Издательский дом Питер
 Скачать 5.79 Mb.
|
|
6.2.1.8. Использование моноклональных реагентов для фенотипирования антигенов эритроцитов системы группы крови AВ0 Провели сравнительную оценку эффективности использования различных реагентов для фенотипирования эритроцитов по системе АВ0 (табл. 44). Определение групп крови по антигенам эритроцитов системы АВ0 проводили перекрестным методом в соответствии с Приказом МЗ РФ № 2 от 09.01.1998 г., результаты оценивали по следующим параметрам: 1) скорость наступления агглютинации; 2) выраженность агглютинации (от 0 до 4+); 3) специфичность реакции. Стандартные эритроциты А (II) и В (III) для перекрестного метода определения групп крови заготавливали от доноров. В Центре крови и тканей Военно-медицинской академии обследовано 51713 доноров. У 33 154 фенотип АВ0 при первичном исследовании (как правило, в условиях работы бригады по заготовке крови в выездных условиях) определяли с использованием поликлональных антител, а у 18 559 — с использованием моноклональных антител. Данные о частоте и структуре ошибок представлены в табл. 45 и 46. Установлено, что частота ошибочных определений фенотипа АВ0 не превышает 0,4 % и при использовании поликлональных антител практически вдвое (р<0,05) выше, чем при использовании моноклональных диагностикумов (табл. 47 и 48). В аналогичной работе Г. Н. Завгороднего и Т. Л. Погоди-ной (1995) зарегистрировано количество ошибочных определений в 4-10 раз Таблица 44 Тестируемые реагенты для фенотипирования эритроцитов по системе АВ0
Примечание. МКА — моноклональные антитела; с — сухая форма; ж — жидкая. Группы крови 251 Таблица 45 Частота ошибок при определении групп крови системы АВО поликлональными антителами у доноров
Таблица 46 Частота ошибок при определении групп крови моноклональными антителами у доноров
Таблица 47 Количество ошибочных определений фенотипа АВО
Таблица 48 Анализ структуры ошибок (%)
252_____________Глава 6. Иммунологические основы переливания крови выше, чем в нашем исследовании. Следует отметить, что первичное определение в работе коллег из 32-го Центрального военно-морского госпиталя проводили сотрудники лечебных отделений, а в Центре крови и тканей Военно-медицинской академии — подготовленные лаборанты. В более чем 80 % случаев причины ошибок в работе коллег могут быть отнесены к субъективным факторам (недостаточное знание вопросов изосерологии, неправильное соотношение капель реагента с эритроцитами, перепутывание пробирок), подлежащим коррекции при специальной подготовке. Одновременно следует заметить, что условия работы выездной бригады, затрудняющие работу лаборантов (низкая температура, недостаточная освещенность, неудобство рабочего места), также подлежат коррекции в первую очередь при планировании работы временного пункта взятия крови. Наибольший процент ошибок при определении групп крови поликлональ-ными антителами приходится на группы крови В (III) — 35,3 % и О (I) — 27,9 %, при определении моноклональными антителами — на группы крови В (III) - 40 % и А (II) - 25,8 %. Сравнительный анализ (табл. 49) определения групп крови системы АВО показал, что при использовании для первичного исследования поликлональ-ных реагентов ошибки в определении фенотипа А (II) встречаются реже (13,9 %), чем при использовании моноклональных диагностикумов (25,8 %, р<0,05). Следует подчеркнуть, однако, что сопоставляемые величины относительны, следовательно возможной причиной этого феномена может быть относительное понижение чувствительности типирующих поликлональных реагентов анти-В. Принципиальное значение имеет тот факт, что при использовании моноклональных антител в определении подгрупп крови системы АВО процент ошибок меньше (табл. 50), чем при использовании поликлональных антител — 8,6 против 31,1 % (р<0,05) соответственно. Надежное выявление антигена А2 моноклональными реагентами позволяет предупредить трансфузии эритроцитов, экспрессирующих этот антиген. Количественные параметры определения антигена А1 эритроцитов с использованием различных групп реактивов представлены в табл. 51. Скорость наступления реакции агглютинации моноклональных антител с эритроцитами, экспрессирующими антиген А1, выше, чем при применении других типов реактивов. Однако наблюдались случаи, когда некоторые серии цоликлонов А отличались снижением реакции агглютинации, причина — нарушение температурного режима при хранении и транспортировке. При определении подгрупп крови с антигеном А2 моноклональные антитела взаимодействовали с эритроцитами в течении 10-30 с, выраженностью агглютинации от 3+ до 4+. Зарегистрировано преимущество использования моноклональных антител для выявления антигена В (табл. 52). Скорость наступления реакции агг- Группы крови 253 Таблица 49 Расхождение результатов определения фенотипа АВО при использовании в первичном определении различных типов диагностикумов
Таблица 50 Частота ошибок при определении подгрупп крови системы АВ0
лютинации со всеми образцами эритроцитов была практически вдвое выше, чем при использовании изогемагглютинирующих сывороток. Дополнительным контролем правильности определения групп крови АВ0 является моноклональный реагент анти-АВ. Реагент анти-АВ целесообразно 254 Глава 6. Иммунологические основы переливания крови Таблица 51 Результаты исследования антигена a1 эритроцитов с различными типами реактивов
Примечание. МКА — моноклональные антитела; ИГС — изогемагглютинирую-щая сыворотка; ГИСЖ — гипериммунная сыворотка животных; ФГ — фитоагглю-тинины Таблица 52 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||