Паразитология. Введение паразиты
 Скачать 2.19 Mb.
|
|
Кожно-слизистый лейшманиоз распространен, главным образом, в Центральной и Южной Америке в других регионах его распространение ограничено небольшими очагами в Африке, Азии и Средиземноморье. Начало болезни напоминает кожный лейшманиоз. На месте укуса москита возникает язва (лейшманиома) однако впоследствии язвы появляются и на других частях тела. После заживления кожных язв, часто спустя многие годы, поражение распространяется на слизистые оболочки носа, горла, глотки и гортани. Изъязвления захватывают хрящевую ткань, переходят на губы, мягкое нёбо, щеки. Развивается уродующая деформация лица. Болезнь длится годами и плохо поддается лечению. Все виды лейшманиозов особенно опасны для больных СПИДом. Диагностика При подозрении на лейшманиоз важную роль играет факт пребывания человека на территориях, эндемичных поданному заболеванию. Одним из простейших диагностических тестов является реакция на выявление гипергаммаглобулинемии (формол-гел-теста по Непиру). Сыворотка крови таких больных 31 при смешивании с 40 % раствором формалина окрашивается в белый цвет. Гипергаммаглобулинеимия выявляется также электрофорезом. При висцеральном лейшманиозе в клетках крови лейшмании обнаруживаются редко, поэтому исследуют мазки пунктатов костного мозга, селезенки или печени, окрашенные по Романовско му—Гимзе (см. рис. 6, б, г цв. вклейка. При кожном лейшманиозе исследуют мазки из нераспавшихся язвили инфильтратов вблизи язв (рис. 6, в цв. вклейка. При этом бугорок или участок краевого инфильтрата для обескровливания захватывают и сдавливают пальцами левой руки, делая неглубокий надрез. Сего стенки концом скальпеля берут кусочек ткани, который вместе с серозной жидкостью переносят на предметное стекло и размазывают по его поверхности. Ткань для приготовления мазков можно также взять из прокола, сделанного толстой иглой на границе пораженных и здоровых тканей. При приготовлении препаратов нужно избегать попадания в них крови, которая не содержит лейшмании и затрудняет изучение под микроскопом. Лейшмании обнаруживаются внутри мононуклеаров или макрофагов в виде телец с голубой цитоплазмой и розовым, более ярко окрашенным кинетопластом и более бледным, но более крупным ядром. Если при приготовлении мазка клетки были разрушены, лейшмании также могут лежать вне клеток. Присутствие ки- нетопласта и ядра помогает отличить лейшмании от внутриклеточных токсоплазм, саркоцистисов и некоторых других организмов. При окрашивании кожных проб кинетопласты напоминают грамположительные кокки (которые в норме содержатся на коже, но отличаются от них внутриклеточным расположением и присутствием рядом более бледного ядра. Используется также посев крови или материала костного пун- ктата на агаровую среду N N N (по фамилиям предложивших их ученых Novy, Neal, Nicolle). На ней отмечается быстрый и обильный рост их культуры в форме промастигот (риса цв. вклейка. В препаратах из пораженных тканей больных кожно-слизистым лейшманиозом лейшмании обнаруживается мало или они вообще отсутствуют. Рост их культуры на кровяном агаре медленный, скудный и неустойчивый. При висцеральном лейшманиозе используется также метод биологических проб. В качестве лабораторных животных используют хомяков (Cricetulus griseus, Mesocricetus auratus), которых заражают суспензией субстрата биологических проб, взятых из костного мозга, лимфатических узлов, печени. Если животные не погибают ранее, их забивают на 15 е сутки и готовят из тканей печени, селезенки и лимфатических узлов препараты (мазки, отпечатки, которые окрашивают по Романовскому —Гимзе и просматривают. 32 Используются также серологические реакции ( Н РИФ, реакция непрямой агглютинации (РНГА) и др, в крупных лабораториях применяют П Ц Р для выявления антигенов лейшмании в тканях пораженных органов. Профилактика Индивидуальная профилактика состоит вис пользовании репеллентов против укусов насекомых и москитных сеток в регионах распространения лейшманиоза. Важны также выявление больных и их своевременное лечение, меры контроля над численностью москитов уничтожение мест их выплода и использование инсектицидов. Трипаносомы Как и лейшмании, трипаносомы (род Trypanosoma) имеют кинетопласт. У человека паразитируют два вида трипаносом. Trypanosoma cruzi поражает человека в Южной Америке, два подвида Т. brucei gambiense и Т. brucei rhodesiense паразитируют у людей в Африке. Подвид Т. brucei bricei паразитирует у животных и не поражает человека. Трипаносомы имеют несколько морфологических форм, чередующихся в жизненном цикле (рис. 3.3). Ама стиготы и промастиготы сходны построению с этими морфологическими формами у лейшмании. Эпимастиготы отличаются от промастигот положением кинетопласта и базального тела, находящихся возле центрально лежащего ядра ундулирующая мембрана короткая. У трипомастигот кинетопласт и базальное тело лежат в задней части удлиненного тела, жгутик тянется вперед, образуя длинную ундулирующую мембрану. Биология и жизненный цикл Человек заражается трипаносомой при укусах кровососущих насекомых — переносчиков. Жизненные циклы африканских и американских трипаносом различаются. В жизненном цикле американских трипаносом чередуются три морфологические формы амастигота, трипомастигота и эпимас- 2 Рис. 3.3. Морфологические формы трипаносом a — амастигота; б — промастигота; в — эпимастигота; г — трипомастигота; / — ядро 2 — кинетопласт; 3 — жгутик 4 — ундулирующая мембрана 2 Корнакова Х "3 Рис. 3.4. Жизненный цикл американских трипаносом / — при укусе клопа в организм человека проникают трипомастиготы; 2— три- помастиготы проникают в клетки внутренних органов и превращаются в амасти готы; 3 — амастиготы превращаются в трипомастиготы, которые разрывают пораженные клетки и проникают в непораженные; 4— трипомастиготы в периферической крови 5 — клоп при питании получает трипомастигот из организма человека 6 — трипомастиготы превращаются в эпимастиготы; 7 — эпимастиго- ты размножаются 8 — эпимастиготы превращаются в трипомастиготы, готовые заразить человека тигота (рис. 3.4). Заражение человека происходит при укусе клопов семейства Triatominae. Резервуарными хозяевами служат многие дикие и домашние животные. При американском трипаносомозе в организме человека трипаносомы паразитируют в виде амасти гот, как при лейшманиозах. Амастиготы развиваются внутри клеток различных внутренних органов, размножаются продольным делением, превращаются в несущие жгутики трипомастиготы, выходят при разрыве пораженных клеток в кровяное русло и поражают другие здоровые клетки организма, где вновь превращаются в амастигот. Клопы заражаются при кровепитании, поглощая трипомастиготы из периферической крови. В пищеварительном тракте переносчика трипомастиготы преобразуются в эпима стиготы, размножаются продольным делением, а затем заполняют задний отдел пищеварительного тракта клопа и снова превращаются в заразные для человека трипомастиготы. При кровососа- нии трипомастиготы выделяются с фекалиями клопа. Человек почесывает место укуса и вносит трипомастиготы в ранку или на пальцах переносит их на слизистые оболочки глаза или рта, где они внедряются в организм. 34 АфриК&некие-трипаносомы переносятся кровососущими мухами цеце рода Glossina (рис. 3.5). Резервуарными хозяевами служат свиньи и некоторые дикие животные. В человеке африканские трипаносомы существуют в виде жгутиковых форм, трипомасти гот, размножающихся продольным делением в лимфатической жидкости, спинном ликворе и других внутренних жидкостях. При попадании в организм мухи цеце трипомастиготы преобразуются в другую морфологическую форму, эпимастиготы, которые также размножаются в пищеварительном тракте переносчика продольным делением, заполняют колюще-сосущий аппарат, где превращаются в трипомастиготы. Последние впрыскиваются в тело человека при кровепитании. Таким образом происходит заражение следующего хозяина. Клинические проявления При африканском трипаносомозе, или сонной болезни, повышается температура, воспаляются лимфатические узлы, во внутренних органах развиваются воспалительные очаги, миокардит, тромбоцитопения и внутренние кровотечения. Увеличиваются размеры селезенки и печени. Вследствие этих процессов летальный исход МОЖвт наступить еще до ПрояйЯеНН0| симптомов поражения центральной нервной системы (ЦНС). На поздней стадии наблюдается менингоэнцефалит, сопровождаю- Рис. 3.5. Жизненный цикл африканских трипаносом / — при укусе мухи цеце трипомастиготы попадают в кровь 2 — трипомастиго ты разносятся по организму 3 — трипомастиготы размножаются в жидких средах организма человека 4 — при питании муха цеце получает трипомастигот; 5 — в пищеварительном тракте мухи цеце трипомастиготы превращаются в эпи- мастигот; 6 — эпимастиготы размножаются 7 — эпимастиготы передвигаются в ротовой аппарат мухи цеце 8— эпимастиготы размножаются в ротовом аппарате мухи цеце и превращаются в инвазионные трипомастиготы 35 шийся нарастающей сонливостью. Изменяется психическое состояние, появляются судороги, параличи. Болезнь без лечения обычно заканчивается летально. При своевременном выявлении болезнь излечима. Американский трипаносомоз, или болезнь Чагаса, развивается медленно, часто в течение многих лет. Вначале вместе проникновения трипаносом на коже появляется фурункулоподоб- ный инфильтрат, чагома, или при проникновении паразитов через слизистую оболочку глаза развивается конъюнктивит. Появляются головная боль, мышечные боли, температура поднимается до 40 "С, воспаляются лимфатические узлы. Паразиты могут поражать все ткани, но наибольшее их количество обнаруживается в сердечной мышце и мышцах кишечника. Развивающаяся сердечная недостаточность может вызвать смерть больного. Через 4 — 6 недель болезнь переходит вскрытую хроническую форму, при которой симптомы выражены слабо. На поздней стадии болезни Чагаса нарастают симптомы поражения сердца, кишечника, развивается истощение и больные погибают. Лечение не разработано. Диагностика В России обнаруживают только завозные случаи трипаносомоза. Диагноз ставится при выявлении паразитов в крови или спинномозговой жидкости. При африканском трипаносо мозе методы диагностики зависят от стадии заболевания. В начальном периоде трипомастиготы обнаруживаются вместе укуса мухи цеце и периферической крови. На стадии лихорадки и после ее окончания трипаносомы выявляют в пунктате увеличенных лимфатических узлов. При поражении Ц НС эффективно исследование спинномозговой жидкости. Изучение ведется на нативных или окрашенных препаратах. Изучение нашивного материала Кровь с цитратом, пунктат лимфатического узла или центрифугированную спинномозговую жидкость изучают под микроскопом, лучше с применением фазового контраста, темного поля или приопущенном конденсоре. Подвижные трипомастиготы видны в поле зрения. Кроме того, их присутствие заметно по пассивному движению клеток крови из- за активного движения жгутиков паразитов. Изучение окрашенного материала Мазки крови окрашивают по Романовскому —Гимзе. Для выявления трипаносом используют толстую каплю, а для более детального изучения строения паразитов — тонкий мазок (рис. 7, б д цв. вклейка. Препарат просматривают при иммерсионном увеличении микроскопа. Типичные трипомастиготы имеют длину 15 — 40 мкм и ширину 2—4 мкм. Цитоплазма окрашивается в голубой цвет. Ядро, расположенное примерно посередине клетки, окрашивается вруби- ново-красный цвет, также как и лежащие позади него кинето- пласт и базальное тельце, от которого начинается жгутик. Сам жгутик выходит из задней части клетки, волнообразно тянется вдоль нее впереди соединен с поверхностью клетки ундулирую- щей мембраной. Впереди клетки видна длинная свободная часть жгутика. В плазме крови или тканевой жидкости трипаносомы двигаются при помощи колебаний жгутика и мембраны, а также посредством изгибаний тела. В более поздней стадии заболевания в крови появляются и более короткие (11—27 мкм) и широкие формы трипаносом с тупо закругленным задним концом и почти полным отсутствием свободной части жгутика. При болезни Чагаса вострой стадии паразитов обнаруживают в периферической крови в нативных или окрашенных по Рома новскому—Гимзе препаратах. Однако вследствие небольшого количества паразитов часто обнаружить их удается лишь при многократных исследованиях. Используется метод обогащения центрифугированием, а также ксенодиагностика. Для этого выращенных в лабораторных условиях триатомовых клопов, свободных от трипаносом, в небольших садках помещают на кожу больных людей. В положительных случаях при содержании клопов при температуре 30 С через 2 недели после кормления в их кишечнике накапливается такое количество трипаносом, что обнаружить их не представляет трудностей. Применяется также интраперитонеальное заражение кровью больного лабораторных животных (мышей, морских свинок и др. Однако в этих случаях результат можно получить лишь через 4 недели. Для культивирования Т. cruzi применяются обычные при выращивании трипаносом и лейшмании среды кровяной агар, среда N N N и др. Используются также серологические реакции. Профилактика Профилактика трипаносомозов заключается в использовании инсектицидов для уменьшения популяций мух цеце и клопов. При индивидуальной профилактике применяют репелленты. 3.2. Подкласс Polymastigota Представители подкласса Polymastigota имеют несколько жгутиков и лишены кинетопласта. Размножается эта группа простейших путем продольного бесполого деления. Один из жгутиков тянется вдоль тела и на отдельных участках соединен с клеточной мембраной, образуя ундулирующую мембрану, служащую для движения. Некоторые жгутиконосцы являются безвредными ком менсалами желудочно-кишечного тракта человека, другие — патогенными паразитами. 37 36 Лямблия Впервые лямблию (Giardia intestinalis, syn. G. lamblia, G. duode- nalis) обнаружил в 1859 г. профессор Харьковского университета Д. Ф. Лямбль в стуле больных диареей. Впоследствии этот вид был назван в честь первооткрывателя Lamblia intestinalis. Однако в соответствии с современными правилами таксономии вид называется Giardia intestinalis. В литературе также можно встретить названия G. lamblia u G. duodenalis. Биология и жизненный цикл Лямблии паразитируют в двенадцатиперстной кишке и верхних отделах тонкого кишечника. Вопреки распространенному мнению они не поражают желчный пузырь, так как желчь действует на них губительно. Лямблии существуют в виде вегетативной формы, или трофозоита, и цисты. Грушевидные трофозоиты имеют уплощенную вентральную поверхность, образующую присасывательный диск, с помощью которого они прикрепляются к кишечным ворсинкам (рис. 3.6, о рис. 8, <7, б цв. вклейка. Паразит имеет два ядра и четыре пары жгутиков, осуществляющих характерное вращательное движение вокруг продольной оси. Продольно на вентральной стороне проходит укрепляющая структура, аксостиль, различимый на окрашенных препаратах, а иногда и у живых лямблий. В средней части тела его пересекают небольшие парабазальные тела. Лямблии лишены собственных пищеварительных ферментов и поглощают через наружную мембрану низкомолекулярные продукты переваривания хозяина. В кишечнике человека лямблии активно размножаются и могут покрывать его стенку сплошным слоем. а Рис. 3.6. Строение трофозоита и цисты лямблии: а — трофозоит; б — циста / — присасывательный диск 2 — ядро 3 — параба зальные тела 4 — аксостиль; 5 — жгутики 6 — оболочка цисты 7 — светлый ободок цитоплазмы Заражение человека происходит при проглатывании инвазионных цист. Из цисты выходят два подвижных трофозоита, прикрепляются к поверхности кишки и начинают питаться и размножаться. Вместе с кишечным содержимым часть лямблий перемещается в дистальные отделы кишечника и погибает. Выделение живых трофозоитов происходит обычно при послаблении стула. В оформленном стуле живые трофозоиты обнаружить трудно. После дефекации трофозоиты вне организма погибают в течение 20 мин. Часть трофозоитов окружается оболочкой и переходит в состояние цисты (рис. 3.6, б Лямблии формируют цисты непостоянно, а периодически, особенно под влиянием неблагоприятных условий при обильном выделении желчи, которая действует на них губительно, дефиците углеводов в пище, высокобелковой диете. Цисты являются расселительной стадией жизненного цикла, ответственной за заражение других хозяев. Они устойчивы к низким температурам, высыханию и хлорированию. В окружающей среде цисты выживают до нескольких месяцев, особенно при попадании вводу. Большинство случаев массового заражения людей лямблиозом происходит из-за употребления для питья воды, загрязненной фекальными стоками. Клинические проявления Лямблиоз — одна из самых распространенных в мире кишечных инфекций. Около 25 % населения Земли заражено этими паразитами. Особенно часто заражаются дети. Лямблиоз может протекать вострой и хронической формах. При остром лямблиозе наблюдается учащенный (2 — 4 раза в сутки) жидкий стул без примеси крови, схваткообразные боли в животе, при пальпации боль в эпигастральной области, тошнота, повышенное газообразование в кишечнике. Для хронического лямблиоза характерен неустойчивый стул, послабления, чередующиеся с запорами, симптомы гастродуоденита, снижение аппетита, головные боли, нарушения сна, снижение трудоспособности, аллергические проявления вплоть до бронхиальной астмы. Диагностика Диагностика лямблиоза может быть затруднена из- за того, что вегетативные формы и цисты лямблий выделяются лишь периодически. Вовремя отрицательных фаз паразитов невозможно обнаружить. Длительность этих фаз колеблется от 2 — 3 сутдо 2 — 3 недель. Поэтому при подозрении на лямблиоз исследования рекомендуется проводить с интервалом в одну неделю в течение 4 — 5 недель. Исследование нашивного материала Живые трофозоиты лям блий можно обнаружить в стуле и дуоденальном содержимом. Для исследования рекомендуется из массы фекалий с помощью деревянной палочки выбрать комочки слизи, которые содержат кроме лямблий лейкоциты и слизь. Трофозоиты лямблий грушевидные, с оттянутым задним концом, имеют длину 10 — 25 и ширину 8 — 12 мкм. В расширенной части трофозоита тело уплощено и вдавлено в зоне присасывательного диска в боковой проекции лямблии имеют вид ковша. За счет четырех пар жгутиков трофозоиты активно передвигаются как поступательно, таки вращательно. При микроскопическом изучении (хна фоне присоски иногда различимы два ядра. При изучении нативного материала можно также обнаружить цисты лямблий (рис. 8, |