уксусной кислоты, 1 каплю насыщенного раствора хлорида натрия и нагревают. Выпадает осадок белка, так как происходи нейтрализация заряда на частицах белка. К раствору яичного белка в пятой пробирке добавляют 1 каплю 10% раствора гидроксида натрия и нагревают. Осадок не образуется, так как отрицательный заряд на частицах белка усиливается. Результаты опыта и выводы записываются в таблицу: № про-бирки Среда Наблюдаемые изменения Выводы 1 Нейтральная 2 Слабокислая (1% раствор СН3СООН) 3 Кислая (10% раствор СН3СООН) 4 Кислая (10% раствор СН3СООН + NaCl) 5 Щелочная (10% раствор NaOH)
2.	Решение ситуационных задач по разделу «Строение и свойства белков».

Тестовые задания

1. 
   Первичная структура белка формируется за счет ………… связей
   

   пептидных; водородных между полярными радикалами; водородных между элементами пептидных группировок; гидрофобного взаимодействия; ионных.

2. 
   Радикалы пептида -вал-фен-три-лей- могут участвовать в образовании ……………связей
   

   пептидных; дисульфидных; гидрофобных;

   ионных; водородных.

3. 
   Радикалы пептида -лиз-асп-вал-фен-глу- могут участвовать в образовании ………… связей
   

   пептидных; дисульфидных; гидрофобных;

   ионных; водородных.

4. 
   Вторичная структура белка стабилизируется
   

   водородными связями между остатками амино- и карбоксильных групп пептидных связей; водородными связями между радикалами аминокислот; гидрофобными связями; ионными связями; пептидными связями.

5. 
   Разрушение первичной структуры белка называется
   

   денатурация; гидролиз; высаливание;

   осаждение; растворение.

6. 
   При денатурации белка разрушается структура
   

первичная; вторичная; третичная;

четвертичная; все типы структур.

7. 
   Структурно и функционально обособленную область белка
   

называют ………..…

8. 
   Замена глутаминовой кислоты в шестом положении -цепи гемоглобина на валин приводит к возникновению заболевания ……….
   
9. 
   При гидролизе белка получена смесь аминокислот и фосфорная кислота. Назовите класс гидролизованного белка.
   
10. 
    Для определения N-концевой аминокислоты используется реакция
    

с фтординитробензолом; гидролиза карбоксипептидазой; гидролиза трипсином; гидролиза химотрипсином; гидролиза пепсином.

РАЗДЕЛ III: Ферменты