Общая микробиология. Виды микроскопии назначение и принципы применения
 Скачать 1.57 Mb.
|
Метод ГрамаТехника (см. выше). Микроскопическая картина. Окраска по Граму дает вариабельные результаты. Поэтому не имеет диагностического значения. Окраска водным разбавленным раствором ЛюголяПридает внутриклеточным формам хламидий коричневый цвет из-за гликогеноподобной оболочки частиц. Окраска микоплазм Метод Романовского-ГимзаТехника (см. выше). Микроскопическая картина. Исследование нативных препаратов не дает результата. Окрашивают препарат из культуры после агаровой фиксации: кусочек среды с колонией помещают на предметное стекло и накрывают покровным стеклом с каплей спиртового раствора метиленового синего и азура, затем препарат высушивают. Окраска спирохет Методы окраски спирохет делятся на две группы: методы позитивной окраски, когда окрашивается сама клетка, и методы негативной окраски, когда окрашивается фон препарата, а спирохета остается бесцветной. Из методов позитивной окраски наиболее употребителен метод Романовского-Гимза. Метод Романовского-ГимзаТехника. См. выше. Особенностью техники окрашивания препаратов спирохет является длительность окраски – в течение 12-15 часов. Микроскопическая картина. Трепонемы окрашиваются в бледно-розовый, лептоспиры – розово-красный, а боррелии – сине-фиолетовый цвет. Ускоренная модификация ШерешевскогоТехника. 15-20 капель красителя Романовского-Гимза разводят в 10 мл 0,5-1% раствора глицерина в воде, разливают в 4-5 пробирок, каждую из которых последовательно нагревают на пламени горелки. Горячий раствор красителя наливают на препарат на 2 минуты, после чего краситель сливают и препарат заливают свежей порцией горячего раствора из следующей пробирки. Вся окраска занимает 8-10 минут. Микроскопическая картина. См. метод Романовского-Гимза. Окраска разведенным фуксиномИспользуется для окраски боррелий. Техника. Реактив: фуксин Циля разводят 1:4 или 1:5. Краситель наносят на фиксированный мазок на 1-2 минуты. Микроскопическая картина. В мазках крови боррелии окрашиваются в розово- красный цвет, эритроциты – в ярко-красный. Серебрение по Морозову Техника. См. выше. Микроскопическая картина. Спирохеты окрашиваются в буро-черный цвет (рис.22). Для негативной окраски спирохет используют несколько методов. Негативный метод БурриТехника. См. выше. Микроскопическая картина. На темно-сером тушевом фоне – бесцветные клетки. Негативная окраска колларголомЭтот метод отличается простотой, доступностью и хорошей эффективностью. Техника. На фиксированный мазок наливают на 3 минуты 2% раствор колларгола. После этого препарат ставят в наклонное положение (водой не смывают) и подсушивают. Микроскопическая картина. На золотисто-оранжевом фоне отчетливо контурируется бесцветная спирохета. Негативный метод БурриТехника. См. выше. Микроскопическая картина. На темно-сером тушевом фоне – бесцветные клетки. Окраска простейших Метод Романовского-ГимзаТехника. См. выше. Микроскопическая картина. Клеточная цитоплазма окрашивается в голубой цвет, а ядра клеток и жгутики – в красно-фиолетовый цвет (рис.23). Метод РайтаТехника. Реактивы. Способ приготовления: 1% раствор щелочного метиленового синего на 0,5% растворе двууглекислого натрия наливают в сосуд таким образом, чтобы высота слоя жидкости не превышала 6 см, и нагревают при 100 С в течение часа. Затем жидкость охлаждают и фильтруют. Охлажденный фильтрат в тонком слое при искусственном освещении должен иметь пурпурно-красный оттенок. К 100 мл фильтрата добавляют 500 мл 0,1% водного раствора эозина. При смешивании обеих жидкостей образуется обильный осадок; последний отфильтровывают и высушивают. Полученный таким образом краситель растворяют в ступке в метиловом спирте в соотношении 0,1:60,0. На сухой нефиксированный мазок наливают несколько капель красителя. Спустя 1 минуту прибавляют столько же капель дистиллированной воды. Через 2-3 минуты препарат промывают в воде около 0,5 минуты, пока он в тонком слое не приобретет розоватого оттенка. Микроскопическая картина. Ядра простейших окрашиваются в вишнево-красный цвет, цитоплазма – в голубоватый, жгутики – в красный цвет. |