Главная страница
Навигация по странице:

  • Окраска ядерных элементов. Метод Романовского

  • Метод Пикарского

  • Метод Романовского-Гимза

  • Метод Здродовского

  • Окраска хламидий Метод Романовского-Гимза

  • Общая микробиология. Виды микроскопии назначение и принципы применения


    Скачать 1.57 Mb.
    НазваниеВиды микроскопии назначение и принципы применения
    АнкорОбщая микробиология.doc
    Дата12.12.2017
    Размер1.57 Mb.
    Формат файлаdoc
    Имя файлаОбщая микробиология.doc
    ТипЛитература
    #11046
    страница8 из 40
    1   ...   4   5   6   7   8   9   10   11   ...   40

    Метод Кнази


    Техника. Препарат, фиксированный жаром, обрабатывают 3-5 мин протравой, состоящей из 70 мл насыщенного водного раствора калийных квасцов и 30 мл 20% водного раствора танина. На мазок, промытый водой, наносят каплю карболового фуксина, закрывают покровным стеклом и микроскопируют, не удаляя краску.

    Микроскопическая картина. Клеточная стенка окрашивается в красно-фиолетовый цвет.

    Обнаружение нуклеоида бактерий

    Окраска ядерных элементов. Метод Романовского


    Техника. Препарат фиксируют метиловым спиртом, спирт-формолом, жидкостью Кар­нуа или смесью Никифорова. Окрашивают рабочим раствором кра­сителя (2 капли красителя Гимза на 1 мл дистиллированной воды) 10-20 мин. Промывают дистиллированной водой и после просушивания микроскопируют. Дистиллированная вода, применяемая для разведения красителя, должна иметь нейтральное значение рН, так как от этого в высокой степени зависят результаты окрашивания. Реакция дистиллированной воды, кроме обычно применяемых с этой целью способов, может быть проверена путем прибавления к ней кристаллика гематок­силина или нескольких капель его спиртового раствора. Вода пригодна, если в течение 2 мин не появляется розовая окра­ска; в противном случае она кислая и должна быть подщелочена 1 % раствором бикарбоната натрия.

    Микроскопическая картина. При микроскопировании ядерные элементы имеют красно-фиолетовый цвет, цитоплазма – слабо-розовый.

    Метод Пикарского


    Техника. Препарат обрабатывают I N рас­твором НС1 7 мин при подогревании до 60С. После про­мывания мазок окрашивают по Романовскому.

    Микроскопическая картина. Ядерные эле­менты темно-красные, цитоплазма розовая.

    Окраска риккетсий

    Метод Романовского-Гимза


    Окраска по Романовскому-Гимза является одним из ос­новных методов при изучении морфологии риккетсий, хламидий, спиро­хет, простейших, а также при исследовании форменных элементов крови.

    Техника. Краситель Романовского-Гимза состоит из азура, эозина и метиленового синего. Непосредственно перед упот­реблением к 10 мл дистиллированной воды нейтральной реакции прибавляют 10 капель краски и тотчас же наливают на препа­рат, предварительно фиксированный жидким фиксатором, на один час. Затем краску сливают, препарат промывают водой, высуши­вают на воздухе и микроскопируют. Окрашивание происходит бы­стрее (30-40 минут), если препарат с краской поместить в термостат при 37С. К 10 мл дистиллированной воды нейтраль­ной или слабо щелочной реакции непосредственно перед окра­ской препарата прибавляют 10 капель краски и тот час же на­ливают на фиксированный препарат (или погружают препарат в стаканчик с краской). Через 1 час краску сливают, препарат промывают водой, высушивают на воздухе и исследуют. Если по­местить препарат с краской в термостат при 37º, то окрашива­ние происходит быстрее (30-40 минут).

    Результаты окрашивания зависят от свойства воды, поэтому следует проверять ее реакцию.

    Микроскопическая картина. Риккетсии окрашиваются в ро­зово-красный цвет, ядра эукариотических клеток – в красно-фиолетовый, а цитоплазма – в голубой.

    Метод Здродовского


    Техника. Препарат тонким слоем наносят на стекло, фик­сируют на пламени и окрашивают разведенным карболовым фуксином (10-15 капель фуксина на 10 мл дважды дистиллиро­ванной воды) в течение 5 минут; затем препарат слегка обес­цвечивают погружением на 1-3 секунды в слабую (0,01%) соля­ную кислоту, промывают водой и докрашивают в течение 30 секунд 1% раствором водного метиленового синего. Тонкий мазок фиксируют на пламени горелки. Окраску производят разведенным карболовым фуксином (10-15 капель фуксина на 10 мл дис­тиллированной воды) в течение 5 минут. Окрашенный препарат промывают водой, а затем обесцвечивают в растворе органиче­ской или минеральной кислоты (0,5% лимонная кислота, 0,01% соляная кислота) в течение 2-3 секунд. Затем препарат про­мывают водой и докрашивают 0,5% раствором метиленовой синьки в течение 0,5 минуты.

    Микроскопическая картина. Риккетсии окрашиваются в ру­биново-красный цвет, в то время как клетки хозяина обес­цвечиваются кислотой и дополнительно окрашиваются в голубой (протоплазма) или синий (ядра) цвет (рис.20).
    Окраска хламидий

    Метод Романовского-Гимза


    Техника (см. выше).

    Микроскопическая картина. На разных стадиях развития способность воспринимать окраску у хламидий меняется:

    - “Элементарные тельца” (инфекционные частицы) окрашива­ются краской Гимза в пурпурный цвет.

    - “Первоначальные тельца” (неинфекционные частицы) окра­шиваются по Гимза в синий цвет.

    - Полностью сформировавшиеся зрелые внутриклеточные включения окрашиваются краской Гимза в пурпурный цвет (рис.21).
    1   ...   4   5   6   7   8   9   10   11   ...   40


    написать администратору сайта