Лекции по гомеопатии. Лекция Предмет, история развития, цели и задачи Фармацевтической гомеопатии
 Скачать 0.73 Mb.
|
|
> определение содержания этилового спирта: а) по плотности отгона: в круглодонную колбу вместимостью 200—250 мл отмеривают точное количество жидкости (если жидкость содержит от 20 до 50 % спирта — 50 мл, от 50 % и выше — 25 мл; жидкость перед перегонкой разбавляют водой до 75 мл). Для равномерного кипения в колбу с жидкостью помещают капилляры, пемзу или кусочки прока- ленного фарфора. Если жидкость при перегонке сильно пенится, то добавляют фосфорную или серную кислоту (2—3 мл), хлорид кальция, парафин или воск (2—3 г). Приемник (мерную колбу вместимостью 50 мл) помещают в сосуд с холодной водой, собирают около 48 мл отгона, доводят его температуру до 20 °С и добавляют воду до метки. Отгон должен быть прозрачным или слегка мутноватым. Плотность отгона определяют пикнометром и по алкого- леметрическим таблицам находят соот- ветствующее содержание спирта в процентах по объему и массе. При содержании в жидкости эфирных масел, летучих кислот или оснований, камфоры к ней доба в- ляют в делительной воронке равный объем насыщенного раствора натрия хлорида и такой же объем пет- ролейного эфира. Смесь взбалтывают в течение 3 мин. После разделения слоев спир- то-водный слой сливают в другую делительную воронку и обрабатывают таким же образом половинным количеством петролейного эфира. Спирто-водный слой сливают в колбу для отгона, а соединенные эфирные жидкости взбалтывают с половинным количеством насыщенного раствора натрия хлорида, потом присоединяют к жидкости, находящейся в колбе для отгона. При содержании летучих кислот их нейтрализуют раствором щелочи, при содержании летучих ос- нований — фосфорной или серной кислотой; б) по температуре кипения настоек: прибор для количественного определения спирта в настой- ках состоит из сосуда для кипячения 1, трубки 2 с боковым отростком, холодильника 3, ртутного термо- метра 4 с ценой деления 0,1 °С и пределом шкалы от 50 до 100 °С. В сосуд для кипячения наливают 40 мл настойки и для равномерного кипения помещают капилляры, пемзу или кусочки прокаленного фарфора. Термометр помещают в приборе таким образом, чтобы ртут- ный шарик выступал над уровнем жидкости на 2—3 мм. Нагревают на сетке с помощью электроплитки мощностью 200 Вт или газовой горелки. Когда жи д- кость в колбе начнет закипать, с помощью реостата в два раза уменьшают напряжение, по даваемое на плитку. Через 5 мин после начала кипения, когда температура становится постоянной или ее отклонение не превышает ±0,1 °С, снимают показания термометра. Полученный результат приводят к нормальному давлению. Если показания барометра отлич аются от 1011 гПа (760 мм рт. ст.), вносят поправку на разность между наблюдаемым и нормальным давлением 0,04 °С на 1,3 гПа (1 мм рт. ст.). При давлении ниже 1011 гПа поправку прибавляют к установленной температуре, при давлении выше 1011 гПа — вычитают. в) по показателю преломления жидкостей: в водных растворах этилового спирта линейная зави- симость показателя преломления и концентрации наблюдается в пределах до 50—60 %. При установле- нии крепостр спирта в более концентрированных растворах следует их предварительно разбавить и при расчетах концентрации учитывать разведение При определении показателя преломления спирто-водных растворов следует на призму рефрактомет- ра наносить не менее 5—7 капель и измерять величину п немедленно во избежание ошибки, связанной с летучестью спирта. Исследование необходимо проводить при температуре 20 °С. Если оно осуществля- ется не при 20 °С, следует вносить поправки на температуру. Величины поправок показателя преломле - ния на 1 °С представлены в табл. 17. Если определение проводится при температуре выше 20 °С, то по- правку прибавляют к найденной величине показателя преломления; если анализ проводится при темпе- ратуре ниже 20 °С, поправку вычитают. Для определения концентрации этилового спирта в спиртовых растворах лекарственных препаратов, приготовленных на 70 %-ном спирте, разбавление проводят обычно 1:2, а приготовленных на 90 и 95 %- ном спирте — 1:3. При этом необходимо учитывать, что при смешивании спирта с водой объем раствора несколько уменьшается, в связи с чем следует вносить поправку к фактору разведения: при смешивании 1 мл спирта с 2 мл воды умножают на коэффициент 2,98 (вместо 3); при смешивании 1 мл спирта с 3 мл воды — на 3,93 (вместо 4). г) по плотности жидкости, определенной с помощью ареометра: по алкоголеметрическим табли- цам ГФ находят соответствующее содержание спирта в % по массе и по объему; > определение содержания тяжелых металлов: в фарфоровой чашке упаривают досуха 5 мл жидкого исследуемого препарата, затем остаток осторожно сжигают в присутствии серной кислоты и прокаливают. Полученный остаток обрабатывают при нагревании 5 мл насыщенного раствора аммония ацетата, фильтруют через беззольный фильтр и доводят до метки 100 мл. 10 мл полученного раствора должны выдерживать испытания на тяжелые металлы (не более 0,001 %). Контроль качества порошковых растираний (тритураций) проводят по следующим параметрам: > равномерность распределения лекарственных веществ: порошки рассматривают на расстоя- нии 20—25 см с помощью лупы или микроскопа с окулярным микрометром в прямом свете: лекарствен- ное вещество должно быть равномерно распределено в молочном сахаре; > соответствие окраски, вкуса, запаха: в низких разведениях у окрашенных, сильно пахнущих и имеющих резкий вкус исходных веществ можно заметить соответствующую окраску и почувствовать своеобразный запах или вкус; > однородность: основная масса готовой тритурации должна состоять из частиц размером 25 мкм и менее, не должно быть частиц размером более 50 мкм; > величина внешней удельной поверхности тритурации должна быть не менее 0,65 м 2 /г, а мо- лочного сахара — не менее 0,50 м 2 /г; размер частиц металлических и угольных растираний: на предметное стекло наносят 0,02—0,03 г соот- ветствующего растирания, добавляют 1—2 капли воды и вызывают растворение молочного сахара уме- ренным нагреванием; за тем (при не очень высокой температуре) раствор выпарива ют настолько, чтобы остался вязкий, олифоподобный остаток, который накрывают покровным стеклом. Препарат рас- сматривают под микроскопом при увеличении в 200 раз, а величину непрозрачных металлических ча- стичек определяют с помощью окулярного микрометра; > капиллярный анализ: растирания берут в количестве 5 г, смешивают примерно с двойным вес о- вым количеством абсолютного этилового спирта и полученную смесь подвергают капиллярному анализу как жидкое разведение; > перекристаллизация насыщенных растворов: взвешенную пробу вещества помещают в мер- ную колбу с определенным количеством воды, различным для каждого вещества, а колбу покрывают не- большим кристаллизатором. Растворения достигают нагреванием закрытой колбы в кипящей воде или на открытом пламени, затем медленно охлаждают на воздухе. А. С веществами, пересыщенные растворы которых полностью кристаллизуются при сопр и- косновении с изоморфным кристаллом, поступают следующим образом: небольшой пипеткой осто- рожно берут несколько капель пересыщенного раствора и помещают по одной на стеклянную пластинку, затем небольшим, предварительно прокаленным, а затем полностью охлажденным платиновым шпат е- лем берут небольшую пробу (приблизительно величиной с булавочную головку) растирания, подлежа- щего испытанию, и помещают ее в одну из капель пересыщенного раствора, находящегося на стеклян- ной пластинке. Если в пробе был хоть один изоморфный кристалл, то сравнительно быстро проис ходит кристаллизация всей капли, в результате чего образуется грубая кристаллическая поверхность и одно- временно теряется ее прозрачность. Примером этого класса веществ являются натрия ацетат и сегнетова соль. Б. С веществами, пересыщенные растворы которых, соприкасаясь с изоморфным кристал- лом, увеличивают его, а сами при этом не кристаллизуются, поступают так: с помощью пипетки берут несколько миллилитров пересыщенного раствора и осторожно, чтобы не смочить край и верхнюю поверхность стенки, помещают в маленькую пробирку, за крываемую резиновой пробкой. С помощью маленького, предварительно прокаленного и полностью охлажденного платинового шпателя добавляют к раствору небольшую пробу исследуемого растирания, пробирку закрывают резиновой пробкой, осто- рожно опрокидывают и оставляют в наклонном положении на несколько часов. Если в пробе были ми к- роскопические изоморфные кристаллы, то через несколько часов на нижней стенке можно заметить н е- которое количество выросших кристаллов или друз различной величины. Примером этого класса ве- ществ являются бура и меди сульфат. Аналитический контроль* качества основных гомеопатических препаратов по действующим веще- ствам проводят различными методами в зависимости как от природы исходных веществ, так и от того, являются ли они фармакопейными или нефармакопейными препаратами. Фармакопейные аллопатические препараты, которые применяются и в гомеопатии, анализируют на подлинность и количественное содержание по методикам фармакопейных изданий. В качестве примеров можно привести некоторые химические соединения, применяемые для приготовления растворов или по- рошковых растираний. Контроль качества базисных гомеопатических препаратов из растительного сырья (эссенции, настой- ки) с целью их дальнейшей стандартизации рекомендуется также проводить по содержанию БАВ. Для этого используют: > качественные реакции на основные группы БАВ; > хроматографический анализ в различных системах растворителей; > количественное определение инструментальными (газожидкостная хроматография, УФ- и ИК- спектрофотометрия, фотоколориметрия) и другими методами. Широко распространенными в растительном сырье классами соединений являются: алкалоиды, кар- диотонические (сердечные) гликозиды, флавоноиды, сапонины, дубильные вещества, антраценпроизво д- ные, кумарины, витамины, полисахариды и др. Для обнаружения основных групп БАВ в растительном сырье и препаратах наиболее часто используют цветные качественные реакции или реакции осаждения. Алкалоиды обнаруживают следующими общими осадочными реакциями: — с реактивом Майера (растворы ртути дихлорида и калия йодида) — бурый осадок; — с реактивами Вагнера и Бушарда (растворы йода в растворе калия йодида) — бурый осадок; — с реактивом Драгендорфа (раствор висмута нитрата основного, калия йодида и кислоты уксусной) — оранжево- красный или кирпично-красный осадок; — с реактивом Марме (раствор кадмия йодида и калия йодида) — белый или желтоватый осадок; — с реактивом Зонненшейна (раствор фосфорно-молиб- деновой кислоты) — желтоватый осадок; — с раствором кремневольфрамовой кислоты — беловатый осадок; — с раствором пикриновой кислоты — желтый осадок; — с раствором танина — беловатый или желтоватый осадок При определении кардиотонических гликозидов проводятся цветные реакции на различные фраг- менты молекулы: на стероидную часть молекулы карденолида: — реакция Либермана—Бурхарда (ледяная уксусная кислота, уксусный ангидрид и концентрирова н- ная серная кислота) — на границе слоев окраска от розовой до зеленой и синей; — реакция Розенгейма (спиртовый раствор трихлорук- сусной кислоты) — окраска от розовой до ли- ловой и синей; на бутенолидное (лактонное) кольцо: — реакция Раймонда (бензольный раствор ж-динитро- бензола и спиртовый раствор калия гидрокси- да); — реакция Легаля (растворы натрия нитропруссида и натрия гидроксида) — на границе слоев наблюдается красное окрашивание в виде кольца; на сахарный компонент: — реакция Келлер—Килиани (ледяная уксусная кислота со следами железа сульфата и концентриро- ванная серная кислота) — верхний слой окрашивается в васильково- синий цвет; — реакция с реактивом Фелинга — оранжевый осадок после гидролиза. Последняя из указанных реакций используется также для определения восстанавливающих Саха- ров. Наличие флавоноидов устанавливают с помощью таких реакций: — цианидиновая проба (порошок металлического магния и концентрированная хлороводородная кислота) — флавоны, флавонолы и флавононы дают красное или оранжевое окрашивание; — борно-лимонная реакция — 5-оксифлавоны и 5-ок- сифлавонолы образуют ярко-желтое окраши- вание с желто- зеленой флуоресценцией; — реакция с треххлористой сурьмой — 5-оксифлавоны и 5-оксифлавонолы дают желтое или красное окрашивание; реакции с раствором аммиака или спирто-водным раствором натрия (калия) гидроксида — флавоны, флавонолы, флавононы и флавононолы образуют желтое окрашивание, при нагревании переходящее в оранжевое или крас ное; халконы и ауроны дают сразу красное или пурпурное окрашивание; — реакция с хлоридом окисного железа — при наличии полифенолов появляется зеленовато-синее окрашивание; — реакция с раствором ванилина в концентрированной хлороводородной кислоте — катехины дают красно-мали- новое окрашивание; — реакция со средним свинца ацетатом — флавоны, халконы, ауроны, содержащие свободные орто- гидроксиль- ные группировки в кольце В, образуют осадки, окрашенные в ярко-желтый и красный цвет. Для обнаружения сапонинов и установления их химической природы используются следующие ре- акции: — проба на пенообразование (в присутствии кислоты и щелочи) — равная по объему и стойкости пена образуется в обеих пробирках при наличии тритерпеновых сапонинов; в случае содержания сапо- нинов стероидной природы в щелочной среде образуется пена в несколько раз больше по объему и сто й- кости; — реакция со спиртовым раствором холестерина — обе группы сапонинов образуют осадки; — реакция с баритовой водой — обе группы сапонинов дают осадки; — реакция с растворами свинца ацетата — тритерпено- вые сапонины осаждаются средним свинца ацетатом, а стероидные — основным; — реакция Либермана—Бурхарда — стероидные сапонины (как и сердечные гликозиды) дают окрас- ку от розовой до зеленой и синей; — реакция Лафона (раствор меди сульфата и концентрированная серная кислота) — при нагревании появляется сине-зеленое окрашивание; — реакция Сальковского (хлороформ и концентрированная серная кислота) — наблюдается появле- ние окраски от желтой до красной; — реакция с пятихлористой сурьмой (хлороформный раствор) — появляется красное окрашивание, переходящее в фиолетовое; — реакция с раствором натрия нитрата (в присутствии концентрированной серной кисл оты) — ярко- красное окрашивание; — реакция с ванилином (спиртовой раствор) и концентрированной серной кислотой — появляется красное окрашивание, при разбавлении водой тритерпеноиды образуют синие хлопья. Наличие кумаринов можно обнаружить с помощью: — реакции со щелочью и диазотированной сульфанило- вой кислотой — при нагревании с раствором калия гидроксида раствор желтеет, а после добавления диазотированной сульфаниловой кислоты окраска изменяется от коричнево-красного до вишневого цвета; — лактонной пробы — после нагревания препарата со спиртовым раствором калия гидроксида, раз- бавления водой очищенной и добавления хлороводородной кислоты помутнение или выпадение осадка указывает на вероятное наличие кумаринов. Обнаружение дубильных веществ проводят следующими качественными реакциями: — с раствором желатина — образование мути; — с раствором хинина гидрохлорида — аморфный осадок; — с растворами железо-аммониевых квасцов или хлорида окисного железа — появляется окрашива- ние: черно- синее — при наличии гидролизуемых дубильных веществ, черно-зеленое — в присутствии конденсированных; — с бромной водой — при наличии конденсированных дубильных веществ сразу образуется осадок; — с раствором средней соли свинца ацетата в уксуснокислой среде — осадок выпадает при наличии гидролизуемых дубильных веществ; при добавлении к фильтрату раствора железо-аммониевых квасцов и кристаллического натрия ацетата в присутствии конденсированных дубильных веществ появляется чер- но-зеленое окрашивание; — с кристаллическим натрия нитратом в присутствии хлороводородной кислоты — при наличии гидролизуемых дубильных веществ появляется коричневое окрашивание. Другие классы соединений определяют отдельными специфическими качественными реакциями, описа- ние которых изложено в методических материалах по химическому анализу лекарственных растений (Гринкевич Н. И., Сафро- нич Л. Н., М., 1983; Ковалев В. Н., Солодовниченко Н. М., Харьков, 1987). Для хроматографического анализа алкалоидов используют следующие системы.растворителей: а) для хроматографии на бумаге: н-бутанол — уксусная кислота — вода (5:1:4); этилацетат — уксус- ная кислота — вода (11:21:85); и-бутанол, насыщенный водой — ледяная уксусная кислота (100:5) и др.; б) для тонкослойной хроматографии: хлороформ — ацетон — диэтиламин (5:4:1); хлороформ — ди- этиламин (9:1); хлороформ — метанол — уксусная кислота (18:1:1); хлороформ — этанол (9:1 или 8:2); ацетон — раствор аммиака (95:5). Проявителями для хроматограмм служат реактив Дра- гендорфа, пары йода, хлороформный раствор сурьмы три- хлорида. Обнаружение кардиотонических (сердечных) гликози- дов методами ТСХ и хроматографии на бу- маге проводят в системах: хлороформ — ацетон — вода (84:15:0,7); хлороформ — бензол — н-бутанол (78:12:5); этилацетат — бензол — вода (84:16:50); бензол — хлороформ (9:1, 7:5 или 3:7). Для проявления хроматограмм используют реактивы Раймонда (растворы лс-динитробензола и калия гидроксида спиртовой) или Йенсена (25 %-ный хлороформный раствор трихлоруксусной кислоты). Для обнаружения флавоноидов методом кроматографии на бумаге и в тонком слое сорбента реко- мендуются следующие системы растворителей: 15 %-ная уксусная кислота; н-бутанол — уксусная кис- лота — вода (4:1:2); этилацетат — муравьиная кислота — вода (70:15:17 или 10:2:3); метанол — уксус- ная кислота — вода (18:1:1) и др. В качестве проявителей используют: 1 %-ный спиртовой раствор алюминия хлорида, 10 %-ный спир- товой раствор натрия (калия) гидрооксида, пары аммиака в УФ-свете и т. д. |