клинбиохметод. Лекции по клинической биохимии караганда 2003 удк 616 577 (075. 8) Рецензенты
![]()
|
3. Остаточный азот и его компоненты.Содержание небелкового азота в цельной крови и плазме составляет 25 – 30 мг/100 мл. У здорового человека колебания в содержании небелкового азота крови незначительны и в основном зависят от количества поступающих с пищей белков. Азотемия – повышение содержания небелкового азота в крови – подразделяется на ретенционную и продукционную. Ретенционная азотемия – наступает в результате недостаточного выделения с мочой азотсодержащих продуктов при нормальном их поступлении в кровяное русло – может быть почечной и внепочечной. а) При почечной ретенционной азотемии увеличение концентрации остаточного азота в крови происходит за счет ослабления выделительной функции почек и встречается при гломерулонефрите, амилоидно–сморщенной почке, пневмонии, туберкулезе почек. б) Внепочечная ретенционная азотемия может возникнуть в результате тяжелой недостаточности кровообращения, снижения артериального давления и уменьшения почечного кровотока, а также при профузных кровотечениях, травматическом шоке, при врожденных пороках сердца и других заболеваниях. Продукционная азотемия возникает при избыточном поступлении азотсодержащих веществ в кровь, как следствие усиленного распада тканевых белков. Функция почек при этом, как правило, не нарушена. Такая азотемия отмечается при кахексии, лейкозе, обширных ранениях, инфекциях, кишечной непроходимости и некоторых других патологических состояниях. 3.1 Методы определения остаточного азотаМетод Кьельдаля. Определение остаточного азота ведут в безбелковом фильтрате крови. В результате минерализации безбелкового фильтрата при нагревании с концентрированной серной кислотой в присутствии катализатора азот всех соединений переходит в форму азота сернокислого аммония. Последующее определение азота проводится в аппарате Кьельдаля. Из полученной соли путем прибавления крепкой щелочи вытесняется аммиак. Далее аммиак отгоняют с водяным паром в приемник со взятым в избытке определенным объемом титрованного раствора серной кислоты для количественного связывания аммиака. После окончания перегонки избыток серной кислоты в приемнике подвергают обратному титрованию щелочью. Таким образом определяют количество непрореагировавшей кислоты и по разности между взятой в опыт и оставшейся (оттитрованной) определяют количество связанной аммиаком кислоты. Далее расчитывают содержание азота в пробе. Данный метод трудоемок и требует длительной минерализации органических веществ и последующей перегонки аммиака. Определение аммиака реактивом Несслера. Возможность избежать перегонки можно путем прямого определения аммиака в минерализованной пробе. Такое олределение проводится колориметрическим методом посредством реактива Несслера. В практике широко используется гипобромитный метод Рапапорта – Эйхгорна, который принят в качестве унифицированного. 3.2 МочевинаМочевина – главный конечный продукт обмена белков в организме. Она в 18 раз токсичнее, чем остальные азотистые вещества сыворотки. От общего азота на долю мочевины приходится до 90%, а на долю аммиака (солей аммония) – не более 60%. Основным источником аммиака для биосинтеза мочевины являются аминокислоты. Аммиак образуется при окислительном и непрямом дезаминировании аминокислот, при гидролизе амидов глутамата и аспартата, а также выделяется при распаде пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов. Определение мочевины в крови и моче Наиболее чувствительными и точными методами определения мочевины являются уреазный (ферментативный) и диацетилмонооксимный. Принцип уреазного метода заключается в следующем: мочевина под действием уреазы разлагается на СО2 и NН3. Последний определяется колориметрически по образованию окрашенных продуктов с реактивом Несслера. Диацетилмонооксидный метод основан на способности мочевины в кислой среде образовывать с диацетилмонооксимом в присутствии тиосемикарбазида и солей железа вещества, интенсивность окраски которых пропорциональна содержанию мочевины в пробе. В норме концентрация мочевины в крови составляет 20 – 40 мг/100 мл. За сутки с мочой у здоровых людей выделяется 20 – 35 г мочевины. Иногда результат исследования выражают в виде азота мочевины, который в норме колеблется в пределах 9 – 14 мг/100 мл. Цифры содержания азота мочевины в 2,14 раза меньше числа, выражающего концентрацию мочевины. Концентрацию мочевины можно также определять экспресс – методом с помощью набора “Уреатест.” Клиническое значение определения мочевины. При патологии сдвиги в уровне мочевины крови зависят от отношения процессов мочевинообразования и ее выведения. При острой почечной недостаточности концентрация мочевины в крови может достигать 300 – 500 мг/100 мл. При этом резко снижается выделение мочевины с мочой. Нарастание содержания мочевины в крови до 100 – 200 мг/100 мл является признаком нарушения функции почек средней тяжести, до 200 мг/100 мл – тяжелым и свыше 300 мг/100 мл – очень тяжелым нарушением с неблагоприятным прогнозом. Иногда определяют отношение азота мочевины крови к остаточному азоту крови, выраженное в процентах: мочевины ––––––––––––––––––––– х 100 остаточный азот В норме коэффициент ниже 48%. При почечной недостаточности этот показатель повышается и может достигать 90%, а при нарушении мочевинообразовательной функции печени снижается (ниже 45%). Патологические изменения печени, приводящие к ее функциональной недостаточности, сопровождаются понижением количества мочевины в крови и в моче (циррозы печени, острая желтая атрофия, отравления фосфором, мышьяком и другими ядами, поражающими паренхиму печени). Уменьшение концентрации мочевины крови может наблюдаться также и при диете с низким содержанием белков. Известно, что одним из способов нейтрализации аммиака в сердечной мышце являе5тся синтез и выведение в кровоток мочевины. Синтез мочевины миокардом требует наличия фермента аргиназы, активность которого повышена в зоне некроза. |